蛙坐骨神經(jīng)干動作電位實驗報告.doc

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一、實驗目的： 1. 學習蛙坐骨神經(jīng)干標本的制備 2. 觀察坐骨神經(jīng)干的雙相動作電位波形，并測定最大刺激強度 3. 測定坐骨神經(jīng)干雙相動作電位的傳導速度 4. 學習絕對不應期和相對不應期的測定方法 5. 觀察機械損傷或局麻藥對神經(jīng)興奮和傳導的影響 二、實驗材料 1. 實驗對象：牛蛙 2. 實驗藥品和器材：任氏液，2%普魯卡因，各種帶USB接口或插頭的連接導線，神經(jīng)屏蔽盒，蛙板，玻璃分針，粗剪刀，眼科剪，眼科鑷，培養(yǎng)皿，燒杯，滴管，蛙毀髓探針，BL-420N系統(tǒng) 三、主要方法和步驟： 1. 搗毀腦脊髓 2. 分離坐骨神經(jīng) 3. 安放引導電極 4. 安放刺激電極 5. 啟動試驗系統(tǒng) 6. 觀察記錄 7. 保存 8. 編輯輸出 四、實驗結果和討論 1. 觀察神經(jīng)干雙相動作電位引導（單通道，單刺激） 如圖，觀察到一個雙相動作電位波形。 2. 神經(jīng)干雙相動作電位傳導速度測定（雙通道，單刺激） （1） 選擇“神經(jīng)骨骼肌實驗”—“…傳導速度測定” （2） 改變單刺激強度 （3） 傳導速度 = 傳導距離(R1--R2-)/傳導時間(t2-t1) 如圖所示，兩個波峰之間的傳導時間 △t = (t2-t1) = 0.66ms 實驗中，我們設定在引導電極1和3之間的距離 △R = (R1--R2-) = 1cm 故傳導速度v = △R/△t = 1cm / 0.66ms = 15.2 m/s 3. 神經(jīng)干雙相動作電位不應期觀察 由上圖可知，當刺激間隔時間為4.61ms時，兩雙相動作電位開始融合，此時為總不應期；當刺激間隔時間為1.05ms時，雙相動作電位完全融合，此時為絕對不應期。 故相對不應期 = 總不應期 – 絕對不應期 = 4.61ms – 1.05ms = 3.56ms 4. 普魯卡因對神經(jīng)沖動傳導的阻滯作用 如圖所示，在兩通道之間滴加普魯卡因后，兩雙相電位間的波峰間隔時間為1.03ms，由引導電極之間的間隔距離1cm，得此時傳導速度： V1 = 1cm/1.03ms = 9.71 m/s 5. 機械損傷對坐骨神經(jīng)干雙向動作電位的影響 由圖可知，當剪斷兩引導電極之間的神經(jīng)干時，第二通道的雙相動作電位消失。 故機械損傷對神經(jīng)動作電位傳導的阻滯作用比局麻藥強。 6. 實驗注意事項 a) 牛蛙腓腸肌后的神經(jīng)干分支較難找，可以適當剪開周圍軟組織輔助找到。 b) 每隔一段時間，記得給神經(jīng)干（及未分離時的周圍軟組織）滴加任氏液以盡量保持組織的活性。 c) 分離出的神經(jīng)要盡量長，以保證實驗數(shù)據(jù)的完整性。 d) 滴加普魯卡因時，液滴可能會垂在神經(jīng)干上的兩個引導電極之間，此時可以用滴管將其引流到神經(jīng)干末端無引導電極的地方，滴到神經(jīng)屏蔽盒底部。 e) 實驗前先熟悉即將使用的機能學實驗系統(tǒng)。