實驗一基本組織

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1、泉州師范學院教案 實驗一 基本組織 【目的和內(nèi)容】 1、觀察各類上皮組織的結(jié)構(gòu)特點；上皮組織游離面的某些特殊結(jié)構(gòu)如紋狀緣和纖毛； 2、重點觀察疏松結(jié)締組織的纖維及各種細胞成分，比較各種結(jié)締組織的結(jié)構(gòu)特點； 3、比較觀察平滑肌、骨骼肌及心肌三種肌纖維縱切和橫切的結(jié)構(gòu)特點； 4、觀察神經(jīng)元的結(jié)構(gòu)特點、尼氏體及神經(jīng)原纖維的形態(tài)與分布； 5、觀察突觸及運動終板的形態(tài)結(jié)構(gòu)。 【材料和用具】 顯微鏡、單層扁平上皮裝片(硝酸銀染色)、甲狀腺切片(HE染色)、單層柱狀上皮切片(小腸切片)(HE染色)、氣管切片(HE染色)、復層扁平上皮切片(食管切片)(HE染色)和膀胱切片(HE染色)

2、、疏松結(jié)締組織裝片(HE染色)、透明軟骨切片(HE染色)、骨磨片、血涂片(瑞氏染色)、骨骼肌縱橫切片(鐵蘇木精染色)、平滑肌分離裝片(HE染色)、心肌縱橫切片(鐵蘇木精染色)、脊髓灰質(zhì)涂片(Nissl染色)、脊髓橫切片(Cajal銀染色)、運動終板(氯化金法浸染的肋間肌)。 【操作】 一、上皮組織 (一) 單層扁平上皮 取單層扁平上皮裝片或小腸、氣管或其他器官切片(HE染色)觀察。 1、單層扁平上皮裝片 ⑴ 低倍鏡觀察：選擇染成淡黃色、標本最薄的部分進行觀察 ⑵ 高倍鏡觀察：在這種平鋪片上可看到腸系膜的間皮細胞和腸系膜內(nèi)毛細血管壁的內(nèi)皮細胞，它們均為單層扁平上皮，在平鋪片上，為其

3、表面觀，上皮細胞為多邊形，細胞之間的邊界由于硝酸銀感光后沉淀為黑色，故細胞邊界清晰，呈鋸齒狀，相鄰細胞彼此相嵌，胞核扁圓形，位于細胞中央。硝酸銀對胞核無銀染作用，所以胞核為無色或淡黃色。 2、小腸、氣管或其他器官切片觀察 ⑴ 低倍鏡觀察：尋找一個毛細血管橫切面或縱切面觀察，了解單層扁平上皮在切面上的形態(tài)。 ⑵ 高倍鏡觀察：毛細血管壁只由一層內(nèi)皮細胞構(gòu)成，細胞很薄。胞核染成藍紫色，長橢圓形，突向管腔。有的細胞切到核，有的沒有切到。胞質(zhì)染成紅色，細胞界限在這種切片上不清晰。 (二) 單層立方上皮 用貓甲狀腺切片(HE染色)觀察。 1、低倍鏡觀察：在甲狀腺切片上先找到大小不等的、內(nèi)含紅色

4、膠狀物質(zhì)的甲狀腺濾泡。 2、高倍鏡觀察：甲狀腺濾泡壁為單層立方上皮細胞構(gòu)成。胞核圓形，染成藍紫色，位于細胞中央。胞質(zhì)染成粉紅色。細胞界限隱約可見。 (三) 單層柱狀上皮 用單層柱狀上皮切片或貓小腸切片(HE染色)觀察。掌握單層柱狀上皮在切面上的形狀，并辨認紋狀緣與杯形細胞。 1、肉眼觀察：我們需要在粘膜層中觀察上皮，所以，首先應辨別哪一層是粘膜。腸腔內(nèi)表面具有突起，不平整的一面即為粘膜面。 2、低倍鏡觀察：粘膜面形成許多指狀突起突向管腔。選擇較完整的縱切突起，可見其表面覆有一層柱狀上皮。 3、高倍鏡觀察：上皮細胞為柱狀，胞核長橢圓形，染成藍紫色，位于細胞的基底部分。把顯微鏡的虹彩光

5、圈縮小，減少光量，可見細胞的游離面有一層較亮的粉紅色膜狀結(jié)構(gòu)，即紋狀緣。在柱狀細胞(吸收細胞)之間散在有杯形細胞。此細胞上端膨大，下端細小，胞核呈三角形或半圓形，位于細胞的基底部。在杯形細胞上端的胞質(zhì)內(nèi)有粘液分泌顆粒，在切片上呈卵圓形空泡狀結(jié)構(gòu)。若切片正垂直切著杯形細胞，則可見其游離面無紋狀緣。但大部分由于切斜，故看不到其游離面或基底部，只見一個個橢圓形或圓形空泡。 (四) 假復層纖毛柱狀上皮 取兔氣管切片(HE染色)觀察。 1、肉眼觀察：先辨別朝向氣管腔的粘膜層。 2、低倍鏡觀察：管壁粘膜的最內(nèi)面著色較深的一層是假復層纖毛柱狀上皮。細胞排列緊密，界限不清楚，其間夾有透亮的杯形細胞。細

6、胞核位置高低不等。 3、高倍鏡觀察：依上皮細胞的形狀、胞核所處的位置及細胞頂端所達到的部位，可分為四種細胞。 ① 基細胞(錐體細胞)：細胞呈錐體形，基部寬，頂部窄，不能達到上皮游離面。胞核排列于整個上皮的下部。 ② 梭形細胞：細胞的兩端尖細，中間略寬，這種細胞不太容易辨認。其胞核排列于整個上皮的中部。 ③ 柱狀細胞：胞體抵達上皮游離面，細胞游離面較寬，基部較細。細胞的游離面有微細而整齊的纖毛，因此整個上皮的游離面被排列緊密的纖毛覆蓋。其胞核排列于整個上皮的上部。 ④ 杯形細胞：夾于柱狀細胞之間，游離面無纖毛。胞核也排列于整個上皮的中部。 (五) 復層扁平上皮 取復層扁平上皮切片或

7、食管切片(HE染色)觀察未角化復層扁平上皮的結(jié)構(gòu)。 1、肉眼觀察：先辨別朝向食管腔的粘膜層。 2、低倍鏡觀察：管壁粘膜的最內(nèi)面著色較深的一層即復層扁平上皮，可見由數(shù)層至十幾層細胞組成，有的地方較厚，有的地方較薄，所以基底面呈波浪狀。 3、高倍鏡觀察：和結(jié)締組織交接的最深的一層細胞呈低柱狀，細胞排列緊密，胞核橢圓形，染色深，位于細胞基底部。中層為幾層多角形細胞。接近表面的細胞漸變?yōu)楸馄綘罴毎? (六) 變移上皮 取膀胱變移上皮切片或用排空狀態(tài)下取材制作的兔膀胱切片(H-E染色)觀察它的形態(tài)特點，并比較其與復層扁平上皮的區(qū)別。 1、肉眼觀察：辨別朝向膀胱腔的粘膜層。 2、低倍鏡觀察：

8、在粘膜層表面尋找上皮，可看到上皮細胞排列層次較多，表層細胞較大，深層細胞較小。 3、高倍鏡觀察：基層細胞最小，呈近似立方形，排列較密。中層細胞呈多角形或倒置的梨形。表層細胞較大，為較闊的方形，游離面略呈弧形，靠游離面的胞質(zhì)著色深，有的細胞可以看到雙核。 二、結(jié)締組織 (一) 疏松結(jié)締組織 取疏松結(jié)締組織裝片觀察。 1、低倍鏡觀察：選擇標本較薄而又均勻處觀察，可見交叉成網(wǎng)的纖維及散在分布于纖維之間的結(jié)締組織細胞。 2．高倍鏡觀察：先區(qū)分纖維，然后區(qū)分細胞。用此法可顯示膠原纖維及彈性纖維。在纖維之間散布有結(jié)締組織細胞，在此主要要求分辨成纖維細胞及巨噬細胞。(4種結(jié)構(gòu)均可見) (1)

9、膠原纖維：被染成粉紅色的粗細不等的細帶狀。它們相互交叉排列，數(shù)目較多。膠原原纖維分辨不清。有時膠原纖維呈波浪狀。 (2) 彈性纖維：在HE染色的切片中呈淡紅色，其斷端常呈卷曲狀。比膠原纖維細，單條，有分支，連結(jié)成網(wǎng)。 (3) 成纖維細胞：數(shù)目最多，胞質(zhì)染色淡，輪廓不甚明顯，仔細觀察呈多突扁平狀。胞核大，多為橢圓形，染成藍紫色。 (4) 巨噬細胞：細胞形狀不一，呈圓形、橢圓形或不規(guī)則形。胞質(zhì)染色較深，細胞輪廓較成纖維細胞清楚。胞核較小，為圓形、橢圓形或腎形，胞核染色也較深，為深藍紫色。 (二) 軟骨 用透明軟骨切片或兔氣管切片(HE染色)觀察，了解透明軟骨的結(jié)構(gòu)特點。 1、肉眼觀察：

10、氣管壁內(nèi)的藍紫色“C”字形結(jié)構(gòu)為透明軟骨，即氣管軟骨。 2、低倍鏡觀察：在透明軟骨中可見染成藍紫色的基質(zhì)和位于陷窩內(nèi)的軟骨細胞。在軟骨中央部分的軟骨細胞較大，呈橢圓形或圓形，經(jīng)常2～4個成群存在。近邊緣的軟骨細胞較小而密集，細胞成梭形，其長軸與軟骨表面平行排列。軟骨周圍包有一層染成淡紅色的致密結(jié)締組織的軟骨外膜。 3、高倍鏡觀察：在HE染色切片中看不到細胞間質(zhì)內(nèi)的膠原纖維?；|(zhì)染成藍紫色，在陷窩周圍的基質(zhì)染色較深，稱軟骨囊。有的切片由于在制作過程中軟骨細胞脫落，使基質(zhì)中顯現(xiàn)出一個個白色空腔，即軟骨陷窩。有的切片由于在制片過程中使部分軟骨細胞有所收縮，所以在軟骨細胞周圍出現(xiàn)白色間隙，這也應是

11、陷窩的一部分。 (三) 骨組織 取未經(jīng)染色的人骨橫磨片觀察。這種磨片是用腐胔的股骨的骨密質(zhì)部分鋸成薄片，再用磨石磨成。骨組織內(nèi)的軟組織(神經(jīng)、血管、淋巴管、結(jié)締組織)及細胞都已腐爛，僅留下空腔和管道。因光線折射關系，這些空腔和管道均呈現(xiàn)黑色，觀察時可縮小顯微鏡的虹彩光圈使光線稍暗些，更為清晰。 1、低倍鏡觀察：可見許多骨板呈多層同心圓排列的結(jié)構(gòu)，即骨單位(哈弗斯系統(tǒng))。每個骨單位的中央有一個黑色、較大的圓形管道的橫斷面即為中央管(哈弗斯管)，在此管周圍有許多成同心圓排列的骨單位骨板(哈弗斯骨板)。 有的骨磨片還可看見中央管之間相連的管。若骨磨片取材完整，還可看到內(nèi)、外環(huán)骨板及橫向穿行于

12、內(nèi)、外環(huán)骨板的穿通管。在骨單位之間，還可看到一些排列不規(guī)則的骨板，即間骨板。 2、高倍鏡觀察：骨板內(nèi)或骨板間有許多扁的卵圓形呈黑色的小腔隙即骨陷窩。骨陷窩向四周發(fā)出許多細小的黑色分支，即骨小管。還可見相鄰骨陷窩之間的骨小管是彼此相通連的，靠近中央管的骨小管則和中央管相通連。 (四) 血液 1、低倍鏡觀察：分辨紅細胞和白細胞 2、高倍鏡觀察： ⑴ 紅細胞：數(shù)目最多，小而圓，無胞核，淺紅色，中央部分著色比周圍淺。 ⑵ 白細胞： 中性粒細胞：數(shù)目較多，其胞質(zhì)中含有細小且分布均勻的淺紫紅色中性顆粒。胞核藍紫色，分葉，葉間有染色質(zhì)絲相連。 嗜酸性粒細胞：數(shù)目較少，胞質(zhì)中有許多粗大的被染

13、成桔紅色的嗜酸性顆粒。胞核紫紅色，也分葉，通常分兩葉。 嗜堿性粒細胞：數(shù)目很少，在涂片上較難找到。胞質(zhì)中含有許多大小不等、被染成藍紫色的嗜堿性顆粒。胞核不規(guī)則，染成淺紫紅色，常被嗜堿性顆粒掩蓋。 淋巴細胞：數(shù)目較多，可見中、小淋巴細胞。小淋巴細胞的大小與紅細胞差不多，核圓有側(cè)凹，占細胞的大部分，染色質(zhì)致密呈塊狀，著色深。胞質(zhì)極少，僅在核周形成一薄層，強嗜堿性，染成天藍色。中型淋巴細胞比紅細胞大，胞質(zhì)較多，著色較淺，有的胞質(zhì)內(nèi)可見少數(shù)細小的紫紅色嗜天青顆粒，胞核圓形或近似腎形，染色也很深。 單核細胞：數(shù)目少，是血液中形體最大的細胞。核大，呈腎形、馬蹄形或不規(guī)則，染色質(zhì)顆粒細而松散，著色淺，

14、常偏位。胞質(zhì)豐富，弱嗜堿性，染成淺灰藍色，內(nèi)含許多細小的嗜天青顆粒。 ⑶ 血小板：為不規(guī)則形小體，直徑約2-3μm，常聚集成群。血小板周圍部分為淺藍色，中央有細小的紫紅色顆粒。 三、肌肉組織 (一) 平滑肌 1. 取平滑肌分離裝片觀察 ① 低倍鏡觀察：找到有平滑肌纖維的部位。 ② 高倍鏡觀察：平滑肌纖維為梭形，胞核長橢圓形，被染成深藍紫色，其寬度幾乎等于平滑肌纖維的寬度。胞質(zhì)染成紅色。 2. 取平滑肌縱橫切片 (HE染色)觀察 ① 低倍鏡觀察：觀察縱切面平滑肌纖維呈梭形；橫切面呈大小不等、不規(guī)則的圓形。 ② 高倍鏡觀察：注意比較縱切面和橫切面上結(jié)構(gòu)的差異。 a. 縱切面：平

15、滑肌纖維為梭形，胞核長橢圓形或桿狀，被染成深藍紫色，其寬度幾乎等于平滑肌纖維的寬度。胞質(zhì)染成紅色。 b. 橫切面：可見到許多染成藍紫色圓形的胞核，其周圍包有染成紅色的胞質(zhì)，這便是切到平滑肌纖維中擁有胞核部分的橫切面。另外，還可見到大小不等的、僅有紅色胞質(zhì)的平滑肌纖維的橫切面，這是因為沒有切到胞核的緣故。 (二) 骨骼肌 貓骨骼肌縱、橫切片(鐵蘇木精染色)的觀察；掌握骨骼肌纖維的一般形態(tài)(胞核的位置及明暗相間的橫紋)。 1、低倍鏡觀察：找到縱切(肌纖維長條形)及橫切(肌纖維多邊形)的肌纖維。在肌纖維間有結(jié)締組織。 2、高倍鏡觀察：注意比較縱、橫切面上結(jié)構(gòu)的差異。 ① 縱切面：肌纖維長

16、條形，外為肌膜，緊貼肌膜內(nèi)方，有許多染成藍紫色的卵圓形胞核。肌原纖維沿著肌纖維長軸排列，有明顯的橫紋，染色深的為A帶，染色淺的為I帶。若切片染色較好，還可看到I帶內(nèi)的Z線和A帶內(nèi)的H帶(最好用油鏡觀察)。 ② 橫切面：肌纖維呈多邊形或不規(guī)則圓形，外有肌膜，卵圓形的胞核緊貼肌膜內(nèi)側(cè)。肌原纖維呈小藍點狀，在肌質(zhì)內(nèi)排列不均勻，所以在橫切面上呈現(xiàn)出肌原纖維的小區(qū)。 (三) 心肌 取猴或狗心肌切片(鐵蘇木精染色)觀察。 1、低倍鏡觀察：作心肌切片宜取心室肌為材料，由于心室肌分多層，所以在切片上可看到縱、橫、斜等切面?？v切面心肌纖維為有分支的帶狀，橫切面心肌纖維為不規(guī)則的圓形。 2、高倍鏡觀察：

17、在縱切面上，心肌纖維彼此分支吻合成網(wǎng)狀。胞核卵圓形，位于纖維中央。把顯微鏡的虹彩光圈縮小，光線放暗一些，可見到心肌纖維的橫紋，但不如骨骼肌纖維明顯。在肌纖維及其分支上可見染色呈深藍色的梯形橫線，即為閏盤。肌纖維之間有結(jié)締組織及血管。 在橫切面上，心肌纖維為不規(guī)則的圓形。有的有胞核，有的則無，這是由于切片切到或沒切到胞核的緣故。 四、神經(jīng)組織 (一) 多極神經(jīng)元 取牛的脊髓灰質(zhì)涂片(Nissl染色)觀察。因為是涂片，所以可以較完整地顯示出神經(jīng)元的結(jié)構(gòu)。這種染色可以把胞核及尼氏體（Nissl’s body）染成藍色。 1、低倍鏡觀察：可見染成深藍色、具有多個突起的多極神經(jīng)元。選一個較大而

18、清晰的神經(jīng)元換用高倍鏡觀察。 2、高倍鏡觀察：可見多角形的胞體。在胞體內(nèi)有圓球形染色較淺的胞核，其中央有一染成深藍色的核仁。胞質(zhì)內(nèi)含有許多不規(guī)則的染成深藍色的小塊，即尼氏體。胞體周圍發(fā)出許多突起，這些突起大多為樹突，因為軸突只有一根，所以在涂片上有時很難看到。尼氏體在樹突內(nèi)為條狀。胞體在一呈圓錐形區(qū)域無尼氏體，此處即是軸丘。如看到與軸丘相連的突起，便可斷定其為軸突。軸突及軸丘內(nèi)無尼氏體。 (二) 神經(jīng)原纖維及突觸 取貓脊髓橫切片(Cajal銀染色)觀察。在這張切片上可同時觀察到神經(jīng)原纖維及終結(jié)的形態(tài)。 1、肉眼觀察：脊髓橫切面中央呈“H”形，染成棕黃色的部分為灰質(zhì)，灰質(zhì)較寬的一端為脊髓

19、灰質(zhì)前角。 2．低倍鏡觀察：在灰質(zhì)前角處可見大而呈多角形有突起的細胞，為多極神經(jīng)細胞。找一個突起較多并切到胞核的神經(jīng)細胞，換用高倍鏡觀察。 3、高倍鏡觀察：可以看到胞體和突起內(nèi)均有棕褐色細絲狀的結(jié)構(gòu)，此即神經(jīng)原纖維。它們在胞體內(nèi)排列成網(wǎng)狀，而在突起內(nèi)則平行排列。 若切片銀染色適當，還可看到在胞體或樹突上有許多黑色的小圈狀或扣環(huán)狀結(jié)構(gòu)(形似蝌蚪)，即為終結(jié)，是光鏡下所見到的形成突觸的部位。 (三) 運動終板 取運動終板或運動神經(jīng)末梢裝片觀察。 1、低倍鏡觀察：骨骼肌纖維呈淺藍紫色，有的呈紫紅色。肌原纖維的橫紋清晰可見。神經(jīng)和神經(jīng)纖維呈黑色。神經(jīng)纖維的末端成爪狀分支，附于肌纖維表面，與

20、肌纖維附著處形成的橢圓形板狀隆起，即為運動終板。 2、高倍鏡觀察：可見運動終板的爪狀分支末端常呈鈕扣狀膨大。 【思考題】 1、什么是上皮、內(nèi)皮及間皮？ 2、舉例說明上皮組織的結(jié)構(gòu)與機能的統(tǒng)一性。 3、疏松結(jié)締組織有哪些細胞及纖維成分？這些細胞及纖維各有什么結(jié)構(gòu)特點？ 4、試述三種肌組織在結(jié)構(gòu)上有什么不同。（列表） 5、明確神經(jīng)原纖維、神經(jīng)纖維、突觸、神經(jīng)末梢、感受器和效應器的概念。 6、繪一多極神經(jīng)元圖，并注明各部結(jié)構(gòu)。 7、神經(jīng)纖維如何形成一條神經(jīng)? 【作業(yè)】 1、 繪圖：繪單層柱狀上皮光鏡圖，并注明各部結(jié)構(gòu)。 2、 列表比較三種肌組織在結(jié)構(gòu)上的異同點。 5