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1、觀察根尖分生組織細(xì)胞有絲分裂 必修一 實(shí)驗(yàn)九 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1、制作洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂裝片； 2、觀察植物細(xì)胞有絲分裂的過程，識(shí)別 有絲分裂的不同時(shí)期，比較細(xì)胞周期不同時(shí)期 的時(shí)間長(zhǎng)短。 二、實(shí)驗(yàn)原理 : 1、 高等植物體內(nèi)，有絲分裂 常見根尖、莖尖等分 生區(qū)細(xì)胞。 各個(gè)細(xì)胞的分裂是獨(dú)立的 。通過在顯微 鏡下觀察各個(gè)時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體（染色質(zhì)）的存在 狀態(tài)，判斷這些細(xì)胞各處于有絲分裂的哪個(gè)時(shí)期 （間期、前期、中期、后期和末期）。 2、堿性染料（ 龍膽紫溶液或醋酸洋紅液 ）能將染色 體（或染色質(zhì)）染成深色。 3、 鹽酸 使植物細(xì)胞之間的果膠質(zhì)層松散，用鹽酸處 理植物的根尖，可以使根尖細(xì)胞彼此 容
2、易分離 。 三、材料用具： 1、洋蔥（或大蒜）根尖， 2、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、滴管等， 3、 解離固定液 ： 鹽酸和酒精混合液 (1:1） 4、 龍膽紫溶液（或醋酸洋紅液） 1.生根培養(yǎng)： 將切除老根的洋蔥或 大蒜的磷基置于盛水的小燒杯上， 于 22 25 下進(jìn)行生根培養(yǎng)。 四、實(shí)驗(yàn)步驟 磷 基 2.取材： 待根長(zhǎng)到 5cm左右 時(shí)剪取根 尖 2-3mm。 取 材 部 位 看一看植物 細(xì)胞的 分裂（根尖） 根 冠 分 生 區(qū) 伸 長(zhǎng) 區(qū) 成 熟 區(qū) 根尖縱剖結(jié)構(gòu)示意圖 3、裝片的制作： 解離 漂洗 染色 制片 鹽 酸 使植物細(xì)胞之間的果膠質(zhì)層松散， 細(xì)胞 相互 分離 放入請(qǐng)水中漂洗
3、洗去鹽酸，便于堿性染料染色 龍膽紫溶液或醋酸 洋紅等堿性染料 使染色體著色，便于顯 微鏡下觀察 用鑷子壓扁，加蓋 玻片 ,再加載玻片壓 散細(xì)胞 使 細(xì)胞分散開 觀察 先用低倍鏡觀察 在低倍鏡下找到分生區(qū)細(xì)胞； 正方形、排列緊密 依次觀察分裂中期、前期、 后期、末期、的細(xì)胞間期、 再用高倍鏡觀察 4、顯微鏡觀察： 思考： 為何只截取根尖 2 3mm？ 有利于找到分生區(qū)細(xì)胞 解離的目的： 使組織中的細(xì)胞相互分離開 。 漂洗的目的： 洗去藥液，防止 解離過度 。 用堿性染料染色目的 ： 使染色質(zhì)和染色體著色，便于觀察。 制片的目的： 使細(xì)胞分散開（成一層細(xì)胞），利于觀察。 （ 6）分生區(qū)的特點(diǎn)是什么
4、？ （ 7）本實(shí)驗(yàn)所觀察到的細(xì)胞還能繼續(xù)分裂嗎？ 細(xì)胞小，排列密而整齊，細(xì)胞 壁薄，細(xì)胞核大，細(xì)胞質(zhì)濃，無(wú)液 泡。具有很強(qiáng)的分裂能力，能夠不 斷的分裂產(chǎn)生新細(xì)胞，再由這些細(xì) 胞分化形成其他組織。 原本細(xì)胞都是疊加在一起 的，在顯微鏡下很難觀察清楚， 酒精和鹽酸就是使細(xì)胞分散分 離并殺死細(xì)胞，顯微鏡觀察的 是死亡的細(xì)胞那時(shí)處于的狀態(tài)， 所以，有的細(xì)胞正處于中期， 有的處于間期。 鏡檢結(jié)果分析 進(jìn)行有絲分裂的細(xì)胞分裂相 間期： 完成 DNA分 子的復(fù)制和 有關(guān)蛋白質(zhì) 的合成。 鏡檢結(jié)果分析 間期分裂相圖 前期： 核仁和核膜逐漸消 失。 核內(nèi)染色質(zhì)逐漸濃 縮為細(xì)長(zhǎng)而卷曲的 染色體，每一染色 體含有兩
5、染色單體， 它們具有一個(gè)共同 的著絲點(diǎn)；兩級(jí)發(fā) 出紡錘絲形成紡錘 體。 鏡檢結(jié)果分析 前期分裂相圖 中期： 染色體形態(tài)、數(shù)目 清晰，便于觀察。 各染色體的著絲點(diǎn) 排列在赤道板上， 紡錘絲與染色體的 著絲點(diǎn)相連。 鏡檢結(jié)果分析 中期分裂相圖 后期： 各染色體著絲點(diǎn)分裂為二，其每條染色 單體也相應(yīng)地分開，并各自隨著紡錘絲 的收縮而平均移向兩極，每極有一組染 色體，數(shù)目和原來的相同。 鏡檢結(jié)果分析 后期分裂相圖 末期： 核膜、核仁重新出現(xiàn)，分開在兩極的染色體各自組 成新的細(xì)胞核，在細(xì)胞中央出現(xiàn)細(xì)胞板形成新的細(xì) 胞壁，使細(xì)胞分裂為二，形成二個(gè)子細(xì)胞。這時(shí)細(xì) 胞又進(jìn)入分裂間期。 末 期 分 裂 相 圖
6、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后： 1、將蓋玻片和載玻片擦洗干凈。 2、顯微鏡復(fù)原，套上塑料袋。 3、整理試驗(yàn)臺(tái)。 本實(shí)驗(yàn)的一些替代和改進(jìn)之處： 1.材料的替代 ： 大蒜；大蔥；蠶豆；綠豆；小麥 2.取材的長(zhǎng)短： 所有材料的根最好是培養(yǎng)到 0.5 1cm，此時(shí)細(xì)胞分裂相最多。 3. 試劑的改進(jìn)： 稀釋的龍膽紫染液（用 10冰醋 酸以 3： 1比例稀釋質(zhì)量濃度為 0.01g/ml的龍膽紫 染液）； 2的醋酸洋紅染液；改良苯酚品紅染液， 1： 1稀釋的醫(yī)用紫藥水 4.根尖的固定： 目的是迅速將組織和細(xì)胞 殺死， 并使細(xì)胞結(jié)構(gòu)盡可能保持生活時(shí)的狀態(tài)。把處于分 裂旺盛時(shí)期的根尖放入裝有卡諾氏固定液的培養(yǎng)皿 內(nèi)（ 3份 95
7、的酒精和 1份 99的冰醋酸混合而成）， 蓋上培養(yǎng)皿蓋固定 12 24h,再用 95酒精沖洗 2次后， 轉(zhuǎn)入 70酒精中置 4 冰箱中保存待用。 5.實(shí)驗(yàn)儀器的替代： 用化學(xué)實(shí)驗(yàn)室學(xué)生實(shí)驗(yàn)中用的 瓷質(zhì)反應(yīng)板（又稱點(diǎn)滴板或比色板）來替代玻璃皿， 既方便操作又容易清洗。 6. 解離、漂洗、染色儀器的改進(jìn)： 在反應(yīng) 板的一個(gè)穴中滴入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 15鹽酸和 95酒精 的混和液（ 1： 1）數(shù)滴（穴的容積約為 5ml），另 一穴中滴 1 2滴 0.01g/ml龍膽紫溶液，其余的穴中 滴加清水用于根尖漂洗。 7. 壓片法的改進(jìn)： 在蓋波片上蓋 2 3層吸水 紙，用拇指輕壓，或用鉛筆的橡皮端或玻璃滴管上 的
8、橡皮頭，對(duì)準(zhǔn)蓋波片下的材料在蓋波片上輕輕敲 擊，使根尖細(xì)胞均勻擴(kuò)散成淡淡的云霧狀。 1.（ 09江蘇卷）有 1位同學(xué)做根尖有絲分裂實(shí)驗(yàn)，在 顯微鏡中觀察到的圖像如圖所示。造成這種情況的 原因可能是 ( ) 取材位置不合適 取材時(shí)間不合適 制片時(shí)壓片力量不合適 解離時(shí)間不合適 視野選擇不合適 A. B. C. D. 解析 此實(shí)驗(yàn)需找到呈正方形、排列緊密的分生區(qū)細(xì) 胞，該視野中細(xì)胞多呈長(zhǎng)方形，可能原因是取材位 置不合適、取材時(shí)間不恰當(dāng)或沒有找到分生區(qū)。 C 2.(08江蘇生物 )29（ 7分）在完成了觀察洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞 有絲分裂實(shí)驗(yàn)后，教師給學(xué)生提供了 2份資料。 資料一 一份 “ 實(shí)驗(yàn)報(bào)告
9、” 的部分內(nèi)容 （一）解離：剪取洋蔥根尖 5cm，放入盛有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 15%的 鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為 95%的酒精混合液（體積比為 1:1）的玻璃皿 中，在室溫下解離 3 5min。 （二）染色：把根尖放在盛有 0.01g/mL龍膽紫溶液的玻璃皿中 染色 3 5cm。 （三）漂洗：將根尖放入盛有清水的玻璃皿中漂洗約 10min。 （四）制片：將根尖放在載玻片上，加一滴清水，并用鑷子把 根尖弄碎，蓋上載玻片，用拇指輕輕按壓載坡片 （ 1）請(qǐng)改正“資料一”中的 3處錯(cuò)誤。 __________ 將“ 5cm”改成“ 2 3mm”；實(shí)驗(yàn)操作步驟應(yīng)改為先漂洗后染色；將 “蓋上載玻片”改成“蓋上蓋玻片后，再
10、加一片載玻片” BD 4在下列實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)材料必須始終保持生活 狀態(tài)的是 A.在光學(xué)顯微鏡下觀察植物細(xì)胞有絲分裂 B.在光學(xué)顯微鏡下觀察植物細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng) C.在光學(xué)顯微鏡下觀察馬蛔蟲受精卵的有絲分裂 固定裝片 D.在光學(xué)顯微鏡下觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離和質(zhì) 壁分離復(fù)原 5.對(duì)洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞的正確描述是 A. 既小且方 B. 形態(tài)不規(guī)則 C. 細(xì)胞已經(jīng)開始分化 D. 無(wú)間期細(xì)胞 6、在“觀察根尖分生組織細(xì)胞的 有絲分裂”實(shí)驗(yàn)中，以下操作 和結(jié)論 正確 的是 A.剪取 5cm根尖，用酒精和吡 羅紅混合液解離染色 B.右圖是高倍顯微鏡下調(diào)解細(xì) 準(zhǔn)焦螺旋看到的視野 C.持續(xù)觀察，視野中的 K細(xì)胞 將分
11、裂成兩個(gè)子細(xì)胞 D.視野中， N細(xì)胞的染色體數(shù) 目是 M細(xì)胞的一半 B 7、 實(shí)驗(yàn)材料的選擇 （ 1）洋蔥的根尖可用于觀察 的實(shí)驗(yàn)， 這是因?yàn)槠涓夥稚鷧^(qū)細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂；而 植物細(xì)胞有絲分裂 細(xì)胞可用于觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁 分離和復(fù)原的實(shí)驗(yàn)，這是因?yàn)槠渚哂?，同時(shí) 還可以利用洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮觀察 在細(xì)胞中 的分布。 （ 2）人的 可用于觀察 及 在細(xì)胞內(nèi)的分布情況，而觀察 時(shí)則選用動(dòng)物的精巢細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料。 （ 3）觀察葉綠體時(shí)常選用蘚類的葉，因?yàn)?。 洋蔥鱗片葉的外表皮 紫色大液泡 DNA和 RNA 口腔上皮細(xì)胞 線粒體 DNA和 RNA 細(xì)胞減 數(shù)分裂 蘚類 植物的葉片薄而小，常是一層細(xì)
12、胞，葉綠體清楚，易 于觀察和操作 吡羅紅或派 洛寧染液 紅色 線粒體 染色體 紫色 醋酸洋紅 RNA 健那綠 藍(lán)綠色 龍膽紫 紅色 8、 染色劑的使用 試劑 被染成分 呈現(xiàn)顏色 DNA 綠色 甲基綠 9、小鼠常被用作研究人類遺傳病的模式動(dòng)物。 請(qǐng)?zhí)畛溆^察小 鼠細(xì)胞減分裂的實(shí)驗(yàn)步驟： 供選材料及試劑：小鼠的腎臟、睪丸、肝臟，蘇丹 染液、 醋酸洋紅染液、詹納斯綠 B（健那綠）染液，解離固定液。 取材 ：用 ____________作實(shí)驗(yàn)材料 制片： 取少量組織低滲處理后，放在 ____________溶液中 ，一定時(shí)間后輕輕漂洗。 將漂洗后的組織放在載玻片上，滴加適量 ____________。 一定時(shí)間后加蓋玻片， ____________。 （小鼠）睪丸 解離固定液 醋酸洋紅染液 壓片
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