2018-2019學(xué)年高中生物 第3章 細(xì)胞工程 第2節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞工程 第1課時(shí) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與單克隆抗體技術(shù)學(xué)案 北師大版選修3.docx

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第1課時(shí)　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與單克隆抗體技術(shù) [目標(biāo)導(dǎo)讀]　1.結(jié)合教材P53～55圖文，掌握哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件和流程。2.分析教材P55圖3－14，理解動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。3.單克隆抗體的制備過(guò)程。 [重難點(diǎn)擊]　1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件和流程。2.單克隆抗體的制備過(guò)程。 1970年，有兩位科學(xué)家做了人—鼠細(xì)胞融合的實(shí)驗(yàn)，以證明細(xì)胞膜的流動(dòng)性。思考該如何實(shí)現(xiàn)人—鼠細(xì)胞的融合，動(dòng)物細(xì)胞融合后還有什么用途呢？植物體細(xì)胞雜交可得到雜種植株，動(dòng)物細(xì)胞融合后能像電影上一樣形成雜種動(dòng)物個(gè)體嗎？ 一、哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件 (1)培養(yǎng)基狀態(tài)和成分：液體培養(yǎng)基，成分主要包括葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。 特別提醒　動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)通常要添加動(dòng)物血清的原因有兩點(diǎn)：一是補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中不足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；二是為動(dòng)物細(xì)胞提供與內(nèi)環(huán)境相似的生活環(huán)境。 (2)氣體環(huán)境：需要足夠的氧氣和一定的二氧化碳。二氧化碳具有調(diào)節(jié)培養(yǎng)液pH的作用。 (3)溫度和pH：培養(yǎng)溫度要與動(dòng)物體內(nèi)溫度保持一致；培養(yǎng)基的適宜pH為7.2～7.4。 2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)流程 (1)取材：取動(dòng)物的胚胎或幼齡動(dòng)物的組織或器官剪碎，加入適量胰蛋白酶或膠原纖維酶使細(xì)胞分散。 (2)原代培養(yǎng)：經(jīng)過(guò)濾、離心后將動(dòng)物細(xì)胞接種到無(wú)菌的培養(yǎng)液中，在適宜的條件下進(jìn)行靜止或慢速轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)，稱為原代培養(yǎng)。 ①貼壁生長(zhǎng)：懸液的細(xì)胞貼附在培養(yǎng)瓶的表面，開(kāi)始有絲分裂，其數(shù)目以指數(shù)增長(zhǎng)的方式增多。 ②接觸抑制：當(dāng)細(xì)胞鋪滿培養(yǎng)瓶的整個(gè)表面后，就形成致密的單層細(xì)胞層，此時(shí)細(xì)胞分裂停止，不再繼續(xù)生長(zhǎng)。 (3)傳代培養(yǎng)：貼滿瓶壁的細(xì)胞需要重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞增殖，即為傳代培養(yǎng)。 ①細(xì)胞生長(zhǎng)到10代左右時(shí)，出現(xiàn)生長(zhǎng)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡。 ②極少部分細(xì)胞可以傳到40～50代，遺傳物質(zhì)沒(méi)有(填“有”或“沒(méi)有”)發(fā)生改變。 ③有些細(xì)胞(如腫瘤細(xì)胞)遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，可以無(wú)限制的傳代下去。 結(jié)合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程分析下列問(wèn)題： 1.為什么要取動(dòng)物的胚胎或幼齡動(dòng)物的組織或器官細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)？ 答案　這類細(xì)胞具有較強(qiáng)的分裂能力，容易培養(yǎng)。 2.培養(yǎng)過(guò)程中兩次使用胰蛋白酶，目的有何不同？ 答案　第一次是將組織分散成單個(gè)細(xì)胞，第二次是將貼滿瓶壁的細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞。 3.能用胃蛋白酶代替胰蛋白酶嗎？ 答案　胃蛋白酶作用的適宜pH約為2，多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2～7.4，胃蛋白酶在此環(huán)境中沒(méi)有活性。 4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)為什么需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境？ 答案　離體培養(yǎng)的細(xì)胞已失去了對(duì)微生物和有毒物質(zhì)的防御能力，一旦受到污染或自身代謝物質(zhì)積累等，培養(yǎng)的細(xì)胞就會(huì)死亡。 1.下列說(shuō)法正確的是(　　) A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物組織培養(yǎng)無(wú)任何聯(lián)系 B.在細(xì)胞培養(yǎng)中，有原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)之分 C.原代培養(yǎng)比傳代培養(yǎng)進(jìn)行得晚 D.在對(duì)動(dòng)物成纖維細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需用纖維素酶將細(xì)胞分散開(kāi) 答案　B 解析　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物組織培養(yǎng)之間相互依存；原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)都屬于細(xì)胞培養(yǎng)，且傳代培養(yǎng)較晚；纖維素酶是分解纖維素的，而動(dòng)物細(xì)胞之間的連接物質(zhì)的成分主要為蛋白質(zhì)，應(yīng)用胰蛋白酶使細(xì)胞分散開(kāi)。 2.下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較中，敘述錯(cuò)誤的是(　　) A.所用的培養(yǎng)基的成分基本相同 B.植物組織培養(yǎng)的結(jié)果是培育成植株，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是培育成很多細(xì)胞 C.植物組織培養(yǎng)的目的是為了快速繁殖和獲得無(wú)病毒的植株，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是為了獲得細(xì)胞產(chǎn)物或雜交細(xì)胞 D.植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的增殖 答案　A 解析　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常含有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，另外還有動(dòng)物血清等。植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基包含植物生長(zhǎng)和發(fā)育的全部營(yíng)養(yǎng)成分，如礦質(zhì)元素、有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分、植物激素，但沒(méi)有動(dòng)物血清。 題后歸納　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較 比較項(xiàng)目 植物組織培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 生物學(xué)原理 植物細(xì)胞的全能性 細(xì)胞增殖 培養(yǎng)基性質(zhì) 固體 液體 培養(yǎng)基成分 蔗糖、氨基酸、水、礦物質(zhì)、生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、瓊脂等 葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、水、動(dòng)物血清等 培養(yǎng)條件 無(wú)菌、適宜的溫度和pH 取材 植物器官、組織或細(xì)胞 動(dòng)物胚胎、幼齡動(dòng)物的組織或器官 過(guò)程 脫分化、再分化 原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng) 培養(yǎng)結(jié)果 植株或組織 細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物 二、動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體技術(shù) 1.細(xì)胞融合 (1)概念：在一些融合因子的作用下，將兩個(gè)或兩個(gè)以上的細(xì)胞合并成為一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。 (2)融合方法 ①物理、化學(xué)方法：與植物體細(xì)胞雜交相同，如聚乙二醇、電流刺激等。 ②生物方法：滅活的病毒。 2.單克隆抗體 (1)定義：由一個(gè)B淋巴細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群所產(chǎn)生的單一型抗體分子。 (2)制備過(guò)程 ①取小鼠體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞和營(yíng)養(yǎng)缺陷型的骨髓瘤細(xì)胞。 ②用聚乙二醇誘導(dǎo)兩種細(xì)胞融合。 ③利用選擇性培養(yǎng)液篩選出雜交瘤細(xì)胞。 ④在新的培養(yǎng)液中大量繁殖。 ⑤注射到小鼠體內(nèi)培養(yǎng)或者在培養(yǎng)液中懸浮培養(yǎng)獲得單克隆抗體。 (3)功能 ①診斷試劑：快捷、準(zhǔn)確地診斷和治療一些疾病。 ②“生物導(dǎo)彈”：?jiǎn)慰寺】贵w攜帶抗癌藥物，專一地殺死腫瘤細(xì)胞。 完善單克隆抗體制備過(guò)程，思考下列問(wèn)題： 1.為什么要對(duì)小鼠注射抗原？ 答案　以獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)。 2.制備單克隆抗體時(shí)，為什么要選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞？ 答案　每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體，但不能無(wú)限增殖；骨髓瘤細(xì)胞可大量快速增殖，卻不能產(chǎn)生抗體。若將這兩種細(xì)胞融合在一起，既能分泌大量特異性抗體又能快速增殖。 3.B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)聚乙二醇處理后，培養(yǎng)液中存在哪幾種細(xì)胞？ 答案　未融合的B淋巴細(xì)胞、未融合的骨髓瘤細(xì)胞、B－B融合細(xì)胞、瘤－瘤融合細(xì)胞、B－瘤融合細(xì)胞。 3.用動(dòng)物細(xì)胞工程獲得單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟錯(cuò)誤的是(　　) A.將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞 B.用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞 C.用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合 D.篩選雜交瘤細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體 答案　B 解析　單克隆抗體的制備過(guò)程是：將一種抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞，然后將B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞同時(shí)培養(yǎng)，在聚乙二醇的誘導(dǎo)下，促使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，得到雜交瘤細(xì)胞。從中選出能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞群，即可得到單克隆抗體。因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞無(wú)細(xì)胞壁，所以在細(xì)胞融合過(guò)程中不需要使用纖維素酶處理。 4.下列對(duì)植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較，描述正確的是(　　) A.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同，誘導(dǎo)融合的方法也完全相同 B.兩者都可以跨越種屬間的生殖隔離，突破有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能 C.利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來(lái)的雜交瘤技術(shù)，為試管嬰兒的誕生開(kāi)辟了新途徑 D.目前科學(xué)家終于實(shí)現(xiàn)了兩個(gè)植物物種間的體細(xì)胞雜交，得到了同時(shí)具有兩個(gè)物種遺傳物質(zhì)的超級(jí)植物，并使它們的性狀全部得以體現(xiàn) 答案　B 解析　動(dòng)物細(xì)胞融合可用滅活的病毒誘導(dǎo)，而植物原生質(zhì)體是不能的；雜交瘤技術(shù)是細(xì)胞工程技術(shù)，而試管嬰兒則是胚胎工程內(nèi)容；生物性狀的體現(xiàn)是基因型與環(huán)境共同作用的結(jié)果，“超級(jí)植物”具有兩個(gè)親本的遺傳物質(zhì)，但性狀不一定能全部表達(dá)。 題后歸納　動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較 植物體細(xì)胞雜交 動(dòng)物細(xì)胞融合 原理 細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 過(guò)程 細(xì)胞A、B 　 ↓去壁 原生質(zhì)體A、B ↓融合 融合的原生質(zhì)體 ↓ 雜種細(xì)胞 ↓植物組織培養(yǎng) 雜種植株 細(xì)胞A、B ↓融合 雜交細(xì)胞 ↓有絲分裂 多個(gè)相同雜交細(xì)胞 相關(guān)酶 纖維素酶和果膠酶 胰蛋白酶或膠原纖維酶 融合方法 物理法：離心、電流刺激、振動(dòng)；化學(xué)法：聚乙二醇等試劑誘導(dǎo) 除物理法和化學(xué)法外還可以用滅活的病毒誘導(dǎo) 結(jié)果 雜種植株 雜交細(xì)胞 用途或意義 克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，獲得雜種植株 培育雜交細(xì)胞或大量獲得細(xì)胞產(chǎn)物 1.進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，最好選用的培養(yǎng)材料是(　　) A.衰老退化的動(dòng)物組織細(xì)胞 B.成熟動(dòng)物個(gè)體的體細(xì)胞 C.動(dòng)物的卵細(xì)胞 D.健康動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物個(gè)體的體細(xì)胞 答案　D 解析　在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，用的是健康動(dòng)物的胚胎或幼齡動(dòng)物的組織或器官，這類細(xì)胞有旺盛的分裂能力。 2.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A.用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動(dòng)物的組織或器官 B.將所取的組織先用胰蛋白酶等進(jìn)行處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞 C.在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離，制成細(xì)胞懸液 D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能傳50代左右，所培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)全部衰老死亡 答案　D 3.關(guān)于單克隆抗體的生產(chǎn)和應(yīng)用，錯(cuò)誤的是(　　) A.對(duì)小動(dòng)物注射特定抗原以獲取所需的B淋巴細(xì)胞 B.融合并篩選特定的雜交瘤細(xì)胞，原代培養(yǎng)發(fā)生遺傳物質(zhì)改變后才能進(jìn)行傳代培養(yǎng) C.特定的單克隆抗體可制成試劑，用于檢測(cè)人體是否受某種抗原的感染 D.治療癌癥的“生物導(dǎo)彈”原理之一是利用單克隆抗體的特異性識(shí)別癌細(xì)胞 答案　B 4.利用細(xì)胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是(　　) A.用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體 B.體外培養(yǎng)單個(gè)B淋巴細(xì)胞可以獲得大量針對(duì)SARS病毒的單克隆抗體 C.將等量B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞不一定為雜交瘤細(xì)胞 D.利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法不能診斷出SARS病毒感染者 答案　C 5.回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問(wèn)題： (1)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面____________________時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的__________________。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是______________________________。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)，需要用酶處理，可用的酶是____________________________。 (2)隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)________________的現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成 ____________細(xì)胞，該種細(xì)胞的黏著性______________，細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)(糖蛋白)的量______________。 (3)在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，通常在____________條件下保存細(xì)胞。因?yàn)樵谶@種條件下，細(xì)胞中__________的活性降低，細(xì)胞____________的速率降低。 答案　(1)相互接觸　接觸抑制　單層(或一層)　胰蛋白酶(或膠原纖維酶) (2)衰老甚至死亡　不死性　降低　減少 (3)低溫　酶　新陳代謝 [基礎(chǔ)過(guò)關(guān)] 1.20世紀(jì)30年代，科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核、天花、水痘和麻疹等疾病患者的病理組織中存在多核細(xì)胞，這些多核細(xì)胞最可能的來(lái)源是(　　) A.細(xì)胞進(jìn)行無(wú)絲分裂形成的 B.細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂時(shí)，染色體復(fù)制后沒(méi)有分開(kāi)形成兩個(gè)子細(xì)胞 C.有絲分裂時(shí)，細(xì)胞核進(jìn)行了分裂，而細(xì)胞質(zhì)沒(méi)有進(jìn)行分裂 D.細(xì)胞在體內(nèi)病毒的作用下發(fā)生了融合 答案　D 解析　選項(xiàng)C、D都可形成多核細(xì)胞，但結(jié)合題干信息，此種現(xiàn)象與感染病毒有關(guān)，故選項(xiàng)D最有可能。 2.在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，屬于原代培養(yǎng)的是(　　) A.用胰蛋白酶使組織分散成單個(gè)細(xì)胞的過(guò)程 B.從機(jī)體取得細(xì)胞后立即進(jìn)行培養(yǎng)的過(guò)程 C.出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象后取下的細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程 D.哺乳動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)基中的懸浮生長(zhǎng)過(guò)程 答案　B 解析　原代培養(yǎng)是指從動(dòng)物機(jī)體組織取得細(xì)胞后的立即培養(yǎng)，直到細(xì)胞出現(xiàn)接觸抑制為止。因?yàn)榧?xì)胞的接觸抑制，細(xì)胞停止分裂增殖，并逐漸走向衰亡，所以要想繼續(xù)細(xì)胞培養(yǎng)，必須將細(xì)胞取下分裝后才能進(jìn)行，分裝后的細(xì)胞培養(yǎng)是傳代培養(yǎng)。 3.一般來(lái)說(shuō)，動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件(　　) ①無(wú)毒的環(huán)境?、跓o(wú)菌的環(huán)境　③合成培養(yǎng)基需加血清④溫度與動(dòng)物的體溫相近?、菪枰狾2，也需要CO2 ⑥適宜的pH A.①②③④⑤⑥ B.①②③④ C.①②④⑤⑥ D.①②③④⑥ 答案　A 解析　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境；一定的營(yíng)養(yǎng)；一般與動(dòng)物相近的體溫和適宜的pH以及氣體環(huán)境等。 4.科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體。與骨髓瘤細(xì)胞融合的是(　　) A.經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞 B.不經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞 C.經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞 D.不經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞 答案　A 解析　單克隆抗體的產(chǎn)生是利用了細(xì)胞工程中的細(xì)胞融合技術(shù)。小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，在體外培養(yǎng)的條件下無(wú)限繁殖，產(chǎn)生特異性的單一抗體。 5.單克隆抗體在疾病的診斷、治療和預(yù)防方面與常規(guī)抗體相比，其特點(diǎn)是(　　) A.單克隆抗體特異性強(qiáng)、純度低、靈敏度高、產(chǎn)量高 B.單克隆抗體特異性強(qiáng)、純度高、靈敏度低、產(chǎn)量高 C.單克隆抗體特異性強(qiáng)、純度高、靈敏度高、產(chǎn)量低 D.單克隆抗體特異性強(qiáng)、純度高、靈敏度高、產(chǎn)量高 答案　D 解析　單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，特異性強(qiáng)、靈敏度高、純度高、產(chǎn)量高。 6.用單克隆抗體研制而成的“生物導(dǎo)彈”由兩部分組成，一是“瞄準(zhǔn)裝置”，二是殺傷性“彈頭”。下列對(duì)此敘述不正確的是(　　) A.“瞄準(zhǔn)裝置”是識(shí)別腫瘤的單克隆抗體 B.“彈頭”具有選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞的功能 C.“彈頭”由放射性同位素、化學(xué)藥物等物質(zhì)構(gòu)成 D.“生物導(dǎo)彈”的制備利用了細(xì)胞工程技術(shù) 答案　B 解析　“生物導(dǎo)彈”由單克隆抗體和殺傷腫瘤細(xì)胞的藥物組成，所運(yùn)用的原理就是單克隆抗體特異性地識(shí)別腫瘤細(xì)胞并與之結(jié)合，從而使其攜帶的藥物直接殺傷腫瘤細(xì)胞，所以“瞄準(zhǔn)裝置”是單克隆抗體，“彈頭”是單克隆抗體攜帶的藥物，它不具有選擇性。 [能力提升] 7.動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)，通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對(duì)正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。從該圖提供的信息不能獲得的結(jié)論是(　　) A.正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同 B.有無(wú)血清對(duì)正常細(xì)胞培養(yǎng)的影響不同 C.培養(yǎng)基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng) D.培養(yǎng)基中是否補(bǔ)充血清對(duì)癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大 答案　A 8.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是(　　) A.要進(jìn)行藥物測(cè)試的實(shí)驗(yàn)研究，最好選擇傳代培養(yǎng)的細(xì)胞 B.克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過(guò)程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變 C.二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無(wú)限的 D.惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng) 答案　D 解析　原代培養(yǎng)的細(xì)胞最接近于體內(nèi)組織或細(xì)胞的生長(zhǎng)特性，很適合用于藥物測(cè)試、基因表達(dá)等實(shí)驗(yàn)研究。培養(yǎng)過(guò)程中，僅有極少數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變。二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)一般傳至10代后就不易傳下去了。惡性細(xì)胞系的細(xì)胞具有不死性，可以進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 9.將基因型為Aa和基因型為Bb的動(dòng)物體細(xì)胞混合，用滅活的仙臺(tái)病毒處理后，不可能獲得下列哪種基因型的細(xì)胞(　　) A.AAaa B.AaBb C.Aabb D.BBbb 答案　C 解析　基因型為Aa和基因型為Bb的動(dòng)物體細(xì)胞融合，它們之間可以自由融合，即Aa和Aa、Aa和Bb、Bb和Bb，可產(chǎn)生AAaa、AaBb、BBbb三種基因型的細(xì)胞。 10.下列是應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟，其中對(duì)單克隆抗體制備的相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　) ①?gòu)幕脊撬枇龅男∈篌w內(nèi)獲取骨髓瘤細(xì)胞 ②將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細(xì)胞 ③將雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng) ④篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細(xì)胞 ⑤利用選擇性培養(yǎng)液篩選出雜交瘤細(xì)胞 ⑥從小鼠腹水中提取抗體 ⑦利用促細(xì)胞融合因子促使細(xì)胞融合 A.實(shí)驗(yàn)順序應(yīng)該是①②⑦⑤④③⑥ B.③過(guò)程產(chǎn)生多個(gè)雜交瘤細(xì)胞的過(guò)程稱為克隆 C.⑦過(guò)程獲得的細(xì)胞均可無(wú)限增殖 D.利用細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體過(guò)程中通常要經(jīng)過(guò)兩次篩選 答案　C 解析　在細(xì)胞融合過(guò)程中，如果只考慮兩兩細(xì)胞的融合，有骨髓瘤細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合、B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合、B淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的融合，并不是所有融合細(xì)胞都能無(wú)限增殖。 11.如圖是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題： (1)容器A中放置的是動(dòng)物器官或組織，它一般取自_____________________________ ________________________________________________________________________。 (2)容器A中的動(dòng)物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是______________，然后用________酶處理，這是為了使細(xì)胞分散開(kāi)，這樣做的目的是___________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)培養(yǎng)首先在B瓶中進(jìn)行，瓶中的培養(yǎng)基成分有______________________________等。 (4)為了把B瓶中的細(xì)胞分散到C瓶中，用____________處理，然后配制成__________________，再分裝。 (5)在C瓶中正常培養(yǎng)一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞全部死亡。原因是_____________________ ___________________________________________________。 答案　(1)胚胎或幼齡動(dòng)物 (2)剪碎　胰蛋白(或膠原纖維)　使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸 (3)葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽和動(dòng)物血清 (4)胰蛋白酶(或膠原纖維酶)　細(xì)胞懸液 (5)細(xì)胞一般可傳到40～50代，若沒(méi)有發(fā)生遺傳信息改變，繼續(xù)培養(yǎng)將出現(xiàn)死亡危機(jī) 12.如圖表示單克隆抗體的制備過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題： (1)據(jù)圖可知，________________技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)，而________技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。 (2)圖中過(guò)程①常用的誘導(dǎo)因素是__________________，過(guò)程②常在________培養(yǎng)基中完成。 (3)A細(xì)胞為_(kāi)_______細(xì)胞，其特點(diǎn)是_______________________________。 (4)合成的單克隆抗體最終可以從________和________中提取。 答案　(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)　細(xì)胞融合　(2)滅活的病毒(或聚乙二醇)　選擇性　(3)雜交瘤　既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一抗體　(4)培養(yǎng)液　小鼠腹水 解析　(1)動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。(2)過(guò)程①中誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法很多，常用的主要有生物法(如用滅活的病毒)、化學(xué)法(如用聚乙二醇)、物理法(如電激等)。過(guò)程②是單克隆抗體技術(shù)的篩選過(guò)程，是在特定的選擇性培養(yǎng)基上進(jìn)行的。(3)A細(xì)胞為雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞具有既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一抗體的特點(diǎn)。(4)雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)一般有體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)兩種方式，體外培養(yǎng)是在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)后從培養(yǎng)液中提取單克隆抗體；體內(nèi)培養(yǎng)是在小鼠腹腔中培養(yǎng)，培養(yǎng)后從小鼠腹水中提取單克隆抗體。 13.如圖為細(xì)胞融合過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題： (1)若A、B是植物細(xì)胞，將其融合形成的D細(xì)胞培養(yǎng)成植株，還要應(yīng)用__________________技術(shù)。 (2)若A、B是動(dòng)物細(xì)胞，則一般取自______________或幼齡動(dòng)物的器官、組織，然后用胰蛋白酶使其分散開(kāi)來(lái)。A、B到C的過(guò)程中，常用的不同于植物細(xì)胞工程的方法是用__________________誘導(dǎo)細(xì)胞融合。 (3)從A、B到C的過(guò)程中，可形成______________種類型的C細(xì)胞(僅考慮兩個(gè)細(xì)胞間的融合)。若該過(guò)程用于制備單克隆抗體，應(yīng)篩選出符合要求的D細(xì)胞，方法是用特定的______________培養(yǎng)液培養(yǎng)，篩選出的D細(xì)胞稱為_(kāi)_________________。常用的培養(yǎng)方法有體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)兩種，前者是在______________培養(yǎng)基中培養(yǎng)，后者是在______________內(nèi)增殖。 答案　(1)植物組織培養(yǎng)　(2)胚胎　滅活的病毒 (3)3　選擇性　雜交瘤細(xì)胞　液體　動(dòng)物的腹腔 [真題體驗(yàn)] 14.(2014新課標(biāo)Ⅰ，40)某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果如圖所示。 若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目為40條)，并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目為60條)按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。 回答下列問(wèn)題： (1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16 000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)____________次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是____________小鼠，理由是__________________ ________________________________________________________________________。 (2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有____________________________________________________________________，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是_________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)雜交瘤細(xì)胞中有__________個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是__________條。 (4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是___________________ ________________________________________________________________________。 答案　(1)四　Y　Y小鼠的血清抗體效價(jià)最高　(2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞　細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%　(3)1　200　(4)①B淋巴細(xì)胞高度分化，不能惡性增殖；②不可能渡過(guò)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)過(guò)程中的兩次危機(jī) 解析　(1)據(jù)圖分析可知，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價(jià)幾乎都達(dá)到16 000以上，小鼠Y的血清抗體效價(jià)最高，最適合用于制備單克隆抗體。 (2)融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外，還有骨髓瘤細(xì)胞的自身融合細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的自身融合細(xì)胞。細(xì)胞的融合是隨機(jī)的，并且不可能所有細(xì)胞都融合，故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。 (3)動(dòng)物細(xì)胞融合后形成的是具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞的細(xì)胞核中的染色體數(shù)目正常情況下為40＋60＝100條，在有絲分裂后期染色體數(shù)目臨時(shí)加倍為200條。 (4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后，仍然不是能惡性增殖的細(xì)胞，同時(shí)B淋巴細(xì)胞不可能渡過(guò)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)過(guò)程中的兩次危機(jī)達(dá)到細(xì)胞系水平。