實驗一神經(jīng)干動作電位.ppt

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生理學(xué)實驗,,實驗一 神經(jīng)干動作電位的引導(dǎo)及傳導(dǎo)速度和不應(yīng)期的測定,【實驗?zāi)康摹?1.學(xué)習(xí)和掌握制備蛙類神經(jīng)干制作方法。 2.①學(xué)習(xí)使用BL-420生物機能實驗系統(tǒng)引導(dǎo)蛙類坐骨神經(jīng)干動作電位的方法。 ②分析神經(jīng)干動作電位的基本波形、幅值、時程，測定神經(jīng)興奮的傳導(dǎo)速度和不應(yīng)期。,【實驗原理】神經(jīng)干動作電位是神經(jīng)興奮的客觀標志。它是由粗細不等、興奮性不同的神經(jīng)纖維所組成的，故在神經(jīng)干表面記錄的動作電位為復(fù)合性動作電位。這種電位的幅度在一定范圍內(nèi)可隨刺激強度的增加而加大。,處于興奮部位的膜外電位負于靜息部位，當神經(jīng)沖動通過后，該處的電位又恢復(fù)到靜息水平，這一可擴布的、一過性的電位變化，即動作電位。如果將兩個引導(dǎo)電極分別置于神經(jīng)干表面，當神經(jīng)干一端興奮時，興奮波先后通過兩個引導(dǎo)電極處，記錄到兩個方向相反的電位偏轉(zhuǎn)波形，稱為雙向動作電位。,【實驗對象】 蟾蜍或蛙 【實驗器材】蛙類手術(shù)器械（粗剪刀，眼科剪，手術(shù)剪，鑷子，探針，蠟盤，玻璃分針，大頭針，）培養(yǎng)皿，神經(jīng)屏蔽盒，引導(dǎo)線，刺激電極，任氏液，BL-420生物機能實驗系統(tǒng)，廢液缸，張力換能器。,【實驗步驟】 1.制備坐骨神經(jīng)腓神經(jīng)標本 （1）破壞腦脊髓 （2）剪除軀干上部及內(nèi)臟 （3）剝皮及分離下肢 （4）制備坐骨神經(jīng)-腓神經(jīng)標本。,,,,,,,2.儀器連接,（1）開機并啟動BL-420生物機能實驗系統(tǒng) （2）本實驗采用雙通道記錄，將兩對引導(dǎo)電極分別與通道1和通道2連接，刺激電極連接至刺激器輸出接口。 連接方法如見圖：,BL-420生物機能實驗系統(tǒng) 神經(jīng)屏蔽盒,,,,,,,CH1 CH2,刺激輸出,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,刺激電極,地線,C1 C2 C3 C4,儀器連接示意圖,,（3）將坐骨神經(jīng)—腓神經(jīng)標本放入神經(jīng)屏蔽盒（坐骨神經(jīng)中樞端放在刺激電極上，外周端放在引導(dǎo)電極上）。,【實驗項目】 1、觀察細胞外引導(dǎo)雙相動作電位的波形特點、測定幅值及時程。 2、測定神經(jīng)干動作電位傳導(dǎo)速度。 3、測定不應(yīng)期： 記下第二個動作電位剛消失時的兩個刺激脈沖之間的波間隔，此時的波間隔值即為絕對不應(yīng)期。用不應(yīng)期減去絕對不應(yīng)期即可得出相對不應(yīng)期,【結(jié)果分析】 1.解釋雙相動作電位產(chǎn)生的機制，記錄動作 電位的時程、幅值。(3) 2.測定神經(jīng)干動作電位傳導(dǎo)速度:V=ΔS/ΔT (m/s) 。（4） 3.動作電位不應(yīng)期的測量（5） 4.刺激強度與復(fù)合動作電位幅值的關(guān)系（6）,【注意事項】 1.破壞蟾蜍的腦和脊髓時，應(yīng)防止其耳后腺及皮膚分泌的蟾酥毒液射入操作者的眼內(nèi)或污染實驗標本。 2.制備神經(jīng)標本過程中，應(yīng)避免用手捏神經(jīng)或鑷子夾傷神經(jīng)。 3.為了防止神經(jīng)標本干燥，制備過程中需不斷滴加任氏液，使其保持良好的興奮性。,4.將神經(jīng)干放入屏蔽盒之前，用刀片輕刮引導(dǎo)電極，以保證電極和神經(jīng)干密切接觸。 5．制作標本過程中，切勿傷及神經(jīng)干及其分支，避免牽拉和其它不良刺激， 6．實驗過程中，應(yīng)經(jīng)常在標本上滴加任氏液以保持濕潤，使其保持良好的興奮性。 7．每次刺激標本以后，必須讓肌肉休息1-2分鐘，以防標本疲勞。,雙向動作電位,傳導(dǎo)速度：動作電位在神經(jīng)干的傳導(dǎo)速度，可用電生理學(xué)方法進行測量。測定神經(jīng)沖動在神經(jīng)干上傳導(dǎo)的距離（S）和通過該距離所需時間（t），即可計算出神經(jīng)沖動的傳導(dǎo)速度(V)，V＝ΔS/Δt。,不應(yīng)期：當雙脈沖的間隔時間為20ms 左右時，示波器熒光屏上呈現(xiàn)兩個同樣大小的動作電位。逐漸縮短雙脈沖之間的間隔，第二個動作電位逐漸向第一個動作電位靠近，振幅也隨之降低，最后可因落在第一個動作電位的絕對不應(yīng)期內(nèi)而完全消失。,刺激強度與復(fù)合動作電位幅值的關(guān)系,一根神經(jīng)纖維在受到閾值以上刺激產(chǎn)生動作電位不隨著刺激強度增大而增大, 但是坐骨神經(jīng)干是有許多神經(jīng)纖維組成的,在受到閾值以上刺激時,由于引起不同數(shù)目神經(jīng)纖維產(chǎn)生動作電位,隨著刺激強度增大,神經(jīng)纖維產(chǎn)生動作電位的數(shù)目也越多,動作電位的幅度也就越大,當全部神經(jīng)纖維都產(chǎn)生動作電位時,動作電位的幅度就不會增大了． 故在一定范圍內(nèi),坐骨神經(jīng)干動作電位的幅度為何隨著刺激強度增大而增大．,實驗報告要求,神經(jīng)干動作電位引導(dǎo)及其傳導(dǎo)速度和不應(yīng)期測定,一、實驗?zāi)康?二、實驗器材 三、實驗步驟,四、實驗結(jié)果,1.動作電位的時程 及幅度 2. 寫出閾刺激 、最大刺激強度 ； 3.相對不應(yīng)期 、絕對不應(yīng)期 4.傳導(dǎo)速度：,五、思考題,1.雙相動作電位產(chǎn)生機制。 2.動作電位隨刺激增大機制，與全或無是否矛盾？,