難得的Quantity One 軟件的培訓(xùn)說明哦-Gel Doc XR ChemiDoc XRS 培訓(xùn)教程

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1、 凝膠成像及Quantity One初級安裝培訓(xùn)大綱 第一部分 儀器清點及軟件安裝 簡介： GelDoc XR和ChemiDoc XRS是Bio-Rad凝膠成像家族的兩個成員，它們的特點是操作簡便、功能齊全。它們采用自動控制的光學(xué)透鏡CCD攝像頭，便于進(jìn)行縮放、聚焦和光圈大小等的調(diào)節(jié)，以實時采集圖像。高精度的12位CCD使圖像數(shù)據(jù)達(dá)到4096級灰度，能滿足普通實驗室各類凝膠以及印記膜的成像需求。除此以外，ChemiDoc XRS的CCD是一個可冷卻45℃的超冷CCD，特別適合于化學(xué)發(fā)光等微弱信號的檢測。 Quantity One是凝膠成像儀附帶的圖像分析軟件，并且可以直接控制這些儀器

2、。拍好的圖像直接通過Quantity One打開，可以靈活地實現(xiàn)蛋白及核酸的一維電泳凝膠分析以及聚類分析、克隆計數(shù)等，并可輕松實現(xiàn)各種分析結(jié)果的輸出。 儀器清點： Bio-Rad Quantity One軟件應(yīng)用講義 選配件： 170-7950 White Light Transilluminator 或 170-8001 White Light Conversion Screen PC要求： 儀器安裝：(詳見工程師安裝手冊) 1. 檢查電源 2. 按要求連接儀器，安裝操作系統(tǒng)和圖像采集卡（ChemiDoc XRS的圖像采集卡要等到驅(qū)動程序安裝完成后再插入）

3、。 3. 安裝驅(qū)動程序（ChemiDoc XRS的圖像采集卡要等到驅(qū)動程序安裝完成后再插入）。 4. 安裝Q1軟件 5. 運(yùn)行Q1軟件，生成Dark Reference 6. 運(yùn)行Q1軟件，檢查zoom，focus，iris 工作是否正常，濾光片位是否正常 7. 用熒光標(biāo)尺或熒光板，檢查圖像儀能否正常攝取圖像 8. 獲取System ID 9. 將System ID和軟件序列號記下，同時提交《軟件密碼注冊表》，用戶用英文填寫（名稱要用全稱）好后帶回或由用戶按表中所示傳真回公司。 儀器各組成部分和功能介紹 圖像采集 （熒光chi） 注意事項： 1

4、． 安裝ChemiDoc XRS的圖像采集卡時，要先安裝其驅(qū)動程序，再將圖像采集卡插入； 2． 如果軟件的密碼狗不能被正常識別，請安裝帶補(bǔ)丁的驅(qū)動程序或向Bio-Rad安裝工程師求助； 3． 在給用戶安裝圖像儀和軟件前，先提醒用戶保存好申請來的密碼、軟件序列號和密碼狗。 4． 培訓(xùn)儀器時，提醒用戶不要將潮濕的樣品長期放在暗箱內(nèi)，以防腐蝕濾光片，更不要將液體濺到暗箱底板上，以免燒壞主板。 5． 提醒用戶儀器用完，及時關(guān)上電源，特別是ChemiDoc XRS的CCD電源； 6． 提醒用戶勿用控制成像儀的電腦上網(wǎng)，也不要自行重裝電腦操作系統(tǒng)或給操作系統(tǒng)升級。  第二部分 圖像獲取及Q

5、uantity One軟件分析操作 培訓(xùn)目的： 1． 熟練掌握凝膠成像儀對一維電泳凝膠圖像的獲取； 2． 熟悉用ChemiDoc XRS對印跡膜的化學(xué)發(fā)光檢測； 3． 熟悉Quantity One的定量分析和條帶分析流程。 時間安排： 成像儀的使用培訓(xùn)大約需要20－40分鐘，Quantity One軟件培訓(xùn)時間大約為1小時。 第一章 簡介 凝膠電泳是每個做分子生物學(xué)的研究者天天都要打交道的基本技術(shù)。電泳之后的信息處理與電泳本身同樣重要。目前有大量軟件可以用于分析電泳結(jié)果，今天要向大家介紹的是Bio-Rad公司的1D凝膠分析軟件Quantity One（Bio-Rad還有一個

6、做2D凝膠分析的軟件PDQuest）。Quantity One軟件是常用1D凝膠分析軟件中功能最強(qiáng)大，自動化程度最高的軟件。這個軟件的最新版本可以在Bio-Rad的網(wǎng)站（http://www.bio-）免費(fèi)下載，以供試用或用戶升級之用。 Quantity One軟件的主要功能包括定量分析(Volumes Quick Guide)，電泳條帶分析(Band Analysis)，差顯分析(Differential Display Analysis)，克隆計數(shù)(Colony Counting Analysis)等，此外，還可以直接控制Bio-Rad公司的各類圖像儀和ExQuest自動切膠儀，使您的凝

7、膠分析工作變得極為輕松。 Quantity One軟件擁有與windows操作系統(tǒng)下絕大多數(shù)應(yīng)用軟件相同的友好界面。插入密碼狗，打開Quantity One軟件，可以看到最上緣藍(lán)色橫條幅是標(biāo)題欄，往下依次是菜單欄和工具欄。  每個菜單的主要功能如下： File 圖像打開、保存、引入、打印等操作 Match 分子量估算、條帶匹配分析 Edit 圖像普通編輯操作 Volumn 定量分析 View 圖像縮放、三維視圖、看光密度值等操作 Analysis 濃度估算、克隆計數(shù)等分析 Image 圖像旋轉(zhuǎn)、翻轉(zhuǎn)、裁切等操作 Reports 分析結(jié)果輸出 Lane

8、 泳道分析 Window 窗口分析 Band 條帶分析 Help 幫助、快捷菜單、軟件注冊等 往下一行是工具欄，上面每個按鈕的功能見下表： 打開文件 圖像顯示控制 條帶分析工具 保存操作 顯示條帶 匹配工具 打印圖像 去除分析標(biāo)記 輪廓修改工具 看全圖 圖像工具 打印快捷指南 局部放大 文字工具 定量分析快捷指南 拖曳 定量工具 條帶分析快捷指南 放大并居中 灰度分析工具 克隆計數(shù)快捷指南 縮小并居中 泳道分析工具

9、 Quantity One軟件HelpàQuick Guide快捷指南提示如何實現(xiàn)一個功能，如定量分析(Volumes Quick Guide)，電泳條帶分析(Band Analysis)，差顯分析(Differential Display Analysis)，克隆計數(shù)(Colony Counting Analysis)等。快捷指南下有1，2，3…步驟，根據(jù)提示完成。 使用Quantity One軟件進(jìn)行電泳結(jié)果分析，通常包括圖像獲取、圖像預(yù)處理、分析、結(jié)果輸出四部分。圖像獲取就是通過軟件控制掃描儀（GS-800、PharosFX等）或凝膠成像系統(tǒng)（GelDoc、ChemiDoc、V

10、ersaDoc等）圖像預(yù)處理就是將掃描或拍照獲得的原始圖像進(jìn)行初步處理，以便更好地進(jìn)行后續(xù)分析。接下來是分析過程，根據(jù)分析的方法和目的不同，又可以分為定量分析、條帶分析、克隆計數(shù)、差異（聚類）分析等等。不管如何分析，最終我們都必須通過軟件的輸出功能，得到我們想要的結(jié)果。Quantity One軟件提供了多種結(jié)果輸出方式。在接下來的幾章里，我們將按照這個思路，一步步引導(dǎo)您使用這一軟件。 第二章 圖像獲取 Quantity One 4.4－4.6版本可以控制Bio-Rad目前幾乎所有的圖像儀，如GelDoc XR、ChemiDoc XRS等。這些圖像儀采集到的圖

11、像，可以直接保存成軟件可直接分析的圖像，即擴(kuò)展名1sc的原始圖像文件。下面將具體介紹如何通過Quantity One軟件從GelDoc XR和ChemiDoc XRS獲取圖像。 一． GelDoc XR GelDoc XR是Bio-Rad凝膠成像系統(tǒng)中最常用，操作最簡便的儀器，它可以用來拍攝EB、SYBR Green等染料染的核酸電泳凝膠；Sypro Ruby、銀染、考馬斯亮藍(lán)等方法染的蛋白電泳凝膠；以及化學(xué)顯色的印記膜等。 使用GelDoc XR之前，先接通電源，打開位于儀器背面右下角的電源開關(guān)；然后根據(jù)具體的應(yīng)用選擇合適的照明和濾光片位置。原則如下： 表格形式 模式1. 如果樣品

12、是通過EB、SYBR Green、Sypro Ruby等染料通過紫外激發(fā)來顯色，就先將樣品置于紫外透射平臺(UV Transilluminator)的中間，關(guān)上暗箱門，然后按下面板上的“Trans UV”按鈕，并將濾光片選擇桿置于位置“I”處。 模式2. 如果樣品是通過金屬銀、考馬斯亮藍(lán)等染料染色，就先將白光轉(zhuǎn)換屏 (White Light Conversion Screen)取下，打開下部的開關(guān)，放在紫外透射平臺上，樣品置于白光轉(zhuǎn)換屏中間。關(guān)上暗箱門，然后按下面板上的“Trans White”按鈕，并將濾光片選擇桿置于位置“I”處。 模式3. 如果是化學(xué)顯色等非透明可見樣品，則用模式2中

13、所示方法，將樣品置于白光轉(zhuǎn)換屏中間。關(guān)上暗箱門，然后按下面板上的“Epi White按鈕”，并將濾光片選擇桿置于位置“O”處。 接下來打開Quantity One軟件，選擇File》GelDoc XR，按以下順序操作： ⑥ ⑦ ⑧ ⑤ ④ ② ③ ① ① 按下Live/Focus，成像儀進(jìn)入實時成像； ② 選擇照明模式，一般核酸膠用UV,蛋白膠用White模式 注意，選擇完成后，要按下成像儀面板上相應(yīng)的光源按鈕 ② 此功能有三個上下鍵按鈕：IRIS（光圈），ZOOM（縮放），F(xiàn)OCUS（聚焦），您可在軟件上直接調(diào)節(jié)或在儀器面板上手工調(diào)節(jié) 調(diào)節(jié)步驟

14、： a 調(diào)大IRIS，以看到圖像 b點ZOOM,將膠適當(dāng)放大 c 調(diào)節(jié)IRIS至合適大?。ㄒ话闱闆r下盡量選擇小光圈，因為小光圈景深大，圖像更清晰) d調(diào)節(jié)FOCUS，至圖像最清晰按 ④ 按“Auto Expose”；如是，單擊Auto Expose,系統(tǒng)將自動選擇曝光時間成像，如不滿意，單擊Manual Expose，并輸入曝光時間（秒），圖像滿意后保存; During the auto exposure, the image is continuously integrated on the camera CCD until it reaches a certain pe

15、rcentage of saturated pixels. This percentage is set in the Options dialog box. (Default = 0.15 percent. See section B.9, Options.) Once you are satisfied with the quality of the displayed image, click on the Freeze button to stop the exposure process. The last full exposure will be displayed in

16、 the image window. ⑤ 如是蛋白凝膠，接第6步直接將清晰的圖像保存即可 ⑦ 按下“Analyze”；AnalyzeClicking on Analyze will open a separate image window displaying the captured image. The default name for the image will include the date, time, and user (if known). ⑧ 按下“Save”鍵，保存圖像。 二． ChemiDoc XRS ChemiDoc XRS是Bio-Rad另一款常用的凝

17、膠成像儀，它不僅具有GelDoc XR的全部功能，而且還有卓越的化學(xué)發(fā)光檢測功能。它配備一個功能強(qiáng)大的超冷CCD，具有很高的靈敏度，能檢測微弱的Western Blot化學(xué)發(fā)光信號。 ChemiDoc XRS的操作與GelDoc XR類似，主要的不同在于操作者需要首先選擇要拍攝的樣品類型(Select Application)，軟件會自動調(diào)整數(shù)據(jù)采集模式。用戶還可以根據(jù)自身樣品的特殊性選擇適當(dāng)?shù)恼彰髂Ｊ胶拖袼乩?即binning，有2×2、3×3兩種捆綁水平，2×2代表長寬共4個像素采集的信號綁在一起，3×3代表長寬共9個像素采集的信號綁在一起。捆綁的像素越多，靈敏度越高，但分辨率相應(yīng)降低

18、。這項功能主要適用于化學(xué)發(fā)光檢測。 水平。 ①① ②① ④① ③① 接下來打開Quantity One軟件，選擇File》ChemiDoc XRS，按以下順序操作： ⑤ ① 選擇合適的應(yīng)用模式，鼠標(biāo)點擊會彈出如下圖所示的菜單： a) 核酸凝膠或熒光染色的蛋白膠，選擇UV Transillumination b) 銀染、考染的蛋白膠，選擇White Transillumination c) 不透明、不發(fā)光樣品，選擇White Epi Illumination d) 信號較強(qiáng)的化學(xué)

19、發(fā)光印記膜，選擇Chemiluminescence e) 信號較弱的化學(xué)發(fā)光印記膜，選擇Chemi Hi Sensitivity f) 如果要拍照特殊樣品，如信號很弱的化學(xué)發(fā)光印記膜，選擇Custom，并選擇需要的照明方式及像素捆綁等； 注意，選擇完成后，要按下成像儀面板上相應(yīng)的光源按鈕，同時根據(jù)以下原則調(diào)整濾光片位：在a、b兩種應(yīng)用模式下，或在custom模式并選擇紫外或白光透射時，將濾光片選擇桿置于位置“I”處；其它模式或在custom模式并選擇側(cè)面白光或無照明時，將濾光片選擇桿置于位置“O”處。 ② 對焦，調(diào)節(jié)光圈，方法與GelDoc XR類似； ③ 調(diào)節(jié)好以后，按下“free

20、ze”； ④ 獲取圖像，非化學(xué)發(fā)光檢測，選擇自動曝光或手動曝光；化學(xué)發(fā)光檢測選擇“Live Acquire”，彈出如下對話框： 第一行，填入最長曝光時間（以秒為計）； 第二行，填入初次曝光時間（以秒為計）； 第三行，填入需要曝光的次數(shù)，每次曝光都是前幾次曝光時間的累加 最后按“OK”鍵，開始曝光。 注意：化學(xué)發(fā)光檢測需要關(guān)閉所有光源，并將光圈“IRIS”調(diào)至最大。另外，建議先用檢測普通非透明樣品的方法對焦，再關(guān)閉光源，檢測化學(xué)發(fā)光 ⑤ 當(dāng)這個選項被選中時，對于步驟①當(dāng)中的a)、b）兩種應(yīng)用模式，曝光完成后軟件會提示是否需要重新做平場。如果要做，按軟件提示一步步做下去即可，如果

21、不久前做過，可選擇不做。 1． 如是化學(xué)發(fā)光，在Select Application下選擇Chemiluminescence 或Chemi Hi Sensitivity(如樣品強(qiáng)度較弱)，先打開Epi-White側(cè)面白光，同第5步調(diào)節(jié)清楚膜的聚焦?fàn)顟B(tài)（如膜上沒有可對焦的標(biāo)記，可用記號筆做個小記號）。然后關(guān)閉光源，不打開任何光源，將濾光片位置換到　o位（儀器上方右側(cè)），將光圈Iris開到最大，選擇Auto Expose自動曝光，或輸入Manual Expose時間，可對化學(xué)發(fā)光的弱信號進(jìn)行長時間積累如30min，或單擊Live Acquire進(jìn)行多楨圖象實時采集，在對話框內(nèi)定義曝光時間長短，采

22、集幾楨圖象，在采集的多楨圖象中選取滿意的保存。 化學(xué)發(fā)光是特別弱的發(fā)光，所以曝光可以很長，記得做完化學(xué)發(fā)光后，把濾光片位置換到原先的位置（I位） Illumination Flat Fielding 第三章 圖像分析 Quantity One的圖像分析功能相當(dāng)強(qiáng)大，根據(jù)不同的需要，可以分為定量分析、條帶分析、相似性分析以及克隆計數(shù)(用于藍(lán)白斑篩選)等等，而且每種分析法都有獨(dú)特的優(yōu)點和輸出方式。本章重點介紹常用的定量分析和條帶分析方法，其余更細(xì)更深的功能請參考軟件自帶的用戶手冊。 一． 定量分析（Volumn Analysis） 定量分析是計算選定區(qū)域內(nèi)信號強(qiáng)度的總

23、和，是Quantity One最方便的定量工具。這種分析方式考慮全定區(qū)域的真實形狀，可用于電泳條帶、斑點、大型芯片以等圖像的定量。這種定量的方法可以扣除背景，可以按照用戶的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出條帶或斑點的濃度，但它不能計算分子量，也不能進(jìn)行條帶匹配和相似性分析。Quantity One軟件稱這類定量的結(jié)果為Volume。 Volume＝選定區(qū)域內(nèi)所有像素信號強(qiáng)度的總和×像素面積 Volume的單位：int×mm2 快捷指南Volumes Quick Guide，能夠指導(dǎo)您對任意所選區(qū)域進(jìn)行定量分析,此分析可以報告多種結(jié)果，常用的結(jié)果是相對濃度和絕對濃度（須提

24、供標(biāo)準(zhǔn)品）。具體的操作方法如下： 1． 選擇成像系統(tǒng)或打開已保存的文件(軟件可以控制Bio-Rad所有的成像系統(tǒng)如GelDoc,ChemiDoc,VersaDoc,GS-800,FX,如不是Bio-Rad成像系統(tǒng)所攝取的圖象，將圖象保存為Tiff 必須是8位（bit）或16位（bit）無壓縮的tiff文件 文件格式，軟件也可進(jìn)行分析處理) 2． Zoom Box，縮放，對圖象進(jìn)行放大觀察 3． Transform轉(zhuǎn)化，調(diào)節(jié)圖象的對比度黑白 4． 選擇待分析區(qū)域： Volumn Contour Tool等高線勾勒區(qū)域，自動連接濃度濃度相同的點，如U1 Volume Free

25、 hand Tool自由畫筆選擇區(qū)域，可以勾勒出無規(guī)則形狀,如U2 Volume Rect Tool 矩形區(qū)域選擇，如U3 Volumn Circle Tool圓形選擇區(qū)域，如U4 按上面4種方法選擇需要定量的區(qū)域。 5．雙擊所選區(qū)域，出現(xiàn)如下窗口，定義樣品類型，如未知樣品Unkonwn(U1,U2…即待計算樣品)，背景Background(B1,B2…，軟件在算濃度時會將此區(qū)域的濃度自動扣除) 或標(biāo)準(zhǔn)樣品Standard（Std1,Std2, 如果該樣品是濃度標(biāo)準(zhǔn)樣品，即定量標(biāo)準(zhǔn)，需在濃度concentration一欄輸入該樣品的濃度）。 6． Select Tool選

26、擇不同區(qū)域 7． Print Image打印圖像 8． Volume Analysis Report 定量報告結(jié)果，打開出現(xiàn)如下窗口，選擇要報告的參數(shù)，主要有2個參數(shù)Volume、adj. Vol. (即adjusted volume) 和Concentration。Volume為定量值，adj. Vol. 為扣除背景后的定量值，如有濃度標(biāo)準(zhǔn)樣品（Std），軟件可報告Concentration絕對濃度。參數(shù)選好后，按下按鈕“done”。 7．軟件報告如下圖所示：按右側(cè)輸出按鈕，可將表格保存成txt文件，按左側(cè)打印按鈕，可將報告打印出來。 打印 文本輸出

27、二．條帶分析（Band Analysis） 條帶分析是Quantity One最基本的分析工具，它可以自動識別電泳泳道和識別條帶，依據(jù)泳道的平均光密度和條帶寬度對每個條帶進(jìn)行模式化定量。這種分析方式雖然不如定量分析來得方便，但這樣可以實現(xiàn)非常復(fù)雜的電泳分析，滿足各種不同的結(jié)果需要。這種方式的最大優(yōu)點在于它可以完全拋棄人為主觀因素而進(jìn)行全自動定量。 用條帶分析的方法進(jìn)行定量的結(jié)果叫Trace Quantity（Trace Qty），計算方法是：首先軟件自動計算條帶上每一橫排像素的平均光密度和平均光密度分布曲線，然后每個具體條帶的定量值是平均光密度曲線的線下面積的積分，即： Trace Qu

28、antity＝平均光密度×條帶上下邊界的距離 Trace Quantity的單位：OD*mm 條帶分析中的條帶定量模型 下面介紹用此功能對泳道內(nèi)的所有條帶進(jìn)行分子量確定，相對濃度分析 1． 打開已保存的文件(如不是Bio-Rad成像系統(tǒng)所攝取的圖象，將圖象保存為Tiff 必須是8位（bit）或16位（bit）無壓縮的tiff文件 文件格式，軟件也可進(jìn)行分析處理) 2． Zoom Box，縮放，對圖象進(jìn)行放大觀察 3． Transform轉(zhuǎn)化，調(diào)節(jié)圖象的對比度黑白 4． 確定泳道(lane),并對泳道進(jìn)行各種調(diào)整（實際實驗中泳道往往不是垂直的而出現(xiàn)各種變形）。按下圖所示

29、在軟件的工具欄中有一Lane Tool圖標(biāo)，包含有更多泳道編輯工具。 Band Tool 條帶編輯工具包 Lane Tool 泳道編輯工具包 5．選擇Frame Lanes，輸入圖像實際泳道(lane)數(shù)并確認(rèn)。此時圖像上泳道的位置上會出現(xiàn)一條條紅線，每條紅線就代表一根泳道。 6．選擇Add/Adjust Anchors，此時泳道紅線上會出現(xiàn)一些小圓圈。這些小圓圈稱為錨定點(anchor)，錨定點規(guī)定了泳道走向。當(dāng)泳道不直時，點擊出現(xiàn)彎曲的泳道部位，就可以增加錨定點。鼠標(biāo)按住錨定點，可以拖動錨定點，讓每根紅線始終位于泳道的中間線上。 7．Lane Background去除

30、泳道背景。點擊該按鈕，選擇一條適當(dāng)?shù)挠镜傈c擊之，然后在彈出的對話框中選“All Lane On”，在“Rolling Disk Size”中填入適當(dāng)?shù)臄?shù)值 數(shù)值代表背景扣除數(shù)，值越大則背景扣除越少，被計入條帶定量值越多，反之則背景扣除越多。從經(jīng)驗來看，該數(shù)值以2－40之間為宜。 。 8．Detect Band，檢測泳道內(nèi)的條帶，打開出現(xiàn)如下窗口。通過調(diào)節(jié)sensitivity靈敏度可調(diào)節(jié)檢測出的條帶數(shù)，調(diào)節(jié)Lane Width使代表表帶的紅色橫線與條帶寬度差不多寬。中間一行人工編輯按鈕可以用來增加/減少條帶、調(diào)節(jié)條帶的上、下邊界等。打開工具欄中Band Tool條帶編輯工具包可看到更多編

31、輯工具（如上圖） 人工編輯按鈕 9. Standard輸入分子量標(biāo)準(zhǔn)，軟件自帶有許多Bio-Rad的分子量標(biāo)準(zhǔn)，如你用的是自己的標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)入New Standard建立新的分子量標(biāo)準(zhǔn)，軟件可以選擇標(biāo)準(zhǔn)單位是MW（蛋白質(zhì)）還是BP（核酸）等（左下圖）。在Protein-Standard對話框中輸入分子量數(shù)值，完成后單擊賦值圖標(biāo)（右下圖），回到圖象文件上單擊標(biāo)準(zhǔn)樣品的泳道，軟件自動將所輸?shù)姆肿恿繑?shù)值和泳道內(nèi)的條帶一一對應(yīng)。 賦值圖標(biāo)： 告訴軟件哪條是分子量標(biāo)準(zhǔn)樣品的泳道 輸入分子量數(shù)值 10. Band Attribute條帶屬性，在完成第9步以后，軟件已自動計算出了其他

32、未知條帶的分子量,打開band attribute選擇要報告的參數(shù)，這里我們選擇Molecular Weight，圖象上可以看到所有條帶的分子量（紅顏色標(biāo)記），標(biāo)準(zhǔn)分子量為藍(lán)色標(biāo)記。 11. Print Image打印圖象 12. All Lane Report所有泳道條帶結(jié)果報告。打開窗口，選擇要報告的參數(shù)，如Mol.Wt.（分子量，如左下圖），軟件將報告結(jié)果（右下圖），在報告的右下腳有一報告輸出工具，點擊可將報告結(jié)果輸出成TXT文本格式或輸出至剪貼板，可粘貼到EXCEL，WORD等文件下。 報告結(jié)果輸出 條帶% 常見

33、問題及處理： 1 問：為什么我新買的Quantity One軟件幾天前還能用，現(xiàn)在只能使用最基本的功能了？ 答：可能是密碼未正確安裝，而試用期已過。 2 問：為什么我重新安裝Quantity One軟件后就不能使用了？ 答：可能是安裝了超過版本限制的高版本Quantity One。 3 問：我的密碼狗還在，可密碼找不到了，我該如何填寫密碼？ 答：可以暫時將電腦連到Internet上，打開Quantity One軟件，選擇Help》Register》Check License，或直接打電話800-820-5567，向Bio-Rad工程師詢問。 4 問：Quantity One軟件能

34、否分析通過其它公司成像儀或掃描儀得到的照片？ 答：可以，但前提是照片必須是未經(jīng)壓縮的TIFF (tif) 文件，且數(shù)據(jù)采集位數(shù)是8位或12位。 5 問：我拍出的圖片，條帶很明顯，為什么軟件總找不到？ 答：打開Quantity One軟件，鼠標(biāo)放在圖像上，同時按下Ctrl.+T，看看條帶數(shù)據(jù)是否大于背景，如果不是，則選擇Image》Invert Data，然后同時按下Ctrl.+B，選擇Invert Display。 6 問：為什么我拍出來的照片，總有一根根很粗的背景？ 答：可能是應(yīng)該使用濾光片而沒有使用，把照明燈管攝入照片。 7 問：為什么我用ChemiDoc XRS拍

35、出來的照片，總有一條條向電泳條帶的影子？ 答：可能是在以前使用動態(tài)平場功能時，未將樣品取出，導(dǎo)致參考背景始終有以前樣品的影子。 8 問：為什么我的白光轉(zhuǎn)換屏不亮了？ 答：白光轉(zhuǎn)換屏下方有電源插口和開關(guān)，檢查電源線是否插緊，開關(guān)是否打開。 9 問：我想割膠，如何打開紫外透射平臺的紫外燈？ 答：將暗箱門關(guān)好，將抽屜式紫外透射平臺完全拉出，安上有機(jī)玻璃保護(hù)屏，然后按下“Trans UV”按鈕和“Prep UV”按鈕。 10 問：為什么我拍出來的照片越來越模糊？ 答：可能是焦距沒調(diào)好，如果排除這個原因，并且是若干年前買的老機(jī)器，請檢查濾光片有沒有被腐蝕。 如有問題請咨詢Bio-Rad以下辦事處： 17-17 北京 電話：010-82675748 傳真：010-62529800 上海 電話：021-64260808 傳真：021-64264988 廣州 電話：020-87771498 傳真：020-87751142 Bio-Rad Quantity One軟件應(yīng)用講義 17-17