2018-2019學(xué)年高中生物 專題2 細胞工程 2.2 動物細胞工程 2.2.2 動物細胞融合與單克隆抗體學(xué)案 新人教版選修3.doc

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2.2.2　動物細胞融合與單克隆抗體 [學(xué)習(xí)目標(biāo)]　1.掌握動物細胞融合的原理和方法。2.歸納單克隆抗體的制備過程及應(yīng)用。 方式一　1970年，有兩位科學(xué)家做了人—鼠細胞融合的實驗，以證明細胞膜的流動性。思考該如何實現(xiàn)人—鼠細胞的融合，動物細胞融合后還有什么用途呢？植物體細胞雜交可得到雜種植株，動物細胞融合后能像電影上一樣形成雜種動物個體嗎？ 方式二　“太空婚禮” 2002年12月30日，兩場籌備了10年的“太空婚禮”首次在神舟四號飛船上舉行，植物細胞“新人”是黃花煙草和革新一號煙草葉肉細胞原生質(zhì)體，動物細胞“新人”是小鼠B淋巴細胞和骨髓瘤細胞，兩批新人同時在“產(chǎn)房”——電融合儀內(nèi)孕育新生命。 請思考： 新人一的婚禮流程是怎樣的？愛情結(jié)晶是什么？ 新人二的婚禮流程又是怎樣的？愛情結(jié)晶會是什么呢？ 要想知道答案，就讓我們一起來進入今天的課題吧！ 一、動物細胞融合 1．概念：兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程，也稱細胞雜交。 2．原理：細胞膜的流動性。 3．誘導(dǎo)融合的方法 (1)物理、化學(xué)方法：與植物體細胞雜交相同，如聚乙二醇、電激等。 (2)生物方法：滅活的病毒。 4．過程：具有不同遺傳信息的兩個或多個細胞雜交細胞。 5．結(jié)果：形成單核雜交細胞，具有原來兩個或多個細胞的遺傳信息，可表現(xiàn)出兩個或多個親本的特點。 6．意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能。成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。如：利用動物細胞融合技術(shù)而發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)，為制造單克隆抗體開辟了新途徑。 歸納總結(jié) 1．對動物細胞融合的理解 (1)動物細胞融合的過程包括細胞膜融合、細胞質(zhì)融合和細胞核融合。其中細胞膜融合是細胞融合的先導(dǎo)，細胞核融合是細胞融合的實質(zhì)。 (2)融合處理后的細胞不可以直接用于培養(yǎng)，還需要篩選。因為誘導(dǎo)融合的手段只是促使細胞間的融合，不能保證所有的細胞都發(fā)生融合，形成的融合細胞也有多種，因此需要進行篩選。 (3)細胞融合技術(shù)與有性雜交不同。有性雜交有著十分嚴(yán)格的時空關(guān)系和物種界限；動物細胞融合則不同，它通過人工的方法克服了存在于物種之間的遺傳屏障，從而能夠按照人們的意愿，把不同物種的不同組織類型的細胞融合在一起。 2．動物細胞融合與植物體細胞雜交的對比 比較項目 植物體細胞雜交 動物細胞融合 原理 細胞膜的流動性、細胞的全能性 細胞膜的流動性 細胞融 合方法 用纖維素酶、果膠酶去除細胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合 用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細胞分散后，誘導(dǎo)細胞融合 誘導(dǎo)手段 離心、電激、振動、聚乙二醇等誘導(dǎo) 與植物體細胞雜交相比，還可用滅活的病毒誘導(dǎo) 結(jié)果 形成雜種植株 形成雜交細胞，以生產(chǎn)細胞產(chǎn)品 用途 克服遠緣雜交不親和的障礙，擴展雜交親本范圍，培育新品種 制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等 意義 突破有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能 例1　下列不屬于細胞融合技術(shù)應(yīng)用的是(　　) A．細胞遺傳與細胞免疫的研究 B．生物新品種的培育 C．單克隆抗體的制備 D．瀕危動物的克隆 答案　D 解析　克隆瀕危動物是體細胞核移植技術(shù)的應(yīng)用，不屬于細胞融合技術(shù)的應(yīng)用。 例2　下列對植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較，描述正確的是(　　) A．動物細胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同，誘導(dǎo)融合的方法也完全相同 B．只有植物體細胞雜交可跨越種屬間的生殖隔離，突破有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能 C．利用動物細胞融合技術(shù)而發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)，為生產(chǎn)單克隆抗體開辟了新途徑 D．目前科學(xué)家終于實現(xiàn)了兩個植物物種間的體細胞雜交，得到了同時具有兩個物種遺傳物質(zhì)的超級植物，并使它們的性狀全部得以體現(xiàn) 答案　C 解析　動物細胞融合的誘導(dǎo)方法有生物方法，如用滅活的病毒，而植物原生質(zhì)體融合沒有生物方法；兩個植物物種間的體細胞雜交，得到了同時具有兩個物種遺傳物質(zhì)的超級植物，但目前不能使它們的性狀全部能得以體現(xiàn)。 拓展提升　生物工程技術(shù)產(chǎn)生后代個體的遺傳物質(zhì)或基因來源 (1)轉(zhuǎn)基因生物：目的基因來自外源生物，絕大多數(shù)基因來自兩個親本。 (2)雜種植株：遺傳物質(zhì)來自融合的兩個親本細胞。 (3)經(jīng)細胞培養(yǎng)獲得的動物細胞：遺傳物質(zhì)只來自一個親本。 (4)動物細胞融合形成的雜交細胞：遺傳物質(zhì)來自融合的兩個親本細胞。 (5)克隆動物：細胞核中的遺傳物質(zhì)來自供體動物，細胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來自提供卵母細胞的動物個體。 二、單克隆抗體的制備 1．傳統(tǒng)抗體的獲得 (1)方法：①向動物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原，使動物產(chǎn)生抗體；②從動物血清中分離所需抗體。 (2)缺陷：產(chǎn)量低、純度低、特異性差。 2．單克隆抗體的制備 (1)制備原理 ①B淋巴細胞特點：一種B淋巴細胞只產(chǎn)生一種單一抗體，B淋巴細胞在體外不能(填“能”或“不能”)無限增殖。 ②骨髓瘤細胞特點：能無限增殖。 ③雜交瘤細胞特點：B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合得到的雜交瘤細胞，既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。 (2)制備過程 制備特異性B淋巴細胞 　? 獲得雜交瘤細胞 　? 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測 　? 將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖 　? 提取單克隆抗體：從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取 (3)單克隆抗體優(yōu)點：特異性強、靈敏度高、并可大量制備。 (4)單克隆抗體的應(yīng)用 ①作為診斷試劑，具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。 ②用于治療疾病和運載藥物。 歸納總結(jié) 1．血清抗體與單克隆抗體的比較 名稱 產(chǎn)生 特點 血清抗體 由B淋巴(漿)細胞分泌 一般從血清中分離，產(chǎn)量低、純度低、特異性差 單克隆抗體 由雜交瘤細胞分泌 特異性強、靈敏度高，能大量制備 2.制備單克隆抗體過程中的兩次篩選 項目 第一次篩選 第二次篩選 篩選原因 誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細胞，另外還有未融合的細胞 從小鼠體內(nèi)提取的B淋巴細胞有很多種，形成的雜交瘤細胞也有很多種 篩選方法 用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選：未融合的細胞和同種細胞融合后形成的細胞都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞才能生長 用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群 篩選目的 得到雜交瘤細胞 得到能分泌所需抗體的雜交瘤細胞 3.利用生物導(dǎo)彈治療癌癥 (1)組成：“生物導(dǎo)彈”＝抗癌細胞的單克隆抗體＋化學(xué)藥物(或放射性同位素或細胞毒素)。 (2)原理：單克隆抗體和癌細胞表面的特定抗原專一性結(jié)合，使藥物定向作用于癌細胞。 (3)優(yōu)點：用藥量小、療效高、毒副作用小。 例3　用a表示骨髓瘤細胞，b表示B淋巴細胞，則單克隆抗體制備過程中兩次篩選的目的分別為(　　) A．從a、aa、ab、bb、b中篩選出a、aa、ab；從a、aa、ab中篩選出ab B．從a、aa、ab、bb、b中篩選出ab、bb、b；從ab、bb、b中篩選出ab C．從a、aa、ab、bb、b中篩選出ab；從ab中篩選出能產(chǎn)生特定抗體的ab D．從a、aa、ab、bb、b中篩選出aa；從aa中篩選出能大量增殖的aa 答案　C 解析　第一次篩選是用選擇培養(yǎng)基選出雜交瘤細胞，即ab；第二次篩選是通過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測選出能產(chǎn)生特異性抗體的ab。 例4　將特定藥物與單克隆抗體相結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”，能夠用于殺死人類某些癌細胞，其過程如圖所示。下列有關(guān)敘述錯誤的是(　　) A．①過程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同 B．經(jīng)①形成的雜交瘤細胞都能無限增殖并產(chǎn)生特定抗體 C．②過程需要篩選并克隆單個雜交瘤細胞 D．抗體的靶向作用使③過程具有高度特異性 答案　B 解析?、龠^程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同，都是細胞膜的流動性，A正確；經(jīng)①形成的雜交瘤細胞不一定都能產(chǎn)生特定抗體，需要經(jīng)過抗體陽性檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞，B錯誤；②過程需要采用抗體陽性檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞，然后進行克隆化培養(yǎng)(包括體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng))，C正確；抗體的靶向作用使③過程具有高度特異性，D正確。 1．動物細胞融合的原理是(　　) A．細胞膜的流動性 B．細胞膜的選擇透過性 C．細胞質(zhì)的流動性 D．細胞質(zhì)酶的活性 答案　A 解析　細胞融合的原理是細胞膜具有流動性。 2．與植物原生質(zhì)體融合相比，動物細胞融合特有的誘導(dǎo)因素是(　　) A．聚乙二醇 B．滅活的病毒 C．振動 D．電激 答案　B 解析　動物細胞融合可以用滅活的病毒誘導(dǎo)，而植物原生質(zhì)體融合不能用滅活的病毒誘導(dǎo)。 3．(2017湖北黃梅二中高二下期中)如圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述正確的是(　　) A．①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T細胞 B．②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細胞的形成 C．③同時具有脾臟細胞和小鼠骨髓瘤細胞的特性 D．④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞群 答案　D 解析?、偈菑囊衙庖叩男∈笃⑴K中獲得的B淋巴細胞，A項錯誤；胰蛋白酶可使組織分散為單個細胞，B項錯誤；③為雜交細胞，若是B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成的雜交細胞，才同時具有B淋巴細胞(可產(chǎn)生抗體)和骨髓瘤細胞(可無限增殖)的特性，C項錯誤；④是經(jīng)篩選后獲得的能夠分泌特異性抗體的雜交瘤細胞，D項正確。 4．利用單克隆抗體研制而成的“生物導(dǎo)彈”由兩部分組成，一是“瞄準(zhǔn)裝置”，二是殺傷性“彈頭”。下列對此描述不正確的是(　　) A．“瞄準(zhǔn)裝置”由識別腫瘤的單克隆抗體構(gòu)成 B．“彈頭”由放射性同位素、化學(xué)藥物或細胞毒素等物質(zhì)構(gòu)成 C．“彈頭”中的藥物有選擇殺傷腫瘤細胞的功能 D．“生物導(dǎo)彈”是利用細胞工程技術(shù)制備出來的 答案　C 解析　“彈頭”中的藥物既能殺傷腫瘤細胞，也能殺傷正常細胞，不具有選擇性；“生物導(dǎo)彈”中的“瞄準(zhǔn)裝置”由專一識別特定腫瘤細胞的單克隆抗體構(gòu)成；“彈頭”由殺死腫瘤細胞的放射性同位素、化學(xué)藥物或細胞毒素等物質(zhì)構(gòu)成；“生物導(dǎo)彈”是利用動物細胞融合、動物細胞培養(yǎng)等細胞工程技術(shù)制備出來的。 5．(2014新課標(biāo)Ⅰ，40)某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果如下圖所示。 若要制備雜交瘤細胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細胞(染色體數(shù)目為40條)，并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞(染色體數(shù)目為60條)按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細胞。 回答下列問題： (1)制備融合所需的B淋巴細胞時，所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到16 000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過________次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細胞的是________小鼠，理由是___________________。 (2)細胞融合實驗完成后，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外，可能還有__________________________________________________，體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是___________________________________。 (3)雜交瘤細胞中有________個細胞核，染色體數(shù)目最多是________條。 (4)未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是____________________。 答案　(1)4　Y　Y小鼠的血清抗體效價最高　(2)B淋巴細胞相互融合形成的細胞、骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞　細胞融合是隨機的，且融合率達不到100% (3)1　100　(4)不能無限增殖 解析　(1)據(jù)圖分析可知，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價幾乎都達到16 000以上，小鼠Y的血清抗體的效價最高，最適合用于制備單克隆抗體。 (2)融合體系中除了未融合的細胞和雜交瘤細胞之外，還有骨髓瘤細胞的自身融合細胞和B淋巴細胞的自身融合細胞。細胞的融合是隨機的，并且不可能所有細胞都融合，故體系中會出現(xiàn)多種類型的細胞。 (3)動物細胞融合后形成的是具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞。雜交瘤細胞的細胞核中的染色體數(shù)目最多為40＋60＝100(條)。 (4)正常細胞的分裂次數(shù)是有限的，且經(jīng)過免疫的B淋巴細胞高度分化，不能無限增殖，而是經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后逐漸衰老死亡。 [對點訓(xùn)練] 題組一　動物細胞融合技術(shù) 1．20世紀(jì)30年代，科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核、天花、水痘和麻疹等疾病患者的病理組織中存在多核細胞，這些多核細胞最可能的來源是(　　) A．細胞進行無絲分裂造成的 B．細胞進行有絲分裂時，染色體復(fù)制后沒有分開形成兩個子細胞 C．有絲分裂時，細胞核進行了分裂，而細胞質(zhì)沒有進行分裂 D．細胞在體內(nèi)病毒的作用下發(fā)生了融合 答案　D 解析　選項C、D都可形成多核細胞，但結(jié)合題干信息，此種現(xiàn)象與感染病毒有關(guān)，故選項D最有可能。 2．下列關(guān)于動物細胞融合與植物體細胞雜交技術(shù)的說法正確的是(　　) A．基本原理相同 B．誘導(dǎo)細胞融合的方法相同 C．細胞融合前的處理過程相同 D．融合后都需要進行篩選 答案　D 解析　植物體細胞雜交的原理為細胞膜的流動性、植物細胞的全能性，而動物細胞融合利用的是細胞膜的流動性和細胞增殖；動物細胞融合常用滅活的病毒誘導(dǎo)，而植物體細胞雜交不能；動物細胞融合前需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細胞分散開，植物體細胞雜交常用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁；誘導(dǎo)融合后會形成多種融合細胞，還有未融合細胞，因此要進行篩選。 3．動物細胞融合的目的中最重要的是(　　) A．克服遠緣雜交不親和的障礙 B．制備單克隆抗體 C．培育新物種 D．生產(chǎn)雜交細胞 答案　B 解析　動物細胞融合技術(shù)能克服遠緣雜交不親和的障礙，但這是它的意義，而不是它的用途；動物細胞的全能性受到限制，目前只見到高度分化的細胞核在去核卵細胞中表現(xiàn)出全能性，還未見到融合的細胞核表現(xiàn)出全能性的例子，因此動物細胞融合不能用來培育新物種；生產(chǎn)雜交細胞不是細胞融合的主要目的，雜交細胞只是細胞融合完成后所形成的結(jié)構(gòu)名稱。 題組二　單克隆抗體的制備 4．運用細胞工程技術(shù)獲得單克隆抗體時，下列操作不必要的是(　　) A．對小動物注射抗原 B．融合并篩選雜交瘤細胞 C．培養(yǎng)雜交瘤細胞 D．將胰蛋白酶注入小鼠腹腔 答案　D 解析　胰蛋白酶在動物細胞培養(yǎng)時用到，是加到培養(yǎng)基中用于分離細胞的。 5．(2017河南西華一高高二下期中)下圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程，有關(guān)敘述不正確的是(　　) A．圖中實驗小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原 B．利用聚乙二醇、滅活的病毒和電激等方法均可誘導(dǎo)細胞融合獲得乙 C．用特定的選擇性培養(yǎng)基對乙篩選，融合細胞均能生長，未融合細胞均不能生長 D．丙需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的丁 答案　C 解析　選擇性培養(yǎng)基只能讓特定的符合條件的細胞存活下來，在題目給定的選擇性培養(yǎng)基上，只有雜交瘤細胞才能夠存活；圖中實驗小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原；利用聚乙二醇、滅活的病毒和電激等方法均可誘導(dǎo)動物細胞融合；丙為能無限增殖和分泌抗體的雜交瘤細胞；為獲得大量專一性抗體，需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測、多次篩選。 6．(2017河北武邑中學(xué)高二下期中)科學(xué)家用滅活的病毒把骨髓瘤細胞與經(jīng)過免疫的B淋巴細胞融合得到雜交瘤細胞，滅活的病毒的作用是(　　) A．病毒比較小，可鉆入到細胞內(nèi) B．滅活的病毒已完全死亡，死亡的病毒可以讓細胞聚集 C．滅活的病毒已失去感染性，對各種動物細胞不造成破壞，但所保留的融合活性可使不同的動物細胞進行融合 D．滅活的病毒帶有目的基因，通過融合可以讓雜交細胞帶有目的基因 答案　C 解析　動物細胞融合常用滅活的病毒作誘導(dǎo)劑是因為滅活的病毒不再具有感染性，不會對細胞造成破壞，但仍可促使不同的動物細胞融合。 7．在單克隆抗體制備過程中，對骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導(dǎo)融合后，要用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活、增殖的細胞是(　　) ①B淋巴細胞?、诠撬枇黾毎、跙淋巴細胞自身融合細胞?、芄撬枇黾毎陨砣诤霞毎、蓦s交瘤細胞 A．①②③④ B．①③⑤ C．②④ D．①③ 答案　A 解析　在題中所述特定的選擇培養(yǎng)基上，能夠存活、增殖的細胞只有雜交瘤細胞。 8．研究單克隆抗體治療癌癥的思路是(　　) A．利用單克隆抗體特異性地對抗癌細胞 B．以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細胞 C．抗癌物質(zhì)在克隆細胞中大量合成 D．單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細胞結(jié)合 答案　D 解析　單克隆抗體主要用于治療癌癥，可制成“生物導(dǎo)彈”，生物導(dǎo)彈就是單克隆抗體＋放射性同位素(或化學(xué)藥物或細胞毒素)，這其實是借助單克隆抗體的定位導(dǎo)向作用將藥物定向帶到癌細胞，靠藥物在原位殺死癌細胞。 [綜合強化] 9．用動物細胞工程技術(shù)制備單克隆抗體，下列實驗步驟中錯誤的是(　　) A．將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞 B．用氯化鈣作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合 C．篩選雜交瘤細胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體 D．該雜交瘤細胞株的增殖方式和產(chǎn)物分別是有絲分裂和單克隆抗體 答案　B 解析　B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合需要滅活的病毒、聚乙二醇或物理因素來誘導(dǎo)；氯化鈣不能作為誘導(dǎo)劑，氯化鈣的作用是在基因工程中用于提高細菌細胞壁的通透性，便于重組質(zhì)粒進入微生物細胞內(nèi)。 10．基因型為Aa與基因型為Bb的動物體細胞混合，用滅活的病毒處理后，不可能獲得下列哪種基因型的細胞(　　) A．AAaa B．AaBb C．Aabb D．BBbb 答案　C 解析　基因型為Aa與基因型為Bb的動物體細胞混合，用滅活的病毒處理后，會有以下情況出現(xiàn)：Aa和Aa融合形成的細胞是AAaa，Bb和Bb融合形成的細胞是BBbb，Aa和Bb融合形成的細胞是AaBb。 11．單克隆抗體在醫(yī)療、診斷等方面發(fā)揮著越來越重要的作用?？茖W(xué)家米爾斯坦和科勒設(shè)計了一個用已免疫的B淋巴細胞制備單克隆抗體的實驗，如圖為其實驗流程圖。則相關(guān)的敘述或說法中，不正確的是(　　) A．a(chǎn)是骨髓瘤細胞，②表示在選擇性培養(yǎng)基上進行培養(yǎng) B．制備單克隆抗體時，選擇B淋巴細胞的原因是它能分泌多種特異性抗體 C．③過程如在體外培養(yǎng)，則需要無菌、無毒，營養(yǎng)充足，溫度、pH適宜等環(huán)境條件 D．誘導(dǎo)動、植物細胞融合常用的一種化學(xué)誘導(dǎo)劑是聚乙二醇 答案　B 解析　對于B淋巴細胞來說，每一種B淋巴細胞經(jīng)特定抗原刺激后只能產(chǎn)生一種特異性抗體。根據(jù)單克隆抗體制備的流程判斷：a是骨髓瘤細胞、b是雜交瘤細胞；①是誘導(dǎo)B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的過程；②表示在選擇性培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)、篩選能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞的過程；③包括體外培養(yǎng)和注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)；選擇性培養(yǎng)基只允許雜交瘤細胞生長、增殖，其他細胞不能生存；動物細胞培養(yǎng)需具備的條件是：無菌、無毒，營養(yǎng)充足，溫度適宜，pH適宜，充足的空氣等；誘導(dǎo)細胞融合時常用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑。 12．關(guān)于單克隆抗體的生產(chǎn)和應(yīng)用，錯誤的是(　　) A．對小動物注射特定抗原以獲取所需的B淋巴細胞 B．單克隆抗體比血清抗體的制備過程簡單，操作方便 C．特定的單克隆抗體可制成試劑，用于檢測人體是否受某種抗原的感染 D．治療癌癥的“生物導(dǎo)彈”原理之一是利用單克隆抗體的特異性識別癌細胞 答案　B 解析　單克隆抗體的制備是用骨髓瘤細胞和經(jīng)過免疫的B淋巴細胞融合后得到雜交瘤細胞；單克隆抗體的制備過程比普通抗體的制備過程復(fù)雜得多；單克隆抗體最廣泛的應(yīng)用是作為診斷試劑；如果把抗癌細胞的單克隆抗體與放射性同位素、化學(xué)藥物或細胞毒素相結(jié)合，制成“生物導(dǎo)彈”注入體內(nèi)，可借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用，將藥物帶到癌細胞所在位置，殺死癌細胞。 13．如圖為細胞融合過程示意圖，請據(jù)圖回答下列問題： (1)若A、B是植物細胞，則其融合形成的D細胞培養(yǎng)成植株，還要應(yīng)用________________技術(shù)。 (2)若A、B是動物細胞，則一般取自________________、幼齡動物的器官或組織，然后用胰蛋白酶使其分散開來。A、B到C的過程中，常用的不同于植物細胞工程的方法是用________________誘導(dǎo)細胞融合。 (3)從A、B到C的過程中，可形成__________種類型的C細胞(僅考慮兩個細胞間的融合)。若該過程用于制備單克隆抗體，應(yīng)篩選出符合要求的D細胞，方法是用特定的________培養(yǎng)基培養(yǎng)，篩選出的D細胞稱為________________，常用的培養(yǎng)方法有體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)兩種；前者是在________培養(yǎng)基中培養(yǎng)，后者是在________________內(nèi)增殖。 答案　(1)植物組織培養(yǎng)　(2)胚胎　滅活的(仙臺)病毒 (3)3　選擇性　雜交瘤細胞　液體　動物的腹腔 解析　若A、B是植物細胞，則D代表雜種植株，若A、B是動物細胞，進行細胞培養(yǎng)時首先要用胰蛋白酶將器官、組織塊分散成單個細胞，選用的材料一般為胚胎、幼齡動物的器官或組織，因為這些部位的細胞代謝旺盛，細胞分裂能力強；能夠產(chǎn)生單克隆抗體的是雜交瘤細胞，需要用特定的選擇性培養(yǎng)基進行篩選，經(jīng)抗體專一檢測后大量克隆，以便進行體內(nèi)或體外的生產(chǎn)。 14．如圖表示單克隆抗體的制備過程，請據(jù)圖回答下列問題： (1)據(jù)圖可知，________________技術(shù)是動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)，而________技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能。 (2)圖中過程①常用的誘導(dǎo)因素是__________________，過程②常在________培養(yǎng)基中完成。 (3)A細胞為________細胞，其特點是______________________________。 (4)合成的單克隆抗體最終可以從________和________中提取。 答案　(1)動物細胞培養(yǎng)　細胞融合　(2)滅活的病毒(或聚乙二醇)　選擇性　(3)雜交瘤　既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一抗體　(4)培養(yǎng)液　小鼠腹水 解析　(1)動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是動物細胞培養(yǎng)，細胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能。(2)過程①中誘導(dǎo)細胞融合的方法很多，常用的主要有生物法(如用滅活的病毒)、化學(xué)法(如用聚乙二醇)、物理法(如電激等)。過程②是單克隆抗體技術(shù)的篩選過程，是在特定的選擇性培養(yǎng)基上進行的。(3)A細胞為雜交瘤細胞，雜交瘤細胞具有既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一抗體的特點。(4)雜交瘤細胞的培養(yǎng)一般有體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)兩種方式，體外培養(yǎng)是在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)后從培養(yǎng)液中提取單克隆抗體；體內(nèi)培養(yǎng)是在小鼠腹腔中培養(yǎng)，培養(yǎng)后從小鼠腹水中提取單克隆抗體。 15．科學(xué)家從某些能無限增殖細胞的細胞質(zhì)中分離出無限增殖調(diào)控基因(prG)，該基因能激發(fā)許多動物細胞的分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。請回答下面的問題： (1)利用細胞融合技術(shù)制備單克隆抗體，一般選用的是_____________和____________融合。 (2)有人提出，可以直接通過基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來制備單克隆抗體，其思路如圖所示。 ①酶A是指________，酶B是指____________。 ②對已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的Ⅱ進行“檢測”的原因是________________；Ⅲ指代的細胞具有的特點是：________________________________。 ③有人提出用細胞核移植技術(shù)構(gòu)建重組細胞來生產(chǎn)單克隆抗體，試用相關(guān)的圖示及文字表示該過程。 答案　(1)骨髓瘤細胞　經(jīng)過免疫的B淋巴細胞(漿細胞)　(2)①限制酶　DNA連接酶?、趯?dǎo)入成功率很低　既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體?、廴鐖D所示 解析　(1)制備單克隆抗體選用的融合細胞一般為骨髓瘤細胞(能無限增殖)與經(jīng)過免疫的B淋巴細胞(能產(chǎn)生特異性抗體)。(2)圖示Ⅰ過程為獲取目的基因，需用限制酶切取出目的基因片段；由于目的基因?qū)氤晒β什⒉桓撸食Ｐ柽M行導(dǎo)入檢測；由于Ⅲ指代的細胞具有“無限增殖”的調(diào)控基因，故可進行無限增殖，從而產(chǎn)生大量的單克隆抗體。