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1、 臨床檢驗實驗室安全知識培訓臨床檢驗實驗室安全知識培訓 檢驗科檢驗科 1高等課堂 生物安全柜生物安全柜 (safety cabinet)2高等課堂l一種專用的排風柜。通過對排到一種專用的排風柜。通過對排到 大氣中的氣體過濾大氣中的氣體過濾(filter)，防止，防止 操作者和環(huán)境接觸到處理有潛在操作者和環(huán)境接觸到處理有潛在 危險性和危險微生物時產(chǎn)生的危險性和危險微生物時產(chǎn)生的氣氣 溶膠。溶膠。3高等課堂生物安全柜產(chǎn)品的特點生物安全柜產(chǎn)品的特點:l1、整個操作區(qū)內(nèi)的三面墻體都為雙、整個操作區(qū)內(nèi)的三面墻體都為雙 層墻體，其夾層互相貫通層墻體，其夾層互相貫通(包括臺面下包括臺面下 部的夾層，形成互相
2、連通的負壓風道部的夾層，形成互相連通的負壓風道.l2、安全柜內(nèi)部墻體一體成型，三面、安全柜內(nèi)部墻體一體成型，三面 墻體間無接縫墻體間無接縫(seamless).l3、采用進口的超高效過濾器、采用進口的超高效過濾器(HEPA)，過濾效率高達，過濾效率高達99.999%.4高等課堂生物安全柜的輔助裝置保障操作者安全生物安全柜的輔助裝置保障操作者安全l1、：安全柜的負壓不能達到要求時，安全柜的負壓不能達到要求時，自動報警。自動報警。l2、：操作窗高度超過安全高度時，操作窗高度超過安全高度時，自動報警。提醒您注意調整。自動報警。提醒您注意調整。5高等課堂l3、：當其壓力超過范圍時自動報警可當其壓力超過
3、范圍時自動報警可 提醒您通知廠家更換過濾器。提醒您通知廠家更換過濾器。l4、：安全柜內(nèi)液體通過柜體下方蝶閥安全柜內(nèi)液體通過柜體下方蝶閥 安全排出，將交叉感染的可能降安全排出，將交叉感染的可能降 到最低。到最低。6高等課堂工作原理工作原理:1.物理屏障物理屏障2.高效過濾高效過濾3.空氣屏障空氣屏障4.定向層流定向層流7高等課堂誘捕效應誘捕效應 靜電效應靜電效應攔截效應攔截效應 沉降效應沉降效應 擴散效應擴散效應0.3 um 的顆粒過的顆粒過濾效率濾效率 99.999%;0.12 um 的顆粒過的顆粒過濾效率濾效率 99.99%.8高等課堂 垂直層流潔凈臺垂直層流潔凈臺9高等課堂I級生物安全柜級
4、生物安全柜:1.保護操作者和操保護操作者和操作環(huán)境。作環(huán)境。2.樣品沒有得到保樣品沒有得到保護。護。3.通過樣品區(qū)的空通過樣品區(qū)的空氣，經(jīng)高效過濾器氣，經(jīng)高效過濾器的過濾之后，的過濾之后，100%地排放到實地排放到實驗室環(huán)境中。驗室環(huán)境中。10高等課堂II 級生物安全柜級生物安全柜-C A型型(B3):30%外排進入環(huán)境外排進入環(huán)境30%外界空氣補充外界空氣補充70%經(jīng)過濾后循經(jīng)過濾后循 環(huán)使用環(huán)使用11高等課堂II 級生物安全級生物安全柜柜 C B1型型70%外排進入環(huán)境外排進入環(huán)境70%外界空氣補充外界空氣補充30%過濾后循環(huán)使過濾后循環(huán)使 用用12高等課堂III級生物安全柜級生物安全柜樣
5、品、操作者、操樣品、操作者、操作環(huán)境都得到保護作環(huán)境都得到保護(操作時戴全密封手操作時戴全密封手 套套）100%外排進入環(huán)境外排進入環(huán)境100%外界空氣補充外界空氣補充無循環(huán)使用的氣流無循環(huán)使用的氣流13高等課堂l如下情況使用生物安全柜：如下情況使用生物安全柜：l（1）致病微生物氣溶膠或濺出）致病微生物氣溶膠或濺出l的操作應在生物安全柜的操作應在生物安全柜 l（級生物安全柜為宜）級生物安全柜為宜）14高等課堂l（2）處理高濃度或大容量感染性）處理高濃度或大容量感染性l材料均須在生物安全柜材料均須在生物安全柜(級安全級安全l柜為宜）或物理抑制設備中進行，柜為宜）或物理抑制設備中進行，l并使用個體
6、防護設備。并使用個體防護設備。15高等課堂l（3）上述材料的離心操作如果使）上述材料的離心操作如果使l用密封的離心機轉子用密封的離心機轉子 或安全離心或安全離心l杯，且它們只在生物安全柜中開閉杯，且它們只在生物安全柜中開閉l和裝載感染性材料，則可在實驗室和裝載感染性材料，則可在實驗室l中進行。中進行。16高等課堂l11操作步驟操作步驟:l開啟電源和內(nèi)外風扇；開啟電源和內(nèi)外風扇；l在機器預熱時將所有必需的物品置于安全在機器預熱時將所有必需的物品置于安全柜內(nèi)；柜內(nèi)；l準備一塊浸有準備一塊浸有75%的酒精的紗布；的酒精的紗布；l開始工作前及完成工作后，讓安全柜工作開始工作前及完成工作后，讓安全柜工作
7、15min來完成來完成“凈化凈化”過程；過程；l手和雙臂伸入到生物安全柜中等待大約一手和雙臂伸入到生物安全柜中等待大約一分鐘，以使安全柜調整完畢才開始對物品分鐘，以使安全柜調整完畢才開始對物品進行處理；進行處理；17高等課堂l接種環(huán)滅菌時，用電子加熱器，而不應該接種環(huán)滅菌時，用電子加熱器，而不應該使用明火；使用明火；l在實驗結束時，生物安全柜里的所有物品在實驗結束時，生物安全柜里的所有物品都應清除表面污染，標本個培養(yǎng)基移出安都應清除表面污染，標本個培養(yǎng)基移出安全柜；全柜；l每天實驗結束時，用每天實驗結束時，用75%酒精擦拭工作臺酒精擦拭工作臺面、四壁及玻璃的內(nèi)外側等部位來清除污面、四壁及玻璃的
8、內(nèi)外側等部位來清除污染；染；l有標本溢出等污染時，用愛爾施消毒，然有標本溢出等污染時，用愛爾施消毒，然后用水再次進行擦拭。后用水再次進行擦拭。18高等課堂l1.2注意事項注意事項:l每次開始實驗之前將所需物品置于安全柜每次開始實驗之前將所需物品置于安全柜內(nèi)，以盡可能減少雙臂進出次數(shù)；內(nèi)，以盡可能減少雙臂進出次數(shù)；l雙臂應該垂直地緩慢進出前面的入口；雙臂應該垂直地緩慢進出前面的入口；l盡量減少操作者身后的人員活動；盡量減少操作者身后的人員活動；l生物安全柜在使用中不能打開玻璃觀看擋生物安全柜在使用中不能打開玻璃觀看擋板；板；l在生物安全柜內(nèi)操作時，不能進行文字工在生物安全柜內(nèi)操作時，不能進行文字
9、工作；作；l級生物安全柜千面的進氣口格柵不能被級生物安全柜千面的進氣口格柵不能被紙、儀器設備或其他物品阻擋；紙、儀器設備或其他物品阻擋；19高等課堂l可產(chǎn)生氣溶膠的設備可產(chǎn)生氣溶膠的設備(如混勻器、離心機等如混勻器、離心機等)應靠近安全柜的后部位置；應靠近安全柜的后部位置；l生物危害性廢棄物袋放在安全柜內(nèi)右側，生物危害性廢棄物袋放在安全柜內(nèi)右側，袋中放入愛爾施消毒劑；袋中放入愛爾施消毒劑；l房間中有人時要關閉紫外燈，以保護眼睛房間中有人時要關閉紫外燈，以保護眼睛和皮膚，避免因不慎暴露而造成傷害；和皮膚，避免因不慎暴露而造成傷害；l安全柜一直維持運行狀態(tài)安全柜一直維持運行狀態(tài)8小時工作期間小時工
10、作期間，不能反復開關；，不能反復開關；l當氣流警報響起時，立刻停止工作，并報當氣流警報響起時，立刻停止工作，并報告生物安全負責人。告生物安全負責人。20高等課堂 離心機的生物安全離心機的生物安全21高等課堂1.高效微粒隔離膜（高效微粒隔離膜（HEPA filter)材料是聚偏氟乙烯（材料是聚偏氟乙烯（PVDF）,孔孔 徑為徑為0.2 m.22高等課堂l.雙重鎖定轉頭蓋雙重鎖定轉頭蓋(Dual Locking Rotor Lid)把轉頭從離心腔拿出至安全柜時，把轉頭從離心腔拿出至安全柜時，保持轉頭的密封保持轉頭的密封23高等課堂l .生物安全轉頭生物安全轉頭 (BiocontainmentRot
11、or)樣品瓶外套是轉頭的一部分樣品瓶外套是轉頭的一部分 樣品瓶可于安全柜內(nèi)打開樣品瓶可于安全柜內(nèi)打開 保證漏出的樣品保留在瓶內(nèi)保證漏出的樣品保留在瓶內(nèi)24高等課堂 、多重保護的試管蓋、多重保護的試管蓋部件包括密封圈，內(nèi)蓋及管部件包括密封圈，內(nèi)蓋及管/瓶蓋瓶蓋25高等課堂離心機使用操作規(guī)程離心機使用操作規(guī)程(7)；l1.先檢查離心管和盛標本的容器是否先檢查離心管和盛標本的容器是否破損破損?l2.稱重平衡稱重平衡,正確放置十字軸和離心桶；正確放置十字軸和離心桶；l3.空離心管用蒸餾水來平衡；空離心管用蒸餾水來平衡；l4.管內(nèi)容物不能裝得過滿，需留出一管內(nèi)容物不能裝得過滿，需留出一定空間定空間;26
12、高等課堂l5.離心的試管應加蓋離心的試管應加蓋,離心時機器呈關離心時機器呈關閉態(tài)；閉態(tài)；l6.每次用畢，清潔離心桶、轉子和離每次用畢，清潔離心桶、轉子和離心機腔的污染；心機腔的污染；l7.機器狀態(tài)復位機器狀態(tài)復位.27高等課堂消毒隔離處理原則消毒隔離處理原則 (先消毒先消毒,后處理后處理)l1、帶有傳染性標本的一次性用品，要、帶有傳染性標本的一次性用品，要焚燒處理。焚燒處理。l2、非一次性使用的，要高壓滅菌后毀、非一次性使用的，要高壓滅菌后毀型、回收。型、回收。28高等課堂如何消毒如何消毒?l針對有傳染性的標本針對有傳染性的標本:1.按體積加漂白粉按體積加漂白粉(5,24h;肝炎肝炎,結核等結
13、核等6h)倒入廁所。倒入廁所。2.微生物培養(yǎng)標本微生物培養(yǎng)標本,培養(yǎng)物高壓培養(yǎng)物高壓 后棄后棄.3.污染的液體、廢液、洗滌液加污染的液體、廢液、洗滌液加漂白水漂白水(10%,過夜過夜)入下水道。入下水道。29高等課堂l針對實驗室的空氣：針對實驗室的空氣：1.低臭氧紫外線燈消毒低臭氧紫外線燈消毒(無人無人).2.化學消毒化學消毒:含有效氯消毒含有效氯消毒“消毒消毒 靈靈”1.5g/L噴噴 灑消毒灑消毒.3.靜電吸附式空氣凈化器持續(xù)消靜電吸附式空氣凈化器持續(xù)消 毒毒,室內(nèi)有無人時均適用室內(nèi)有無人時均適用.30高等課堂l針對實驗室的地面針對實驗室的地面,臺面和儀器臺面和儀器:可用可用0.5%1%過氧
14、乙酸過氧乙酸 或或“消毒消毒 靈靈”1.5g/L 噴霧噴霧.31高等課堂l地面的清潔與消毒應達到以下要求：地面的清潔與消毒應達到以下要求：l1)、地面應濕式清掃，保持潔凈；當有血、地面應濕式清掃，保持潔凈；當有血跡、糞便、體液等污染時，應及時以含氯跡、糞便、體液等污染時，應及時以含氯消毒拖洗。消毒拖洗。l2)、拖洗工具使用后應先洗凈、消毒、再、拖洗工具使用后應先洗凈、消毒、再晾干。晾干。32高等課堂l 針對化驗報告單：針對化驗報告單：應設立專門的清潔區(qū)打印報告單應設立專門的清潔區(qū)打印報告單.33高等課堂 手衛(wèi)生手衛(wèi)生(hand of hygiene)l目的：目的：l 控制醫(yī)院性感染的最重要控制
15、醫(yī)院性感染的最重要l 最簡便易行最簡便易行 的措施之一。的措施之一。l （包括保護個人自己）（包括保護個人自己）l （避免交叉感染）（避免交叉感染）34高等課堂 洗手、手消毒和外科洗手洗手、手消毒和外科洗手l 洗手（洗手（handwashing）：）：指用普通肥皂和皂液通過流動水指用普通肥皂和皂液通過流動水 洗手。為僅去除手部皮膚污垢、洗手。為僅去除手部皮膚污垢、碎屑和部分致病菌的一個過程。碎屑和部分致病菌的一個過程。35高等課堂l手消毒（手消毒（hand antisepsis）：）：指用含抗菌劑肥皂指用含抗菌劑肥皂/液，或消毒劑液，或消毒劑 擦洗手。在一般性洗手或刷手的基擦洗手。在一般性洗手
16、或刷手的基 礎上對殘留手部的微生物作進一步礎上對殘留手部的微生物作進一步 清除，除去或殺滅皮膚上的致病菌清除，除去或殺滅皮膚上的致病菌 的過程。的過程。36高等課堂l外科手消毒外科手消毒:(surgical hand antisepsis)要清除或消滅要清除或消滅暫居菌暫居菌和減少和減少常駐菌常駐菌 能降低術中因手套破損而導致細菌能降低術中因手套破損而導致細菌 侵入手術區(qū)域的風險。侵入手術區(qū)域的風險。37高等課堂l暫居菌暫居菌指寄生在皮膚表層指寄生在皮膚表層,常規(guī)洗常規(guī)洗 手易被清除的微生物手易被清除的微生物.接觸病人或接觸病人或 被污染的物體表面時獲得被污染的物體表面時獲得,如果沒如果沒 有
17、通過肥皂和水的沖洗和機械摩擦有通過肥皂和水的沖洗和機械摩擦 或者用消毒手刷將其破壞或者用消毒手刷將其破壞,它可隨它可隨 時通過手傳播。時通過手傳播。38高等課堂l常居菌常居菌是能從大部分人的皮膚上是能從大部分人的皮膚上 分離的微生物，這類微生物是皮分離的微生物，這類微生物是皮 膚上持久固有的寄居者，不易被膚上持久固有的寄居者，不易被 機械性的摩擦清除固有的細菌包機械性的摩擦清除固有的細菌包 括凝固酶陰性葡萄球菌、一些棒括凝固酶陰性葡萄球菌、一些棒 狀桿菌類、不動桿菌屬、丙酸菌狀桿菌類、不動桿菌屬、丙酸菌 屬及某些腸道細菌族成員等。屬及某些腸道細菌族成員等。39高等課堂l洗手指征：洗手指征：直接
18、接觸病人前后直接接觸病人前后/無菌操作前后無菌操作前后穿脫工作服等前后穿脫工作服等前后/再進入清潔區(qū)前再進入清潔區(qū)前接觸特殊易感病人前后接觸特殊易感病人前后 接觸或處理病人的血液、體液、分接觸或處理病人的血液、體液、分泌物后等等泌物后等等40高等課堂l正確的洗手方法：正確的洗手方法：1、掌心對掌心、掌心對掌心 2、手指交叉掌心對手背、手指交叉掌心對手背 3、換一手后操作同上、換一手后操作同上 4、兩手互握互搓指背、兩手互握互搓指背 5、拇指在掌中轉動摩擦、拇指在掌中轉動摩擦 6、指尖聚掌心中摩擦、指尖聚掌心中摩擦41高等課堂l標準標準：各區(qū)域工作的醫(yī)務人員的手均：各區(qū)域工作的醫(yī)務人員的手均不能
19、不能檢出致病性微生物。對于常駐菌檢出致病性微生物。對于常駐菌（條件性）（條件性）要求要求檢出細菌菌落數(shù)；檢出細菌菌落數(shù)；類區(qū)域和類區(qū)域和類區(qū)域類區(qū)域:5cfu/cm2 類區(qū)域類區(qū)域:10cfu/cm2 類區(qū)域類區(qū)域:15cfu/cm242高等課堂l手套的使用與要求手套的使用與要求:手套的種類手套的種類:1、清潔手套、清潔手套 2、無菌手套、無菌手套 手套的使用手套的使用:1、手術、護理特殊病人或入、手術、護理特殊病人或入 體腔的操作（無菌手套）體腔的操作（無菌手套）2、手可能被污染時（清潔手套、手可能被污染時（清潔手套）43高等課堂l手套使用須注意手套使用須注意 1、手套不能代替洗手、手套不能
20、代替洗手 2、帶手套只能接觸可能污染的、帶手套只能接觸可能污染的 物品物品 3、脫手套后要洗手、脫手套后要洗手 44高等課堂l消毒消毒(disinfection):殺滅物體上病原微生物的方法殺滅物體上病原微生物的方法,并并 不一定殺死含芽胞的細菌或非病原不一定殺死含芽胞的細菌或非病原 微生物。微生物。45高等課堂l滅菌滅菌(serilization):指殺滅物體上所有微生物的方法。指殺滅物體上所有微生物的方法。滅菌比消毒的要求高，包括殺死細滅菌比消毒的要求高，包括殺死細 菌芽胞在內(nèi)的全部病原微生物和非菌芽胞在內(nèi)的全部病原微生物和非 病原微生物。病原微生物。46高等課堂l抑菌抑菌(bacteri
21、ostasis):指抑制體內(nèi)或體外細菌的生長繁殖指抑制體內(nèi)或體外細菌的生長繁殖 常用的抑菌劑為各種抗生素常用的抑菌劑為各種抗生素,用于用于 體內(nèi)可抑制其生長繁殖體內(nèi)可抑制其生長繁殖;用于體外用于體外 是通過抑菌試驗來驗證細菌對抗生是通過抑菌試驗來驗證細菌對抗生 素的敏感性。素的敏感性。47高等課堂l防腐防腐(antisepsis):防止或抑制體外細菌生長繁殖的方防止或抑制體外細菌生長繁殖的方 法。細菌一般不死亡。使用同一種法。細菌一般不死亡。使用同一種 化學藥品在高濃度時稱為消毒劑，化學藥品在高濃度時稱為消毒劑，而以低濃度達到抑菌目的時又稱之而以低濃度達到抑菌目的時又稱之 為抑菌劑。為抑菌劑。
22、48高等課堂l防腐防腐(antisepsis):防止或抑制體外細菌生長繁殖的方防止或抑制體外細菌生長繁殖的方 法。細菌一般不死亡。使用同一種法。細菌一般不死亡。使用同一種 化學藥品在高濃度時稱為消毒劑，化學藥品在高濃度時稱為消毒劑，而以低濃度達到抑菌目的時又稱之而以低濃度達到抑菌目的時又稱之 為抑菌劑。為抑菌劑。49高等課堂 消毒滅菌的手段消毒滅菌的手段l一、物理消毒滅菌法一、物理消毒滅菌法l二、化學消毒滅菌法二、化學消毒滅菌法l三、生物消毒滅菌法三、生物消毒滅菌法50高等課堂 一、物理消毒滅菌法一、物理消毒滅菌法l(一一)熱力熱力 濕熱濕熱/干熱干熱,前者的效率更大前者的效率更大.l(二二)
23、輻射輻射l(三三)濾過濾過l(四四)超聲波超聲波l(五五)干燥干燥/低溫低溫51高等課堂高壓蒸氣滅菌器高壓蒸氣滅菌器：1、滅菌原理：、滅菌原理：通過預先抽真空的方法將蒸汽引入柜室通過預先抽真空的方法將蒸汽引入柜室,穿透到物品中間以熱力使菌體蛋白凝固穿透到物品中間以熱力使菌體蛋白凝固。2、注意事項、注意事項:操作人員須經(jīng)專業(yè)培訓，合格后方能上崗操作人員須經(jīng)專業(yè)培訓，合格后方能上崗;安全使用防灼傷安全使用防灼傷;保證鍋內(nèi)空氣流通并定期滅保證鍋內(nèi)空氣流通并定期滅菌效果監(jiān)測并記錄菌效果監(jiān)測并記錄;保持高壓鍋整潔。保持高壓鍋整潔。3、操作操作（見后）：（見后）：52高等課堂 將擬滅菌的物品隨同盛裝的桶放
24、入滅菌器將擬滅菌的物品隨同盛裝的桶放入滅菌器內(nèi)；蓋好蓋子，擰緊元寶螺絲，勿使漏氣；內(nèi)；蓋好蓋子，擰緊元寶螺絲，勿使漏氣；鍋下加熱，打開排氣活門，放出冷空氣（一鍋下加熱，打開排氣活門，放出冷空氣（一般般在水沸后排氣般般在水沸后排氣10-15分鐘左右）分鐘左右）,關閉放關閉放氣活門，使壓力逐漸上升至氣活門，使壓力逐漸上升至103Kpa，溫度達，溫度達121.3，維持，維持20分鐘以上，排氣至分鐘以上，排氣至“0”時，時，慢慢打開蓋子。切忌突然開蓋，是冷空氣大慢慢打開蓋子。切忌突然開蓋，是冷空氣大量量進入，蒸汽凝成水滴，使物品潮濕，且量量進入，蒸汽凝成水滴，使物品潮濕，且玻璃類易發(fā)生爆裂。待壓力指針
25、到玻璃類易發(fā)生爆裂。待壓力指針到“0”位置位置和和熱空氣排盡后，才能打開柜門，去除物品；熱空氣排盡后，才能打開柜門，去除物品；關緊進氣閥。關緊進氣閥。53高等課堂 二、化學消毒滅菌法二、化學消毒滅菌法l應用化學消毒劑注意事項應用化學消毒劑注意事項:1.明確消毒劑的種類與作用特點明確消毒劑的種類與作用特點 2.不同消毒劑的適宜使用對象不同消毒劑的適宜使用對象 3.不同消毒劑間的配伍禁忌不同消毒劑間的配伍禁忌 4.影響消毒劑消毒滅菌效果的因素影響消毒劑消毒滅菌效果的因素54高等課堂l影響消毒劑消毒滅菌效果的因素影響消毒劑消毒滅菌效果的因素 1.消毒劑的性質消毒劑的性質,濃度與作用時間濃度與作用時間 2.微生物的種類與數(shù)量微生物的種類與數(shù)量 3.消毒作用時的溫度消毒作用時的溫度(高提高效果高提高效果)4.消毒劑殺菌受酸堿度影響消毒劑殺菌受酸堿度影響 5.消毒環(huán)境中存在有機物影響效果消毒環(huán)境中存在有機物影響效果55高等課堂 三、生物消毒滅菌法三、生物消毒滅菌法l噬菌體噬菌體(bacteriophage,phage)一種感染細菌一種感染細菌,真菌或其他微生物真菌或其他微生物 的病毒。其中毒性噬菌體能在宿主的病毒。其中毒性噬菌體能在宿主 菌細胞內(nèi)復制增殖形成大量子代噬菌細胞內(nèi)復制增殖形成大量子代噬 菌體，并最終裂解宿主菌。菌體，并最終裂解宿主菌。56高等課堂l 謝謝 謝謝57高等課堂
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