2019年春高中生物 專題2 細(xì)胞工程 2.2 動(dòng)物細(xì)胞工程 2.2.1 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)學(xué)案（含解析）新人教版選修3.doc

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動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù) 1．簡(jiǎn)述動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)及條件。(重點(diǎn))　2.舉例論證動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用及意義。　3．簡(jiǎn)述動(dòng)物核移植的過程及意義。(重、難點(diǎn)) 一、動(dòng)物細(xì)胞工程(閱讀教材P44) 常用的技術(shù)手段：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等。 技術(shù)基礎(chǔ)：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。 二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(閱讀教材P44～P47) 概念：從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。 .培養(yǎng)過程 .相關(guān)概念 (1)細(xì)胞貼壁：細(xì)胞懸液中分散的細(xì)胞貼附在瓶壁上。 (2)細(xì)胞的接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞停止分裂增殖的現(xiàn)象。 (3)原代培養(yǎng)：指動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)。 (4)傳代培養(yǎng)：貼壁的細(xì)胞，出現(xiàn)接觸抑制后，需要重新用胰蛋白酶來(lái)處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖的培養(yǎng)過程。 4．培養(yǎng)條件 (1)無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理。 (2)營(yíng)養(yǎng) (3)溫度和pH (4)氣體環(huán)境 .應(yīng)用 (1)生產(chǎn)生物制品：如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。 (2)應(yīng)用于基因工程：動(dòng)物細(xì)胞是基因工程技術(shù)中常用的受體細(xì)胞，離不開動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。 (3)檢測(cè)有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性。 (4)用于生理、病理、藥理等方面的研究，如篩選抗癌藥物等。 三、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物(閱讀教材P47～P50) 1．動(dòng)物核移植概念 (1)供體：動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核。 (2)受體：去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞。 (3)結(jié)果：形成重組胚胎，發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。 2．兩種類型 3．體細(xì)胞核移植的過程 4．體細(xì)胞核移植的應(yīng)用前景 (1)畜牧生產(chǎn)方面：加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。 (2)保護(hù)瀕危物種方面：增加動(dòng)物的存活數(shù)量。 (3)醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域：轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。 (4)治療人類疾?。恨D(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物細(xì)胞、組織和器官作為異種移植的供體等。 5．體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題 (1)成功率非常低。 (2)絕大多數(shù)克隆動(dòng)物存在健康問題。 (3)對(duì)克隆動(dòng)物食品的安全性問題存在爭(zhēng)議。 連一連 判一判 (1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性。() (2)從動(dòng)物機(jī)體取出相關(guān)組織，可以用胃蛋白酶將它分散成單個(gè)細(xì)胞。() (3)(2018東北師大附中高二期末)動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中一些細(xì)胞會(huì)發(fā)生遺傳物質(zhì)的變化。(√) (4)(2018鹽城高二檢測(cè))在動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)過程中，使用的合成培養(yǎng)基中可以不加入血清和血漿等物質(zhì)。() (5)動(dòng)物體細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞是卵細(xì)胞。() (6)體細(xì)胞核移植技術(shù)產(chǎn)生的個(gè)體組織與供體的性狀完全相同。() 　動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng) 結(jié)合下面動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程，探究以下問題： (1)以上過程的原理為細(xì)胞增殖。 (2)用胰蛋白酶處理組織塊，可使細(xì)胞分散開，目的是使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸。不能使用胃蛋白酶分散細(xì)胞，因?yàn)槎鄶?shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2～7.4，此pH下胃蛋白酶不具有活性。 (3)劃分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)是以分瓶為界，即配制細(xì)胞懸液后轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中的第一次培養(yǎng)為原代培養(yǎng)，分瓶后的培養(yǎng)(無(wú)論分瓶多少次)均為傳代培養(yǎng)。 (4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常需加入血清、血漿，其中含有多種維持細(xì)胞正常代謝和生長(zhǎng)的物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、氨基酸、未知的促生長(zhǎng)因子等。 植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較 項(xiàng)目 植物組織培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 區(qū) 別 原理 植物細(xì)胞的全能性 細(xì)胞增殖 培養(yǎng)基 固體或半固體培養(yǎng)基，包括礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、瓊脂、植物激素等 液體培養(yǎng)基，包括無(wú)機(jī)鹽、葡萄糖、維生素、氨基酸、動(dòng)物血清等 細(xì)胞來(lái)源 離體植物器官、組織或細(xì)胞 胚胎或幼齡動(dòng)物組織、器官 過程 脫分化、再分化 原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng) 結(jié)果 獲得新個(gè)體或細(xì)胞產(chǎn)品 大量產(chǎn)生細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物 用途 ①快速繁殖名貴花卉和果樹； ②培養(yǎng)無(wú)病毒植株、轉(zhuǎn)基因植物； ③大規(guī)模生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品，如藥物、食品添加劑、香料、色素等 ①生產(chǎn)蛋白質(zhì)制品，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等； ②檢測(cè)有毒物質(zhì)； ③研究生理、藥理、病理 相同點(diǎn) ①都需要人工條件下的無(wú)菌、無(wú)毒操作，無(wú)菌培養(yǎng)； ②都進(jìn)行有絲分裂 1．如圖為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞增殖情況的變化曲線，圖中B、E兩點(diǎn)表示經(jīng)篩選、分裝后繼續(xù)培養(yǎng)。下列判斷錯(cuò)誤的是(　　) A．B點(diǎn)之前的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，之后的培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng) B．接觸抑制現(xiàn)象主要發(fā)生在AB段和DE段 C．分瓶后的每個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞群稱為一個(gè)克隆 D．E點(diǎn)后的少數(shù)細(xì)胞獲得不死性，向等同于癌細(xì)胞的方向發(fā)展 解析：選C。人們通常將動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，分瓶后的培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)，B點(diǎn)之后細(xì)胞繼續(xù)生長(zhǎng)，可見B點(diǎn)之后進(jìn)行了傳代培養(yǎng)，A正確；當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，即會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，在AB段和DE段細(xì)胞幾乎生長(zhǎng)停滯，可能發(fā)生了接觸抑制，B正確；細(xì)胞克隆的最基本要求是必須保證分離出來(lái)的是一個(gè)細(xì)胞而不是多個(gè)細(xì)胞，C錯(cuò)誤；E點(diǎn)后細(xì)胞已獲無(wú)限繁殖能力且持續(xù)生存，具有了癌細(xì)胞的性質(zhì)，D正確。 (1)培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)沒有脫分化的過程，因高度分化的動(dòng)物細(xì)胞發(fā)育潛能變窄，失去了發(fā)育成完整個(gè)體的能力。 (2)不是所有的細(xì)胞增殖過程中都存在接觸抑制。例如，癌細(xì)胞增殖時(shí)不存在接觸抑制，所以在培養(yǎng)瓶中可以形成多層細(xì)胞。 2．(2018湖南寧鄉(xiāng)高二期末)用動(dòng)植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是(　　) A．都需要用含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱 B．都需要用液體培養(yǎng)基 C．都要在無(wú)菌條件下進(jìn)行 D．都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性 解析：選C。不管是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)還是植物組織培養(yǎng)，最基本的一個(gè)條件就是無(wú)菌環(huán)境。此外，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，其中的碳源是葡萄糖，培養(yǎng)液中還需要加入一定的動(dòng)物血清或血漿，其氣體環(huán)境是95%空氣＋5%CO2，以維持培養(yǎng)液的pH；而植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，其碳源為蔗糖，組織培養(yǎng)的脫分化階段必須在黑暗條件下進(jìn)行，而再分化過程需要一定的光照條件；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是細(xì)胞的增殖，不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，而植物組織培養(yǎng)完成了由一個(gè)細(xì)胞到一個(gè)完整植株的全過程，體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性。 　動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物 結(jié)合克隆羊“多利”的產(chǎn)生過程，探究以下問題： (1)以上過程的原理是動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性。 (2)由于控制毛色的基因位于細(xì)胞核中，因此“多利”的面部毛色應(yīng)與核供體相同，即為白色。 (3)若甲、乙兩只綿羊分別為雄性、雌性個(gè)體，則克隆羊“多利”的性別為雄性。 (1)在進(jìn)行核移植時(shí)，為何一般不選用生殖細(xì)胞作為供核細(xì)胞？ 提示：因?yàn)樯臣?xì)胞與正常體細(xì)胞相比遺傳物質(zhì)減半。 (2)在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前，為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核？ 提示：為使核移植產(chǎn)生的胚胎或動(dòng)物的遺傳物質(zhì)全部來(lái)自有重要利用價(jià)值的動(dòng)物提供的體細(xì)胞，在供體細(xì)胞的細(xì)胞核移至受體細(xì)胞之前，必須將受體細(xì)胞的細(xì)胞核去掉或?qū)⑵淦茐摹? 1．核移植時(shí)供體和受體的選擇 (1)供體：一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，因?yàn)?0代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型，保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。 (2)受體：減Ⅱ中期的卵母細(xì)胞。一方面細(xì)胞大，易于操作；卵黃多，營(yíng)養(yǎng)豐富，為發(fā)育提供充足的營(yíng)養(yǎng)。另一方面細(xì)胞質(zhì)中含有能刺激融合后重組細(xì)胞進(jìn)行分裂分化并形成重組胚胎的物質(zhì)。 2．克隆動(dòng)物的特點(diǎn) (1)克隆動(dòng)物的性狀與核供體生物的性狀基本相同，但不是完全相同，原因是：①克隆動(dòng)物的細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來(lái)自于受體卵母細(xì)胞；②生物的性狀不僅與遺傳物質(zhì)有關(guān)，還受環(huán)境影響。 (2)核基因是供體核基因的100%的復(fù)制。 (3)克隆動(dòng)物是一種無(wú)性繁殖方式。 3．克隆的層次 (1)分子水平：如DNA復(fù)制； (2)細(xì)胞水平：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)； (3)個(gè)體水平：克隆羊“多利”的誕生。 交匯點(diǎn)1　細(xì)胞結(jié)構(gòu)——細(xì)胞核 (1)分布：真核細(xì)胞具有____________包被的細(xì)胞核；原核細(xì)胞沒有核膜包被的細(xì)胞核。 (2)結(jié)構(gòu)：包括____________、核仁、____________、核孔等。 (3)功能：細(xì)胞核是遺傳的信息庫(kù)，是細(xì)胞__________的控制中心。 交匯點(diǎn)2　細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì) 動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)存在于____________中。 答案：交匯點(diǎn)1 (1)核膜　(2)核膜　染色質(zhì)　(3)代謝和遺傳 交匯點(diǎn)2 線粒體 1．(2018山東萊蕪高二期中)下列對(duì)動(dòng)物核移植技術(shù)的描述，不正確的是(　　) A．動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞的 B．體細(xì)胞核移植的過程中可通過顯微操作去核法去除卵母細(xì)胞中的核 C．細(xì)胞核移植的供體細(xì)胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞 D．通過體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物是對(duì)供體100%的復(fù)制 解析：選D。早期胚胎細(xì)胞作細(xì)胞核的供體細(xì)胞時(shí)妊娠成功率最高，體細(xì)胞核移植的難度高于胚胎細(xì)胞核移植的；在核移植前一般要先用顯微操作法去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核，獲得卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)；核移植時(shí)作供核一方的一般 是傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是此種細(xì)胞能保持正常的二倍體核型，遺傳物質(zhì)不發(fā)生改變；通過細(xì)胞核移植方法獲得的重組細(xì)胞，細(xì)胞核遺傳物質(zhì)來(lái)自供體核，細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來(lái)自受體的細(xì)胞質(zhì)，所以用核移植的方法得到的動(dòng)物不是對(duì)供體動(dòng)物100%的復(fù)制。 2.如圖為哺乳動(dòng)物(羊)的生殖過程，下列敘述不正確的是(　　) A．個(gè)體2為克隆動(dòng)物，c為高度分化的體細(xì)胞 B．個(gè)體2的遺傳性狀與提供c細(xì)胞的羊不完全相同 C．產(chǎn)生動(dòng)物個(gè)體1與動(dòng)物個(gè)體2的生殖方式是不同的 D．e細(xì)胞為完成減數(shù)分裂的卵細(xì)胞 解析：選D。在核移植過程中，去核受體細(xì)胞一般選用處于減數(shù)第二次分裂中期的次級(jí)卵母細(xì)胞，而不是完成減數(shù)分裂的卵細(xì)胞。 判斷有性生殖與無(wú)性生殖的兩種方法 (1)從概念上判斷：①有性生殖是指經(jīng)兩性生殖細(xì)胞結(jié)合而成的合子或有性配子直接發(fā)育成個(gè)體的生殖方式；②無(wú)性生殖是指不經(jīng)過生殖細(xì)胞的結(jié)合而由親本直接產(chǎn)生子代的生殖方式。 (2)從培養(yǎng)細(xì)胞的種類上判斷：①組織培養(yǎng)中培養(yǎng)的不是體細(xì)胞而是有性配子或合子時(shí)，才屬于有性生殖；②植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞核移植都屬于無(wú)性生殖。 核心知識(shí)小結(jié) [要點(diǎn)回眸] [答題必備] 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖。 細(xì)胞在培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁(生長(zhǎng))和細(xì)胞接觸抑制現(xiàn)象。 動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件包括：無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，適宜的營(yíng)養(yǎng)、溫度和pH及氣體環(huán)境。 動(dòng)物細(xì)胞核移植的原理是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性。 哺乳動(dòng)物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。 在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH。 [隨堂檢測(cè)] 1．(2018北京海淀區(qū)高二檢測(cè))動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)是(　　) ①細(xì)胞貼壁　②有絲分裂?、鄯稚⑸L(zhǎng)?、芙佑|抑制?、轀p數(shù)分裂?、迋鞔囵B(yǎng)一般傳至10代就不易傳下去 A．①②④⑥　　　　　　 B．②③④⑤ C．①③④⑥ D．③④⑤⑥ 解析：選A。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)懸液中分散的細(xì)胞只有貼附在光滑無(wú)毒的瓶壁上才會(huì)生長(zhǎng)增殖，稱為細(xì)胞貼壁，在懸液中不會(huì)分散生長(zhǎng)，①對(duì)、③錯(cuò)；動(dòng)物體細(xì)胞增殖的方式是有絲分裂，沒有減數(shù)分裂，②對(duì)、⑤錯(cuò)；當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng) 到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂，這叫接觸抑制，④對(duì)；傳代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳到10代以后就不易傳下去了，⑥對(duì)。 2．(2018淮安高二檢測(cè))實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是(　　) A．甲過程需要對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒 B．乙過程對(duì)皮膚組織可用胰蛋白酶處理 C．丙過程得到的細(xì)胞大多具有異常二倍體核型 D．丁過程得到的部分細(xì)胞可能失去貼壁黏附性 解析：選C。甲過程表示獲取實(shí)驗(yàn)小鼠的組織細(xì)胞，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒處理，選項(xiàng)A正確；乙表示用胰蛋白酶處理皮膚組織，使其分散成單個(gè)皮膚細(xì)胞，選項(xiàng)B正確；丙過程表示原代培養(yǎng)，形成的細(xì)胞株遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變，具有正常的二倍體核型，選項(xiàng)C錯(cuò)誤；丁是傳代培養(yǎng)過程，該過程部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生了變化而失去貼壁黏附性，選項(xiàng)D正確。 3．(2018福建八縣一中高二期末)某研究小組對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞(甲)和正常肝細(xì)胞(乙)進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是(　　) A．在利用兩種肝組織塊制備肝細(xì)胞懸液時(shí)，也可用胃蛋白酶處理 B．細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2和95%O2的混合氣體的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行 C．為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素 D．在相同適宜條件下培養(yǎng)等量的甲、乙細(xì)胞，一段時(shí)間后，乙細(xì)胞數(shù)量比甲多 解析：選C。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2～7.4，而在這樣的環(huán)境中胃蛋白酶會(huì)變性失活，因此在利用兩種肝組織塊制備肝細(xì)胞懸液時(shí)，不可用胃蛋白酶處理，應(yīng)用胰蛋白酶處理，A錯(cuò)誤；細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2和95%空氣的混合氣體的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，B錯(cuò)誤；為了防止培養(yǎng)過程中雜菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素，C正確；甲(肝腫瘤細(xì)胞)失去接觸抑制，而乙(正常肝細(xì)胞)具有接觸抑制，因此一段時(shí)間后，甲細(xì)胞數(shù)量比乙多，D錯(cuò)誤。 4．(2018淮安高二檢測(cè))如圖所示是某動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中活細(xì)胞和死亡細(xì)胞密度統(tǒng)計(jì)結(jié)果，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　) A．實(shí)驗(yàn)中要控制胰蛋白酶溶液濃度和處理時(shí)間，以免損傷細(xì)胞 B．培養(yǎng)液中應(yīng)適當(dāng)加入青霉素、鏈霉素，以避免雜菌污染 C．曲線bc段變化的主要原因是培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物積累等 D．培養(yǎng)至第6天時(shí)，新產(chǎn)生的細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù) 解析：選D。實(shí)驗(yàn)中要控制胰蛋白酶溶液的濃度和處理時(shí)間，以免損傷細(xì)胞，A正確；培養(yǎng)液中應(yīng)適當(dāng)加入青霉素、鏈霉素等一定量的抗生素，以避免雜菌污染，B正確；曲線bc段表示活細(xì)胞密度減少，而此時(shí)間段內(nèi)死細(xì)胞密度增加，產(chǎn)生這種變化的主要原因是培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物積累等，C正確；培養(yǎng)至第6 天時(shí)，活細(xì)胞數(shù)等于死細(xì)胞數(shù)，D錯(cuò)誤。 5．下列為克隆羊“多利”的培育過程示意圖。 下列各項(xiàng)有關(guān)表述錯(cuò)誤的是(　　) A．克隆羊“多利”的主要性狀與甲羊一致，因其細(xì)胞核基因來(lái)自甲羊 B．克隆羊“多利”的培育過程中采用的生物技術(shù)有核移植和胚胎移植 C．乙羊的去核卵母細(xì)胞為重組細(xì)胞基因表達(dá)提供了細(xì)胞內(nèi)的環(huán)境條件 D．此過程說(shuō)明高度分化的動(dòng)物細(xì)胞具有全能性 解析：選D。生物的性狀主要由細(xì)胞核中的基因控制，此過程中培育成的早期胚胎需要移植到第三只羊的子宮內(nèi)完成發(fā)育過程，此實(shí)驗(yàn)只能說(shuō)明高度分化的動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性，而不能證明動(dòng)物細(xì)胞的全能性。 6．(2018泰安高二檢測(cè))某生物興趣小組對(duì)一種抗癌新藥進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，以動(dòng)物肝癌細(xì)胞為材料，測(cè)定抗癌藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞增殖的影響。請(qǐng)回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問題： (1)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為________培養(yǎng)基。通常在培養(yǎng)基中還需要加入適量________等一些天然成分。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是________________。另外，還應(yīng)該保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于________、________的環(huán)境。 (2)在細(xì)胞生長(zhǎng)過程中，當(dāng)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)到一定程度時(shí)，其生長(zhǎng)會(huì)受到抑制，這種現(xiàn)象稱為________。 (3)為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的____________。 (4)請(qǐng)你幫助興趣小組的同學(xué)分析本實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)的自變量是________________，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組除了自變量不同外，其他處理均應(yīng)該相同，這是為了遵循實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的________原則。 解析：(1)將動(dòng)物細(xì)胞所需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基，稱為合成培養(yǎng)基。由于對(duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚，因此，在使用合成培養(yǎng)基時(shí)，還要加入一些動(dòng)物血清、血漿等天然成分。細(xì)胞培養(yǎng)所需的氣體中有CO2，作用是維持培養(yǎng)液的pH。被培養(yǎng)的細(xì)胞必須處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境中，才能保證細(xì)胞正常地生長(zhǎng)增殖。(2)動(dòng)物細(xì)胞在分裂過程中有接觸抑制的現(xiàn)象。(3)抗生素能殺死培養(yǎng)基中的微生物，保證無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境。(4)要測(cè)定抗癌藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞增殖的影響，實(shí)驗(yàn)的自變量為抗癌藥物的有無(wú)，其他無(wú)關(guān)變量應(yīng)該相同，否則會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，這種設(shè)計(jì)遵循的是實(shí)驗(yàn)的單一變量原則。 答案：(1)合成　血清、血漿　維持培養(yǎng)液的pH　無(wú)菌　無(wú)毒　(2)接觸抑制　(3)抗生素 (4)是否加入抗癌藥物　單一變量 7．隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，人們可以根據(jù)需求來(lái)改造生物的性狀。如圖是利用奶牛乳汁生產(chǎn)人類血清白蛋白的圖解，據(jù)圖回答下列問題： (1)在此過程中涉及到的細(xì)胞水平現(xiàn)代生物技術(shù)手段主要有_______________________。 (2)在基因工程中，我們稱②為________，在②進(jìn)入③之前要用__________________等工具來(lái)構(gòu)建基因表達(dá)載體，能實(shí)現(xiàn)②進(jìn)入③的常用方法是______________________。 (3)圖中①一般經(jīng)________處理可以得到③，從③到④的過程中一般利用去核后未受精的卵母細(xì)胞作為受體，而不用普通的體細(xì)胞，原因是 ________________________________________________________________________。 (4)⑦是⑥的后代，那么⑦的遺傳性狀和____________最相似，原因是 ________________________________________________________________________。 如果②的數(shù)量太少，常用________來(lái)擴(kuò)增。要實(shí)現(xiàn)⑦批量生產(chǎn)人類血清白蛋白，則要求③的性染色體是______。利用該方法得到的動(dòng)物叫做_______________________。 答案：(1)核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)　(2)目的基因　限制酶、DNA連接酶和載體　顯微注射法　(3)胰蛋白酶　卵母細(xì)胞大、易操作、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)多，體細(xì)胞的細(xì)胞核在卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中才能表現(xiàn)出全能性　(4)荷斯坦奶牛　個(gè)體⑦的核遺傳物質(zhì)大部分來(lái)自荷斯坦奶牛，⑥只是為胚胎發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)和場(chǎng)所，⑦并沒有獲得⑥的遺傳信息　PCR技術(shù)　XX　轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物 [課時(shí)作業(yè)] 一、選擇題 1．(2018安徽阜陽(yáng)高二期末)下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中，正確的是(　　) A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胃蛋白酶使細(xì)胞分散 B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的主要目的是獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白 C．細(xì)胞遺傳物質(zhì)的改變發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中 D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境 解析：選D。通常將健康幼齡動(dòng)物組織用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞，將處理后的細(xì)胞初次培養(yǎng)，稱為原代培養(yǎng)。貼滿瓶壁的細(xì)胞需要重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖，這種培養(yǎng)過程即為傳代培養(yǎng)。胃蛋白酶的最適pH約為2，不適合用作細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分散細(xì)胞的酶。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)利用了細(xì)胞有絲分裂的原理，獲得大量的具有相同遺傳特性的細(xì)胞，細(xì)胞傳代培養(yǎng)至50代以后，遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充足，氣體環(huán)境、溫度、pH適宜等條件。 2．(2018南京高二檢測(cè))在將動(dòng)物組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞時(shí)，可以使用胰蛋白酶。由此不能推測(cè)出來(lái)的是(　　) A．動(dòng)物細(xì)胞之間可能依靠蛋白質(zhì)相互聯(lián)系 B．處理時(shí)一定要注意處理時(shí)間、加酶量 C．胰蛋白酶一定不會(huì)對(duì)動(dòng)物細(xì)胞造成損傷 D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的pH應(yīng)該與胰蛋白酶作用的適宜pH基本一致 解析：選C。在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，胰蛋白酶可以使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解，使細(xì)胞分散，使用時(shí)應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間，以免消化過度而造成細(xì)胞損傷。 3．(2018臨沂高二檢測(cè))在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，下列處理中不恰當(dāng)?shù)氖?　　) A．培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具要進(jìn)行無(wú)菌處理 B．提供種類齊全的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) C．提供純氧以保證細(xì)胞的呼吸作用 D．保證提供適宜的溫度和pH 解析：選C。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中要保證無(wú)菌、無(wú)毒，需要對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理，A項(xiàng)正確；培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)成分充足，以滿足細(xì)胞增殖的需要，B項(xiàng)正確；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程需要的氣體環(huán)境應(yīng)為95%的空氣和5%的CO2的混合氣體，空氣中的O2保證其代謝所用，CO2維持培養(yǎng)液的pH，C項(xiàng)錯(cuò)誤；細(xì)胞體外培養(yǎng)需要適宜溫度和pH，其中溫度一般與動(dòng)物體溫接近，D項(xiàng)正確。 4．(2018河南南陽(yáng)高二期中)下列關(guān)于動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的敘述，不正確的是(　　) A．用核移植技術(shù)得到克隆動(dòng)物的過程體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性 B．動(dòng)物體細(xì)胞核移植過程中用到了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞融合技術(shù) C．用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞 D．用動(dòng)物體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物是對(duì)核供體動(dòng)物進(jìn)行100%的復(fù)制 解析：選D。用核移植技術(shù)得到克隆動(dòng)物的過程體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性，A正確；動(dòng)物體細(xì)胞核移植過程中用到了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞融合技術(shù)，B正確；傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞能夠保持正常的二倍體核型，遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變，故一般都選傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞用作核移植的供體細(xì)胞，C正確；通過動(dòng)物體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的重組細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)主要來(lái)自卵母細(xì)胞，故用動(dòng)物體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物不是對(duì)核供體動(dòng)物進(jìn)行100%的復(fù)制，D錯(cuò)誤。 5．(2018鹽城高二檢測(cè))人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞在特定誘導(dǎo)條件下，可分化為脂肪、肝、神經(jīng)等多種組織細(xì)胞。下圖表示培養(yǎng)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的大致過程。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　) A．人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞屬于專能干細(xì)胞 B．通過離心除去上清液可以除去胰蛋白酶 C．過程①通常用胰蛋白酶處理 D．出現(xiàn)接觸抑制前，培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞數(shù)量有可能呈“J”型增長(zhǎng) 解析：選A。根據(jù)題意可知，人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞可以分化為脂肪、肝、神經(jīng)等多種組織細(xì)胞，故屬于多能干細(xì)胞，A錯(cuò)誤；離心后細(xì)胞沉淀在底層，胰蛋白酶在上清液中，B正確；將剪碎的人臍帶組織塊用胰蛋白酶分散成單個(gè)細(xì)胞，C正確；出現(xiàn)接觸抑制之前，細(xì)胞數(shù)量的增長(zhǎng)可能接近“J”型，D正確。 6．下列哪一項(xiàng)不屬于克隆(　　) A．利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 B．利用核移植技術(shù)培育出克隆綿羊 C．利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育出雜種植株 D．利用胡蘿卜莖尖組織經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到脫毒苗 解析：選C。克隆是指從一共同的祖先，通過無(wú)性繁殖的方法產(chǎn)生出來(lái)的遺傳特性相同的DNA分子、細(xì)胞或個(gè)體。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因?qū)儆诜肿铀降目寺?；利用核移植技術(shù)培育出克隆綿羊?qū)儆趥€(gè)體水平的克?。焕弥参矬w細(xì)胞雜交技術(shù)培育出雜種植物產(chǎn)生的不是復(fù)制品，不屬于克??；利用植物組織培養(yǎng)獲得脫毒苗，屬于個(gè)體水平的克隆。 7．(2018啟東高二檢測(cè))從母羊甲的體細(xì)胞中取出細(xì)胞核，移植入母羊乙的去核卵母細(xì)胞中，融合后的細(xì)胞經(jīng)卵裂形成早期胚胎，再植入另一只母羊丙的子宮內(nèi)，下列有關(guān)說(shuō)法正確的是(　　) A．生出小羊的性狀與甲羊完全相同 B．一般來(lái)說(shuō)生出小羊的核基因型與甲羊完全相同 C．生出小羊的遺傳物質(zhì)由甲、乙雙親共同決定，所以該過程為有性生殖 D．生出小羊的性狀由甲、乙、丙3個(gè)親本的基因型與環(huán)境共同決定 解析：選B。核移植獲得克隆動(dòng)物的生殖方式是無(wú)性生殖，遺傳物質(zhì)中甲羊的和乙羊的都有，因此認(rèn)為生出的小羊性狀完全同甲羊是不正確的，應(yīng)是主要性狀與甲羊相同，核基因型一般與甲羊完全相同，因此B項(xiàng)正確。 8．(2018河北涿鹿中學(xué)高二期中)如圖是某克隆羊培育過程模式圖，試分析獲得該克隆羊的生殖方式、該克隆羊的基因型以及該克隆羊發(fā)育成熟時(shí)所分泌的性激素依次是(　　) A．無(wú)性生殖、Aa、雌性激素 B．無(wú)性生殖、aa、雄性激素 C．有性生殖、aa、雄性激素 D．有性生殖、AA、雌性激素 解析：選B。克隆羊是利用了細(xì)胞核移植技術(shù)，其生殖方式為無(wú)性生殖；該克隆羊繼承了B羊的全部的細(xì)胞核基因和A羊的細(xì)胞質(zhì)基因，因此其基因型為aa；由于B羊?yàn)樾坌?，因此該克隆羊亦為雄性，故該克隆羊發(fā)育成熟時(shí)所分泌的性激素是雄性激素。 9．(2018福建季延中學(xué)高二期末)隨著生物技術(shù)的迅速發(fā)展，已滅絕生物的“復(fù)活”將不再是神話。如果世界上最后一只野驢剛剛死亡，下列“復(fù)活”野驢的方法中，最可行的是(　　) A．將野驢的體細(xì)胞取出，利用組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)脫分化、再分化，培育成新個(gè)體 B．取出野驢的體細(xì)胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)培育成新個(gè)體 C．取出野驢的體細(xì)胞核移植到家驢的去核卵母細(xì)胞中，經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個(gè)體 D．將野驢的基因?qū)爰殷H的受精卵中，培育成新個(gè)體 解析：選C。動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到限制，因此動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不能形成新個(gè)體，A錯(cuò)誤；動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)還不能形成新的動(dòng)物個(gè)體，況且細(xì)胞融合后會(huì)導(dǎo)致遺傳物質(zhì)加倍，B錯(cuò)誤；將野驢的體細(xì)胞核移植到雌性家驢的去核卵母細(xì)胞中，可以克隆形成野驢，C正確；將野驢的基因?qū)爰殷H的受精卵中，屬于基因工程，可培育出新性狀的家驢，D錯(cuò)誤。 10．如圖所示為人類治療性克隆的大概過程，以下說(shuō)法正確的是(　　) A．治療性克隆的過程中涉及轉(zhuǎn)基因、核移植、細(xì)胞培養(yǎng)等現(xiàn)代生物技術(shù) B．治療性克隆的結(jié)果說(shuō)明動(dòng)物細(xì)胞具有全能性 C．治療性克隆的過程中有細(xì)胞的分裂和分化 D．治療性克隆的器官在移植方面的主要優(yōu)點(diǎn)是其遺傳物質(zhì)與患者完全相同，沒有免疫排斥反應(yīng) 解析：選C。治療性克隆主要涉及核移植、細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)，不涉及轉(zhuǎn)基因技術(shù)；沒有新個(gè)體的產(chǎn)生不能說(shuō)明動(dòng)物細(xì)胞具有全能性；治療性克隆的器官中遺傳物質(zhì)和患者不完全相同，去核卵母細(xì)胞中也有部分遺傳物質(zhì)；形成器官的克隆過程會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞的分裂和分化。 二、非選擇題 11．如圖表示動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)流程圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題： ①取動(dòng)物組織塊 ↓ ②______________ ↓ ③處理組織分散成單個(gè)細(xì)胞 ↓ ④制成____________ ↓ ⑤轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng) ↓ ⑥處理貼壁細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，制成________ ↓ ⑦轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng) (1)過程②表示________________________。 (2)過程③和⑥用________________________處理組織或貼壁細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，這樣做的目的是_______________________________________________________________。 (3)④和⑥的過程都要把分散的細(xì)胞制成_______________________________。 (4)過程⑤進(jìn)行的細(xì)胞培養(yǎng)是________，細(xì)胞適于________生長(zhǎng)增殖。 (5)過程⑦進(jìn)行的細(xì)胞培養(yǎng)是________，一般傳至________代后就不易傳下去了，傳至________繼續(xù)培養(yǎng)時(shí)，增殖會(huì)逐漸緩慢，以至于完全停止，部分細(xì)胞的______會(huì)發(fā)生改變。繼續(xù)培養(yǎng)時(shí)，少部分細(xì)胞發(fā)生了______，朝著等同于________的方向發(fā)展。 解析：進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先將組織塊剪碎，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使其分散成許多單個(gè)細(xì)胞，然后，用培養(yǎng)液將分散的細(xì)胞稀釋制成細(xì)胞懸液，再將細(xì)胞懸液放入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)。懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。以后，細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，數(shù)目不斷增多。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。人們通常將動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。貼滿瓶壁的細(xì)胞需要重新用胰蛋白酶等處理，然后分別繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖，這樣的培養(yǎng)過程通常被稱為傳代培養(yǎng)。 答案：(1)剪碎組織　(2)胰蛋白酶　解除由于接觸對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的抑制　(3)細(xì)胞懸液　(4)原代培養(yǎng)　貼壁　(5)傳代培養(yǎng)　10　10～50代 　細(xì)胞核型　突變　癌細(xì)胞 12．(2016高考全國(guó)卷Ⅱ節(jié)選)如圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物(二倍體)的流程。 回答下列問題： (1)圖中A表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為____________。過程①表示去除細(xì)胞核，該過程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行，去核時(shí)常采用________的方法。②代表的過程是__________。 (2)經(jīng)過多次傳代后，供體細(xì)胞中__________________的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此，選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。 (3)若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是 ________________________________________________________________________。 (4)與克隆羊“多莉(利)”培育成功一樣，其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了________________________________________________________________________。 解析：(1)核移植過程中，供體的體細(xì)胞中性染色體組成可為XX或XY；去核時(shí)常采用顯微操作的方法；圖示②過程表示胚胎移植。(2)細(xì)胞培養(yǎng)過程中，經(jīng)過多次傳代培養(yǎng)，細(xì)胞中遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性會(huì)降低。(3)由于卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響，所以克隆動(dòng)物與供體性狀不完全相同。(4)克隆動(dòng)物的成功獲得證明了已分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。 答案：(1)XX或XY　顯微操作　胚胎移植 (2)遺傳物質(zhì)　(3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響　(4)動(dòng)物已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性 13．(2018濟(jì)南高二檢測(cè))華南虎是原產(chǎn)中國(guó)的老虎品種，已有近30年沒有野生華南虎出現(xiàn)的報(bào)告，野生華南虎也被一些專家認(rèn)為已經(jīng)瀕臨滅絕?？茖W(xué)工作者嘗試用普通老虎完成體細(xì)胞克隆華南虎的研究，下圖是其培育過程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題： (1)克隆華南虎的遺傳性狀與________(填字母)虎基本一致。 (2)A、B、C 3只虎哪一只沒有提供遺傳物質(zhì)？______。 (3)克隆華南虎的過程是否遵循孟德爾的遺傳定律？為什么？ ________________________________________________________________________。 (4)有人設(shè)想將虎的體細(xì)胞與牛的體細(xì)胞進(jìn)行融合，以獲得新物種“虎—?！?，你認(rèn)為依據(jù)目前的生物技術(shù)和理論能否實(shí)現(xiàn)這一愿望？________。原因是___________________。 解析：(1)由克隆華南虎的過程可知，華南虎A提供細(xì)胞核，普通虎B提供細(xì)胞質(zhì)，所以克隆虎D的遺傳性狀與供核的A更接近，即相當(dāng)于克隆了A。(2)老虎C只提供胚胎發(fā)育的場(chǎng)所，沒有提供遺傳物質(zhì)給D。(3)核移植過程沒有經(jīng)過兩性生殖細(xì)胞的結(jié)合，屬于無(wú)性生殖，沒有減數(shù)分裂方式的出現(xiàn)，不遵循孟德爾遺傳定律。(4)高度分化的動(dòng)物細(xì)胞全能性受到限制，因此無(wú)論是高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞，還是不同種動(dòng)物體細(xì)胞融合后的雜交細(xì)胞，經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)只會(huì)發(fā)生細(xì)胞增殖，不會(huì)發(fā)生細(xì)胞分化，形成不了個(gè)體，動(dòng)物體細(xì)胞的全能性無(wú)法體現(xiàn)。 答案：(1)A　(2)老虎C　(3)不遵循。克隆屬于無(wú)性生殖，而孟德爾的遺傳定律僅在有性生殖的減數(shù)分裂過程中起作用　(4)不能　高度分化的動(dòng)物細(xì)胞全能性受到限制，虎和牛體細(xì)胞雜交后得到的雜交細(xì)胞不能正常發(fā)育成完整個(gè)體 14．我國(guó)首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的種豬場(chǎng)自然分娩產(chǎn)出，這標(biāo)志著我國(guó)在轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)領(lǐng)域已達(dá)到世界領(lǐng)先水平。下圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題： (1)一個(gè)完整的基因表達(dá)載體除了帶有綠色熒光蛋白基因以外，還必須含有復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子和______________。啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，它是______________酶識(shí)別和結(jié)合的部位；而起始密碼子的化學(xué)本質(zhì)則是____________(填“DNA”或“RNA”)。 (2)過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞后，要通過DNA分子雜交技術(shù)，來(lái)檢測(cè)綠色熒光蛋白基因是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的___________________上。 (3)從豬中取胎兒成纖維細(xì)胞，用__________________處理，然后進(jìn)行分散培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)，將培養(yǎng)瓶置于含一定量CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，CO2的作用是________________________。 (4)過程④表示通過顯微操作法吸出卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核，微型吸管除了將細(xì)胞核吸出外，往往將________________________一并吸出。 (5)本實(shí)驗(yàn)所用到的現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)有______________________(填字母)。 A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) B．胚胎移植 C．胚胎細(xì)胞核移植 D．DNA重組技術(shù) 答案：(1)標(biāo)記基因　RNA聚合　RNA (2)染色體DNA (3)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)　維持培養(yǎng)液的pH (4)第一極體　(5)ABD