2018-2019學(xué)年高中生物 專題2 細(xì)胞工程 2.2 動(dòng)物細(xì)胞工程 2.2.2 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體教學(xué)案（含解析）新人教版選修3.doc

《2018-2019學(xué)年高中生物 專題2 細(xì)胞工程 2.2 動(dòng)物細(xì)胞工程 2.2.2 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體教學(xué)案（含解析）新人教版選修3.doc》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《2018-2019學(xué)年高中生物 專題2 細(xì)胞工程 2.2 動(dòng)物細(xì)胞工程 2.2.2 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體教學(xué)案（含解析）新人教版選修3.doc（21頁珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 1．動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。 2．動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等。 3．動(dòng)物細(xì)胞融合的主要用途是制備單克隆抗體。 4．雜交瘤細(xì)胞是由經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合而成的，具有既能無限增殖又能產(chǎn)生專一抗體的能力。 5．制備單克隆抗體過程中第一次篩選是為了獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選是為了獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。 6．單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可大量制備。 7．單克隆抗體的主要用途有：作為診斷試劑、用于治療疾病和運(yùn)載藥物。 一、動(dòng)物細(xì)胞融合 1．概念：是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程，也稱細(xì)胞雜交。 2．結(jié)果：形成雜交細(xì)胞。 3．誘導(dǎo)因素：聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等。 4．意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。 5．應(yīng)用 (1)是研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。 (2)為制備單克隆抗體開辟了新途徑。 二、單克隆抗體 1．傳統(tǒng)抗體的獲得 (1)方法： (2)缺點(diǎn)：產(chǎn)量低、純度低、特異性差。 2．單克隆抗體的制備及優(yōu)點(diǎn) (1)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。 (2)制備過程： (3)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。 3．單克隆抗體的應(yīng)用 (1)作為診斷試劑，具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。 (2)用于治療疾病和運(yùn)載藥物。 1．動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最重要的意義是(　　) A．克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 B.制備單克隆抗體 C．培育新物種 D．生產(chǎn)雜交細(xì)胞 解析：選A　與植物體細(xì)胞雜交相似，進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞融合的最大意義是突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。 2．與植物原生質(zhì)體融合相比，動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素是(　　) A．聚乙二醇　　　　　　B．滅活的病毒 C．振動(dòng) D．電激 解析：選B　動(dòng)物細(xì)胞融合可以用滅活的病毒誘導(dǎo)，而植物原生質(zhì)體融合不能用滅活的病毒誘導(dǎo)。 3．動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是(　　) A．細(xì)胞膜的流動(dòng)性 B．細(xì)胞膜的選擇透過性 C．細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)性 D．細(xì)胞質(zhì)酶的活性 解析：選A　細(xì)胞能融合的原理是細(xì)胞膜具有流動(dòng)性。 4．科學(xué)家們用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是(　　) A．經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 B．未經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 C．經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞 D．未經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞 解析：選C　B淋巴細(xì)胞接受抗原刺激后，能形成效應(yīng)B細(xì)胞，從而產(chǎn)生抗體與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合而發(fā)揮免疫效應(yīng)，所以只有經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞才會(huì)產(chǎn)生專一性的抗體。 5．運(yùn)用細(xì)胞工程技術(shù)獲得單克隆抗體時(shí)，下列操作不必要的是(　　) A．對(duì)小動(dòng)物注射抗原 B．融合并篩選雜交瘤細(xì)胞 C．培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞 D．將胰蛋白酶注入小鼠腹腔 解析：選D　胰蛋白酶在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)用到，是加到培養(yǎng)基中用于分離細(xì)胞的。 1．融合的原理與過程 (1)原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性。 (2)過程：動(dòng)物細(xì)胞融合的過程包括細(xì)胞膜融合、細(xì)胞質(zhì)融合和細(xì)胞核融合。其中細(xì)胞膜融合是細(xì)胞融合的先導(dǎo)，在細(xì)胞膜融合中體現(xiàn)出細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性，細(xì)胞融合的實(shí)質(zhì)是核融合。動(dòng)物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞核融合為一個(gè)細(xì)胞核。如下圖(以滅活的病毒誘導(dǎo)為例)： 2．融合的結(jié)果 形成單核雜交細(xì)胞，具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的遺傳信息，可表現(xiàn)出兩個(gè)或多個(gè)親本的特點(diǎn)。 3．植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較 比較項(xiàng)目 植物體細(xì)胞雜交 動(dòng)物細(xì)胞融合 原理 細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性 細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的增殖 融合前處理 先除去細(xì)胞壁 先使細(xì)胞分散開 使用的酶 纖維素酶和果膠酶 胰蛋白酶或膠原蛋白酶 誘導(dǎo)手段 物理法：離心、電激、振動(dòng) 化學(xué)法：聚乙二醇等試劑誘導(dǎo) 除物理法和化學(xué)法外，也可用滅活的病毒誘導(dǎo) 過程 結(jié)果 雜種植株 雜交細(xì)胞 應(yīng)用 培育植物新品種 主要用于制備單克隆抗體 意義 克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，打破了生殖隔離，擴(kuò)展了雜交的親本組合 [題組沖關(guān)] 1．關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合的說法，錯(cuò)誤的是(　　) A．動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程 B．動(dòng)物細(xì)胞融合后形成的具有原來兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞 C．常用的誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的因素有：聚乙二醇、滅活的病毒、電激、紫外線照射 D．細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能 解析：選C　動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等，紫外線照射不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。 2．下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的說法，正確的是(　　) A．基本原理相同 B．誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法相同 C．細(xì)胞融合前的處理過程相同 D．融合后都需要進(jìn)行篩選 解析：選D　植物體細(xì)胞雜交的原理為細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞的全能性，而動(dòng)物細(xì)胞融合利用的是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞增殖；動(dòng)物細(xì)胞融合常用滅活的病毒誘導(dǎo)，而植物體細(xì)胞雜交不能；動(dòng)物細(xì)胞融合前需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散開，植物體細(xì)胞雜交常用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁；誘導(dǎo)融合后會(huì)形成多種融合細(xì)胞，還有未融合細(xì)胞，因此要進(jìn)行篩選。 1．血清抗體與單克隆抗體的比較 名稱 產(chǎn)生 特點(diǎn) 血清抗體 由B淋巴(漿) 細(xì)胞分泌 一般從血清中分離，產(chǎn)量低、純度低、特異性差 單克隆抗體 由雜交瘤細(xì)胞分泌 特異性強(qiáng)、靈敏度高，能大量制備 2．制備過程 3．制備單克隆抗體過程中的兩次篩選 項(xiàng)目 第一次篩選 第二次篩選 篩選 原因 誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞，另外還有未融合的細(xì)胞 從小鼠體內(nèi)提取的B淋巴細(xì)胞有很多種，形成的雜交瘤細(xì)胞也有很多種 篩選 方法 用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng) 用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群 篩選 目的 得到雜交瘤細(xì)胞 得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞 4.單克隆抗體制備過程的關(guān)鍵分析 (1)對(duì)動(dòng)物免疫的原因：B淋巴細(xì)胞要經(jīng)過免疫過程，即接觸抗原，增殖分化為有特異性免疫功能的B淋巴細(xì)胞，才能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，所以，與骨髓瘤細(xì)胞融合的B淋巴細(xì)胞實(shí)際上是漿細(xì)胞。 (2)雜交瘤細(xì)胞具備雙親的遺傳物質(zhì)，不僅具有漿細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體的能力，還具有骨髓瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下大量增殖的能力，從而可以克服單純B淋巴細(xì)胞不能無限增殖的缺點(diǎn)，而大量生產(chǎn)單克隆抗體。 [題組沖關(guān)] 3．用動(dòng)物細(xì)胞工程獲得單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟錯(cuò)誤的是(　　) A．將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞 B．用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞 C．用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與能在體外大量增殖的小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合 D．篩選雜交瘤細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體 解析：選B　用纖維素酶處理植物細(xì)胞，可去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，而動(dòng)物細(xì)胞無細(xì)胞壁，所以用不到纖維素酶。 4．下面為制備單克隆抗體和多克隆抗體的示意圖，據(jù)圖回答下列問題： (1)圖中向小鼠注射包含多種抗原決定簇的抗原后，所獲得的免疫抗血清實(shí)際上是含有____________________________(填寫抗體的名稱)的混合物，這種方法制備的多克隆抗體不僅產(chǎn)量低，而且純度低。與多克隆抗體相比，單克隆抗體突出的優(yōu)點(diǎn)在于它的__________________，并能大量制備。 (2)圖中選用B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，說明細(xì)胞膜具有____________；如果僅考慮細(xì)胞的兩兩融合，其融合細(xì)胞有________種類型。 (3)圖中兩次篩選的目的不同，其中篩選①的目的是篩選出________________，篩選②的目的是篩選出____________________________。篩選時(shí)所用的培養(yǎng)基是特定的____________培養(yǎng)基。 (4)科學(xué)工作者正在研究的用于治療癌癥的“生物導(dǎo)彈”就是____________________________，用“生物導(dǎo)彈”治療癌癥的方法優(yōu)于化療的原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (5)由圖中可看出，單克隆抗體的制備過程中，運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞工程中的________________和________________兩大技術(shù)。 解析：(1)結(jié)合題圖可看出，向小鼠注射包含多種抗原決定簇的抗原后，獲得的免疫抗血清實(shí)際上是含有Ab1、Ab2、Ab3、Ab4多種抗體的混合物。(2)動(dòng)物細(xì)胞融合的過程體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動(dòng)性；僅考慮兩個(gè)細(xì)胞的融合，可得到B細(xì)胞＋B細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞＋骨髓瘤細(xì)胞及B細(xì)胞＋骨髓瘤細(xì)胞3種類型的融合細(xì)胞。(3)在單克隆抗體的制備過程中，第1次篩選的目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞，第2次篩選的目的是獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。篩選時(shí)所用的培養(yǎng)基是特定的選擇性培養(yǎng)基。(4)把單克隆抗體與抗癌藥物相結(jié)合制成“生物導(dǎo)彈”，注入體內(nèi)，借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用，能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在位置，在原位殺死癌細(xì)胞。這樣既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量。(5)單克隆抗體的制備運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞融合與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)兩大技術(shù)。 答案：(1)Ab1、Ab2、Ab3、Ab4　特異性強(qiáng)、靈敏度高　(2)流動(dòng)性　3　(3)雜交瘤細(xì)胞　能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞　選擇性　(4)單克隆抗體上連接抗癌藥物　不損傷正常細(xì)胞，且用藥劑量少，毒副作用小　(5)動(dòng)物細(xì)胞融合　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) [隨堂基礎(chǔ)鞏固]　 1．下列不屬于細(xì)胞融合技術(shù)應(yīng)用的是(　　) A．細(xì)胞遺傳與細(xì)胞免疫的研究 B．生物新品種的培育 C．單克隆抗體的制備 D．瀕危動(dòng)物的克隆 解析：選D　克隆瀕危動(dòng)物是體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用，不屬于細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用。 2．在單克隆抗體制備過程中，對(duì)骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活、增殖的細(xì)胞是(　　) ①B淋巴細(xì)胞?、诠撬枇黾?xì)胞　③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞　④骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞?、蓦s交瘤細(xì)胞 A．①②③④　　　　　　　　　B．①③⑤ C．②④ D．①③ 解析：選A　在題中所述特定的選擇培養(yǎng)基上，能夠存活、增殖的細(xì)胞只有雜交瘤細(xì)胞。 3．將小鼠骨髓瘤細(xì)胞與一種B淋巴細(xì)胞融合，可使融合的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生大量單克隆抗體，其依據(jù)是(　　) A．骨髓瘤細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖 B．B淋巴細(xì)胞只有與骨髓瘤細(xì)胞融合才能產(chǎn)生抗體 C．骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖，且能產(chǎn)生抗體 D．B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖，骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖 解析：選D　融合的雜交瘤細(xì)胞既具有B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體的特點(diǎn)，又具有骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖的特點(diǎn)。 4．獲得大量單克隆抗體必須用單個(gè)的B細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖，形成細(xì)胞群。其原因是(　　) A．在體外培養(yǎng)條件下B淋巴細(xì)胞可以無限增殖 B．每一個(gè)B淋巴細(xì)胞都參與特異性免疫反應(yīng) C．單個(gè)的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的能力強(qiáng) D．在動(dòng)物體內(nèi)B淋巴細(xì)胞可產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的抗體，而每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體 解析：選D　在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的特異性抗體，但是每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。因此，要想獲得大量的單一抗體，必須用單個(gè)的B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖，也就是通過克隆形成細(xì)胞群，這樣的細(xì)胞群就有可能產(chǎn)生出化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體——單克隆抗體。 5．利用單克隆抗體研制而成的“生物導(dǎo)彈”由兩部分組成，一是“瞄準(zhǔn)裝置”，二是殺傷性“彈頭”。下列對(duì)此描述錯(cuò)誤的是(　　) A．“瞄準(zhǔn)裝置”是由識(shí)別腫瘤的單克隆抗體構(gòu)成 B．“彈頭”是由放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素等物質(zhì)構(gòu)成 C．“彈頭”中的藥物有選擇殺傷腫瘤細(xì)胞的功能 D．“生物導(dǎo)彈”是利用細(xì)胞工程制備出來的 解析：選C　“彈頭”中的藥物既能殺傷腫瘤細(xì)胞，也能殺死正常細(xì)胞，不具有選擇性?！吧飳?dǎo)彈”中的“瞄準(zhǔn)裝置”是由專一識(shí)別特定腫瘤細(xì)胞的單克隆抗體構(gòu)成；“彈頭”是由殺死腫瘤細(xì)胞的放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素等物質(zhì)構(gòu)成；“生物導(dǎo)彈”是利用動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等細(xì)胞工程技術(shù)制備出來的。 6．甘草酸是中藥甘草中的主要活性成分。為了快速檢測(cè)甘草酸，科研人員利用細(xì)胞工程技術(shù)制備了抗甘草酸的單克隆抗體，其基本操作過程如圖所示。相關(guān)敘述正確的是(　　) A．過程①注射相應(yīng)抗原后應(yīng)立即從小鼠脾臟中提取細(xì)胞甲 B．過程②誘導(dǎo)細(xì)胞融合，利用了細(xì)胞膜的選擇透過性 C．過程③、④的篩選方法相同，細(xì)胞丙、丁的遺傳物質(zhì)相同 D．過程⑤無論在體內(nèi)還是體外進(jìn)行，細(xì)胞丁都可大量增殖 解析：選D　過程①注射相應(yīng)抗原后應(yīng)經(jīng)過一段時(shí)間，使小鼠產(chǎn)生漿細(xì)胞，再?gòu)男∈笃⑴K中提取細(xì)胞甲；過程②誘導(dǎo)細(xì)胞融合利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性；過程③篩選雜交瘤細(xì)胞，過程④篩選能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，二者的方法不同；過程⑤無論在體內(nèi)還是在體外進(jìn)行，細(xì)胞丁都可大量增殖。 7．如圖表示單克隆抗體的制備過程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題： (1)據(jù)圖可知，__________________技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)，而____________技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。 (2)圖中過程①常用的誘導(dǎo)因素是________，過程②常在________培養(yǎng)基中完成。 (3)A細(xì)胞為________細(xì)胞，其特點(diǎn)是________________________________________。 (4)合成的單克隆抗體最終可以從________和________中提取。 解析：(1)動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。(2)過程①中誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法很多，常用的主要有生物法，如用滅活的病毒，化學(xué)法，如用聚乙二醇(PEG)和物理法，如電激等。過程②是單克隆抗體技術(shù)的篩選過程，是在特定的選擇性培養(yǎng)基上進(jìn)行的。(3)A細(xì)胞為雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞具有既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一抗體的特點(diǎn)。(4)雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)一般有體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)兩種方式，體外培養(yǎng)是在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)后從培養(yǎng)液中提取單克隆抗體；體內(nèi)培養(yǎng)是在小鼠腹腔中培養(yǎng)，培養(yǎng)后從小鼠腹水中提取單克隆抗體。 答案：(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)　細(xì)胞融合　(2)滅活的病毒(或聚乙二醇)　選擇性　(3)雜交瘤　既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一抗體　(4)培養(yǎng)液　小鼠腹水 [課時(shí)跟蹤檢測(cè)]　 一、選擇題 1．生產(chǎn)單克隆抗體時(shí)，在培養(yǎng)液中加入某種試劑能篩選出雜交瘤細(xì)胞，因?yàn)樵撛噭?　　) A．能抑制淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞的DNA復(fù)制 B．能阻止淋巴細(xì)胞的原癌基因被激活 C．選擇性抑制骨髓瘤細(xì)胞的DNA復(fù)制 D．能阻止雜交瘤細(xì)胞核糖體上所有蛋白質(zhì)的合成 解析：選C　因?yàn)橐Y選出雜交瘤細(xì)胞，而雜交瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞在適宜條件下都能進(jìn)行增殖，故必須用一種試劑來抑制骨髓瘤細(xì)胞的DNA復(fù)制，才能避免骨髓瘤細(xì)胞的干擾。 2．下列是應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟，選項(xiàng)中對(duì)單克隆抗體制備的相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　) ①將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細(xì)胞?、趶幕脊撬枇龅男∈篌w內(nèi)獲取骨髓瘤細(xì)胞 ③利用促細(xì)胞融合因子使兩種細(xì)胞發(fā)生融合　④將雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔培養(yǎng)?、莺Y選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細(xì)胞?、迯母顾刑崛】贵w A．實(shí)驗(yàn)順序應(yīng)當(dāng)是①②③⑤④⑥ B．④過程中產(chǎn)生的多個(gè)雜交瘤細(xì)胞也稱為克隆 C．③過程獲得的細(xì)胞均可無限增殖 D．③到⑤的過程中通常要經(jīng)過兩次篩選 解析：選C　克隆是一種無性生殖，④過程中，雜交瘤細(xì)胞在小鼠腹腔培養(yǎng)產(chǎn)生的多個(gè)雜交瘤細(xì)胞是細(xì)胞的增殖，也屬于克?。虎圻^程是細(xì)胞融合過程，會(huì)得到多種融合細(xì)胞，只有雜交瘤細(xì)胞能夠無限增殖；③～⑤要經(jīng)過兩次篩選才能獲得無限增殖以及能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。 3．下列有關(guān)制備單克隆抗體的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．采用的細(xì)胞工程技術(shù)包括細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞融合 B．兩次篩選的目的分別是篩選出雜交瘤細(xì)胞和篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞 C．要先用胃蛋白酶處理得到單個(gè)細(xì)胞，然后用誘導(dǎo)劑處理得到雜交瘤細(xì)胞 D．運(yùn)用的生物學(xué)原理包括細(xì)胞分裂和細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性 解析：選C　單克隆抗體的制備采用了動(dòng)物細(xì)胞融合和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)；第一次篩選是篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選是篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；用胰蛋白酶處理得到單個(gè)細(xì)胞；制備過程中依據(jù)的原理有細(xì)胞分裂和細(xì)胞膜的流動(dòng)性。 4．關(guān)于單克隆抗體的生產(chǎn)和應(yīng)用，錯(cuò)誤的是(　　) A．對(duì)小動(dòng)物注射特定抗原以獲取所需的B淋巴細(xì)胞 B．單克隆抗體比血清抗體的制備過程簡(jiǎn)單，操作方便 C．特定的單克隆抗體可制成試劑，用于檢測(cè)人體是否受某種抗原的感染 D．治療癌癥的“生物導(dǎo)彈”原理之一是利用單克隆抗體的特異性識(shí)別癌細(xì)胞 解析：選B　單克隆抗體的制備是用骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞融合后得到雜交瘤細(xì)胞；單克隆抗體的制備過程比普通抗體的制備過程復(fù)雜得多；單克隆抗體最廣泛的應(yīng)用是作為診斷試劑；如果把抗癌細(xì)胞的單克隆抗體與放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素相結(jié)合，制成“生物導(dǎo)彈”注入體內(nèi)，可借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用，將藥物帶到癌細(xì)胞所在位置，殺死癌細(xì)胞。 5．下列有關(guān)動(dòng)植物細(xì)胞工程的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．動(dòng)物細(xì)胞融合過程中，常用的誘導(dǎo)因素有滅活的病毒、PEG等 B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理組織塊 C．植物組織培養(yǎng)過程中，需要用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁 D．植物體細(xì)胞雜交過程中，需要用不同濃度的細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素培養(yǎng)雜種細(xì)胞 解析：選C　植物組織培養(yǎng)時(shí)不需要去掉細(xì)胞壁，植物體細(xì)胞雜交才需要先去掉細(xì)胞壁。 6．將抗癌藥物與能特異性識(shí)別癌細(xì)胞的單克隆抗體相結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”，能夠用于殺死人類的某些癌細(xì)胞，其過程如下圖所示。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　) A．①過程的原理和植物原生質(zhì)體融合原理基本相同 B．經(jīng)①形成的雜交瘤細(xì)胞都能無限增殖并產(chǎn)生單一抗體 C．②過程需要篩選并克隆單個(gè)雜交瘤細(xì)胞 D．抗體的靶向作用使③過程具有高度特異性 解析：選B?、龠^程細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合原理均是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性；經(jīng)①過程形成的雜交瘤細(xì)胞需要篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，篩選的雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖又能產(chǎn)生抗體；②過程需要篩選產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，并對(duì)該細(xì)胞進(jìn)行單克隆培養(yǎng)；單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、產(chǎn)量高、純度高的特點(diǎn)，根據(jù)其特異性識(shí)別癌細(xì)胞的特點(diǎn)，將藥物定向運(yùn)到癌細(xì)胞，抑制癌細(xì)胞增殖。 7．下列方案中不能制備出抗H1N1流感病毒單克隆抗體的是(　　) A．將H1N1流感病毒抗原的基因?qū)牍撬枇黾?xì)胞，并使該基因表達(dá) B．將抗H1N1流感病毒抗體的基因?qū)牍撬枇黾?xì)胞，并使該基因表達(dá) C．將產(chǎn)生抗H1N1流感病毒抗體的效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出雜交瘤細(xì)胞并進(jìn)行體外大規(guī)模培養(yǎng) D．將骨髓瘤細(xì)胞中的癌基因?qū)肽墚a(chǎn)生抗H1N1流感病毒抗體的效應(yīng)B細(xì)胞中，并使癌基因表達(dá) 解析：選A　H1N1流感病毒的遺傳物質(zhì)是RNA，該病毒抗原的基因無法導(dǎo)入骨髓瘤細(xì)胞中，因?yàn)镽NA片段不能和DNA連接。 8．下圖表示植物體細(xì)胞雜交或動(dòng)物細(xì)胞融合的簡(jiǎn)略過程。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　) A．在將A和B兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交前，必須先利用酶解法去除細(xì)胞的有關(guān)結(jié)構(gòu) B．若該過程是制備人抗某病毒的單克隆抗體的過程， 則在培養(yǎng)D細(xì)胞的培養(yǎng)液中通常要加入一定量的抗生素、血清等物質(zhì) C．與傳統(tǒng)的有性雜交相比，細(xì)胞融合技術(shù)的優(yōu)越性在于能定向地改造生物的性狀 D．滅活的病毒能誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合，而不能誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體的融合 解析：選C　兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交前，必須先利用酶解法去除細(xì)胞壁，以制備原生質(zhì)體；在制備人抗某病毒的單克隆抗體的過程中，需在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素、血清等物質(zhì)；與傳統(tǒng)的有性雜交相比，細(xì)胞融合技術(shù)的優(yōu)越性在于可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，但不能定向地改造生物的性狀；用滅活的病毒作誘導(dǎo)因素是動(dòng)物細(xì)胞融合特有的人工誘導(dǎo)方法。 9．如圖是單克隆抗體制備過程示意圖，其中1過程注射的物質(zhì)和甲細(xì)胞的名稱分別為(　　) A．抗體、T淋巴細(xì)胞 B．抗原、T淋巴細(xì)胞 C．抗體、B淋巴細(xì)胞 D．抗原、B淋巴細(xì)胞 解析：選D　①過程注射的是抗原，使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)。甲細(xì)胞是B淋巴細(xì)胞。 10．如圖是制備抗體的兩個(gè)途徑的模式圖，下列敘述正確的是(　　) A．圖中獲得的抗體1和抗體2結(jié)構(gòu)完全相同 B．抗體1和抗體2的制備過程均涉及細(xì)胞篩選 C．②過程所需的氣體O2的作用是維持培養(yǎng)液的pH D．①和④過程的原理分別是細(xì)胞增殖和堿基互補(bǔ)配對(duì)原則 解析：選B　大腸桿菌沒有膜結(jié)構(gòu)細(xì)胞器，不能對(duì)合成的抗體進(jìn)行進(jìn)一步加工，圖中獲得的抗體1和抗體2結(jié)構(gòu)不完全相同；抗體1和抗體2的制備過程均涉及細(xì)胞篩選；②動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的氣體CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH；①過程的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性，④過程的原理是堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。 二、非選擇題 11．利用B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備出單克隆抗體的流程如下圖所示。請(qǐng)據(jù)圖回答問題： (1)通過過程①得到的B淋巴細(xì)胞在從小鼠體內(nèi)分離出之前，需對(duì)小鼠____________________。 (2)過程②誘導(dǎo)融合運(yùn)用的原理是________________，該過程中區(qū)別于原生質(zhì)體融合的方法是用________處理。 (3)過程③至少需要通過兩次篩選和克隆培養(yǎng)，其中第一次篩選的目的是獲得______________。圖中X細(xì)胞具有________________________________的特點(diǎn)。單克隆抗體的特點(diǎn)是________________________________________________。 (4)經(jīng)過篩選和克隆化培養(yǎng)得到雜交瘤細(xì)胞后，一般采用體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)兩種方式進(jìn)行培養(yǎng)，動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)對(duì)環(huán)境條件的要求比較高，如培養(yǎng)液需適宜的溫度、________________________等。(答出兩項(xiàng)即可) (5)由上述過程生產(chǎn)出的單克隆抗體不能直接用于人體，理由是________________________________________________________________________。 解析：誘導(dǎo)融合運(yùn)用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性原理，該過程中區(qū)別于原生質(zhì)體融合的方法是用滅活病毒處理。雜交瘤細(xì)胞具有骨髓瘤細(xì)胞和漿細(xì)胞的特點(diǎn)，即既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可能大量制備的特點(diǎn)。因?yàn)樾∈笮纬傻目贵w對(duì)人體來說是抗原，人體會(huì)發(fā)生排異反應(yīng)，故由該過程生產(chǎn)出的單克隆抗體不能直接用于人體。 答案：(1)注射特異性抗原　(2)細(xì)胞膜具有流動(dòng)性　滅活病毒　(3)雜交瘤細(xì)胞　既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無限增殖　特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可能大量制備 (4)pH、動(dòng)物血漿、氣體環(huán)境、無菌、無毒的環(huán)境(答出兩項(xiàng)即可)　(5)小鼠形成的抗體對(duì)人體來說是抗原，存在著排異反應(yīng) 12．(全國(guó)卷Ⅰ)某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果如下圖所示。 若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條)，并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目60條)按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞?；卮鹣铝袉栴}： (1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16 000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過________次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是________小鼠，理由是________________________________________________________________________。 (2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有________________________________________________________，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是__________________________________________________________。 (3)雜交瘤細(xì)胞中有________個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是________條。 (4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是________________________________________________________________________。 解析：(1)由圖可知，小鼠至少經(jīng)過4次免疫后，免疫小鼠的血清抗體效價(jià)可達(dá)到16 000以上，其中Y小鼠的血清抗體效價(jià)最高。(2)由于細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且并不是所有細(xì)胞都能參與融合，融合體系中含有五種細(xì)胞：未融合的B淋巴細(xì)胞、未融合的骨髓瘤細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞。(3)兩個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核融合成一個(gè)細(xì)胞核標(biāo)志著融合的完成，雜交瘤細(xì)胞中有一個(gè)細(xì)胞核；細(xì)胞融合過程中染色體會(huì)發(fā)生丟失，所以染色體數(shù)量最多為兩者之和，即100條。(4)未融合的B淋巴細(xì)胞不能無限增殖，經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活。 答案：(1)4　Y　Y小鼠的血清抗體效價(jià)最高　(2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞　細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%　(3)1　100　(4)經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞不能無限增殖 13.埃博拉出血熱是一種由埃博拉病毒引起的急性傳染病，建立良好特異性的檢測(cè)方法非常重要。埃博拉病毒核蛋白NP具有很強(qiáng)的抗原性，是診斷研究的重要靶點(diǎn)。 (1)鼠源抗NP蛋白的單克隆抗體，由鼠雜交瘤細(xì)胞分泌，抗體結(jié)構(gòu)如圖1所示，抗體通過可變區(qū)與抗原特異性結(jié)合。從鼠雜交瘤細(xì)胞中提取________，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA，利用________技術(shù)擴(kuò)增鼠源抗體可變區(qū)對(duì)應(yīng)的DNA片段。使用____________________將________源抗體可變區(qū)對(duì)應(yīng)的DNA片段與能表達(dá)____________源抗體恒定區(qū)部分的載體重組，導(dǎo)入人胚腎上皮細(xì)胞，從細(xì)胞培養(yǎng)液中獲取人－鼠嵌合抗體。臨床使用人－鼠嵌合抗體的優(yōu)點(diǎn)是________________________。 (2)提取埃博拉病毒的蛋白質(zhì)進(jìn)行電泳，并運(yùn)用抗原－抗體雜交，檢測(cè)人－鼠嵌合抗體的特異性。實(shí)驗(yàn)主要步驟如圖2所示，其中一抗能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合，二抗能與相應(yīng)一抗特異性結(jié)合。 組別 一抗來源 二抗來源 結(jié)果 ① 人－鼠嵌合抗體 AP標(biāo)記的抗人抗體 Ⅰ ② 鼠雜交瘤細(xì)胞 上清液 AP標(biāo)記的抗鼠抗體 Ⅱ ③ 普通人胚腎上皮 細(xì)胞培養(yǎng)液 AP標(biāo)記的抗人抗體 Ⅲ 實(shí)驗(yàn)記錄如上表，AP標(biāo)記的抗人抗體能與嵌合抗體中的人源恒定區(qū)結(jié)合，AP標(biāo)記的抗鼠抗體能與鼠源抗體結(jié)合。若表中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ依次對(duì)應(yīng)圖2結(jié)果分析中的________、________、________(一種方案即可)，則表明該人－鼠嵌合抗體能用于埃博拉出血熱的應(yīng)急血清學(xué)檢測(cè)。 解析：(1)基因工程操作中，從鼠雜交瘤細(xì)胞中提取相應(yīng)的RNA，通過逆轉(zhuǎn)錄可產(chǎn)生cDNA。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增鼠源抗體可變區(qū)對(duì)應(yīng)的DNA片段。使用限制酶和DNA連接酶可將鼠源抗體可變區(qū)對(duì)應(yīng)的DNA片段與能表達(dá)人源抗體恒定區(qū)部分的載體重組，導(dǎo)入人胚腎上皮細(xì)胞，從細(xì)胞培養(yǎng)液中獲取人－鼠嵌合抗體。臨床使用人－鼠嵌合抗體的優(yōu)點(diǎn)是降低免疫排斥反應(yīng)。(2)由實(shí)驗(yàn)表格記錄可知，AP標(biāo)記的抗人抗體能與嵌合抗體中的人源恒定區(qū)結(jié)合，AP標(biāo)記的抗鼠抗體能與鼠源抗體結(jié)合。若表中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ依次對(duì)應(yīng)結(jié)果分析中的A、B、C，則表明該人－鼠嵌合抗體能用于埃博拉出血熱的應(yīng)急血清學(xué)檢測(cè)。 答案：(1)RNA　PCR　限制酶和DNA連接酶(答不全不得分)　鼠　人　降低免疫排斥反應(yīng)　(2)方案一：A　B　C(或方案二：B　A　C) (時(shí)間：45分鐘　滿分：50分)　　　　　　　　　　　 一、選擇題(每小題2分，共24分) 1．植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞工程中所用的技術(shù)或方法與原理不相符的是(　　) A．植物組織培養(yǎng)和單克隆抗體——細(xì)胞的全能性 B．纖維素酶、果膠酶處理植物細(xì)胞壁——酶的專一性 C．原生質(zhì)體融合和動(dòng)物細(xì)胞融合——細(xì)胞膜的流動(dòng)性 D．紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)——細(xì)胞增殖 解析：選A　植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性，單克隆抗體制備的原理是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性和細(xì)胞增殖；植物細(xì)胞壁的成分包括纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性可利用相關(guān)酶分解細(xì)胞壁；原生質(zhì)體融合和動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性；紫草細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理都是細(xì)胞的增殖。 2．關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì) B．體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體 C．植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于植物莖尖脫毒 D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培育 解析：選B　克隆動(dòng)物用到的生物技術(shù)有細(xì)胞核移植和胚胎移植等，無體細(xì)胞雜交技術(shù)。 3．下列有關(guān)植物體細(xì)胞雜交的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．用酶解法去掉細(xì)胞壁，分離出有活力的原生質(zhì)體 B．再生出細(xì)胞壁是原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志 C．植物體細(xì)胞雜交的最終目的是獲得細(xì)胞代謝產(chǎn)物 D．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以克服不同物種間遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 解析：選C　去除植物細(xì)胞壁可以用纖維素酶和果膠酶；原生質(zhì)體融合后形成新的細(xì)胞壁標(biāo)志著雜種細(xì)胞的形成；植物體細(xì)胞雜交的目的是獲得雜種植株；植物體細(xì)胞雜交不是有性生殖過程，因此可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。 4．下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．用于培養(yǎng)的細(xì)胞多取自動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物 B．培養(yǎng)過程中需要使用胰蛋白酶等獲得細(xì)胞懸液 C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)要保證氧氣供應(yīng)，不能通入二氧化碳 D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，并要加入血清 解析：選C　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要一定的氣體環(huán)境，所需要的氣體主要有氧氣和二氧化碳。氧氣是細(xì)胞代謝所必需的，二氧化碳的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。 5．下列有關(guān)單克隆抗體制備及其應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．制備單克隆抗體運(yùn)用的技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) B．需要用選擇培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞 C．需要從雜交瘤細(xì)胞中篩選出能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞 D．利用“生物導(dǎo)彈”治療癌癥就是利用了單克隆抗體清除癌細(xì)胞 解析：選D　“生物導(dǎo)彈”由單克隆抗體與藥物、毒素或放射性同位素組合而成，因帶有單克隆抗體而能自動(dòng)導(dǎo)向，在生物體內(nèi)與特定目標(biāo)細(xì)胞或組織結(jié)合，由其攜帶的藥物產(chǎn)生治療作用。 6．在細(xì)胞工程中，選擇合適的生物材料是成功的關(guān)鍵。下列選擇不合理的是(　　) A．選擇高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)有利于獲得大量細(xì)胞 B．選擇胚胎細(xì)胞作為核供體進(jìn)行核移植可提高克隆動(dòng)物的成功率 C．選擇一定大小的植物莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)可獲得脫毒苗 D．選擇植物的愈傷組織進(jìn)行誘變處理可能獲得優(yōu)質(zhì)的突變體 解析：選A　高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞分裂能力較弱，對(duì)其進(jìn)行培養(yǎng)不利于獲得大量細(xì)胞。 7．(北京高考)在應(yīng)用農(nóng)桿菌侵染植物葉片獲得轉(zhuǎn)基因植株的常規(guī)實(shí)驗(yàn)步驟中，不需要的是(　　) A．用攜帶目的基因的農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞 B．用選擇培養(yǎng)基篩選導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞 C．用聚乙二醇誘導(dǎo)轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的原生質(zhì)體融合 D．用適當(dāng)比例的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素誘導(dǎo)愈傷組織生芽 解析：選C　將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。需用選擇培養(yǎng)基篩選含目的基因的細(xì)胞。用聚乙二醇誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合是細(xì)胞融合技術(shù)的必要手段，但不是基因工程的常規(guī)步驟。獲得導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞后，需要經(jīng)植物組織培養(yǎng)才能發(fā)育成植株，植物組織培養(yǎng)過程中需要用適當(dāng)比例的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素誘導(dǎo)愈傷組織分化生成根和芽，屬于必需步驟。 8．(江蘇高考)下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述，正確的是(　　) A．PEG是促細(xì)胞融合劑，可直接誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合 B．用原生質(zhì)體制備人工種子，要防止細(xì)胞破裂 C．骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理，可直接獲得單克隆抗體 D．核移植克隆的動(dòng)物，其線粒體DNA來自供卵母體 解析：選D　PEG是促細(xì)胞融合劑，但植物細(xì)胞不能直接融合，需先去壁形成原生質(zhì)體才能融合；制備人工種子應(yīng)用完整的植物細(xì)胞，不能用原生質(zhì)體；骨髓瘤細(xì)胞不能產(chǎn)生抗體；核移植克隆的動(dòng)物，線粒體DNA來自供卵母體。 9．下圖為將胡蘿卜的離體組織在一定條件下培育形成試管苗的過程示意圖。有關(guān)敘述正確的是(　　) A．利用此過程獲得的試管苗可能為雜合子 B．①②過程所需的培養(yǎng)基成分相同 C．多倍體植株的培育需經(jīng)過如圖所示過程 D．此過程依據(jù)的生物學(xué)原理是細(xì)胞膜具有流動(dòng)性 解析：選A　植物的組織培養(yǎng)過程是無性繁殖的過程，如果離體的組織來自純合子，將來得到的試管苗是純合子，如果離體的組織來自雜合子，將來得到的試管苗是雜合子；①為脫分化，②為再分化，所需培養(yǎng)基成分不同；用秋水仙素處理萌發(fā)的種子和幼苗就可獲得多倍體植株，不需組織培養(yǎng)過程；植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性而不是細(xì)胞膜的流動(dòng)性。 10．利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)將白菜和甘藍(lán)(均為二倍體)培育成“白菜—甘藍(lán)”雜種植株(如下圖所示)。下列說法正確的是(　　) A．圖示“白菜—甘藍(lán)”植株不能結(jié)子 B．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的目的是獲得雜種細(xì)胞 C．上述過程中包含著有絲分裂、細(xì)胞分化和減數(shù)分裂等過程 D．“白菜—甘藍(lán)”雜種植株所具有的性狀是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果 解析：選D　“白菜—甘藍(lán)”屬于異源四倍體，有同源染色體，是可育的，能結(jié)子；植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的目的是獲得雜種植株；上述過程包括去壁、原生質(zhì)體融合、植物組織培養(yǎng)等過程，其結(jié)果是形成“白菜—甘藍(lán)”幼苗，并未發(fā)育到性成熟個(gè)體，因此整個(gè)過程中沒有減數(shù)分裂過程；任何性狀都是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果。 11．下圖所示為培育農(nóng)作物新品種的一種方式。相關(guān)說法正確的是(　　) A．②③過程分別稱為細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化 B．該育種與傳統(tǒng)雜交育種相比，最大的優(yōu)點(diǎn)是繁殖速度快 C．該育種過程說明已分化細(xì)胞中不表達(dá)的基因仍具有表達(dá)的潛能 D．該育種方式只涉及細(xì)胞工程 解析：選C?、冖圻^程分別是脫分化和再分化；該育種方式最大優(yōu)點(diǎn)是能定向改變生物的遺傳特性；該育種方式涉及的生物技術(shù)有基因工程和植物細(xì)胞工程。 12．對(duì)于下面制備單克隆抗體的過程示意圖，敘述錯(cuò)誤的是(　　) A．①表示B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均是從小鼠的脾臟中提取的 B．④中的篩選是通過抗原—抗體反應(yīng)進(jìn)行的 C．②促進(jìn)細(xì)胞融合時(shí)可用聚乙二醇來誘導(dǎo) D．⑤是可以無限增殖的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞群 解析：選A　單克隆抗體是B淋巴細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合得到的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的，細(xì)胞融合時(shí)，使用的化學(xué)方法是用聚乙二醇誘導(dǎo)；④中的篩選是通過抗原—抗體反應(yīng)進(jìn)行的，如果有反應(yīng)說明表達(dá)了抗體；融合細(xì)胞具有雙親的特點(diǎn)，既能無限增殖又能產(chǎn)生單一抗體；B淋巴細(xì)胞也可以從血液中提取，骨髓瘤細(xì)胞不是從脾臟中提取的。 二、非選擇題(除注明外，每空1分，共26分) 13．(9分)細(xì)胞融合技術(shù)有著廣泛的應(yīng)用，其中植物體細(xì)胞雜交要進(jìn)行原生質(zhì)體的融合，單克隆抗體的制備需進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞融合。下圖表示細(xì)胞融合的簡(jiǎn)略過程，請(qǐng)據(jù)圖回答問題： (1)若a、b分別表示白菜和甘藍(lán)兩種植物細(xì)胞的原生質(zhì)體，則采用化學(xué)法形成c時(shí)，一般是用____________作為誘導(dǎo)劑。由d形成雜交植株的過程所依據(jù)的原理是________________________。 (2)對(duì)于a、b所在的動(dòng)物組織，通常用____________________處理獲得分散的單個(gè)細(xì)胞a、b。目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常在10代以內(nèi)，以保持細(xì)胞正常的________________。動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是____________________。 (3)若a、b分別為骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞，假設(shè)僅考慮某兩個(gè)細(xì)胞的融合，則可形成________種類型的細(xì)胞d，因此需用特定的____________培養(yǎng)基篩選出____________細(xì)胞用于培養(yǎng)。 解析：(1)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合時(shí)可采用化學(xué)法和物理法，采用化學(xué)法誘導(dǎo)時(shí)，一般是用聚乙二醇(PEG)作為誘導(dǎo)劑。由d形成雜交植株的過程所依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理組織獲得分散的單個(gè)細(xì)胞。10代以內(nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型，因此目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常在10代以內(nèi)，動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性。(3)若a、b分別為骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞，假設(shè)僅考慮某兩個(gè)細(xì)胞的融合，則可形成三種類型的細(xì)胞d，即骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞。因此需用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞用于培養(yǎng)。 答案：(1)聚乙二醇(或PEG)　植物細(xì)胞的全能性 (2)胰蛋白酶或膠原蛋白酶　二倍體核型　細(xì)胞膜的流動(dòng)性(2分)　(3)三　選擇　雜交瘤 14．(10分)早早孕試紙是人們?cè)O(shè)計(jì)出來的一種方便女性檢測(cè)自己是否懷孕的產(chǎn)品。人絨毛膜促性腺激素(HCG)是由受孕婦女體內(nèi)胎盤產(chǎn)生的一種糖蛋白類激素，在孕婦的尿液中大量存在，而非妊娠孕婦尿液中幾乎不含有該激素。膠體金法早早孕檢測(cè)試紙采用雙抗體夾心法原理，以膠體金為指示標(biāo)記制作而成。其測(cè)定和判斷方法如圖： 注：MAX線處含有鼠源性HCG單克隆抗體和膠體金，T線處含羊抗HCG的抗體，C線處含有羊抗鼠多克隆抗體。 (1)HCG在胎盤細(xì)胞的____________上合成，然后在____________上進(jìn)一步合成加工，最后經(jīng)____________進(jìn)一步的修飾加工然后分泌到細(xì)胞外。 (2)MAX線處包埋的是鼠源性HCG單克隆抗體，它是由____________細(xì)胞產(chǎn)生的，由于單克隆抗體具有____________、____________的特點(diǎn)，所以能準(zhǔn)確地識(shí)別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異，并與一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合。 (3)制備鼠源性HCG單克隆抗體的過程中，可能運(yùn)用到____________________和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)，其中后者需要置于95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，CO2的作用是__________________________________________。 (4)在細(xì)胞內(nèi)DNA的合成一般有兩條途徑，主要途徑是在細(xì)胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸，進(jìn)而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻斷此途徑。另一輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下，經(jīng)酶的催化作用合成DNA，而骨髓瘤細(xì)胞的DNA合成沒有此輔助途徑。 ①利用DNA合成途徑不同的特點(diǎn)配制的HAT培養(yǎng)基含有多種成分，其中添加的____________具有篩選雜交瘤細(xì)胞的作用。 ②最終篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是________________________________________。 解析：(1)根據(jù)題意可知，人絨毛膜促性腺激素(HCG)的化學(xué)本質(zhì)是一種糖蛋白，所以HCG在核糖體上合成，還需要經(jīng)過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的初步加工和高爾基體的進(jìn)一步加工和修飾才能分泌到細(xì)胞外。(2)單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的，具有純度高、特異性強(qiáng)(靈敏度高)等特點(diǎn)。(3)制備鼠源性HCG單克隆抗體的過程中，可能運(yùn)用到了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要置于95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH。(4)骨髓瘤細(xì)胞的DNA合成只有一條途徑，在培養(yǎng)基中加入氨基嘌呤，阻斷了骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合體的增殖。雜交瘤細(xì)胞有兩條合成DNA的途徑，因此在選擇培養(yǎng)基上雜交瘤細(xì)胞能生存并無限增殖。B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生單一抗體。 答案：(1)核糖體　內(nèi)質(zhì)網(wǎng)　高爾基體　(2)雜交瘤　純度高　特異性強(qiáng)(靈敏度高)　(3)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)　維持培養(yǎng)液的pH　(4)①氨基嘌呤?、谀軣o限增殖并分泌特異性抗體 15．(7分)如圖是利用現(xiàn)代生物技術(shù)改良草莓品系的過程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題： (1)將野生綠色草莓的葉片離體組織培養(yǎng)成四倍體試管苗的過程，體現(xiàn)了植物細(xì)胞的________性，此過程中秋水仙素的作用機(jī)理是_______________________________。 (2)①過程中欲獲得抗蟲草莓，可從蛋白酶抑制劑基因、生長(zhǎng)素誘導(dǎo)基因中選擇____________________作為目的基因，通常用____________________________法導(dǎo)入受體細(xì)胞，基因表達(dá)載體除包括目的基因外，還必須有____________及標(biāo)記基因等。 (3)②過程可以先用花藥離體培養(yǎng)分別獲得抗蟲草莓和鳳梨草莓的單倍體，再利用___________________________________________________________技術(shù)獲得同時(shí)具鳳梨風(fēng)味和抗蟲特性的六倍體草莓，該技術(shù)常用的酶有_______________。 解析：(1)植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性；秋水仙素能誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍，其作用機(jī)理是抑制紡錘體形成，從而引起細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍。(2)蛋白酶抑制劑基因表達(dá)的蛋白酶抑制劑能阻斷或降低蛋白酶的活性，使昆蟲不能正常消化食物中的蛋白質(zhì)，還會(huì)引起害蟲的厭食反應(yīng)；而生長(zhǎng)素誘導(dǎo)基因表達(dá)的產(chǎn)物對(duì)害蟲無作用，所以要獲得抗蟲草莓可選擇蛋白酶抑制劑基因作為目的基因，通常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入受體細(xì)胞?；虮磉_(dá)載體除包括目的基因外，還必須有啟動(dòng)子、終止子及標(biāo)記基因等。(3)②過程常采用雜交育種，還可先用花藥離體培養(yǎng)獲得2N和4N的草莓，再用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得同時(shí)具鳳梨風(fēng)味和抗蟲特性的草莓，但在誘導(dǎo)細(xì)胞融合之前，需用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體。 答案：(1)全能　抑制紡錘體形成，從而引起細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍　(2)蛋白酶抑制劑基因　農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化　啟動(dòng)子、終止子　(3)植物體細(xì)胞雜交　纖維素酶和果膠酶