BSL-2ABSL-2生物安全實(shí)驗(yàn)室病毒實(shí)驗(yàn)室 培訓(xùn)知識(shí)點(diǎn)【教學(xué)類別】

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1、 BSL-2/ABSL-2生物安全實(shí)驗(yàn)室/病毒實(shí)驗(yàn)室 培訓(xùn)知識(shí)點(diǎn) 基本要求BSL-2實(shí)驗(yàn)室培訓(xùn) t申請(qǐng)人具備3個(gè)月以上的細(xì)胞室工作經(jīng)驗(yàn)；能夠嚴(yán)格遵守本單位及實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)程；既往無不良安全行為記錄。 特別要求BSL-2+實(shí)驗(yàn)室培訓(xùn) 除滿足基本要求外，還應(yīng)具備以下條件：申請(qǐng)人參加過BSL-2實(shí)驗(yàn)室培訓(xùn)，并具備3個(gè)月以上BSL-2實(shí)驗(yàn)室工作經(jīng)驗(yàn)。 特別要求ABSL-2實(shí)驗(yàn)室培訓(xùn) 除滿足BSL-2+實(shí)驗(yàn)培訓(xùn)要求外，還應(yīng)具備以下條件：已取得上海市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物上崗證；或參加過上海巴斯德研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物上崗培訓(xùn)并考試合格 生物安全 4狹義指現(xiàn)代生物技術(shù)的研究、開發(fā)、應(yīng)用以及轉(zhuǎn)基因生物

2、的跨國越境轉(zhuǎn)移可能對(duì)生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人類健康產(chǎn)生潛在的不利影響。廣義指與生物有關(guān)的各種因素對(duì)社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、人類健康及生態(tài)系統(tǒng)所產(chǎn)生的危害或潛在風(fēng)險(xiǎn)。 實(shí)驗(yàn)室生物安全 1防止發(fā)生病原體或毒素?zé)o意中暴露或意外釋放的防護(hù)原則、技術(shù)和行為。 2實(shí)驗(yàn)室的生物安全條件和狀態(tài)不低于容許水平，可避免實(shí)驗(yàn)室人員、來訪人員、社區(qū)和環(huán)境受到不可接受的損害，符合相關(guān)法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)等對(duì)實(shí)驗(yàn)室生物安全責(zé)任的要求。 生物安全 4防止發(fā)生病原體或毒素?zé)o意中暴露或意外釋放的防護(hù)原則、技術(shù)和行為。 生物安全保障 4單位和個(gè)人為防止病原體或毒素丟失、被竊、濫用、轉(zhuǎn)移或有意釋放而采取的安全措施。 實(shí)驗(yàn)室相

3、關(guān)感染 實(shí)驗(yàn)室感染主要途徑 t注射器針頭或其他污染銳器意外接種；液體溢灑和噴濺到皮膚和粘膜；通過口吸移液或用手指或污染的物體觸摸口或眼睛從而攝入或接觸；動(dòng)物咬傷和抓傷；吸入傳染性氣溶膠； t20%可明確感染的原因；80%是由工作人員操作失誤引起；20%是由設(shè)備故障引起；80%是不明原因的感染，可能為氣溶膠傳播感染。 實(shí)施實(shí)驗(yàn)室生物安全管理的目的 保護(hù)人員和環(huán)境免受感染性生物因子的潛在暴露 實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系目標(biāo) t保證實(shí)驗(yàn)室設(shè)施、設(shè)備、個(gè)體防護(hù)裝備及相關(guān)物品符合國家有關(guān)的安全要求，定期檢查、維護(hù)、更新，確保不降低其設(shè)計(jì)性能。保證實(shí)驗(yàn)工作人員均可得到持續(xù)培訓(xùn)及繼續(xù)教育。

4、提供必要的免疫計(jì)劃、定期健康檢查和醫(yī)療保障。 管理體系文件 管理手冊(cè)，程序文件，標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程、安全手冊(cè)，記錄、標(biāo)識(shí) 實(shí)驗(yàn)室生物安全管理員職責(zé) 針對(duì)技術(shù)方法、程序和方案、生物因子、材料和設(shè)備進(jìn)行定期的內(nèi)部安全檢查；糾正違反生物安全操作規(guī)程的行為；在發(fā)生感染性物質(zhì)泄露或其他事故時(shí)，協(xié)助事故處置和調(diào)查；檢查和監(jiān)督實(shí)驗(yàn)室廢棄物的有效管理與安全處置；檢查和監(jiān)督實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)消毒滅菌措施的落實(shí)情況。 實(shí)驗(yàn)室工作人員 充分認(rèn)識(shí)和理解所從事工作的風(fēng)險(xiǎn)；自覺遵守實(shí)驗(yàn)室的管理規(guī)定和要求；在身體狀態(tài)許可的情況下，應(yīng)接受實(shí)驗(yàn)室的免疫計(jì)劃和其他的健康管理規(guī)定；按規(guī)定正確使用設(shè)施、設(shè)備和個(gè)體防護(hù)裝備；

5、主動(dòng)報(bào)告可能不適于從事特定任務(wù)的個(gè)人狀態(tài)；不應(yīng)因人事、經(jīng)濟(jì)等任何壓力而違反管理規(guī)定；有責(zé)任和義務(wù)避免因個(gè)人原因造成生物安全事件或事故；如果懷疑個(gè)人受到感染，應(yīng)立即報(bào)告；主動(dòng)識(shí)別任何危險(xiǎn)和不符合規(guī)定的工作，并立即報(bào)告。 風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與控制 危險(xiǎn) 可能導(dǎo)致死亡、傷害或疾病、財(cái)產(chǎn)損失、工作環(huán)境破壞或這些情況組合的根源或狀態(tài)。 風(fēng)險(xiǎn) 危險(xiǎn)發(fā)生的概率及其后果嚴(yán)重性的綜合。 風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估 評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)大小及確定是否可接受的全過程。 風(fēng)險(xiǎn)控制 為降低風(fēng)險(xiǎn)而采取的綜合措施。 危險(xiǎn)度分級(jí)Risk Group Risk Group Individual Risk Community Risk I

6、No or Low No or Low II Moderate Low III High Low IV High High 病原微生物分類與防護(hù)水平 第一類 能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。Smallpox 第二類 能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。HIV 第三類 能夠引起人類或動(dòng)物疾病，一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。HBV 第

7、四類 在通常情況下不會(huì)引起人類或者動(dòng)物疾病的微生物。Mouse Leukemia Virus 病毒培養(yǎng)：指病毒的分離、培養(yǎng)、滴定、中和試驗(yàn)、活病毒及其蛋白純化、病毒凍干以及產(chǎn)生活病毒的重組試驗(yàn)等操作。利用活病毒或其感染細(xì)胞（或細(xì)胞提取物），不經(jīng)滅活進(jìn)行的生化分析、血清學(xué)檢測、免疫學(xué)檢測等操作視同病毒培養(yǎng)。（如大量活菌操作） 動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn)：指以活病毒感染動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)。 動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn)未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料的操作：指未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料在采用可靠的方法滅活前進(jìn)行的病毒抗原檢測、血清學(xué)檢測、核酸檢測、生化分析等操作。未經(jīng)可靠滅活或固定的人和動(dòng)物組織標(biāo)本因含病毒量較高，其操作的防護(hù)級(jí)別應(yīng)比照病毒培

8、養(yǎng)。（樣本檢測） 滅活材料的操作：指感染性材料或活病毒在采用可靠的方法滅活后進(jìn)行的病毒抗原檢測、血清學(xué)檢測、核酸檢測、生化分析、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)等不含致病性活病毒的操作。 無感染性材料的操作：指針對(duì)確認(rèn)無感染性的材料的各種操作，包括但不限于無感染性的病毒DNA或cDNA操作。（非感染性材料的實(shí)驗(yàn)） 生物安全屏障 一級(jí)屏障 即生物安全設(shè)備，包括：個(gè)體防護(hù)裝備、生物安全柜、動(dòng)物隔離箱、安全離心杯 二級(jí)屏障 即實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)計(jì)和結(jié)構(gòu)，包括：圍護(hù)結(jié)構(gòu)、通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)、供水供氣系統(tǒng)、電力供應(yīng)系統(tǒng)、照明系統(tǒng)、監(jiān)控報(bào)警系統(tǒng)、消毒滅菌系統(tǒng) 生物安全防護(hù)（三要素實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)、安全設(shè)備（一級(jí)屏

9、障）、設(shè)施設(shè)計(jì)和結(jié)構(gòu)（二級(jí)屏障）） 一級(jí)防護(hù) 通過良好的實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)，合適的生物安全設(shè)備來防止工作人員或者實(shí)驗(yàn)室環(huán)境對(duì)生物因子暴露 二級(jí)防護(hù) 防止實(shí)驗(yàn)室外部環(huán)境對(duì)生物因子暴露 Bio-safety level(BSL) 表示僅從事體外操作的實(shí)驗(yàn)室的相應(yīng)生物安全防護(hù)水平。 Animal bio-safety level (ABSL) 表示包括從事動(dòng)物活體操作的實(shí)驗(yàn)室的相應(yīng)生物安全防護(hù)水平。 BSL-1實(shí)驗(yàn)室基本防護(hù)要求 t在靠近實(shí)驗(yàn)室出口處設(shè)置洗手裝置；在實(shí)驗(yàn)室出口處應(yīng)設(shè)存衣或掛衣裝置，個(gè)人服裝與工作服分開放置；人員工作時(shí)應(yīng)穿工作服，戴手套； BSL-2實(shí)驗(yàn)室基本防護(hù)要求

10、 t符合BSL-1實(shí)驗(yàn)室的要求；實(shí)驗(yàn)室進(jìn)入控制措施；在實(shí)驗(yàn)室或其所在建筑內(nèi)配備高壓滅菌設(shè)備；病原微生物應(yīng)在生物安全柜內(nèi)操作；工作區(qū)應(yīng)配備緊急洗眼裝置；人員工作時(shí)應(yīng)穿工作服，戴手套、口罩和帽子，以防氣溶膠污染； 1進(jìn)入控制 實(shí)驗(yàn)室門口應(yīng)張貼國際通用的生物危害標(biāo)識(shí) t僅授權(quán)人員可以進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室 t禁止兒童進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室 t實(shí)驗(yàn)室門應(yīng)保持鎖閉 t應(yīng)標(biāo)明實(shí)驗(yàn)室操作的微生物 人員培訓(xùn)與考核 t人員健康管理 t t出入記錄 2操作規(guī)范 l 洗手 接觸感染性物質(zhì)后和離開實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域前 l 禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域內(nèi)從事下列行為（進(jìn)食、飲水、吸煙、處理隱形眼鏡、使用化妝品、儲(chǔ)存食品）

11、 l 移液（禁止口吸移液，必須使用機(jī)械移液裝置） l 銳器處置y禁止將銳器隨意棄置于塑料，必須使用專用銳器收集容器 l 廢物包裝袋t l 控制濺出和氣溶膠產(chǎn)生 l 去除工作臺(tái)面污染或感染性物質(zhì)濺出后 使用適當(dāng)消毒劑 3工作完成之后 廢棄物處置t分類收集，固體液體分開；收集于防漏包裝袋和容器；使用有生物危害的紅色或黃色可高壓蒸汽滅菌包裝袋；廢棄物應(yīng)高壓滅菌； 4工作過程中 必須穿著實(shí)驗(yàn)室防護(hù)服以防污染個(gè)人衣物；工作時(shí)必須戴手套以保護(hù)雙手暴露于危險(xiǎn)性材料；當(dāng)手套被污染、破損或必要時(shí)應(yīng)更換手套；每當(dāng)操作危險(xiǎn)性材料的工作結(jié)束時(shí)離開實(shí)驗(yàn)間前，除去手套并洗手；不要清洗或重復(fù)使用一次性

12、手套；如果有可能發(fā)生微生物或其他有害物質(zhì)濺出，要佩戴防護(hù)眼鏡；涉及感染性物質(zhì)的所有操作均應(yīng)在生物安全柜或其它防護(hù)裝置內(nèi)進(jìn)行。 離心 1使用密封轉(zhuǎn)頭或安全離心杯t2一定要在生物安全柜內(nèi)打開 BSL-2實(shí)驗(yàn)設(shè)施及操作規(guī)程 實(shí)驗(yàn)室分區(qū) 1實(shí)驗(yàn)室防護(hù)（工作）區(qū) 實(shí)驗(yàn)室的物理分區(qū)，該區(qū)域內(nèi)生物風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較大，需對(duì)實(shí)驗(yàn)室的平面設(shè)計(jì)、圍護(hù)結(jié)構(gòu)的密閉性、氣流，以及人員進(jìn)入、個(gè)體防護(hù)等進(jìn)行控制的區(qū)域。 2核心工作間（主實(shí)驗(yàn)室） 防護(hù)區(qū)中直接從事高風(fēng)險(xiǎn)操作的工作間。 3輔助工作區(qū) 生物風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較小的區(qū)域，也指實(shí)驗(yàn)室中防護(hù)區(qū)以外的區(qū) 消毒滅菌設(shè)備（滅菌鍋、紫外燈、過氧化氫發(fā)生

13、裝置） 常用消毒劑 2%戊二醛、75%乙醇、二氧化氯、含氯消毒劑（三氯異氰尿酸等） 個(gè)體防護(hù)裝備 t防護(hù)服、手套（雙層）、口罩、防護(hù)帽、防護(hù)鏡、鞋套、防水圍裙套袖。 l 在輔助工作區(qū)無需使用PPE。 l 進(jìn)入防護(hù)區(qū)時(shí)應(yīng)使用第一層PPE，包括：一次性鞋套、工作服、第一層乳膠手套、帽子、口罩。在半污染區(qū)中操作超速離心機(jī)和-80℃冰箱必須戴第二層乳膠手套。 l 在核心工作間開展病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)時(shí)應(yīng)增加第二層PPE。包括：第二層乳膠手套、一次性圍裙套袖或反穿衣、防護(hù)鏡。 PPE脫除程序 t第二層PPE應(yīng)在離開核心工作間時(shí)脫下。第二層手套應(yīng)先消毒再脫下。第一層PPE應(yīng)在離開

14、防護(hù)區(qū)時(shí)脫下。離開實(shí)驗(yàn)室時(shí)應(yīng)使用流水和洗手液洗手。 運(yùn)輸包裝要求 l 在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)和本單位內(nèi)運(yùn)輸感染性物質(zhì)標(biāo)本時(shí)必須遵守雙層防護(hù)原則，使用兩層包裝系統(tǒng)。裝載感染性物質(zhì)標(biāo)本的內(nèi)層容器必須放到一個(gè)外層容器中，并保持內(nèi)層容器固定直立。外層容器應(yīng)防破裂、防泄漏，并可耐受高壓滅菌和化學(xué)消毒劑作用。 l 對(duì)外運(yùn)輸包裝要求 對(duì)外運(yùn)輸感染性物質(zhì)過程中應(yīng)使用三層包裝系統(tǒng)，包括內(nèi)層容器，第二層包裝容器及外層包裝材料。裝載標(biāo)本的內(nèi)層容器必須防水、防漏并貼上指示內(nèi)容物的適當(dāng)標(biāo)簽。內(nèi)層容器外面要包裹足量的吸收性材料，以便內(nèi)層容器打破或泄漏時(shí)能吸收溢出的所有液體。 保存與使用 t感染性物質(zhì)應(yīng)貯存于指定的冰箱

15、，冰箱門應(yīng)張貼生物危險(xiǎn)標(biāo)識(shí)。 t感染性物質(zhì)的監(jiān)管實(shí)行雙人負(fù)責(zé)制，由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人和其指定的責(zé)任人共同管理。保藏冰柜實(shí)行雙鎖管理。每次存取感染性物質(zhì)必須登記。 t感染性物質(zhì)的所有操作必須在Ⅱ級(jí)生物安全柜中進(jìn)行。開放式的工作臺(tái)上不允許操作這類物質(zhì)。 t所有涉及感染性物質(zhì)的使用過程都應(yīng)如實(shí)記錄，包括領(lǐng)取和使用的時(shí)間，感染性物質(zhì)名稱及數(shù)量。不經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)，不得將感染性物質(zhì)帶出實(shí)驗(yàn)室。 t實(shí)驗(yàn)工作結(jié)束后，未用盡的感染性物質(zhì)和使用后得到的產(chǎn)物應(yīng)按要求進(jìn)行處理、銷毀或保存，并如實(shí)填寫實(shí)驗(yàn)記錄。 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)空氣的消毒和滅菌 t實(shí)驗(yàn)室房間、生物安全柜、傳遞窗內(nèi)的懸吊式紫外消毒燈等對(duì)上述空間內(nèi)的

16、空氣進(jìn)行消毒，安裝數(shù)量為平均1.5W/m3，照射時(shí)間30-60分鐘。 t甲醛熏蒸可對(duì)實(shí)驗(yàn)室空氣、設(shè)備以及物體表面的微生物實(shí)現(xiàn)有效滅菌。 t二氧化氯噴霧可對(duì)實(shí)驗(yàn)室空氣、設(shè)備以及物體表面的微物實(shí)現(xiàn)有效消毒滅菌。 物體表面消毒滅菌 t實(shí)驗(yàn)室地面應(yīng)濕式拖掃，禁止干拖干掃和使用吸塵器?？墒褂煤认疽海ㄓ行群?000-2000mg/L）噴灑后拖掃。拖把應(yīng)專用，污染區(qū)和清潔區(qū)不得混用。應(yīng)使用可裝配吸水布或紙巾的拖把，使用后用應(yīng)將吸水布或紙巾作為感染性廢物處理。 t實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、桌子、椅子、凳子、門把手、實(shí)驗(yàn)記錄夾等可用75%乙醇噴灑擦拭，消毒作用不少于20min。 t實(shí)驗(yàn)材料的表面可用75%乙

17、醇擦拭或噴灑消毒。 儀器設(shè)備的消毒滅菌 顯微鏡、離心機(jī)、冰箱、培養(yǎng)箱、移液器等局部輕度污染時(shí)，可用先后用2%戊二醛和75%乙醇擦拭。污染嚴(yán)重或傳染性強(qiáng)的，半小時(shí)后重復(fù)擦拭一次。如需整體滅菌，應(yīng)使用甲醛熏蒸或二氧化氯噴霧。 手的清潔消毒 t離開BSL-2實(shí)驗(yàn)室污染區(qū)，脫防護(hù)服前應(yīng)75%乙醇洗手消毒。 t實(shí)驗(yàn)室工作完畢后應(yīng)立即進(jìn)行手部清洗和消毒。采用非自動(dòng)洗手設(shè)備，水龍頭開關(guān)盡量應(yīng)用長柄式、腳踏式或感應(yīng)式。使用瓶裝式液體皂，洗手后用一次性紙巾或烘干機(jī)烘干。在無流動(dòng)水情況下，可使用含乙醇免洗消毒洗手液。 廢棄物處置程序 分類收集 t實(shí)驗(yàn)室廢物應(yīng)根據(jù)其特性分別按照感染性廢物、病理性廢物

18、、 損傷性廢物(銳器)、化學(xué)性廢物進(jìn)行分類收集。危險(xiǎn)廢物應(yīng)使用專用容器收集。在設(shè)有分區(qū)的實(shí)驗(yàn)室中，不同區(qū)域的廢物應(yīng)分開收集。實(shí)驗(yàn)廢物應(yīng)收集于所在區(qū)域的廢棄收集容器內(nèi)。感染性實(shí)驗(yàn)廢物應(yīng)使用專用黃色包裝袋收集，包裝袋應(yīng)置于專用硬質(zhì)收集箱桶里。 tBSL-2實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)中產(chǎn)生的實(shí)驗(yàn)廢物均應(yīng)視為感染性廢物。 核心工作間中可使用紅色高壓滅菌袋收集。生物安全柜中產(chǎn)生的廢物應(yīng)在生物安全柜內(nèi)消毒、收集、包裝后移出。損傷性廢物（銳器）應(yīng)使用有蓋、耐刺破的黃色利器盒收集，并按感染性材料處置。感染性液態(tài)廢物應(yīng)收集于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的可密閉收集桶中，禁止直接向下水管道中排放。收集容器內(nèi)實(shí)驗(yàn)廢物超過容量3/4時(shí)必須進(jìn)行清

19、理。實(shí)驗(yàn)廢物應(yīng)每天至少清運(yùn)一次。 消毒滅菌 t感染性廢物的消毒滅菌方式包括：化學(xué)消毒、高壓滅菌、高溫焚燒。 t感染性廢物收集前應(yīng)先進(jìn)行化學(xué)消毒。 tBSL-2實(shí)驗(yàn)室感染性廢物送出實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)高壓滅菌。如實(shí)驗(yàn)室不具備高壓滅菌條件，可送至清潔室高壓滅菌。實(shí)驗(yàn)廢物送出BSL-2實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)消毒包裝袋外表面。 任何需重復(fù)使用的感染性材料必須在消毒滅菌后進(jìn)行清洗、修復(fù)。 tBSL-2實(shí)驗(yàn)室使用過的防護(hù)服、毛巾應(yīng)高壓滅菌后再送出洗滌。 tBSL-2實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的含有感染性物質(zhì)的液態(tài)廢物應(yīng)使用消毒劑處理后集中收集于密閉容器。移出實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)使用含氯消毒劑處理。處理時(shí)間應(yīng)不少于2小時(shí)，有效氯含量應(yīng)大于2

20、000mg/L，處理過程中容器應(yīng)保持密封。BSL-2實(shí)驗(yàn)室廢液移出實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)對(duì)容器外表面進(jìn)行化學(xué)消毒 離心準(zhǔn)備工作要求 t檢查轉(zhuǎn)頭或離心杯密封圈 t離心管內(nèi)液體不應(yīng)過量 t密閉離心管 t離心管放入轉(zhuǎn)頭或離心杯前應(yīng)去除表面污染 t密閉轉(zhuǎn)頭或離心杯 t去除轉(zhuǎn)頭或離心杯表面污染 t使用純水或酒精作為配平液體 t應(yīng)在用于配平的離心管蓋上作標(biāo)記 離心結(jié)束后的工作要求 t在生物安全柜內(nèi)打開轉(zhuǎn)頭或離心杯 t從生物安全柜內(nèi)取出轉(zhuǎn)頭或離心杯時(shí)應(yīng)去除污染 生物安全柜 操作規(guī)程 個(gè)人防護(hù)要求（在使用生物安全柜時(shí)必須穿個(gè)人防護(hù)服，戴手 套；應(yīng)戴口罩和帽子，根據(jù)需要帶防護(hù)眼罩或者

21、面罩。） 柜內(nèi)物品的擺放按照從潔凈區(qū)到污染區(qū)的方向擺放。所有物品盡可能放在工作臺(tái)后部。將廢物袋、移液管收集盤、吸濾瓶等大體積物品放在柜內(nèi)一側(cè)。 前后格柵不能被紙、儀器設(shè)備或者其他物品阻擋。 紫外消毒燈 每周清潔，除去可能影響殺菌效果的灰塵和污垢。房間中有人時(shí)一定要關(guān)閉紫外燈，以保護(hù)眼睛和皮膚，避免因不慎暴露而造成傷害。 避免明火 火焰可造成生物安全柜的氣流紊亂，干擾氣流模式?？蓳p壞HEPA過濾器。處理揮發(fā)性物品和易燃物品時(shí)易造成危險(xiǎn)。 工作前準(zhǔn)備 打開安全柜的日光燈和風(fēng)機(jī)；安全柜運(yùn)行15min，凈化工作區(qū)的空氣污染物；用適當(dāng)消毒劑擦拭生物安全柜的工作臺(tái)面及內(nèi)壁以去除污染；將實(shí)驗(yàn)

22、中需使用的物品集中用消毒劑擦拭后放在臺(tái)面相應(yīng)位置上。 工作中操作 避免手臂在前開口處快速移動(dòng)和頻繁進(jìn)出。盡量避免污染的物品進(jìn)入潔凈區(qū)。在生物安全柜內(nèi)操作時(shí)，不能進(jìn)行文字工作。盡量減少操作者身后的人員活動(dòng)。操作者的面部應(yīng)始終在移動(dòng)檔板后面。 溢出處理 始終保持生物安全柜運(yùn)轉(zhuǎn)狀態(tài)，不要關(guān)閉風(fēng)機(jī)。在溢出物上覆蓋浸有消毒劑的吸水材料，保持適當(dāng)時(shí)間以 發(fā)揮消毒作用。在安全柜內(nèi)消毒污染的手套。如果防護(hù)服已被污染，也應(yīng)消毒。更換新的手套和衣服后進(jìn)行下一步的清潔工作。所有廢棄物以及防護(hù)服進(jìn)行高壓滅菌。清洗手部和其它部位暴露皮膚。立即通知實(shí)驗(yàn)室相關(guān)管理人員。如果溢出物流入安全柜內(nèi)，可能需要對(duì)安

23、全柜進(jìn)行徹底消毒。 工作結(jié)束后處理 保持安全柜繼續(xù)運(yùn)行至少5min完成凈化。將柜內(nèi)物品移出前，應(yīng)使用適當(dāng)消毒劑擦拭去除表面污染。工作結(jié)束后應(yīng)使用適當(dāng)消毒劑擦拭生物安全柜的內(nèi)壁和臺(tái)面，以去除污染。關(guān)閉前窗，關(guān)日光燈，關(guān)風(fēng)機(jī)，開紫外消毒燈照射至少30分鐘。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物和寄生蟲控制分級(jí) 一、分級(jí)： 1、普通級(jí)動(dòng)物（CV） 概念：普通級(jí)動(dòng)物是指飼養(yǎng)在開放系統(tǒng)中，在微生物控制上要求最低的動(dòng)物，它要求不攜帶人畜共患病和動(dòng)物烈性傳染病的病原。 特點(diǎn)：①來源于清潔動(dòng)物或SPF動(dòng)物，在開放系統(tǒng)中飼養(yǎng)。飼養(yǎng)成本低，價(jià)格便宜，可大量供應(yīng)。②微生物控制程度低，但應(yīng)排除人畜共患病和動(dòng)物烈性傳染病。

24、③對(duì)實(shí)驗(yàn)反應(yīng)性差。 2、清潔動(dòng)物(CL) 概念：除不帶有普通級(jí)動(dòng)物應(yīng)排除的病原外，還不應(yīng)攜帶對(duì)動(dòng)物危害大和對(duì)科學(xué)研究干擾大的病原。 特點(diǎn)：①來源于SPF動(dòng)物或無菌動(dòng)物，在屏障系統(tǒng)中飼養(yǎng)。②較普通級(jí)動(dòng)物健康，又比SPF動(dòng)物容易達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。③對(duì)實(shí)驗(yàn)干擾較少，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性和敏感性較好，是我國主要的科研用動(dòng)物。 3、無特定病原體動(dòng)物(SPF) 概念：無特定病原體動(dòng)物是指動(dòng)物體內(nèi)無特定的微生物和寄生蟲存在，但帶有非特定的微生物和寄生蟲的動(dòng)物。 特點(diǎn)：①來源于無菌動(dòng)物或悉生動(dòng)物，飼養(yǎng)在屏障系統(tǒng)中。②屬健康無病動(dòng)物。繁殖率高，自然死亡率低。③不干擾科研實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠，是國際上公認(rèn)的科研用動(dòng)物

25、。 4、無菌動(dòng)物(GF) 包括悉生動(dòng)物(GN) 概念：無菌動(dòng)物是指用現(xiàn)有的檢測技術(shù)在動(dòng)物體內(nèi)外的任何部位均檢不出任何活的微生物和寄生蟲的動(dòng)物。 特點(diǎn)：①來源于剖腹產(chǎn)或無菌卵的孵化，飼養(yǎng)在隔離系統(tǒng)中。②體內(nèi)外無菌，飼養(yǎng)較困難。③形態(tài)學(xué)和生理學(xué)在某些方面與常規(guī)動(dòng)物不同。 5、悉生動(dòng)物(GN) 概念：悉生動(dòng)物是指在無菌動(dòng)物體內(nèi)植入已知微生物的動(dòng)物。植入一種細(xì)菌的動(dòng)物叫單菌動(dòng)物；植入兩種細(xì)菌的動(dòng)物叫雙菌動(dòng)物；植入三種細(xì)菌的動(dòng)物叫三菌動(dòng)物；植入多種細(xì)菌的動(dòng)物叫多菌動(dòng)物 特點(diǎn)：①來源于無菌動(dòng)物，對(duì)動(dòng)物所帶的微生物明確。飼養(yǎng)在隔離系統(tǒng)中。②與無菌動(dòng)物相比，生活力、抵抗力較強(qiáng)，容易飼養(yǎng)。③在某些實(shí)

26、驗(yàn)中，可代替無菌動(dòng)物。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常見疾病 鼠痘（脫腳?。⒘馨图?xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎、小鼠肝炎、仙臺(tái)病毒、沙門氏菌感染、霉形體感染、螨病 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的生物危害 生物危害是指在科學(xué)實(shí)驗(yàn)中，由于實(shí)驗(yàn)人員的錯(cuò)誤操作，而使有害病原體散播到外界，污染外界環(huán)境，并造成周圍人及動(dòng)物感染發(fā)病。 第一類：天花病毒 第二類：鼠疫耶爾森菌，霍亂弧菌，布魯氏菌屬，炭疽芽胞桿菌，乙型腦炎病毒 第三類：金黃色葡萄球菌，鏈球菌屬，仙臺(tái)病毒（鼠副流感病毒1 型） 第四類：小鼠白血病病毒，小鼠乳腺瘤病毒 1 4 7 2 5 8 3 6 9 小鼠標(biāo)記 ( 1) 3- 5％苦味酸溶液，可染成黃色?！鳛椤皞€(gè)”位數(shù)。 ( 2) 0.5%中性紅或品紅溶液，可染成紅色?！鳛椤笆蔽粩?shù)。 8 教資分享