動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)ppt課件

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,,專題2.2動(dòng)物細(xì)胞工程,1,動(dòng)物細(xì)胞工程,其中，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。,2,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù),3,教學(xué)目標(biāo),新課標(biāo)要求 簡述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件及應(yīng)用。 簡述通過動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動(dòng)物的過程和應(yīng)用前景。 教學(xué)重點(diǎn) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程及條件。 用動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動(dòng)物的過程。 教學(xué)難點(diǎn) 用動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動(dòng)物的過程。,4,資料：燒傷病人的治療通常是取燒傷病人的健康皮膚進(jìn)行自體移植，但對(duì)于大面積燒傷病人來講，健康皮膚很有限，請(qǐng)同學(xué)們想一想如何來治療該病人？,取該患者的皮膚進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),獲得足量的細(xì)胞后再移植。,5,一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多。 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)品。,6,一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),1.概念：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體內(nèi)取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖。,原理：細(xì)胞增殖,目的：獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)品。,2.過程：,7,動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官,,,分散成單個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞懸液,,,,,10~50代細(xì)胞,發(fā)生癌變 無限傳代,培養(yǎng)液,胰蛋白酶或膠原蛋白酶,原代培養(yǎng),傳代培養(yǎng),不死性細(xì)胞,,繼續(xù)傳代培養(yǎng),（第1代細(xì)胞到第10代細(xì)胞）,8,細(xì)胞的生長特性,●細(xì)胞貼壁：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。 要求：培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。 ●細(xì)胞的接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。,,9,,細(xì)胞貼壁,10,培養(yǎng)器皿,返回,11,,動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官,,細(xì)胞懸浮液（原代細(xì)胞）,,10代細(xì)胞,,無限增殖,單個(gè)細(xì)胞,加培養(yǎng)液,,細(xì)胞株,細(xì)胞系,原代培養(yǎng)：第1代細(xì)胞傳至10代左右 傳代培養(yǎng)：將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出，分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。 細(xì)胞株：10到40、50代的細(xì)胞，遺傳物質(zhì)沒發(fā)生改變。 細(xì)胞系：超過50代的細(xì)胞，遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，失去接觸抑制，可無限增殖。,,過程點(diǎn)撥：,等同于 癌細(xì)胞,12,尋根問底,1.進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)用胰蛋白酶分散細(xì)胞，說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分？用胃蛋白酶行嗎？,細(xì)胞間的成分主要是蛋白質(zhì)。 不行，胃蛋白酶適宜的PH約為2，當(dāng)PH6時(shí)，胃蛋白酶就會(huì)失去活性，而胰蛋白酶適宜PH為7.2---8.4，多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜PH為7.2---7.4。胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性，胰蛋白酶在此環(huán)境中活性較高，因此胰蛋白酶適宜用于細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的消化。,2.胰蛋白酶真的不會(huì)把細(xì)胞消化掉嗎？為什么？,細(xì)胞膜成分：磷脂和蛋白質(zhì) 長時(shí)間的作用也會(huì)消化細(xì)胞膜蛋白，對(duì)細(xì)胞有損傷作用。 因此必須控制好胰蛋白酶的消化時(shí)間。,3.目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞為幾代以內(nèi)的？,10代以內(nèi)，以保持細(xì)胞正常的二倍體核型。,13,5、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞？,6、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體？,成塊組織不利于培養(yǎng)，分散了并制成細(xì)胞懸濁液，利于細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸，利于培養(yǎng)。,不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多。 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)品。,4、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料？,分化程度低,分裂和增殖旺盛，易培養(yǎng),思考,14,二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件,1、無菌、無毒的環(huán)境 2、營養(yǎng) 3、溫度和PH 溫度36.5+0.5度，pH7.2～7.4 4、氣體環(huán)境 O2和CO2（95%空氣和5% CO2 ）,維持培養(yǎng)液的PH,培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理 措施：培養(yǎng)液中加一定量的抗生素。,葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、微量元素、促生長因子（維生素、激素等）和 動(dòng)物血清,較植物組織培養(yǎng)基，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的獨(dú)特之處？,①液體培養(yǎng)基 ②成分中有動(dòng)物血清等,15,想一想,為什么對(duì)動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)要添加血清？,血清中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白質(zhì)為白蛋白和球蛋白；氨基酸有多種，是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分，有些動(dòng)物細(xì)胞不能合成，必須由培養(yǎng)液提供；激素有胰島素、生長激素等促進(jìn)細(xì)胞的生長、增殖、貼附，還有很多未知的促細(xì)胞生長因子等其他活性物質(zhì)。因此，細(xì)胞培養(yǎng)要保證細(xì)胞能順利生長和繁殖，一般要添加10%----20%的血清。,16,三、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用,1.生產(chǎn)蛋白生物制品：病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等 2.基因工程技術(shù)中的受體細(xì)胞。 3.用于檢測(cè)有毒物質(zhì)。 4.培養(yǎng)正常或病變的細(xì)胞，用于生理、病理、藥理等方面的研究?？捎糜诮】导?xì)胞的培養(yǎng)，如獲得大量自身的皮膚細(xì)胞，用于植皮；用于篩選抗癌藥物等，為治療和預(yù)防疾病提供理論依據(jù),17,細(xì)胞的全能性,細(xì)胞株、細(xì)胞系,植物體或組織,培養(yǎng)結(jié)果,快速繁殖、培育無病毒植株等,培養(yǎng)目的,葡萄糖、動(dòng)物血清,蔗糖、植物激素,培養(yǎng)基特有成分,液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基,培養(yǎng)基性質(zhì),細(xì)胞增殖,原理,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),植物組織培養(yǎng),比較項(xiàng)目,植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較,18,1、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的細(xì)胞（ ） A．細(xì)胞系 B．細(xì)胞株 C．原代細(xì)胞 D．傳代細(xì)胞,2、動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是 ----- （ ） A.動(dòng)物細(xì)胞融合 B.單克隆抗體 C.胚胎移植 D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),A,D,3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物細(xì)胞培養(yǎng)的重要區(qū)別在于----（ ） A.培養(yǎng)基不同； B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進(jìn)行； C.動(dòng)物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能； D.動(dòng)物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細(xì)胞只能培 養(yǎng)成植株。,A,學(xué)后鞏固,19,作業(yè),請(qǐng)預(yù)習(xí)課本47頁以后的內(nèi)容 完成練習(xí)冊(cè)相關(guān)練習(xí),20,