2019年春高中生物 專題2 細胞工程 2.2 動物細胞工程 2.2.2 動物細胞融合與單克隆抗體學(xué)案 新人教版選修3.doc

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　動物細胞融合與單克隆抗體 1. 掌握動物細胞融合技術(shù)。　2.理解單克隆抗體技術(shù)。(重、難點)　3．了解動物細胞融合和單克隆抗體技術(shù)的應(yīng)用。(重點) 一、動物細胞融合(閱讀教材P52) 概念 是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程，也稱細胞雜交 原理 細胞膜的流動性 結(jié)果 形成雜交細胞 誘導(dǎo)因素 ①聚乙二醇(PEG)、②滅活的病毒、③電激等 應(yīng)用 ①成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段；②制備單克隆抗體 意義 克服了遠緣雜交的不親和性 二、單克隆抗體(閱讀教材P52～P54) .傳統(tǒng)抗體的獲得 (1)方法：①向動物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原，使動物產(chǎn)生抗體；②從動物血清中分離所需抗體。 (2)缺陷：產(chǎn)量低、純度低、特異性差。 2．單克隆抗體的制備過程 .單克隆抗體的優(yōu)點及應(yīng)用 (1)優(yōu)點：特異性強、靈敏度高、產(chǎn)量高。 (2)應(yīng)用 ①作為診斷試劑，具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。 ②用于治療疾病和運載藥物。 判一判 (1)(2018曲阜高二檢測)細胞融合技術(shù)與傳統(tǒng)的有性雜交相比，其優(yōu)越性在于能定向地改造生物的性狀。() (2)(2018南京師大附中高二期中)制備單克隆抗體時，要選用已免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞。(√) (3)(2018南京師大附中高二期中)B淋巴細胞不能產(chǎn)生抗體，而漿細胞能產(chǎn)生抗體。(√) (4)動物雜交瘤細胞產(chǎn)生單克隆抗體能體現(xiàn)細胞的全能性。() (5)動物細胞融合和植物體細胞雜交的結(jié)果是相同的。() 　動物細胞融合 結(jié)合下面動物細胞融合的過程，探究下列問題： (1)融合過程：細胞膜融合→細胞質(zhì)融合→細胞核融合。 (2)細胞膜融合的過程體現(xiàn)出細胞膜具有一定的流動性。 (3)融合后重組細胞的特點：融合形成的雜種細胞具有兩種細胞的遺傳信息，通過動物細胞培養(yǎng)，雜種細胞表現(xiàn)出兩個親本細胞的特點。 植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較 項目 植物體細胞雜交 動物細胞融合 原理 細胞膜的流動性和植物細胞的全能性 細胞膜的流動性 步驟 酶解法去掉細胞壁后，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，形成雜種體細胞，再經(jīng)過植物組織培養(yǎng)形成雜種植株 分散成單個細胞后誘導(dǎo)細胞融合 誘導(dǎo)方法 物理方法、化學(xué)方法 物理方法、化學(xué)方法、滅活病毒 結(jié)果 形成雜種植株 形成雜種細胞 1．下列關(guān)于動物細胞融合的說法，錯誤的是(　　) A．動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程 B．動物細胞融合需要用纖維素酶處理 C．動物細胞融合時需要人工誘導(dǎo) D．誘導(dǎo)動物細胞融合常用的方法有：聚乙二醇、滅活的病毒、電激等 答案：B 2．下列對植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較，描述正確的是 (　　) A．動物細胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同，誘導(dǎo)融合的方法也完全相同 B．只有植物體細胞雜交可跨越種屬間的生殖隔離，突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能 C．利用動物細胞融合技術(shù)而發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)，為生產(chǎn)單克隆抗體開辟了新途徑 D．目前科學(xué)家終于實現(xiàn)了兩個植物物種間的體細胞雜交，得到了同時具有兩個物種遺傳物質(zhì)的超級植物，并使它們的性狀全部得以體現(xiàn) 解析：選C。動物細胞融合的誘導(dǎo)方法有生物方法，如用滅活的病毒，而植物原生質(zhì)體融合沒有生物方法；兩個植物物種間的體細胞雜交，得到了同時具有兩個物種遺傳物質(zhì)的超級植物，并不一定使它們的性狀都能得以體現(xiàn)，這是基因選擇性表達的結(jié)果。 生物工程技術(shù)產(chǎn)生后代個體的遺傳物質(zhì)或基因來源 (1)轉(zhuǎn)基因生物：目的基因來自外源生物，絕大多數(shù)基因來自兩個親本。 (2)雜種植株：遺傳物質(zhì)來自融合的兩個親本細胞。 (3)經(jīng)細胞培養(yǎng)獲得的動物細胞：遺傳物質(zhì)只來自一個親本。 (4)動物細胞融合形成的雜交細胞：遺傳物質(zhì)來自融合的兩個親本細胞。 (5)克隆動物：細胞核中的遺傳物質(zhì)來自供體動物，細胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來自提供卵母細胞的動物個體。 　單克隆抗體 結(jié)合下圖探究制備單克隆抗體的流程。 (1)第一步：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原蛋白，然后從小鼠體內(nèi)獲得已免疫的B淋巴細胞；該細胞能產(chǎn)生單一抗體。 (2)第二步：用電激法、聚乙二醇法、滅活的病毒法等，誘導(dǎo)兩種細胞發(fā)生融合，這時得到的融合細胞除了雜交瘤細胞，還有B淋巴細胞相互融合的細胞和骨髓瘤細胞相互融合的細胞。 (3)第三步：用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。然后再從雜交瘤細胞群中選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。這時的雜交瘤細胞既能分泌抗體又能大量增殖。 (4)第四步：克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞。 (5)第五步：將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取單克隆抗體。 (1)融合后的細胞，在培養(yǎng)時通過什么方式進行繁殖？細胞中染色體數(shù)目與淋巴細胞相比有何不同？ 提示：有絲分裂。融合后細胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍。 (2)篩選過程中對細胞克隆培養(yǎng)時，在特定培養(yǎng)基上使每個孔一個細胞的目的是什么？ 提示：使每個孔內(nèi)不多于一個細胞，達到單克隆培養(yǎng)的目的(或單一細胞培養(yǎng)以保證抗體的純度)。 1．植物體細胞雜交和單克隆抗體制備的比較 比較項目 植物體細胞雜交(番茄—馬鈴薯植株) 單克隆抗體制備 第1步 原生質(zhì)體的制備(酶解法) 正常小鼠的處理(注射滅活抗原) 第2步 原生質(zhì)體的融合(物、化法) 動物細胞融合(物、化、生法) 第3步 雜種細胞的篩選和培養(yǎng) 雜交瘤細胞的篩選和培養(yǎng) 第4步 雜種植株鑒定 提純單克隆抗體(特異性強、靈敏度高) 融合前處理 酶解法除去細胞壁：纖維素酶、果膠酶 注射特定抗原，免疫處理正常小鼠 意義和用途 ①克服有性遠緣雜交不親和的障礙； ②培育作物新品種 ①制備單克隆抗體； ②有助于疾病的診斷、治療、預(yù)防 2.漿細胞、骨髓瘤細胞和雜交瘤細胞的比較 細胞類型 來源 特點 漿細胞 由B淋巴細胞受抗原刺激后增殖分化而來 能產(chǎn)生單一抗體，但不能無限增殖 骨髓瘤細胞 從骨髓腫瘤中提取 能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體 雜交瘤細胞 漿細胞與骨髓瘤細胞融合而成 既能產(chǎn)生抗體，又能無限增殖 3.兩次篩選的比較 第一次篩選：由于細胞融合是隨機的，因此細胞混合物中融合細胞將以多種形式出現(xiàn)，因此必須從中篩選出既能分泌抗體，同時又能大量增殖的雜交瘤細胞。 第二次篩選：從雜交瘤細胞群中選出能產(chǎn)生專一抗體的特異性雜交瘤細胞。 交匯點　免疫調(diào)節(jié) (1)免疫類型：人體的免疫分為________和特異性免疫；特異性免疫又包括__________和__________。 (2)免疫過程 ①體液免疫：B淋巴細胞接受抗原刺激后增殖、分化，大部分分化為__________細胞，產(chǎn)生抗體，小部分分化為__________細胞。 ②細胞免疫：T細胞接受抗原刺激后，分化形成__________，然后與被抗原入侵的__________細胞密切接觸，使其裂解死亡。 答案：(1)非特異性免疫　體液免疫　細胞免疫 (2)①漿　記憶 ②效應(yīng)T細胞　宿主　 1．關(guān)于應(yīng)用動物細胞工程技術(shù)獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟如下，其中對單克隆抗體制備的相關(guān)敘述不正確的是(　　) ①將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細胞　②從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取骨髓瘤細胞?、劾么偌毎诤弦蜃邮箖煞N細胞發(fā)生融合　④將雜交瘤細胞注入小鼠腹腔中培養(yǎng)?、莺Y選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細胞?、迯母顾刑崛】贵w A．實驗順序應(yīng)當(dāng)是①②③⑤④⑥ B．④過程中產(chǎn)生多個雜交瘤細胞的過程也屬于克隆 C．③過程中獲得的細胞均可無限增殖 D．③到⑤過程中通常要經(jīng)過兩次篩選 解析：選C。誘導(dǎo)動物細胞融合后，B淋巴細胞自身融合的細胞不能無限增殖。 2．對于下面制備單克隆抗體過程示意圖的敘述，不正確的是(　　) A．圖中有1處明顯錯誤 B．②中兩兩融合的細胞有3種，篩選保留了1種 C．③中雜交瘤細胞均能產(chǎn)生抗體 D．⑤可以無限增殖并分泌相應(yīng)抗體 解析：選C。圖中的錯誤是用于提取B淋巴細胞的小鼠沒有經(jīng)過免疫，A正確；②為第一次篩選，目的是篩選出雜交瘤細胞，B正確；③雜交瘤細胞是由B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成的，但由脾臟中提取的B淋巴細胞包括非免疫的B淋巴細胞和已免疫的漿細胞，因此，③雜交瘤細胞不一定都能產(chǎn)生抗體，C錯誤；⑤是經(jīng)過兩次篩選得到的雜交瘤細胞群，具有無限增殖和分泌相應(yīng)抗體的特點，D正確。 核心知識小結(jié) [要點回眸] [答題必備] 動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。 動物細胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等。 動物細胞融合的主要用途是制備單克隆抗體。 雜交瘤細胞是由經(jīng)免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合而成的，具有既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體的能力。 單克隆抗體最主要的優(yōu)點是特異性強、靈敏度高，并能大量制備。 單克隆抗體的主要用途有：作為診斷試劑、用于治療疾病和運載藥物。 [隨堂檢測] 1．動物細胞融合的目的中，最重要的是(　　) A．克服不同生物遠緣雜交的障礙 B．制備單克隆抗體 C．培育新物種 D．生產(chǎn)雜交細胞 解析：選B。植物體細胞雜交主要是為了克服不同生物遠緣雜交的障礙，以培育新品種。另外，植物體細胞雜交還應(yīng)用了植物細胞的全能性。動物細胞的全能性受到限制，目前只見到高度分化的細胞核在去核卵母細胞中表現(xiàn)全能性，還未見到融合細胞核表現(xiàn)出全能性的例子，因此動物細胞融合不能用來培育新的物種。生產(chǎn)雜交細胞，也不是動物細胞融合的主要目的。 2．(2018太原外國語學(xué)校高二月考)將源自同品系小鼠的癌細胞和正常成纖維細胞融合，所獲雜種細胞的后代只要保留成纖維細胞的某些染色體就可表現(xiàn)為正常表型，但若這些染色體丟失則會重新惡變?yōu)榘┘毎Ｏ铝袛⑹霾徽_的是(　　) A．雜種細胞的后代保留的成纖維細胞的某些染色體上有抑制細胞惡性增殖的基因 B．利用滅活病毒可以誘導(dǎo)動物細胞融合 C．雜種細胞重新惡變后將失去接觸抑制現(xiàn)象 D．染色體數(shù)目的變異會抑制細胞的癌變 答案：D 3．(2018上海寶山高二模擬)如圖是兩種生物細胞融合技術(shù)的示意圖，下列關(guān)于該圖的敘述中，正確的是(　　) A．a(chǎn)過程必須除去細胞壁；b過程需要通過細胞識別 B．如果圖中表示的是動物細胞融合或植物體細胞雜交，X均能形成雜種個體 C．若X是蘋果梨幼苗，則c過程是細胞分裂、分化的過程 D．細胞融合技術(shù)的缺點是不能克服遠緣不親和性 答案：C 4．(2018常州高二檢測)核苷酸合成有兩個途徑，物質(zhì)A可以阻斷其中的全合成途徑(如下圖)。正常細胞內(nèi)含有補救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶，制備單克隆抗體時選用的骨髓瘤細胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶?，F(xiàn)用加入H、A、T三種物質(zhì)的“HAT培養(yǎng)基”來篩選特定的雜交瘤細胞。關(guān)于篩選原理的敘述，正確的是(　　) A．免疫的B細胞及其互相融合細胞因全合成途徑被A阻斷而在HAT培養(yǎng)基上不能增殖 B．骨髓瘤細胞及其互相融合細胞因無法進行上述兩個途徑而在HAT培養(yǎng)基上不能增殖 C．雜交瘤細胞因為可以進行上述兩個途徑，所以能在HAT培養(yǎng)基上大量增殖 D．HAT培養(yǎng)基上篩選出的所有雜交瘤細胞既能大量增殖又能產(chǎn)生高純度的目標抗體 解析：選B。免疫的B細胞及其互相融合細胞均屬于成熟細胞，不能增殖，A錯；骨髓瘤細胞及其互相融合細胞缺乏轉(zhuǎn)化酶，又因HAT培養(yǎng)基中的物質(zhì)A阻斷了全合成途徑，所以在HAT培養(yǎng)基上不能增殖，B正確；雜交瘤細胞因為可以進行補救合成途徑，能夠在HAT培養(yǎng)基上大量增殖，C錯；HAT培養(yǎng)基上篩選出的雜交瘤細胞能大量增殖，也能產(chǎn)生抗體，但不一定產(chǎn)生目標抗體，D錯。 5．用單克隆抗體研制而成的“生物導(dǎo)彈”由兩部分組成，一是“瞄準裝置”，二是殺傷性“彈頭”，下列對此描述不正確的是(　　) A．“瞄準裝置”是由識別腫瘤的單克隆抗體構(gòu)成的 B．“彈頭”是由放射性同位素、化學(xué)藥物和細胞毒素等物質(zhì)構(gòu)成的 C．“彈頭”中的藥物有選擇殺傷腫瘤細胞的功能 D．“生物導(dǎo)彈”是利用細胞工程制備出來的 解析：選C?！皬楊^”中的藥物不具有選擇性?！吧飳?dǎo)彈”中的“瞄準裝置”是由專一識別特定腫瘤細胞的單克隆抗體構(gòu)成的；“彈頭”是由殺死腫瘤細胞的放射性同位素、化學(xué)藥物和細胞毒素等物質(zhì)構(gòu)成的；“生物導(dǎo)彈”是利用動物細胞融合、動物細胞培養(yǎng)等細胞工程技術(shù)制備出來的。 6．(2018江西臨川二中期末)如圖為動物細胞融合示意圖，請據(jù)圖回答： (1)圖中滅活的仙臺病毒的作用是____________________________________。 (2)若僅考慮兩兩融合，則A細胞和B細胞融合后共有___________________三種類型。 (3)由雜種細胞形成無性系1、2、3的方法，可以稱為________________________。 (4)此項技術(shù)最重要的應(yīng)用是____________________________________。 解析：(1)誘導(dǎo)細胞融合需要有促融劑，比如聚乙二醇、滅活的仙臺病毒等。(2)若僅考慮兩兩融合，則A細胞和B細胞融合后共有A—A、A—B、B—B三種類型。(3)無性繁殖可以稱之為克隆。(4)細胞融合技術(shù)最重要的應(yīng)用是制備單克隆抗體。 答案：(1)促進細胞融合(作為促融劑)　(2)A—A、A—B、B—B　(3)克隆　(4)制備單克隆抗體 7．(2018天津河?xùn)|區(qū)一模)下圖是一種“生物導(dǎo)彈”的作用原理示意圖，沒有與腫瘤細胞結(jié)合的“生物導(dǎo)彈”一段時間后被機體清除。阿霉素是一種抗腫瘤藥，可抑制DNA和RNA的合成，對正常細胞也有一定毒性。(注：堿性磷酸酶廣泛分布于人體肝臟、骨骼、腸、腎等組織器官中) (1)制備單克隆抗體需要篩選，第二次篩選時，雜交瘤細胞還需進行__________________，最終篩選出________________________。 (2)活化阿霉素能抑制細胞中的__________________和________________過程。 (3)在此治療中，正確的方法是注射________________________。與傳統(tǒng)的化療相比，此治療方法的優(yōu)點是____________________________________。 答案：(1)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測　產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞 (2)DNA的復(fù)制　轉(zhuǎn)錄　(3)阿霉素和單克隆抗體 (4)特異性強，能減輕阿霉素對正常細胞的傷害 [課時作業(yè)] 一、選擇題 1．(2018徐州高二檢測)基因型為Aa與基因型為Bb的動物體細胞，用滅活的病毒處理后，不可能獲得下列哪種基因型的細胞(　　) A．AAaa　　　　　　　　 B．AaBb C．Aabb D．BBbb 解析：選C。誘導(dǎo)融合處理后可能會出現(xiàn)3種兩兩融合的細胞，即同種細胞相互融合，基因型為AAaa和BBbb；不同種細胞相互融合，融合后的雜交細胞基因型為AaBb，C項基因型細胞不可能出現(xiàn)。 2．與植物體細胞雜交相比，動物細胞融合的原理及其特有的誘導(dǎo)因子分別是(　　) A．細胞膜的流動性、離心 B．細胞膜的流動性、滅活的病毒 C．細胞的全能性、電激 D．細胞的全能性、滅活的病毒 解析：選B。植物體細胞雜交的原理是細胞膜的流動性、植物細胞的全能性，動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性；動物細胞融合的常用誘導(dǎo)因子有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等，其中滅活的病毒是其特有的誘導(dǎo)因子，而聚乙二醇、電激均可用于誘導(dǎo)植物體細胞雜交。 3．(2018陜西黃陵中學(xué)高二月考)制備單克隆抗體時用單個的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞，通過培養(yǎng)，形成細胞群。此過程中的細胞內(nèi)部變化一定不涉及(　　) A．RNA聚合酶與結(jié)合位點結(jié)合 B．堿基互補配對 C．同源染色體配對 D．脫水縮合 答案：C 4．用a表示骨髓瘤細胞，b表示B淋巴細胞，則單克隆抗體制備過程中兩次篩選的目的分別為(　　) A．從a、aa、ab、bb、b中篩選出a、aa、ab；從a、aa、ab中篩選出ab B．從a、aa、ab、bb、b中篩選出ab、bb、b；從ab、bb、b中篩選出ab C．從a、aa、ab、bb、b中篩選出ab；從ab中篩選出能產(chǎn)生特定抗體的ab D．從a、aa、ab、bb、b中篩選出aa；從aa中篩選出能大量增殖的aa 解析：選C。第一次篩選是用選擇培養(yǎng)基選出雜交瘤細胞，即ab；第二次篩選是通過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測選出能產(chǎn)生特異性抗體的ab。 5．(2018棲霞二中高二檢測)下圖中的供體DNA中含有無限增殖調(diào)控基因，該基因能激發(fā)動物細胞的分裂，圖示是利用該基因制備新型單克隆抗體的過程，下列相關(guān)敘述錯誤的是(　　) A．經(jīng)酶A處理后Ⅰ與質(zhì)粒具有相同的黏性末端 B．Ⅱ是已免疫的B淋巴細胞 C．Ⅲ既能無限增殖又能分泌特異性抗體 D．Ⅱ→Ⅲ過程中的檢測篩選的目的是得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞 答案：D 6．(2018棲霞二中高二檢測)下列在現(xiàn)代生物科技的應(yīng)用中，不需要進行檢測與篩選的是(　　) A．對植物的莖尖進行組織培養(yǎng)獲得脫毒苗 B．將鼠的骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合，制備單克隆抗體 C．利用植物體細胞雜交技術(shù)培育“蘿卜—甘藍” D．將抗蟲基因?qū)胫参锛毎?，培育具有抗蟲特性的新植株 答案：A 7.單克隆抗體在醫(yī)療、診斷等方面發(fā)揮著越來越重要的作用。英國科學(xué)家米爾斯坦和德國科學(xué)家科勒設(shè)計了一個用已免疫的B淋巴細胞制備單克隆抗體的實驗，如圖為其實驗流程圖。下列相關(guān)的敘述不正確的是(　　) A．a(chǎn)是骨髓瘤細胞，②表示在選擇培養(yǎng)基上進行培養(yǎng) B．制備單克隆抗體時，選擇B淋巴細胞的原因是它能分泌多種特異性抗體 C．④過程如在體外培養(yǎng)，則需要無菌、無毒的環(huán)境，營養(yǎng)充足，溫度、pH適宜等環(huán)境條件 D．誘導(dǎo)動物、植物細胞融合常用的一種化學(xué)誘導(dǎo)劑是聚乙二醇 解析：選B。對于B淋巴細胞來說，每一種B淋巴細胞經(jīng)特定抗原刺激后只能產(chǎn)生一種特異性抗體。根據(jù)單克隆抗體制備的流程判斷：a是骨髓瘤細胞，b是雜交瘤細胞。①是誘導(dǎo)B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的過程。②表示在選擇培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，篩選出雜交瘤細胞。③表示篩選出能專一性產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞。④包括體外培養(yǎng)和注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)兩種方法。選擇培養(yǎng)基只允許雜交瘤細胞生長、增殖，其他細胞不能生存。動物細胞培養(yǎng)需要具備的條件是：無菌、無毒的環(huán)境，營養(yǎng)充足，溫度、pH適宜，充足的空氣等。誘導(dǎo)細胞融合時常用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑。 8．對于下面制備單克隆抗體過程的示意圖，敘述不正確的是(　　) A．①表示B淋巴細胞和骨髓瘤細胞均是從小鼠的脾臟中提取的 B．④中的篩選是通過抗原—抗體反應(yīng)進行的 C．②促進細胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介導(dǎo) D．⑤是可以無限增殖的雜交瘤細胞產(chǎn)生的細胞 解析：選A。單克隆抗體是B淋巴細胞和小鼠骨髓瘤細胞融合得到的雜交瘤細胞產(chǎn)生的，B淋巴細胞也可以從血漿中提取。細胞融合時，使用的化學(xué)方法是用聚乙二醇誘導(dǎo)；④中的篩選是通過抗原—抗體反應(yīng)進行的，如果有反應(yīng)說明表達了抗體；融合細胞具有雙親的特點，既能無限增殖又能產(chǎn)生單一抗體。 9．(2018蕪湖高二檢測)將特定藥物與單克隆抗體相結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”，能夠用于殺死人類某些癌細胞。其過程如圖所示。下列有關(guān)敘述錯誤的是(　　) A．①過程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同 B．經(jīng)①形成的雜交瘤細胞都能無限增殖并產(chǎn)生特定抗體 C．②過程需要篩選并克隆單個雜交瘤細胞 D．抗體的靶向作用使③過程具有高度特異性 解析：選B。①過程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同，都是細胞膜的流動性，A正確。經(jīng)①形成的雜交瘤細胞不一定都能產(chǎn)生特定抗體，需要經(jīng)過抗體陽性檢測篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞，B錯誤。②過程需要采用抗體陽性檢測篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞，然后進行克隆化培養(yǎng)(包括體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng))，C正確?？贵w的靶向作用使③過程具有高度特異性，D正確。 10．(2018上海松江區(qū)第二次模擬)如圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程，下列有關(guān)敘述不正確的是(　　) A．圖中給實驗小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原 B．利用聚乙二醇、滅活的病毒和電激等方法均可誘導(dǎo)細胞融合獲得乙 C．用特定的選擇培養(yǎng)基對乙進行篩選，融合細胞均能生長，未融合細胞均不能生長 D．對丙需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的丁 答案：C 二、非選擇題 11．(2018河南南陽六校高二期末)細胞的融合技術(shù)有著廣泛的應(yīng)用：有性生殖的生物產(chǎn)生后代需進行受精作用，植物體細胞雜交要進行原生質(zhì)體的融合，單克隆抗體的制備需進行動物細胞融合。下列為細胞融合的簡略過程，請據(jù)圖回答相關(guān)問題： (1)動物細胞融合的原理是__________，若進行有性雜交，精子和卵子的結(jié)合體現(xiàn)了細胞膜的______________功能。 (2)a、b分別表示兩種二倍體植物的體細胞，若a植物細胞內(nèi)含有m個染色體，b植物細胞內(nèi)含有n個染色體，則d細胞內(nèi)含有__________個染色體，d細胞融合完成的標志：________________。若對a和b采用雜交育種成功的話，得到的后代應(yīng)含有___________個染色體，若要得到可育的后代，常采用____________________處理幼苗。這兩種方法相比，體細胞雜交方法的優(yōu)點是______________________。 答案：(1)細胞膜的流動性　信息交流 (2)m＋n　雜種細胞再生出細胞壁　(m＋n)/2　秋水仙素　克服了遠緣雜交不親和的障礙 12．(2018菏澤一中宏志班檢測)下圖是通過動物纖維母細胞等獲得單克隆抗體的實驗研究。據(jù)圖回答相關(guān)問題： (1)過程①類似于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的________過程，過程②的實質(zhì)是__________。 (2)A代表________________物質(zhì)，Y、Z細胞的名稱分別是___________、__________。 (3)過程③誘導(dǎo)細胞融合的生物因素是____________，細胞融合后還需要用____________培養(yǎng)基篩選獲得Z細胞。 (4)Z細胞還需經(jīng)過____________和______________才能獲得大量產(chǎn)生所需抗體的細胞。 (5)經(jīng)過上述過程獲得的單克隆抗體的優(yōu)點是____________________。 答案：(1)脫分化　基因的選擇性表達 (2)抗原(特定抗原)　B淋巴細胞　雜交瘤細胞 (3)滅活的病毒　選擇 (4)克隆化培養(yǎng)　抗體檢測(專一性抗體陽性檢測) (5)特異性強、靈敏度高，并可大量制備 13．(2018廣東汕頭檢測)新型的微生物蛋白農(nóng)藥是由微生物產(chǎn)生的一類蛋白質(zhì)藥物，能夠激活農(nóng)作物的防御系統(tǒng)，提高農(nóng)作物抗病抗蟲的能力?？蒲腥藛T在某個真菌菌株上發(fā)現(xiàn)了激活蛋白AP45，并進行了相關(guān)研究(見下圖)。請回答下列問題： (1)圖中的①是__________________________；②是_________________________。 (2)所設(shè)計的引物對，應(yīng)與____________能互補配對，但在__________________之間不應(yīng)有能互補配對的核苷酸序列。 (3)據(jù)圖分析，該實驗以____________基因作為標記基因。 (4)如果要利用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測目的基因是否成功表達，則需要以____________為抗原、制備出其單克隆抗體。 (5)以此類激活蛋白制成的微生物蛋白農(nóng)藥并不會直接殺死害蟲或者病原生物，是一種環(huán)境友好型的產(chǎn)品，具有____________________________等優(yōu)點(要求一項)。 答案：(1)RNA(或mRNA)　構(gòu)建目的基因表達載體 (2)目的基因(或cDNA)　兩種引物(或引物自身的不同片段或引物與非目的基因，要求一項) (3)青霉素抗性 (4)激活蛋白AP45(或目的蛋白) (5)不引起害蟲或病原生物的抗藥性(或易分解無殘留或?qū)θ诵鬅o害或其他合理答案) 14．(2018廣西桂林、賀州期末聯(lián)考)雙功能抗體就是雙特異性抗體，是一種非天然性抗體，結(jié)合抗原的兩個臂具有不同的特異性，可以通過生物學(xué)方法制備。1983年Milstein等人將能分泌目的單克隆抗體的雜交瘤細胞(稱之為A細胞)與分泌另一種抗體的脾細胞(即B細胞)融合，形成可分泌兩種親代抗體和雜種抗體的雜交瘤細胞(A—B細胞)，得到可預(yù)先設(shè)定的特異性的雙功能抗體。 (1)Milstein等利用A細胞和B細胞制備雙功能抗體的過程中，使用了哪些動物細胞工程的技術(shù)手段____________和____________(寫出兩種)。在這個過程中，若融合最多考慮兩兩融合，總共應(yīng)該有________種細胞存在，請參照題干表示方法用A、B字母表示這些細胞的具體類型____________________________________________。 (2)雙功能抗體在癌癥治療中的作用類似于“生物導(dǎo)彈”，借助于雙功能抗體一條臂與癌細胞表面抗原____________，同時另一條臂將T細胞和NK細胞等殺傷細胞定向帶到癌細胞所在位置。在生物體內(nèi)T細胞攻擊癌細胞屬于____________免疫。 (3)生物學(xué)方法制備雙功能抗體的缺點之一為，不能對雙功能抗體進行改造，限制了它的臨床應(yīng)用。使用____________(工程技術(shù))，可以對雙功能抗體的結(jié)構(gòu)進行設(shè)計改造，使其更加符合人類的需要，這種改造最終還必須通過對____________分子的改造來完成。 答案：(1)動物細胞融合　動物細胞培養(yǎng)　5　A—A，A—B，B—B，A，B　(2)特異性結(jié)合　細胞　(3)蛋白質(zhì)工程　DNA