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1、神經(jīng)干動作電位,坐骨神經(jīng)干動作電位的記錄、觀察 神經(jīng)干不應期的測定 動作電位傳導速度的測定,目的,通過記錄神經(jīng)干的復合動作電位,掌握生物電記錄的一般原則和方法。 學會利用刺激器誘發(fā)組織興奮的方法;掌握設定刺激參數(shù)的方法。 學習分析辨別動作電位,了解其產(chǎn)生的基本原理,加強對興奮性和閾強度的了解。,實驗原理,用電刺激神經(jīng),在刺激電極的負極下神經(jīng)纖維膜內(nèi)產(chǎn)生去極化,當去極化達到閾電位,膜上產(chǎn)生一次可傳導的快速電位反轉(zhuǎn),即動作電位。 神經(jīng)干由許多神經(jīng)纖維組成。其動作電位是以膜外記錄方式記錄到的復合動作電位。 如果兩個引導電極置于興奮性正常的神經(jīng)干表面,興奮波先后通過兩個電極處,便引導出兩個方向相反的電
2、位波形,稱雙相動作電位。,雙相動作電位 Biphasic Action Potential,刺激偽跡(Stimulus artifact),刺激偽跡是刺激電流通過導電介質(zhì)擴散至兩引導電極而形成的電位差信號。,屏蔽盒用有機玻璃制成,盒內(nèi)有兩根導軌,導軌上有7個裝有銀絲電極的有機玻璃滑塊,每個電極滑塊通過導線與標本盒側(cè)壁的一個接線柱相聯(lián),其中一對作刺激電極,l2對作記錄電極,記錄電極與刺激電極間的電極接地。,屏蔽盒內(nèi)要保持一定的濕度,但電極間不要短路,電極的銀絲必需保持清潔; 實驗時標本應經(jīng)常保持濕潤,標本兩端的扎線要懸空; 神經(jīng)的近中樞端置于刺激電極一側(cè),外周端置于記錄電極側(cè)。,,實驗材料,動物
3、 蟾蜍 器械 常用手術(shù)器械、蛙板、毀髓針、玻璃解剖針、 神經(jīng)屏蔽盒、大頭針、任氏液、燒杯、培養(yǎng)皿。 RM6240B生理信號記錄儀。,操作過程,坐骨神經(jīng)干的制備 雙毀髓 (錄像) 制備下肢標本 (錄像) 制備坐骨神經(jīng)標本 (錄像),2. 連接實驗裝置,,實驗操作 進入實驗模塊:“實驗” 肌肉神經(jīng)神經(jīng)干動作電位 彈出刺激器對話框,并處于示波狀態(tài) 在刺激器對話框中選擇同步觸發(fā)。,,,測量坐骨神經(jīng)干的閾強度、最適刺激強度:調(diào)整刺激強度從0mv遞增,求得閾強度、最適刺激強度。 在最適刺激強度下,觀察動作電位形狀,測量其時程及幅度。,根據(jù)波形幅度可調(diào)節(jié)位于屏幕 上顯示通道右側(cè)的靈敏度。 參數(shù)調(diào)節(jié)后,應再次
4、點擊“開 始刺激”鍵,以刷新波形。 可用“PgUp”與“PgDn”翻頁查 找波形。,,,,神經(jīng)損傷對復合動作電位的影響 在第一對記錄電極間用鑷子夾傷神經(jīng)干,記錄動作電位。觀察復合動作電位有何變化。,注意事項,制作標本過程中應盡量減少對神經(jīng)的牽拉,以免損傷神經(jīng)。 實驗過程中,要經(jīng)常保持標本濕潤。 神經(jīng)干應與每個使用的電極密切接觸。 實驗結(jié)束后,神經(jīng)屏蔽盒應清洗、擦干,以防止殘留的鹽液常腐蝕電極。,,坐骨神經(jīng)腓腸肌標本的制備,方法與步驟: 1. 雙毀髓: 毀髓針自枕骨大孔分別進入顱腔和椎管搗毀腦和脊髓; 2. 剝制后肢標本:剪去頭、前肢和內(nèi)臟,剩余脊柱和后肢; 3. 分離兩后肢:左右兩后肢分開,勿損傷兩側(cè)坐骨神經(jīng); 4. 分離坐骨神經(jīng):玻璃分針,保留一段脊柱骨; 5. 游離腓腸肌:跟腱結(jié)扎 6. 分離股骨頭 7. 檢驗標本:鋅銅弓電極,完整標本坐骨神經(jīng)腓腸肌股骨頭一段脊柱骨,,,注意事項: .操作過程中切勿損傷神經(jīng),勿用金屬器械觸碰坐骨神經(jīng); .操作過程中經(jīng)常用任氏液濕潤去皮的標本。,下次實驗:神經(jīng)干AP不應期與傳導速度的測定,