神經(jīng)干動作電位的記錄與觀察

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1、神經(jīng)干動作電位,坐骨神經(jīng)干動作電位的記錄、觀察 神經(jīng)干不應(yīng)期的測定 動作電位傳導(dǎo)速度的測定,目的,通過記錄神經(jīng)干的復(fù)合動作電位，掌握生物電記錄的一般原則和方法。 學(xué)會利用刺激器誘發(fā)組織興奮的方法；掌握設(shè)定刺激參數(shù)的方法。 學(xué)習(xí)分析辨別動作電位，了解其產(chǎn)生的基本原理，加強對興奮性和閾強度的了解。,實驗原理,用電刺激神經(jīng)，在刺激電極的負(fù)極下神經(jīng)纖維膜內(nèi)產(chǎn)生去極化，當(dāng)去極化達(dá)到閾電位，膜上產(chǎn)生一次可傳導(dǎo)的快速電位反轉(zhuǎn)，即動作電位。 神經(jīng)干由許多神經(jīng)纖維組成。其動作電位是以膜外記錄方式記錄到的復(fù)合動作電位。 如果兩個引導(dǎo)電極置于興奮性正常的神經(jīng)干表面，興奮波先后通過兩個電極處，便引導(dǎo)出兩個方向相反的電

2、位波形，稱雙相動作電位。,雙相動作電位 Biphasic Action Potential,刺激偽跡(Stimulus artifact),刺激偽跡是刺激電流通過導(dǎo)電介質(zhì)擴(kuò)散至兩引導(dǎo)電極而形成的電位差信號。,屏蔽盒用有機(jī)玻璃制成，盒內(nèi)有兩根導(dǎo)軌，導(dǎo)軌上有7個裝有銀絲電極的有機(jī)玻璃滑塊，每個電極滑塊通過導(dǎo)線與標(biāo)本盒側(cè)壁的一個接線柱相聯(lián)，其中一對作刺激電極，l2對作記錄電極，記錄電極與刺激電極間的電極接地。,屏蔽盒內(nèi)要保持一定的濕度，但電極間不要短路，電極的銀絲必需保持清潔； 實驗時標(biāo)本應(yīng)經(jīng)常保持濕潤，標(biāo)本兩端的扎線要懸空； 神經(jīng)的近中樞端置于刺激電極一側(cè)，外周端置于記錄電極側(cè)。,,實驗材料,動物

3、 蟾蜍 器械 常用手術(shù)器械、蛙板、毀髓針、玻璃解剖針、 神經(jīng)屏蔽盒、大頭針、任氏液、燒杯、培養(yǎng)皿。 RM6240B生理信號記錄儀。,操作過程,坐骨神經(jīng)干的制備 雙毀髓 （錄像） 制備下肢標(biāo)本 （錄像） 制備坐骨神經(jīng)標(biāo)本 （錄像）,2. 連接實驗裝置,,實驗操作 進(jìn)入實驗?zāi)K：“實驗” 肌肉神經(jīng)神經(jīng)干動作電位 彈出刺激器對話框，并處于示波狀態(tài) 在刺激器對話框中選擇同步觸發(fā)。,,,測量坐骨神經(jīng)干的閾強度、最適刺激強度：調(diào)整刺激強度從0mv遞增，求得閾強度、最適刺激強度。 在最適刺激強度下，觀察動作電位形狀，測量其時程及幅度。,根據(jù)波形幅度可調(diào)節(jié)位于屏幕 上顯示通道右側(cè)的靈敏度。 參數(shù)調(diào)節(jié)后，應(yīng)再次

4、點擊“開 始刺激”鍵，以刷新波形。 可用“PgUp”與“PgDn”翻頁查 找波形。,,,,神經(jīng)損傷對復(fù)合動作電位的影響 在第一對記錄電極間用鑷子夾傷神經(jīng)干，記錄動作電位。觀察復(fù)合動作電位有何變化。,注意事項,制作標(biāo)本過程中應(yīng)盡量減少對神經(jīng)的牽拉，以免損傷神經(jīng)。 實驗過程中，要經(jīng)常保持標(biāo)本濕潤。 神經(jīng)干應(yīng)與每個使用的電極密切接觸。 實驗結(jié)束后，神經(jīng)屏蔽盒應(yīng)清洗、擦干，以防止殘留的鹽液常腐蝕電極。,,坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備,方法與步驟： 1. 雙毀髓： 毀髓針自枕骨大孔分別進(jìn)入顱腔和椎管搗毀腦和脊髓； 2. 剝制后肢標(biāo)本：剪去頭、前肢和內(nèi)臟，剩余脊柱和后肢； 3. 分離兩后肢：左右兩后肢分開，勿損傷兩側(cè)坐骨神經(jīng)； 4. 分離坐骨神經(jīng)：玻璃分針，保留一段脊柱骨； 5. 游離腓腸?。焊旖Y(jié)扎 6. 分離股骨頭 7. 檢驗標(biāo)本：鋅銅弓電極,完整標(biāo)本坐骨神經(jīng)腓腸肌股骨頭一段脊柱骨,,,注意事項： .操作過程中切勿損傷神經(jīng)，勿用金屬器械觸碰坐骨神經(jīng)； .操作過程中經(jīng)常用任氏液濕潤去皮的標(biāo)本。,下次實驗：神經(jīng)干AP不應(yīng)期與傳導(dǎo)速度的測定,