實驗一基本組織

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1、泉州師范學院教案 實驗一 基本組織 【目的和內容】 1、觀察各類上皮組織的結構特點；上皮組織游離面的某些特殊結構如紋狀緣和纖毛； 2、重點觀察疏松結締組織的纖維及各種細胞成分，比較各種結締組織的結構特點； 3、比較觀察平滑肌、骨骼肌及心肌三種肌纖維縱切和橫切的結構特點； 4、觀察神經(jīng)元的結構特點、尼氏體及神經(jīng)原纖維的形態(tài)與分布； 5、觀察突觸及運動終板的形態(tài)結構。 【材料和用具】 顯微鏡、單層扁平上皮裝片(硝酸銀染色)、甲狀腺切片(HE染色)、單層柱狀上皮切片(小腸切片)(HE染色)、氣管切片(HE染色)、復層扁平上皮切片(食管切片)(HE染色)和膀胱切片(HE染色)

2、、疏松結締組織裝片(HE染色)、透明軟骨切片(HE染色)、骨磨片、血涂片(瑞氏染色)、骨骼肌縱橫切片(鐵蘇木精染色)、平滑肌分離裝片(HE染色)、心肌縱橫切片(鐵蘇木精染色)、脊髓灰質涂片(Nissl染色)、脊髓橫切片(Cajal銀染色)、運動終板(氯化金法浸染的肋間肌)。 【操作】 一、上皮組織 (一) 單層扁平上皮 取單層扁平上皮裝片或小腸、氣管或其他器官切片(HE染色)觀察。 1、單層扁平上皮裝片 ⑴ 低倍鏡觀察：選擇染成淡黃色、標本最薄的部分進行觀察 ⑵ 高倍鏡觀察：在這種平鋪片上可看到腸系膜的間皮細胞和腸系膜內毛細血管壁的內皮細胞，它們均為單層扁平上皮，在平鋪片上，為其

3、表面觀，上皮細胞為多邊形，細胞之間的邊界由于硝酸銀感光后沉淀為黑色，故細胞邊界清晰，呈鋸齒狀，相鄰細胞彼此相嵌，胞核扁圓形，位于細胞中央。硝酸銀對胞核無銀染作用，所以胞核為無色或淡黃色。 2、小腸、氣管或其他器官切片觀察 ⑴ 低倍鏡觀察：尋找一個毛細血管橫切面或縱切面觀察，了解單層扁平上皮在切面上的形態(tài)。 ⑵ 高倍鏡觀察：毛細血管壁只由一層內皮細胞構成，細胞很薄。胞核染成藍紫色，長橢圓形，突向管腔。有的細胞切到核，有的沒有切到。胞質染成紅色，細胞界限在這種切片上不清晰。 (二) 單層立方上皮 用貓甲狀腺切片(HE染色)觀察。 1、低倍鏡觀察：在甲狀腺切片上先找到大小不等的、內含紅色

4、膠狀物質的甲狀腺濾泡。 2、高倍鏡觀察：甲狀腺濾泡壁為單層立方上皮細胞構成。胞核圓形，染成藍紫色，位于細胞中央。胞質染成粉紅色。細胞界限隱約可見。 (三) 單層柱狀上皮 用單層柱狀上皮切片或貓小腸切片(HE染色)觀察。掌握單層柱狀上皮在切面上的形狀，并辨認紋狀緣與杯形細胞。 1、肉眼觀察：我們需要在粘膜層中觀察上皮，所以，首先應辨別哪一層是粘膜。腸腔內表面具有突起，不平整的一面即為粘膜面。 2、低倍鏡觀察：粘膜面形成許多指狀突起突向管腔。選擇較完整的縱切突起，可見其表面覆有一層柱狀上皮。 3、高倍鏡觀察：上皮細胞為柱狀，胞核長橢圓形，染成藍紫色，位于細胞的基底部分。把顯微鏡的虹彩光

5、圈縮小，減少光量，可見細胞的游離面有一層較亮的粉紅色膜狀結構，即紋狀緣。在柱狀細胞(吸收細胞)之間散在有杯形細胞。此細胞上端膨大，下端細小，胞核呈三角形或半圓形，位于細胞的基底部。在杯形細胞上端的胞質內有粘液分泌顆粒，在切片上呈卵圓形空泡狀結構。若切片正垂直切著杯形細胞，則可見其游離面無紋狀緣。但大部分由于切斜，故看不到其游離面或基底部，只見一個個橢圓形或圓形空泡。 (四) 假復層纖毛柱狀上皮 取兔氣管切片(HE染色)觀察。 1、肉眼觀察：先辨別朝向氣管腔的粘膜層。 2、低倍鏡觀察：管壁粘膜的最內面著色較深的一層是假復層纖毛柱狀上皮。細胞排列緊密，界限不清楚，其間夾有透亮的杯形細胞。細

6、胞核位置高低不等。 3、高倍鏡觀察：依上皮細胞的形狀、胞核所處的位置及細胞頂端所達到的部位，可分為四種細胞。 ① 基細胞(錐體細胞)：細胞呈錐體形，基部寬，頂部窄，不能達到上皮游離面。胞核排列于整個上皮的下部。 ② 梭形細胞：細胞的兩端尖細，中間略寬，這種細胞不太容易辨認。其胞核排列于整個上皮的中部。 ③ 柱狀細胞：胞體抵達上皮游離面，細胞游離面較寬，基部較細。細胞的游離面有微細而整齊的纖毛，因此整個上皮的游離面被排列緊密的纖毛覆蓋。其胞核排列于整個上皮的上部。 ④ 杯形細胞：夾于柱狀細胞之間，游離面無纖毛。胞核也排列于整個上皮的中部。 (五) 復層扁平上皮 取復層扁平上皮切片或

7、食管切片(HE染色)觀察未角化復層扁平上皮的結構。 1、肉眼觀察：先辨別朝向食管腔的粘膜層。 2、低倍鏡觀察：管壁粘膜的最內面著色較深的一層即復層扁平上皮，可見由數(shù)層至十幾層細胞組成，有的地方較厚，有的地方較薄，所以基底面呈波浪狀。 3、高倍鏡觀察：和結締組織交接的最深的一層細胞呈低柱狀，細胞排列緊密，胞核橢圓形，染色深，位于細胞基底部。中層為幾層多角形細胞。接近表面的細胞漸變?yōu)楸馄綘罴毎? (六) 變移上皮 取膀胱變移上皮切片或用排空狀態(tài)下取材制作的兔膀胱切片(H-E染色)觀察它的形態(tài)特點，并比較其與復層扁平上皮的區(qū)別。 1、肉眼觀察：辨別朝向膀胱腔的粘膜層。 2、低倍鏡觀察：

8、在粘膜層表面尋找上皮，可看到上皮細胞排列層次較多，表層細胞較大，深層細胞較小。 3、高倍鏡觀察：基層細胞最小，呈近似立方形，排列較密。中層細胞呈多角形或倒置的梨形。表層細胞較大，為較闊的方形，游離面略呈弧形，靠游離面的胞質著色深，有的細胞可以看到雙核。 二、結締組織 (一) 疏松結締組織 取疏松結締組織裝片觀察。 1、低倍鏡觀察：選擇標本較薄而又均勻處觀察，可見交叉成網(wǎng)的纖維及散在分布于纖維之間的結締組織細胞。 2．高倍鏡觀察：先區(qū)分纖維，然后區(qū)分細胞。用此法可顯示膠原纖維及彈性纖維。在纖維之間散布有結締組織細胞，在此主要要求分辨成纖維細胞及巨噬細胞。(4種結構均可見) (1)

9、膠原纖維：被染成粉紅色的粗細不等的細帶狀。它們相互交叉排列，數(shù)目較多。膠原原纖維分辨不清。有時膠原纖維呈波浪狀。 (2) 彈性纖維：在HE染色的切片中呈淡紅色，其斷端常呈卷曲狀。比膠原纖維細，單條，有分支，連結成網(wǎng)。 (3) 成纖維細胞：數(shù)目最多，胞質染色淡，輪廓不甚明顯，仔細觀察呈多突扁平狀。胞核大，多為橢圓形，染成藍紫色。 (4) 巨噬細胞：細胞形狀不一，呈圓形、橢圓形或不規(guī)則形。胞質染色較深，細胞輪廓較成纖維細胞清楚。胞核較小，為圓形、橢圓形或腎形，胞核染色也較深，為深藍紫色。 (二) 軟骨 用透明軟骨切片或兔氣管切片(HE染色)觀察，了解透明軟骨的結構特點。 1、肉眼觀察：

10、氣管壁內的藍紫色“C”字形結構為透明軟骨，即氣管軟骨。 2、低倍鏡觀察：在透明軟骨中可見染成藍紫色的基質和位于陷窩內的軟骨細胞。在軟骨中央部分的軟骨細胞較大，呈橢圓形或圓形，經(jīng)常2～4個成群存在。近邊緣的軟骨細胞較小而密集，細胞成梭形，其長軸與軟骨表面平行排列。軟骨周圍包有一層染成淡紅色的致密結締組織的軟骨外膜。 3、高倍鏡觀察：在HE染色切片中看不到細胞間質內的膠原纖維?；|染成藍紫色，在陷窩周圍的基質染色較深，稱軟骨囊。有的切片由于在制作過程中軟骨細胞脫落，使基質中顯現(xiàn)出一個個白色空腔，即軟骨陷窩。有的切片由于在制片過程中使部分軟骨細胞有所收縮，所以在軟骨細胞周圍出現(xiàn)白色間隙，這也應是

11、陷窩的一部分。 (三) 骨組織 取未經(jīng)染色的人骨橫磨片觀察。這種磨片是用腐胔的股骨的骨密質部分鋸成薄片，再用磨石磨成。骨組織內的軟組織(神經(jīng)、血管、淋巴管、結締組織)及細胞都已腐爛，僅留下空腔和管道。因光線折射關系，這些空腔和管道均呈現(xiàn)黑色，觀察時可縮小顯微鏡的虹彩光圈使光線稍暗些，更為清晰。 1、低倍鏡觀察：可見許多骨板呈多層同心圓排列的結構，即骨單位(哈弗斯系統(tǒng))。每個骨單位的中央有一個黑色、較大的圓形管道的橫斷面即為中央管(哈弗斯管)，在此管周圍有許多成同心圓排列的骨單位骨板(哈弗斯骨板)。 有的骨磨片還可看見中央管之間相連的管。若骨磨片取材完整，還可看到內、外環(huán)骨板及橫向穿行于

12、內、外環(huán)骨板的穿通管。在骨單位之間，還可看到一些排列不規(guī)則的骨板，即間骨板。 2、高倍鏡觀察：骨板內或骨板間有許多扁的卵圓形呈黑色的小腔隙即骨陷窩。骨陷窩向四周發(fā)出許多細小的黑色分支，即骨小管。還可見相鄰骨陷窩之間的骨小管是彼此相通連的，靠近中央管的骨小管則和中央管相通連。 (四) 血液 1、低倍鏡觀察：分辨紅細胞和白細胞 2、高倍鏡觀察： ⑴ 紅細胞：數(shù)目最多，小而圓，無胞核，淺紅色，中央部分著色比周圍淺。 ⑵ 白細胞： 中性粒細胞：數(shù)目較多，其胞質中含有細小且分布均勻的淺紫紅色中性顆粒。胞核藍紫色，分葉，葉間有染色質絲相連。 嗜酸性粒細胞：數(shù)目較少，胞質中有許多粗大的被染

13、成桔紅色的嗜酸性顆粒。胞核紫紅色，也分葉，通常分兩葉。 嗜堿性粒細胞：數(shù)目很少，在涂片上較難找到。胞質中含有許多大小不等、被染成藍紫色的嗜堿性顆粒。胞核不規(guī)則，染成淺紫紅色，常被嗜堿性顆粒掩蓋。 淋巴細胞：數(shù)目較多，可見中、小淋巴細胞。小淋巴細胞的大小與紅細胞差不多，核圓有側凹，占細胞的大部分，染色質致密呈塊狀，著色深。胞質極少，僅在核周形成一薄層，強嗜堿性，染成天藍色。中型淋巴細胞比紅細胞大，胞質較多，著色較淺，有的胞質內可見少數(shù)細小的紫紅色嗜天青顆粒，胞核圓形或近似腎形，染色也很深。 單核細胞：數(shù)目少，是血液中形體最大的細胞。核大，呈腎形、馬蹄形或不規(guī)則，染色質顆粒細而松散，著色淺，

14、常偏位。胞質豐富，弱嗜堿性，染成淺灰藍色，內含許多細小的嗜天青顆粒。 ⑶ 血小板：為不規(guī)則形小體，直徑約2-3μm，常聚集成群。血小板周圍部分為淺藍色，中央有細小的紫紅色顆粒。 三、肌肉組織 (一) 平滑肌 1. 取平滑肌分離裝片觀察 ① 低倍鏡觀察：找到有平滑肌纖維的部位。 ② 高倍鏡觀察：平滑肌纖維為梭形，胞核長橢圓形，被染成深藍紫色，其寬度幾乎等于平滑肌纖維的寬度。胞質染成紅色。 2. 取平滑肌縱橫切片 (HE染色)觀察 ① 低倍鏡觀察：觀察縱切面平滑肌纖維呈梭形；橫切面呈大小不等、不規(guī)則的圓形。 ② 高倍鏡觀察：注意比較縱切面和橫切面上結構的差異。 a. 縱切面：平

15、滑肌纖維為梭形，胞核長橢圓形或桿狀，被染成深藍紫色，其寬度幾乎等于平滑肌纖維的寬度。胞質染成紅色。 b. 橫切面：可見到許多染成藍紫色圓形的胞核，其周圍包有染成紅色的胞質，這便是切到平滑肌纖維中擁有胞核部分的橫切面。另外，還可見到大小不等的、僅有紅色胞質的平滑肌纖維的橫切面，這是因為沒有切到胞核的緣故。 (二) 骨骼肌 貓骨骼肌縱、橫切片(鐵蘇木精染色)的觀察；掌握骨骼肌纖維的一般形態(tài)(胞核的位置及明暗相間的橫紋)。 1、低倍鏡觀察：找到縱切(肌纖維長條形)及橫切(肌纖維多邊形)的肌纖維。在肌纖維間有結締組織。 2、高倍鏡觀察：注意比較縱、橫切面上結構的差異。 ① 縱切面：肌纖維長

16、條形，外為肌膜，緊貼肌膜內方，有許多染成藍紫色的卵圓形胞核。肌原纖維沿著肌纖維長軸排列，有明顯的橫紋，染色深的為A帶，染色淺的為I帶。若切片染色較好，還可看到I帶內的Z線和A帶內的H帶(最好用油鏡觀察)。 ② 橫切面：肌纖維呈多邊形或不規(guī)則圓形，外有肌膜，卵圓形的胞核緊貼肌膜內側。肌原纖維呈小藍點狀，在肌質內排列不均勻，所以在橫切面上呈現(xiàn)出肌原纖維的小區(qū)。 (三) 心肌 取猴或狗心肌切片(鐵蘇木精染色)觀察。 1、低倍鏡觀察：作心肌切片宜取心室肌為材料，由于心室肌分多層，所以在切片上可看到縱、橫、斜等切面?？v切面心肌纖維為有分支的帶狀，橫切面心肌纖維為不規(guī)則的圓形。 2、高倍鏡觀察：

17、在縱切面上，心肌纖維彼此分支吻合成網(wǎng)狀。胞核卵圓形，位于纖維中央。把顯微鏡的虹彩光圈縮小，光線放暗一些，可見到心肌纖維的橫紋，但不如骨骼肌纖維明顯。在肌纖維及其分支上可見染色呈深藍色的梯形橫線，即為閏盤。肌纖維之間有結締組織及血管。 在橫切面上，心肌纖維為不規(guī)則的圓形。有的有胞核，有的則無，這是由于切片切到或沒切到胞核的緣故。 四、神經(jīng)組織 (一) 多極神經(jīng)元 取牛的脊髓灰質涂片(Nissl染色)觀察。因為是涂片，所以可以較完整地顯示出神經(jīng)元的結構。這種染色可以把胞核及尼氏體（Nissl’s body）染成藍色。 1、低倍鏡觀察：可見染成深藍色、具有多個突起的多極神經(jīng)元。選一個較大而

18、清晰的神經(jīng)元換用高倍鏡觀察。 2、高倍鏡觀察：可見多角形的胞體。在胞體內有圓球形染色較淺的胞核，其中央有一染成深藍色的核仁。胞質內含有許多不規(guī)則的染成深藍色的小塊，即尼氏體。胞體周圍發(fā)出許多突起，這些突起大多為樹突，因為軸突只有一根，所以在涂片上有時很難看到。尼氏體在樹突內為條狀。胞體在一呈圓錐形區(qū)域無尼氏體，此處即是軸丘。如看到與軸丘相連的突起，便可斷定其為軸突。軸突及軸丘內無尼氏體。 (二) 神經(jīng)原纖維及突觸 取貓脊髓橫切片(Cajal銀染色)觀察。在這張切片上可同時觀察到神經(jīng)原纖維及終結的形態(tài)。 1、肉眼觀察：脊髓橫切面中央呈“H”形，染成棕黃色的部分為灰質，灰質較寬的一端為脊髓

19、灰質前角。 2．低倍鏡觀察：在灰質前角處可見大而呈多角形有突起的細胞，為多極神經(jīng)細胞。找一個突起較多并切到胞核的神經(jīng)細胞，換用高倍鏡觀察。 3、高倍鏡觀察：可以看到胞體和突起內均有棕褐色細絲狀的結構，此即神經(jīng)原纖維。它們在胞體內排列成網(wǎng)狀，而在突起內則平行排列。 若切片銀染色適當，還可看到在胞體或樹突上有許多黑色的小圈狀或扣環(huán)狀結構(形似蝌蚪)，即為終結，是光鏡下所見到的形成突觸的部位。 (三) 運動終板 取運動終板或運動神經(jīng)末梢裝片觀察。 1、低倍鏡觀察：骨骼肌纖維呈淺藍紫色，有的呈紫紅色。肌原纖維的橫紋清晰可見。神經(jīng)和神經(jīng)纖維呈黑色。神經(jīng)纖維的末端成爪狀分支，附于肌纖維表面，與

20、肌纖維附著處形成的橢圓形板狀隆起，即為運動終板。 2、高倍鏡觀察：可見運動終板的爪狀分支末端常呈鈕扣狀膨大。 【思考題】 1、什么是上皮、內皮及間皮？ 2、舉例說明上皮組織的結構與機能的統(tǒng)一性。 3、疏松結締組織有哪些細胞及纖維成分？這些細胞及纖維各有什么結構特點？ 4、試述三種肌組織在結構上有什么不同。（列表） 5、明確神經(jīng)原纖維、神經(jīng)纖維、突觸、神經(jīng)末梢、感受器和效應器的概念。 6、繪一多極神經(jīng)元圖，并注明各部結構。 7、神經(jīng)纖維如何形成一條神經(jīng)? 【作業(yè)】 1、 繪圖：繪單層柱狀上皮光鏡圖，并注明各部結構。 2、 列表比較三種肌組織在結構上的異同點。 5