重醫(yī) 臨床免疫學(xué)檢驗 重點整理

《重醫(yī) 臨床免疫學(xué)檢驗 重點整理》由會員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《重醫(yī) 臨床免疫學(xué)檢驗 重點整理（11頁珍藏版）》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。

1、填空 1. 免疫防御功能異常可導(dǎo)致（感染、免疫缺陷）疾病。 2. 抗原抗體反應(yīng)的特點有（ 特異性、比例性 、可逆性、階段性） 3. 抗原抗體反應(yīng)的溫度一般以（15?40°C）為宜，最適溫度為（37°C） 4. 影響抗原抗體反應(yīng)的環(huán)境因素主要有（電解質(zhì)、pH、溫度） 5?某些特殊的抗原抗體反應(yīng)對溫度有一些特殊的要求，如冷凝集素在（4°C）左右與紅細胞 結(jié)合最好，（20C）以上反而解離。 6. 抗原抗體的結(jié)合分子間的引力包括（靜電引力、 范德華引力、氫鍵引力和疏水作用力）， 其中作用最強的是（疏水作用力） 1. 間接凝集反應(yīng)的類型包括（正向間接凝集、反向間接凝集反應(yīng)、間接凝集抑制反應(yīng)

2、和協(xié)同 凝集反應(yīng)）四種類型。 2. 參與凝集反應(yīng)中的抗原稱為（凝集原），抗體稱為（凝集素），常用的直接凝集試驗有（玻片 法、試管法、玻片法） 3. 在間接凝集反應(yīng)中正向凝集反應(yīng)是用（抗原）致敏載體以檢測標本中相應(yīng)的（抗體），而反向 間接凝集反應(yīng)是用（抗體）致敏載體以檢測標本中相應(yīng)（抗原） 4. 間接抗球蛋白試驗可用已知抗原型紅細胞檢測血清中的（不完全抗體），可用于輸血前的（交 叉配血）試驗。 1．免疫沉淀反應(yīng)是（可溶性抗原）與（相應(yīng)抗體）的特異性結(jié)合 2．棋盤格法（抗原 ）和（抗體）同時稀釋，可一次完成（抗原）和（抗體）的滴定 3．單向瓊脂擴散是待測抗原從含有定量（抗體）的（凝膠）

3、內(nèi)自由向周圍擴散，抗原抗體 特異性結(jié)合，在兩者比例合適的部位，形成（沉淀環(huán)）。 4．Maneini 曲線適用于（大分子抗原）的測定，在一定范圍內(nèi)，沉淀環(huán)隨時間延長而擴大， 抗原濃度與（擴散環(huán)直徑的平方）呈線性關(guān)系，常用（普通）坐標紙作圖。 5．Fahey 曲線適用于（小分子抗原）的測定，在一定范圍內(nèi)，沉淀環(huán)隨時間延長而擴大， 沉淀環(huán)直徑與（抗原濃度的對數(shù)）呈線性關(guān)系，常用（半對數(shù)）坐標紙作圖。 6． 雙向瓊脂擴散試驗可對抗原或抗體的存在、含量和相對分子量進行分析，沉淀線靠近抗 原孔指示（抗體含量較高）；靠近抗體孔則指示（抗原含量較高）；不出現(xiàn)沉淀線則表明（無 對應(yīng)的抗原和抗體）。 7．

4、免疫電泳是將（電泳）與（雙向免疫擴散）相結(jié)合的一種免疫化學(xué)分析技術(shù)。 8．火箭免疫電泳是（電泳）與（單向免疫擴散）相結(jié)合的免疫技術(shù)。 9．對流免疫電泳是（電泳）與（雙向免疫擴散）相結(jié)合的免疫技術(shù)。 10．對流免疫電泳中，抗體流向負極，是因為（電泳 ）速度?。姖B）速度大。 11．免疫濁度測定的基本原理是抗原抗體在特殊緩沖液中快速形成（免疫復(fù)合物），使反應(yīng) 液出現(xiàn)（濁度），并可根據(jù)其推算出抗原或抗體的量。 12．根據(jù) Rayleigh 方程，散射比濁法中的散射光強度與入射光波長成（反）比，與粒子的 濃度和體積成（正）比。 13．速率散射比濁法是測定單位時間內(nèi)免疫復(fù)合物形成的（最快時間

5、段）的散射信號值，此 時的散射信號最強，速率散射信號值最大。 14．免疫膠乳濁度測定的原理與透射比濁法相似。載體為大小適中、均勻的膠乳顆粒其直徑 應(yīng)稍（小于）入射光波長目前多用（200） nm 的膠乳顆粒。 15．免疫濁度測定的基本原則之一是反應(yīng)體系中必須始終保持（抗體）過量。 16．凝膠內(nèi)沉淀試驗包括（單向擴散試驗、雙向擴散試驗）；抗原抗體最適比的基本測定方 法為（抗原稀釋法、抗體稀釋法）。 1．標記免疫技術(shù)的示蹤物有（酶、放射性核素、熒光素、化學(xué)或生物發(fā)光劑、膠體金） 2?放射免疫技術(shù)可分為（放射免疫分析RIA、免疫放射分析IRMA）兩種基本類型。 3. 采用125-I制備標記

6、物的基本原理是以放射性碘原子置換被標記物分子中（酪胺酸或酪胺 殘基）或（組胺殘基）上的氫原子。 1．熒光免疫技術(shù)的主要類型包括（熒光抗體染色技術(shù)、熒光免疫測定技術(shù)）。 2．熒光物質(zhì)有（熒光素、其他熒光素物質(zhì)）。 3．熒光抗體染色技術(shù)可分為（熒光免疫顯微技術(shù)、流式熒光免疫技術(shù)）。 4. 鑭系稀土元素標記物制備的螯合劑有（多羧基酸類螯合劑、B-二酮體類螯合劑、BCPDA、 菲洛林） 5. 熒光免疫測定根據(jù)抗原抗體反應(yīng)后是否需要分離結(jié)合的與游離的熒光標記物而分為 （均 相、非均相）兩種類型。 6. 非均相熒光免疫測定法包括（時間分辨熒光免疫測定、熒光酶免疫測定）。 7. 均相熒光免疫測定

7、法包括（熒光偏振免疫測、底物標記熒光免疫測定）。 8. 熒光素標記抗體的方法有（攪拌標記、透析標記法）。 1. 膜載體酶免疫測定技術(shù)的類型主要有（斑點-ELISA免疫滲濾試驗、免疫層析試驗、免疫 印跡法） 2. 酶免疫組織化學(xué)技術(shù)常用的酶有（HRP、ALP、B-半乳糖苷酶（B-Gal））。 3. ELISA 檢測抗原的方法主要有（雙抗體夾心法、雙位點一步法、競爭法）；檢測抗體的方 法主要有（間接法、雙抗原夾心法、競爭法、捕獲法）。 4. ELISA中三種必要試劑是（固相的抗原或抗體、酶標記的抗原或抗體、酶的反應(yīng)底物）。 5. 制備酶結(jié)合物常用的方法有（戊二醛交聯(lián)法、過碘酸鹽氧化法）

8、。 6. 在稀釋液和洗滌液中加入（吐溫一 20），可以去除非特異性吸附。 7. 均相酶免疫測定技術(shù)的類型主要有（酶增強免疫測定技術(shù)、克隆酶供體免疫分析技術(shù)）。 8. 非標記抗體酶免疫組織化學(xué)技術(shù)的類型主要有（酶橋法、PAP法、雙橋PAP法、APAAP 法）。 9. （SDS-PAGE、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運、酶免疫測定）三項技術(shù)結(jié)合而成形成免疫印跡法。 10. 常用于HRP標記抗原/抗體的方法：（戊二醛交聯(lián)法、改良過碘酸鈉法）。 1. 化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)根據(jù)發(fā)光方式不同分為（化學(xué)發(fā)光酶免疫分析、化學(xué)發(fā)光免疫分析、點 化學(xué)發(fā)光免疫分析）。 2. 根據(jù)形成激發(fā)態(tài)分子的激發(fā)能可將發(fā)光分為三種類型（光

9、照發(fā)光、生物發(fā)光、化學(xué)發(fā)光）， 發(fā)光劑分為（熒光素、生物發(fā)光劑、化學(xué)發(fā)光劑）三種。 3. HRP常用的發(fā)光底物為（魯米諾）；ALP常用的發(fā)光底物為（AMPPD、4-MUP）。 4. 發(fā)光酶免疫分析的技術(shù)要點包括（抗原抗體反應(yīng)、標記物游離部分和結(jié)合部分分離、酶促 發(fā)光反應(yīng)及檢測）三個過程。 5?發(fā)光酶免疫分析常用的標記酶有（ALP、HRP）,根據(jù)酶促反應(yīng)底物不同，發(fā)光酶免疫分 析可分為（熒光酶免疫分析、化學(xué)發(fā)光酶免疫分析） 6?電化學(xué)發(fā)光免疫分析是（電化學(xué)、免疫測定）相結(jié)合的產(chǎn)物。它的標記物的發(fā)光原理與 一般化學(xué)發(fā)光不同，是一種在電極表面由（電化學(xué)）引發(fā)的特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，實際上包 括

10、了（電化學(xué)、化學(xué)發(fā)光）兩個過程。 7. ECLIA通過（電）啟動發(fā)光反應(yīng)，而CLIA是通過（化合物混合）啟動發(fā)光反應(yīng)。 1?不受位阻效應(yīng)影響，更易發(fā)揮生物素活性作用的是（BCNHS）。 2?用于標記蛋白質(zhì)醛基的，適用范圍較BHZ寬的活化生物素是（BCHZ）。 3?在一定波長的光照射下，光敏基團可轉(zhuǎn)變?yōu)榉枷慊趸蕉苯优c腺嘌吟N7位氨基結(jié)合 的是（光生物素）。 4.生物素化蛋白質(zhì)衍生物有二類，一種是（生物素化的大分子生物活性物質(zhì)），另一種是（標 記材料結(jié)合生物素后制成的標記物）。 5?用于親和素標記的物質(zhì)中，最常用的是（酶、異硫氰酸熒光素（FITC）、膠體金） 1. 用丙酮做固定

11、劑的抗原是（免疫球蛋白）；用1%聚甲醛做固定劑的抗原是（激素）；用10% 甲醛做固定劑的抗原是（類脂質(zhì)）；用 95%乙醇做固定劑的抗原是（蛋白質(zhì)）；用四氯化磺 做固定劑的抗原是（酶）。 2?免疫染色對特殊標本的進一步處理常用（冰凍切片、石蠟切片）法。 3?免疫組化染色后，陽性細胞的染色分布有三種類型，分別是（胞質(zhì)型、細胞核型、細胞膜 表面型）。 4. 酶免疫組化技術(shù)中最常用的酶有（辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶）。 5. 免疫電鏡標本的制備主要有（非包埋法免疫染、包埋前免疫染色、包埋后免疫染色） 6?免疫組化中最常用的制片方法是（蛋白酶消化法、非特異吸附法）。 1．金免疫

12、技術(shù)主要有（金免疫組織化學(xué)染色技術(shù)）和（金免疫測定技術(shù)），前者包括（免疫金（銀） 光鏡染色技術(shù)、免疫金電鏡染色技術(shù)）；后者包括（斑點金免疫滲濾試驗、斑點金免疫層析 試驗）等。 2．免疫金是指（膠體金與抗原（抗體） ）的結(jié)合物，在免疫組織化學(xué)染色技術(shù)中，習(xí)慣上稱 之為（金探針） 3．斑點金免疫層析試驗方法學(xué)類型有（雙抗體夾心法、競爭法、間接法）。 4．滲濾裝置是斑點金免疫滲濾試驗試劑盒中主要組成部分之一，由（塑料小盒、吸水墊料 ） 和（點加了抗原或抗體的硝酸纖維素膜片）三部分組成。 5．斑點金免疫滲濾試驗試劑盒由（滲濾裝置、膠體金標記物、洗滌液）組成。 6．用于電鏡的免疫金法可分為（包埋

13、前染色、包埋后染色）兩大類。 7．免疫金電鏡染色技術(shù)包括（標本包埋、免疫組化染色）兩個主要步驟。 8. 為了消除待測血清標本中（非特異性IgG）的干擾，斑點金間接免疫層析法測抗體常設(shè)計成 （反流免疫層析法 ） 1. PBMCs 包括（淋巴細胞）和（單核細胞 ）。 2. 在反相溶血空斑試驗中每一個空斑代表一個（分泌Ig的細胞）。 3. B細胞表面特異的標志是（SmIg）o 4. 常用的測定淋巴細胞活力的方法是（臺盼藍染色法）。 5. 淋巴細胞轉(zhuǎn)化情況的判定方法有（形態(tài)學(xué)方法、3H—TdR摻入法、MTT比色法） 6. 淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗應(yīng)用的同位素是（3-H ），細胞毒試驗應(yīng)用的同位

14、素是（51-Cr） 7. 分離外周血白細胞常用的方法是（自然沉降法）和（聚合物加速沉降法）。 8. 去除白細胞懸液中殘留紅細胞的常用方法有（無菌蒸餾水低滲裂解法、 0. 83％氯化銨處 理法）。 9．去除單個核細胞懸液中單核細胞的常用方法有（黏附去除法、羰基鐵粉吞噬去除法）。 10. 檢測T細胞數(shù)量的花環(huán)技術(shù)包括（E花環(huán)試驗、葡萄球菌花環(huán)法、抗體致敏紅細胞花環(huán) 法）；檢測B細胞數(shù)量的花環(huán)技術(shù)主要有（Ea花環(huán)試驗、Et花環(huán)試驗）。 11. 淋巴細胞的密度為 （1.077±0.001）。 12. 外周血經(jīng) Ficoll 分離液離心后從上到下分為（血清、 PBMCs 、粒細胞、紅細胞）層

15、。 1. 活化的TH1細胞產(chǎn)生的細胞因子主要有（IL-2、IFN、IL-12），而TH2細胞主要產(chǎn)生 的細胞因子為（IL-4、IL-5、IL-10）。 2. 細胞因子常用的檢測法包括（生物學(xué)檢測法、免疫學(xué)檢測法、分子生物學(xué)檢測法）。 3. ELISA 測定法測定細胞因子常用（競爭法）。 1. 補體參與的反應(yīng)試驗類型包括（免疫溶血試驗、補體結(jié)合試驗、補體依賴的細胞毒驗 、 免疫黏附試驗）. 2. 參與補體結(jié)合試驗的試劑可分為（指示系統(tǒng)、反應(yīng)系統(tǒng)）兩個系統(tǒng)。 3.III型變態(tài)反應(yīng)疾病患者的血清中補體水平（降低）。 4. 補體的最佳保存溫度是（一 20以下），在（56°C ）下30mi

16、n即被滅活。 5. CH50 試驗中有（ 綿羊紅細胞、溶血素、人血清 ）參與反應(yīng)。 1. 免疫球蛋白根據(jù)重鏈的不同可分為（IgM、IgG、IgA、IgE、IgD ） 2. 免疫固定電泳的特點是（周期短、敏感性高、分辨清晰、結(jié)果易于分析） 3. Ig中k/入比率正常范圍是（1.2?2.4） 1. 腫瘤抗原可分為（ 腫瘤相關(guān)抗原、腫瘤特異性抗原）兩類。 2. 腫瘤標志物檢測的臨床意義，歸納起來有（早期普查、腫瘤診斷、監(jiān)測病情）等 3. 腫瘤標志物的檢測對臨床某些腫瘤有重要輔助診斷價值，如：AFP可輔助診斷（肝癌）， CEA 可輔助診斷（結(jié)腸癌 ）， PSA 可輔助診斷（前列腺癌）。

17、 4. 細胞免疫是抗腫瘤免疫的重要機制，參與抗腫瘤免疫的細胞主要有（T細胞、B細胞、 NK 細胞、樹突狀細胞 ）等。 1. 宿主抗移植物反應(yīng)根據(jù)臨床出現(xiàn)癥狀情況一般分為（超急性排斥、急性排斥、慢性排斥） 三類。 2. （ HLA ）是不同個體間進行器官或組織移植時發(fā)生排斥反應(yīng)的重要成分。 3. HLA三類分子中，（I、II類）分子是能發(fā)生移植排斥反應(yīng)的首要抗原尤其是（HLA-DR ） 位點。 4. HLA-A、B、C和HLA-DQ、DR抗原采用（補體依賴的微量細胞毒）試驗檢測。 簡答/問答 抗原抗體反應(yīng)的原理：1.Ag、Ab能特異性結(jié)合：（內(nèi)因）2.Ag、Ab結(jié)合的動力：（外因）靜

18、 電引力（又稱庫侖引力）范得華力（又稱電子云力）氫鍵、疏水作用力。 抗原抗體反應(yīng)的特點：2.特異性、交叉反應(yīng)（cross-reaction）2.最適比例3.可逆性 影響抗原抗體反應(yīng)的主要因素自身因素：Ag：與Ag的理化性質(zhì)、抗原表位的數(shù)目及種類 有關(guān)；Ab：與Ab的來源有關(guān)：是R型抗體或H型抗體；與Ab的特異性、親合性有關(guān)； 與 Ab 的濃度有關(guān)。外界環(huán)境條件：1 ．電解質(zhì) 2 ．PH 3 ．溫度 抗原抗體反應(yīng)分哪些種類？沉淀反應(yīng)； 凝集反應(yīng)；補體參與的溶血反應(yīng)、補體結(jié)合試驗、 中和試驗、三大標記技術(shù) 什么是交叉反應(yīng)，有無特異性，為什么？在臨床上有何意義？交叉反應(yīng)cross-reacti

19、on）----抗 體對具有相同或相似抗原表位的抗原發(fā)生的反應(yīng)稱為交叉反應(yīng)。交叉反應(yīng)并沒有違背Ag、 Ab特異性結(jié)合的原則，其產(chǎn)生的先決條件是存在共同Ag表位。交叉反應(yīng)的意義：1.免疫 學(xué)診斷：（利用交叉反應(yīng)）eg外斐氏反應(yīng)等:利用變形桿菌0X19、0X2、OXk作Ag檢查血 清中Ab,診斷斑疹傷寒（立克次氏體感染所致）2.可造成免疫病理損害：eg鏈球菌感染后 易導(dǎo)致腎小球腎炎，其原因為鏈球菌與人體腎小球基底膜有共同的Ag表位所致。 雙擴、單擴、對流免疫電泳、免疫電泳實驗的原理，方法，用途。 凝膠擴散試驗原理：可 溶性抗原與相應(yīng)抗體在電解質(zhì)存在下，在瓊脂基質(zhì)中擴散，當(dāng)兩者相遇，比例恰當(dāng)時結(jié)合，

20、 出現(xiàn)肉眼可見的沉淀線。雙擴，方法：制備瓊脂板、打孔、加樣、擴散、用途： 1.已知 Ag 或Ab測未知Ab或Ag :雙孔型2?抗原性質(zhì)分析：三角孔型3?測Ag有效稀釋度：梅花孔 型。單擴：方法：已知抗體+瓊脂混合制板、打孔，在瓊脂板小孔中加梯度抗原，抗原向四 周擴散形成沉淀環(huán)，抗原濃度與沉淀環(huán)直徑呈線性關(guān)系繪制標準曲，從標準曲線上查出并計 算待測標本含量。用途：定量測定可測IgG、IgA、IgM、C3等含量。對流免疫電泳（counter -immunoelectrophoresis）原理：定向加速的免疫雙擴（雙擴+電場，使抗原、抗體相對泳動） 方法：抗原、抗體分別在瓊脂板上不同孔內(nèi)，抗原在負極

21、端，抗體在正極端，電泳。電壓： 4?6v/cm（瓊脂長度）電泳時間：45分鐘?1小時。用途用于HBsAg、AFP等檢測。免疫電泳 （immunoelectrophoresis）原理：區(qū)帶電泳+雙擴結(jié)合。方法:1.Ag電泳分出區(qū)帶（當(dāng)時看不 到）2.Ag、Ab免疫雙擴。用途：常用于分析復(fù)雜Ag的組分。（如人全血清組分的分析） 影響電泳的因素有哪些？ 1?與溶液的pH有關(guān)：常用pH8~9,蛋白質(zhì)帶負電2?與溶液離子強 度有關(guān)：愈高，泳動慢，一般0.02?0.2M3.與電場強度有關(guān)：愈高，愈快，一般4?6v/cm （瓊 脂長），約40v左右4.電滲作用的影響：電場中液體對于一固體的固定相對移動的現(xiàn)象

22、。電 滲方向與電泳方向相反。 Ab沉淀素（precipitin）。沉淀反應(yīng)稀釋ag,凝集反應(yīng)稀釋ab。Ag凝集原agglutinogen Ab 凝集素 agglutinin 玻片凝集試驗和試管凝集試驗的區(qū)別玻片法 用已知抗體檢測未知抗原。定性試驗。用途： AB0 血型鑒定、菌種鑒定。試管法用已知抗原測未知抗體的效價。屬半定量試驗。 反向間接凝集試驗、間接凝集抑制試驗的原理及實例：反向間接（血、膠乳）凝集試驗。 原理：將已知抗體吸附于載體上，檢測未知抗原。如：反向間接血凝檢測HBsAg、AFP等 間接凝集抑制試驗原理：待測樣本（可溶性Ag?） +已知Ab,反應(yīng)一段時間后，+已知致 敏Ag顆粒

23、（已成為顆粒性Ag），觀察是否有凝集現(xiàn)象。不凝集為陽性，凝集為陰性。如： 用膠乳凝集抑制試驗檢測小便中絨毛膜促性腺激素（HCG） 協(xié)同凝集試驗的原理原理:實質(zhì)為反向間接凝集反應(yīng)葡萄球菌A蛋白（Staphylococcus protein A, SPA）能非特異地與IgG的Fc段結(jié)合，當(dāng)與特異性抗原相遇時，IgG的Fab段與抗原結(jié)合， 出現(xiàn)金葡菌的凝集現(xiàn)象（屬特殊間接凝集試驗） 比較沉淀試驗和凝集試驗的異同抗原性質(zhì)：可溶性Ag、顆粒性Ago稀釋對象：抗原、抗體。 結(jié)果現(xiàn)象：沉淀現(xiàn)象、凝集現(xiàn)象。敏感性：低 、高。 免疫血清制備的主要程序。（一）動物的選擇： 1.常用動物：哺乳類較多：馬、羊、豬

24、、猴、 兔豚鼠等；禽類：雞。2.選擇原則：免疫的Ag與動物的種類要求越遠越好（即免疫原性好）； 與免疫血清的量有關(guān)：所需量大，用馬、羊、猴等大動物；所需量小，用兔、豚鼠等小動物 動物的個體狀態(tài)：雄性、適齡、健康、無感染；其它：根據(jù)實驗的特殊要求。（二）抗原的 條件：具有良好的抗原決定簇（表位）：易被LC識別而產(chǎn)生Ab；具有可靠的純度；足夠大 的分子量及相對復(fù)雜的空間結(jié)構(gòu)；注射量：嚴格掌握。寧可小，一般用25卩g/kg動物；量大 可出現(xiàn)免疫抑制 佐劑概念、作用機理、福氏不完全完全佐劑的組成。佐劑（adjuvant）:同Ag 一起或預(yù)先注 入機體，能增強機體對該 Ag 的免疫應(yīng)答或改變免疫應(yīng)答類

25、型的物質(zhì)。福氏不完全佐劑 （FIA）：組成：羊毛脂+石臘油，二者比例為4： 1.福氏完全佐劑（FCA）：組成：羊毛脂 ＋石臘油＋卡介苗 分離提純免疫球蛋白有哪些方法，其原理是什么？1 鹽析法:在不同濃度的中性鹽中蛋白質(zhì) 會脫水，降低帶電電勢，親水性變?yōu)槭杷裕肿娱g相互凝聚而沉淀（鹽析作用）。不同蛋 白質(zhì)鹽析所需中性鹽的濃度不同，故可分離不同蛋白質(zhì)。 2離子交換層析法:原理利用不同的 蛋白質(zhì)在緩沖溶液中所帶電荷不同，與某一載體上的具有相反電荷的離子基團進行吸附，然 后進行解脫，達到純化蛋白質(zhì)目的。 3 凝膠過濾法:凝膠顆粒是網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，當(dāng)分子大小不同的 混合物通過凝膠柱時，分子大的先下來，分

26、子小的嵌入凝膠顆粒的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中后下來，從而 將分子大小不同的物質(zhì)分離開來，即為分子篩的作用。 4親和層析法:利用抗原抗體的結(jié)合具 有特異性、可逆性，將純化抗原先交聯(lián)到載體（瓊脂糖珠）上，制成親和層析柱，當(dāng) Ab（Ig） 通過時，與抗原特異性結(jié)合在柱上，Ab中雜質(zhì)流出。然后通過改變緩沖液pH、離子強度， 使 Ab 解脫下來。 免疫標記技術(shù)的原理用可以微量檢測的標記物（示蹤物質(zhì)）標記抗原或抗體，作為試劑，與 相應(yīng)抗體或抗原結(jié)合反應(yīng)后，測定抗原抗體復(fù)合物中的標記物，從而推斷所測抗體或抗原有 無及量的多少 免疫熒光技術(shù)中最常用的熒光素是什么？ 1 .異硫氰酸熒光黃 （ Fluorescein is

27、othiocyanate , FITC）可發(fā)出黃綠色熒光2.四乙基羅丹明（rhodamine, RB20）發(fā)出橘紅色熒光3.四甲基異硫氰 酸羅丹明（tetramethylrhodamine isothiocyanate,TRITC）發(fā)出橙紅色熒光 免疫熒光顯微染色的各種方法及優(yōu)缺點1.直接法:快、直接、干擾因素少;用于檢測抗原;每檢 測一種抗原要標記一種熒光抗體,較麻煩。 2.間接法：優(yōu)點：制備一種熒光抗體（抗抗體）可 用于多種Ab檢測；靈敏度高。3.補體法：靈敏度高，制備一種熒光抗補體用于多種檢測； 干擾因素多，補體不穩(wěn)定，少用。 4.雙標記法。免疫熒光顯微技術(shù)優(yōu)缺點優(yōu)點： 1.特異性、 敏

28、感性高2?快速3?可定位4?既可測Ag又可測Abo缺點：1?需要熒光顯微鏡2?有非特異熒光 干擾 3.定性測定、判斷結(jié)果不客觀4.片子難保存（熒光猝滅） ELISA的原理、方法（以間接法測抗體和雙抗夾心法為例）及影響因素。原理：將酶分子 與Ab或Ag連接成一酶結(jié)合物（酶標記物），當(dāng)它與固相載體中相應(yīng)Ag或Ab相遇，形成 酶標記的 AgAb 復(fù)合物，加入底物，酶催化底物，生成有色產(chǎn)物，根據(jù)顏色深淺可測出溶液 中Ag或Ab的量。雙抗體夾心法步驟：包被已知Ab-洗滌-加待測標本（測Ag?）-洗滌- 加酶標Ab-洗滌-加底物-加終止液-觀察結(jié)果。間接法：步驟：包被已知Ag+待測標本（Ab?） -反應(yīng)

29、一段時間后，洗滌-加酶標抗抗體（酶標羊抗人IgG）-洗滌-加底物-加終止液，觀察結(jié) 果。ELISA試驗的影響因素（一）固相載體：酶標板要求：吸附性能好、空白值低、透明 度高，板批間、孔間性能相近。（二）抗原、抗體Ag:需純化Ab：需效價高、親和力強、 純化（三）試驗條件1.包被：一般用pH 9.6 CB（carbonate buffer），0.05M,有利于蛋白質(zhì)吸 附。包被濃度：0.1?100g/ml，—般常用10 g/ml包被時間、溫度：4 °C過夜或37 °C1-3h包 被量：100ul封閉：用0.1?5%牛血清白蛋白緩沖液浸泡0.5小時2?抗原抗體反應(yīng)的條件。 （1）微堿性有利于抗原

30、抗體結(jié)合，故用pH 7.4 PBS（phosphate buffer saline）洗滌（2）去污劑 有利于AgAb形成，洗液中加0.05% Tween-20 （3） Ag、Ab反應(yīng)時間、溫度：一般37°C、 40?50分鐘3.洗滌用PH7.2-7.4PBS,規(guī)一化，每次浸泡1~2分鐘，拋干,共洗滌3~4次4.酶 促反應(yīng)條件溫度37C時間10-20分pH 5.5底物量一致5?排除干擾：多設(shè)對照。 ELISA 試驗應(yīng)設(shè)哪些對照，為什么? 陽性對照 同標本一樣 顏色深；陰性對照 同標本一 樣 顏色淺 or 無色；酶結(jié)合物對照 加酶步加入 無色；底物對照 加底物步加入 無色；空 白對照 只加終止液

31、 無色。 判斷ELISA試驗結(jié)果的方法。（一）肉眼判定與陽性、陰性對照顏色比較：1?若待檢孔顯 色淺于陰性對照則判定為陰性；2.若待檢孔顯色深于或等于陽性對照孔則判定為陽性；3.若 待檢孔顯色介于陰性對照孔和陽性對照孔之間則判定為弱陽性。（二）酶標光度儀檢測A492 值（吸光率）：比色法1.與陽性、陰性對照測定值比較2.P/N比值：大于2.0為陽性，小于 2.0為陰性P: positive （待測吸光度值）N: negative 單克隆抗體概念由一個B細胞克隆產(chǎn)生的識別單一抗原表位的同源抗體。 雜交瘤技術(shù)制備單抗的原理及簡要步驟 能產(chǎn)生抗體的小鼠B（漿）細胞與小鼠骨髓瘤細胞雜 交能生成分

32、泌單克隆抗體的雜交瘤細胞。1.制備能產(chǎn)生單抗的雜交瘤細胞2.克隆化雜交瘤細 胞3.篩選雜交瘤細胞 4.擴大培養(yǎng)單克隆雜交瘤細胞5.收集單抗并鑒定6.純化單抗 HAT培養(yǎng)基的作用（次黃嘌吟、氨基蝶吟、胸腺嘧啶）：氨基蝶吟是抗代謝的藥物，能阻斷 內(nèi)源性合成DNA （合成DNA的主要途徑）。選出雜交瘤細胞。 人源單克隆抗體概念：單克隆抗體為人IgG。制備目的：用于人。 基因工程抗體、嵌合抗體概念，嵌合抗體優(yōu)點 基因工程抗體：在基因水平上對編碼抗體的 基因進行切割、拼接或修飾，甚至人工合成，然后導(dǎo)入受體細胞內(nèi)表達而產(chǎn)生的抗體（單克 隆抗體）。嵌合抗體：用DNA重組技術(shù)將鼠源單抗基因的可變區(qū)（V區(qū)

33、）基因與產(chǎn)生人Ig 的恒定區(qū)（C區(qū)）基因相連接，構(gòu)成嵌合基因，導(dǎo)入受體細胞（骨髓瘤細胞），表達出嵌合 抗體。a.免疫原性低，有利于用于人體b.在人體內(nèi)半衰期較鼠單抗長c.在人體內(nèi)生物學(xué)作用 （如CDC、ADCC）較鼠單抗強d.與人/人雜交瘤比，體外傳代更穩(wěn)定 人體免疫功能包括哪些組成部分一.非特異性免疫應(yīng)答 1.皮膚黏膜的機械阻擋作用及局部分 泌的抑菌、殺菌物質(zhì)2?吞噬細胞的吞噬作用3.NK（nature killer）細胞對病毒感染靶細胞的殺傷 作用4?血液、體液中的抗菌分子：補體、溶菌酶。二特異性免疫應(yīng)答細胞免疫：由T LC主 導(dǎo)完成，其效應(yīng)物質(zhì)是致敏TLc（CTL/Th1）體液免疫：由

34、BLC主導(dǎo)完成，其效應(yīng)物質(zhì)是Ab 實驗室中檢測人細胞免疫和體液免疫最常用哪些試驗，這些試驗的原理如何？正常值應(yīng)為 多少？ 一.T細胞的計數(shù)（T細胞表面標志的檢測）（一）特異性抗原的檢測T細胞表面有 一些特異的CD抗原，根據(jù)這些不同的CD抗原可鑒定不同的T細胞群體1.免疫熒光法：用 熒光素標記的單抗作為試劑染色淋巴細胞，計算出染上熒光的淋巴細胞百分率2.免疫細胞化 學(xué)法。（二）T細胞特異性受體（E受體）的檢測E花環(huán)形成試驗（Erythrocyte Rosette forming test）原理：T淋巴細胞表面含有綿羊紅細胞（SRBC）受體（CD2），當(dāng)T淋巴細胞與綿羊紅細 胞相遇時，T細胞通過該

35、受體吸附綿羊紅細胞而形成花環(huán)。Et正常值60%?80%Ea正常值 20%?30%二.T細胞功能的檢測（一）淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗1.原理淋巴細胞在某些物質(zhì)刺激下， 細胞增殖、分化（如細胞變大、胞漿增多、出現(xiàn)空泡）DNA合成增加（核染色質(zhì)疏松，核 仁出現(xiàn)），轉(zhuǎn)化成為淋巴母細胞。（1）形態(tài)學(xué)檢測法正常值60%?80%。（2）同位素摻入法 （3H-TdR摻入法）原理:T細胞受PHA刺激后，細胞進入增殖周期發(fā)生有絲分裂合成DNA。 試驗中當(dāng)細胞進入S期時，在培養(yǎng)液中加入3H-胸腺嘧啶核苷（3H-TdR），細胞攝入，合成 DNA,據(jù)摻入細胞內(nèi)的同位素量，可推測細胞增殖活躍程度，從而判斷淋巴細胞轉(zhuǎn)化的程度。

36、 （3） MTT 比色法（二）相關(guān)的細胞因子的檢測（三）淋巴細胞的細胞毒性檢測1.形態(tài)學(xué)方 法2?同位素法：常用51Cr釋放試驗原理：用51Cr標記靶細胞（一般為腫瘤細胞），將它與 待測淋巴細胞（效應(yīng)CTL細胞）一起培養(yǎng)，效應(yīng)細胞破壞靶細胞，51Cr釋放出來，測定 其51Cr數(shù)量，便可推知效應(yīng)細胞的殺傷能力。特異溶解百分率大于50%為陽性。二、細胞 免疫功能體內(nèi)檢測法（一）W型超敏反應(yīng)皮試原理：W型超敏反應(yīng)的本質(zhì)是細胞免疫，所 以W型超敏反應(yīng)如為陽性，可反映細胞免疫功能好。陽性（直徑＞0.5cm）：曾感染過結(jié)核菌， 細胞免疫功能好。陰性（直徑＜ 0.5cm） ：細胞免疫功能差或從未感染過結(jié)核菌

37、。強陽性（直 徑〉2.5cm）:表明現(xiàn)處于結(jié)核的活動期。三.B細胞數(shù)量的檢測（一）B細胞表面識別抗原受 體（BCR） （SmIg, Surface membrane Ig）的檢測。正常值：15%?25%。（二） B細胞表面抗原 的檢測。B細胞表面特有的CD抗原有：CD19、CD20，用抗CD20的單抗（免疫熒光法、 酶免疫組化法）檢測外周血淋巴細胞，陽性細胞為B淋巴細胞，約占總淋巴細胞的10%?15%。 四.B細胞功能的檢測（一）血清中Ig的測定人的體液免疫功能正常（B細胞功能正常）， 應(yīng)反映在血清中有正常量的免疫球蛋白（二）血型抗體效價的測定反映體內(nèi)IgM水平正常6 月嬰兒抗A >1 : 8

38、,或抗B > 1 : 4; 1歲后抗A>1:16，或抗B > 1 : 8如3歲以上抗A或 抗B效價仍< 1 ： 4,表示IgM缺乏，提示先天性體液免疫功能缺陷。（三）抗原刺激機體 后抗體應(yīng)答反應(yīng)（體內(nèi)試驗）將抗原注射到體內(nèi)，一段時間后檢測相應(yīng)抗體效價，如抗體效 價低，說明機體體液免疫功能差如用三聯(lián)傷寒菌苗0.25ml注射，每周1次，連續(xù)3次，抗 H應(yīng)為1 ： 160,若低，表示體液免疫應(yīng)答功能差。 補體的定義、組成及性質(zhì)complement:補體是存在于人和動物血清中的一組具有酶活性的 球蛋白，一般情況下處于未激活狀態(tài)。補體的特性：穩(wěn)定性差，各種理化因素都可使之失活： 如酸、堿、紫外線照射、

39、劇烈震蕩等。組成：1?補體的固有成分：C1-C9,其中C1又包括C1q、 C1r、C1s,共9種成分11種蛋白分子。其中C9的分子量最小、C3的含量最高；2?補體的調(diào) 節(jié)蛋白：如C4調(diào)節(jié)蛋白、C1抑制物、S蛋白等；3.補體受體；如C1qR、C3aR等； CH50 實驗的原理、正常值及意義 原理：組成和功能完整的補體系統(tǒng)能使致敏羊紅細胞發(fā) 生溶血；羊紅細胞的溶血程度與補體的活性成正比；CH50 （U/ml）=1/血清用量X稀釋倍 數(shù)?？傃a體活性參考范圍：50 —100U/m 1。補體檢測的臨床意義：1.補體量f :多見于急性炎 癥感染、組織損傷、癌腫；2?補體量；：見于補體消耗f：體內(nèi)有Ag、

40、Ab反應(yīng)，如SLE、 RA等；補體合成（：肝臟疾患；補體先天性缺之：具有遺傳性和家族史 補體結(jié)合實驗的原理、結(jié)果判斷及評價 原理：補體可與任何一組AgAb復(fù)合物結(jié)合；一旦 與某一復(fù)合物結(jié)合后，便不再與另一復(fù)合物結(jié)合。結(jié)果判斷：不溶血為陽性，即待測物中有 相應(yīng)的Ab或Ag；溶血為陰性，即待測物中無相應(yīng)的Ab或Ag。優(yōu)點：該試驗既可測Ag、 又可測Ab； Ag既可以是顆粒性Ag、也可是可溶性Ag、甚至可以是塊狀物，因此檢測Ag 的范圍廣；可以用于病毒、立克次氏體、細菌等多種病原體的檢測（實際上是測Ag）;比較 敏感（0.05ug/m1）、特異；結(jié)果判斷明顯：通過有無溶血來觀察，無需特殊儀器檢測。

41、缺點: 參與反應(yīng)的物質(zhì)多，影響因素也多；（反應(yīng)體系中有Ag、Ab、C、羊紅細胞、溶血素）；在 正式試驗前需要找出幾種物質(zhì)間最恰當(dāng)?shù)谋壤容^復(fù)雜。 免疫復(fù)合物的含義及免疫復(fù)合物病的致病原因含義：immune complex,它主要指AgAb復(fù)合 物及AgAbC復(fù)合物兩種。中等大小的IC沉積在體內(nèi)，通過激活補體、激活血小板而致病。 免疫復(fù)合物檢測使用的標準品、出現(xiàn)的問題及WHO推薦的檢測方法標準品是AHG—熱 聚合人IgG （不是IC）O IC檢測的有關(guān)技術(shù)問題：到目前為止，所有檢測IC的試驗，還沒 有另人滿意的標準化措施;在體外制備的IC還很不穩(wěn)定，因此用人工合成的復(fù)合物作為定量 標準不適宜

42、。WHO推薦的檢測方法：C1q結(jié)合試驗、膠固素試驗、類風(fēng)濕因子（RF）試驗、 Raji 細胞試驗 AID的基本特征及常見的AID有哪些？誘因可有可無。有一定的遺傳傾向。女性患者多見， 發(fā)病率隨年齡增長而增加?；颊哐逯锌蓹z出高效價的自身抗體和（或）自身致敏T淋巴 細胞。一些自身抗體在自身免疫病中呈現(xiàn)交叉重疊現(xiàn)象:即在同一種自身免疫病患者體內(nèi)可 檢測到多種自身抗體，而不同的自身免疫病也可存在同一種自身抗體。IgG、IgA、IgM升 高，尤其 IgG 升高明顯。病損局部可發(fā)現(xiàn)有淋巴細胞、漿細胞、嗜酸性粒細胞浸潤及免疫 復(fù)合物沉積。免疫抑制劑治療可取得一定療效。系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic l

43、upus erythematosus, SLE）III型；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis, RA）III型；自身免疫性溶血性貧血 （autoimmune hemolytic anemia, AIHA）II 型； 重癥肌無力（myasthenia gravis, MG）II 型。 ANA的定義及ANAs的組成 抗核抗體（antinuclear antibody, ANA）原指抗細胞核抗原成分 的自身抗體的總稱。廣義地指抗細胞內(nèi)所有抗原成分的自身抗體的總和。ANA所針對的靶 抗原由細胞核擴展到整個細胞，包括細胞核、細胞漿、細胞骨架及細胞周期等。 抗核抗體 譜（anti

44、nuclear antibodies, ANAs）抗 DNA 抗體：抗 dsDNA、抗 ssDNA 抗體抗組蛋白抗體 （AHA）：抗Hl、H2A、H2B、H3、H4等抗ENA抗體：抗Sm、抗核糖核蛋白（RNP）、 抗SS-A、抗SS-B等抗非組蛋白抗體：抗Scl-70、抗Jo-1、抗Ku、抗增殖細胞核抗原（PCNA）、 抗PL-7、抗PL-12、抗著絲點抗體等抗核仁抗體：抗PM-Scl、抗NOR-90、抗U3nRNA抗 細胞其它成分抗體：抗高爾基體、抗中心體、抗線粒體、抗肌動蛋白、抗核層蛋白等 各種AID檢測時的代表性自身抗體有哪些？抗dsDNA抗體對SLE有較高特異性，70-90% 活動性S

45、LE患者該抗體陽性，是SLE的診斷標準之一。AHA在藥物性狼瘡患者中陽性率達 90-100%，而SLE病人陽性率僅有20-35%，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病人為36%。抗Sm抗體：抗 Sm抗體是SLE的特異性標志，疾病特異度達99%，為提高SLE的診斷準確率，可將抗Sm 抗體和抗 dsDNA 抗體同時檢測?？?SS-A、 SS-B 抗體 ：抗 SS-A 和抗 SS-B 抗體并存是干 燥綜合癥的特異標志。核糖核蛋白（ribonucleoprotein，RNP），又稱u1RNP?？箄1RNP抗 體在混合性結(jié)締組織?。∕CTD）陽性率為95%以上，是MCTD的標志抗體?？筍cl-70是進 行性全身性硬化癥（P

46、SS）的標志抗體，陽性率為50-64%?？笿o-1抗體對肌炎和間質(zhì)性肺 纖維化有高度特異性，抗體的效價與疾病的活動性相關(guān)。原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）時 AMA陽性率可達90%以上。AMA是PBC的血清學(xué)指標。 在原發(fā)性免疫缺陷病中哪一種發(fā)生最多？ 原發(fā)性體液免疫缺陷?。ㄕ荚l(fā)性 ID 的 50~70%），如嬰兒性聯(lián)丙球蛋白缺乏癥。 懷疑體液免疫缺陷應(yīng)作哪些過篩試驗和確診試驗？ 1.過篩試驗（1）血清蛋白電泳 丙球 定量（2）血型抗體效價測定（反映 IgM 水平）正常（3）血清抗鏈球菌溶血素抗體的測定 （抗O）的測定一反應(yīng)IgG水平（4）骨髓檢查2.確診試驗（1）血清免疫球蛋白（G、M、

47、 A）測定（2）抗原刺激后抗體應(yīng)答反應(yīng)3） B細胞計數(shù)（4） T細胞亞群測定 懷疑細胞免疫缺陷應(yīng)作哪些過篩試驗和確診試驗？ 過篩試驗（1）淋巴細胞絕對值測定（2） 遲發(fā)型超敏反應(yīng)皮試（3）胸腺X線檢查。確診試驗（1）淋巴結(jié)活檢（2） T淋巴細胞計數(shù) （ 3） T 細胞功能試驗 I、W型超敏反應(yīng)皮試的原理1當(dāng)變應(yīng)原再次進入致敏者皮膚，與吸附在肥大細胞或和嗜 堿性粒細胞上的特異IgE高變區(qū)結(jié)合，導(dǎo)致肥大細胞或嗜堿性粒細胞脫顆粒，釋放生物活性 介質(zhì)：如組織胺、白三烯、激肽等。在20－30分鐘內(nèi)局部皮膚出現(xiàn)紅暈、紅斑、風(fēng)團以及 搔癢感，數(shù)小時后消失。出現(xiàn)此現(xiàn)象者判斷為皮試陽性，即對該變應(yīng)原過敏;未

48、出現(xiàn)紅暈、 紅斑、風(fēng)團者為陰性，即對該變應(yīng)原不過敏。 4用皮內(nèi)注射、皮膚斑貼等方法使變應(yīng)原進入 已致敏機體，體內(nèi)致敏的 T 細胞 CD4+Th1 再次遇到相應(yīng)抗原后，釋放出大量細胞因子，如 IL-2、IFN-Y、TNF、IL-3、GM-CSF, （1）活化巨噬細胞及NK,增強吞噬細胞作用；（2） 吸引WBC到達Ag所在部位，促進吞噬；（3）促進T細胞增生和分泌細胞因子，加重局部 炎癥反應(yīng)，最后造成局部以單核細胞和淋巴細胞浸潤為主的炎癥反應(yīng)。 比較I、W型超敏反應(yīng)皮試（抗原、時間、結(jié)果、意義）抗原：體液免疫細胞免疫；時間： 15-25min 48-72h ；結(jié)果：風(fēng)團和紅暈反應(yīng)，紅腫、硬結(jié)等局

49、部炎癥反應(yīng)；意義：尋找變應(yīng)原 、預(yù)防藥物或疫苗過敏，尋找變應(yīng)原、評價機體細胞免疫功能狀態(tài)、用于傳染病的診斷。 掌握HLA-I、II類分子的結(jié)構(gòu)、分布及意義。HLA-I類分子由一條a鏈和一條B鏈組成， a鏈的N端胞外區(qū)分為a1、a2、a3三個結(jié)構(gòu)區(qū)，其中a 1、a 2構(gòu)成抗原結(jié)合槽，與處 理后的抗原肽結(jié)合形成MHC-抗原肽復(fù)合體oHLA-I類分子分布在所有有核細胞膜上。功能： 識別和提呈內(nèi)源性抗原肽；對CTL的識別起限制性作用。HLA-II類分子由一條a鏈和一條 B鏈組成，兩條肽鏈的胞外區(qū)分別有a1、a2和B1、B2兩個功能區(qū)，由a 1與B 1共同形 成抗原結(jié)合槽。分布：抗原提呈細胞(如B細胞、

50、巨噬細胞、樹突狀細胞)及活化的T細胞等。 功能：識別和提呈外源性抗原肽；對Th的識別起限制性作用。 移植排斥反應(yīng)的類型及產(chǎn)生的原因和避免方法。原因：供、受體間HLA I類、II類抗原 的差異，差異越大排斥越強。 DR — 最重要。 1.超急性排斥反應(yīng)：預(yù)存抗體產(chǎn)生的原因： 多次輸血，血液透析，多次妊娠，再次移植。個別原因不明，可能與曾感染某些病毒細菌有 關(guān)，產(chǎn)生同種異型抗體。避免方法：移植前對受體血清與供體細胞進行細胞毒試驗( CDC 試驗，complement dependent cytotoxicity),檢測受者血清中是否預(yù)存有抗供者細胞的抗體。 2.加速性排斥反應(yīng)產(chǎn)生機理：同超級性，

51、但抗體效價及親和性要低些。極少數(shù)也可能由致敏 淋巴細胞引起。避免方法：CDC試驗3?急性排斥反應(yīng)機理：供、受者HLAAg型別不完全 一致造成的。早期以細胞免疫為主、晚期體液免疫為主避免：盡可能選HLA Ag型別一致的 供體4?慢性排斥反應(yīng)機理：供、受者HLA Ag型別不完全一致造成的。早期以細胞免疫為主、 晚期體液免疫為主避免：盡可能選HLA Ag型別一致的供體 移植物抗宿主反應(yīng)的概念及產(chǎn)生原因。 移植物中免疫活性細胞攻擊宿主。(1)宿主免疫活 性細胞處于反應(yīng)無能狀態(tài)(2)移植物中含有大量的免疫活性細胞 移植前選擇供體應(yīng)做哪些檢測？(一交叉配合試驗1?測受體血清中有無抗供體細胞的抗體 (1)

52、微量細胞毒試驗(complement dependent cytotoxicity,CDC試驗)2.混合淋巴細胞培養(yǎng)(二 HLA型別檢測1.血清學(xué)方法(Serologically defined antigen, SD抗原)(1)檢測位點：A、B、 C、DR、DQ (2)檢測細胞：檢測A、B、C位點一用總淋巴細胞檢測DR、DQ位點一用 B淋巴細胞血清學(xué)與細胞學(xué)鑒定HLA抗原的基因位點是哪些，檢測時應(yīng)采用什么細胞？ 細胞分型法(lymphocyte defined antigen, LD抗原)檢測位點：DP待測細胞：BLc方法：淋 巴細胞混合培養(yǎng)試驗(mixed lymphocyte cultu

53、re, MLC)分雙向與單向混合培養(yǎng)兩種方法 舉例解釋 CDC 試驗。 移植前選擇供體的檢測。微量細胞毒試驗( complement dependent cytotoxicity,方法：受體血清+供體Lc+補體 觀察細胞死亡情況，大于10%應(yīng)放棄此供體 移植后監(jiān)測排斥反應(yīng)應(yīng)做哪些檢測？ 1.3H-TdR四小時摻入法(2)外周血T細胞計數(shù)(3) 補體 C3 測定 免疫學(xué)檢測質(zhì)控的內(nèi)在品質(zhì)和外在因素各有哪些？如何進行衡量？ 內(nèi)在品質(zhì)：精密度、準 確度、敏感性、特異性等。外在因素：試劑、器材、參考品、操作人員等。精密度(precision)： 用某種方法對同一標本反復(fù)測定，所得結(jié)果之間的差異大小，即彼此之間的符合程度。用標 準差(SD)和變異系數(shù)(CV)來衡量其大小。包括批內(nèi)精密度和批間精密度。準確度 (accuracy)：測定值和真實值之間的符合程度。敏感性(sensitivity)：測定方法檢測極低濃 度物質(zhì)的能力；標本的真實狀態(tài)為陽性，用該方法檢測能得到陽性結(jié)果。衡量方法：①將參 考品作系列稀釋，觀察該方法所能測定的最低含量；②檢測臨床已確診的病例。特異性 (specificity)：標本真實狀態(tài)為陰性，用該方法測定能得到陰性結(jié)果；無交叉反應(yīng)。衡量方 法：①檢測正常人群或已知的無關(guān)病例；②已知的陽性標本，加入免疫阻斷劑后是否得到陰 性結(jié)果。