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1、神經(jīng)干動作電位電生理綜合實驗,實驗目的,測定蛙坐骨神經(jīng)的動作電位傳導速度,學習蛙類離體坐骨神經(jīng)干的單相、雙相動作電位的記錄方法及與強度的關系。 判別、分析神經(jīng)干動作電位的基本波形、測量其幅值以及時程。,,學會制作坐骨神經(jīng)標本的方法,實驗原理（一）,將蛙的神經(jīng)標本放在任氏液中，其興奮性在幾個小時內(nèi)可保持不變。 若給神經(jīng)一次適宜刺激，可在神經(jīng)上產(chǎn)生一個動作電位。生理學實驗中常利用蛙的坐骨神經(jīng)標本來觀察神經(jīng)興奮性的規(guī)律。,蛙坐骨神經(jīng)標本制作,實驗原理（二）,本實驗將兩個引導電極置于正常完整的神經(jīng)干表面，當神經(jīng)干的一端興奮之后，興奮波會先后通過兩個引導電極，可記錄到兩個相反方向的電位偏轉(zhuǎn)波形，稱為
2、雙相動作電位。如果兩個引導電極之間的神經(jīng)組織有損傷，興奮波只能通過一個引導電極，不能傳導至第二個引導電極，則只能記錄到一個方向的電位偏轉(zhuǎn)波形，稱為單向動作電位。,蛙坐骨神經(jīng)雙相、單相動作電位與強度法則,實驗原理（三）,,動作電位在神經(jīng)干上傳導具有一定的速度蟾蜍的坐骨神經(jīng)是混合神經(jīng)，由許多粗細不等的有髓和無髓神經(jīng)纖維構(gòu)成，其中以A類纖維為主，傳導速度約為3540m/s。,神經(jīng)沖動的傳導速度 （v）是指動作電位在單位時間（t）內(nèi)傳導的距離（s）,神經(jīng)動作電位傳導速度的測定,儀器與器械（一）,普通剪刀、手術剪、組織剪、眼科鑷 金屬探針、蛙板、蛙釘 玻璃分針 瓷碗、細線、培養(yǎng)皿、滴管,實驗方法與步驟,
3、1.破壞腦、脊髓（雙毀髓）,枕骨大孔,,2.剪除軀干上部、皮膚及內(nèi)臟,坐骨神經(jīng),坐骨神經(jīng)的走行,3.剝皮 剝完皮膚后，將標本放在盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。,4.洗干凈雙手及使用過的全部手術器械。,5.分離兩腿,6.游離坐骨神經(jīng)標本,注意事項,1.破壞腦脊髓要徹底，防止蟾酥射入操作者眼中或污染實驗標本。 2.操作時避免壓擠、損傷和用力牽拉標本，不可用金屬器械觸碰神經(jīng)干。3.操作過程中，應給神經(jīng)和肌肉滴加任氏液，防止表面干燥，以免影響標本的興奮性。4.標本制成后須放在任氏液中浸泡數(shù)分鐘,使標本興奮性穩(wěn)定,再開始實驗效果會較好。,儀器與器械（二）,計算機生物信號采集處理系統(tǒng) RM6240,神經(jīng)標本屏蔽
4、盒,實驗方法與步驟,1.坐骨神經(jīng)標本的制備,2.儀器及標本的連結(jié),,坐骨神經(jīng)干放置于神經(jīng)標本屏蔽盒內(nèi) 神經(jīng)標本屏蔽盒 與RM6240系統(tǒng)連接,刺激電極,引導電極,s+ s_,r1 r1 r2 r2,接地電極,（1）引導雙相神經(jīng)動作電位,3.啟動BL410系統(tǒng)，進入系統(tǒng)軟件，點擊“實驗項目”菜單，選擇“神經(jīng)肌肉生理實驗”。,點擊“神經(jīng)干動作電位的引導”，引導出一個雙相動作電位。,仔細觀察雙相動作電位的波形。讀出最大刺激時雙相動作電位上下相的振幅和整個動作電位持續(xù)時間數(shù)值。, 自動調(diào)節(jié)刺激強度，觀察動作電位波形的變化。讀出波寬為某一數(shù)值時的閾刺激和最大刺激。,（2）觀察和測定雙相動作電位, 測定神
5、經(jīng)沖動傳導速度,分別測量兩個動作電位起始點之間的時間差（t），為神經(jīng)沖動從第一對引導電極傳導到第二對引導電極所需要的時間。,測量神經(jīng)屏蔽盒內(nèi)兩對電極之間的距離（s）即為神經(jīng)干的長度。（2） 按公式v=s/t(m/s）計算神經(jīng)沖動傳導的速度。,用鑷子將兩個引導電極r1,r1之間的神經(jīng)夾傷，記錄單相動作電位。, 觀察和測定單相動作電位,注意事項,制備標本時，神經(jīng)干應盡可能分離長一些，上自脊柱附近的主干，下至踝關節(jié)附近。分離過程中勿損傷神經(jīng)組織，以免影響其興奮性。 將神經(jīng)干搭在引導電極上時，神經(jīng)干不能與標本盒壁相接觸，盡量將其拉成水平線，不要下垂或斜向放置。 3.刺激強度在開始時不要過強，先由弱強度開始，逐步加大強度，以免剌激傷害神經(jīng)標本。 4.經(jīng)常滴加任氏液，保持神經(jīng)標本濕潤。 5.實驗完畢神經(jīng)糟應仔細清洗，擦干，以免殘留的鹽液導致電極腐蝕生銹。,,實驗結(jié)果分析及思考,1. 神經(jīng)干動作電位與刺激強度有何關系？神經(jīng)干動作電位符合“全或無”定律嗎 ？ 為什么?,
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