《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》教案.doc

教 案 2010 ~ 2011 學(xué)年第 一 學(xué)期 課 程 名 稱 醫(yī)學(xué)微生物學(xué) 開 課 系 部 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)系 開課教研室 病原生物學(xué)教研室 授 課 教 師 吳高莉 職 稱 講師 授 課 班 級 臨床醫(yī)學(xué) 學(xué) 生 人 數(shù) 長 沙 醫(yī) 學(xué) 院 教 務(wù) 處 制 長 沙 醫(yī) 學(xué) 院 教 案 課程名稱 醫(yī)學(xué)微生物學(xué) 授課題目（章節(jié)或主題） 緒論 授課教師 吳高莉 所屬系（部） 基礎(chǔ)系 所屬教研室 病原生物學(xué) 職稱 講師 授課時(shí)間 年 月 日第 周星期 第 節(jié)第 次課 授課時(shí)數(shù) 1 授課班級 臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)（本科√ ?？啤酰? 教學(xué)課型 理論課√ 實(shí)驗(yàn)課□ 見習(xí)課□ 習(xí)題課□ 討論課□ 其它□ 教材名稱、作者、出版社及出版時(shí)間 《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》（第7版）李凡、劉晶星主編人民衛(wèi)生出版社 教學(xué)目的要求： 1．什么是微生物？微生物的特點(diǎn)、分類、與人類的關(guān)系。 2．什么是微生物學(xué)？什么是醫(yī)學(xué)微生物學(xué)？醫(yī)學(xué)微生物學(xué)研究范圍。 3．醫(yī)學(xué)微生物學(xué)發(fā)展簡史 重點(diǎn)： 1．熟悉微生物的概念、特點(diǎn)、分類、與人類的關(guān)系。 2．了解微生物學(xué)、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的研究范圍 教學(xué)方法（請打√選擇）： 講授法√ 討論法□ 啟發(fā)式□ 自學(xué)輔導(dǎo)法□ 練習(xí)法（習(xí)題或操作）□ 讀書指導(dǎo)法□ PBL（以問題為中心的教學(xué)法）□ 其它□ 教學(xué)手段（請打√選擇）： 板書□ 實(shí)物□ 標(biāo)本□ 掛圖□ 模型□ 投影□ 幻燈□ 錄像□ CAI（計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)）√ 教學(xué)過程設(shè)計(jì)和教學(xué)內(nèi)容： 第一節(jié) 微生物與病原微生物 一、微生物（microorganism） 1.概念：自然界中一群體形微小、結(jié)構(gòu)簡單，肉眼直接看不見，必須借助顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)千倍，甚至數(shù)萬倍才能觀察到的微小生物。 2.特點(diǎn)：種類繁多、分布廣泛、形體微小、結(jié)構(gòu)簡單、增殖迅速、容易變異 3.分類 ： ①非細(xì)胞型微生物：無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，無產(chǎn)生能量酶；含有一種核酸（RNA或DNA)。 ②原核細(xì)胞型微生物：細(xì)胞器不完整，只有核糖體；擬核，無核仁、核膜； DNA和RNA同時(shí)存在。 ③真核細(xì)胞型微生物：細(xì)胞器完整；有細(xì)胞核，有核仁、核膜。 4.與人類的關(guān)系： （1）少數(shù)微生物引起人類和動、植物的病害； ①病原微生物 ②機(jī)會致病性微生物 正常情況下不致病，特殊情況下致病的微生物。 （2）絕大多數(shù)微生物對人類和動物、植物是有益的，而且有些是必需的。 ①在自然界物質(zhì)循環(huán)中的作用 ②在農(nóng)業(yè)方面的作用 ③在食品方面的作用 ④在制藥方面的作用 ⑤在工業(yè)方面的作用 ⑥在環(huán)境保護(hù)方面的作用 ⑦在生命科學(xué)中的作用 ⑧人類和動物體內(nèi)的正常菌群 第二節(jié) 微生物學(xué)和醫(yī)學(xué)微生物學(xué) 一、微生物學(xué)（microbiology） 概念：生命科學(xué)的一個(gè)重要分支，研究微生物的種類、分布、形態(tài)、結(jié)構(gòu)、代謝、生長繁殖、遺傳、進(jìn)化及與人、動、植物等相互關(guān)系的一門科學(xué)。 二、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)（medical microbiology） 概念：研究與醫(yī)學(xué)有關(guān)的病原微生物生物學(xué)特性、致病性和免疫機(jī)制以及特異性診、防治措施，以控制和消滅感染性疾病和與之有關(guān)的免疫損傷等疾病，達(dá)到保障和提高人類健康水平的目的。 第三節(jié) 醫(yī)學(xué)微生物學(xué)發(fā)展簡史 一、微生物學(xué)經(jīng)驗(yàn)時(shí)期 在生活生產(chǎn)（主要是食品）、醫(yī)學(xué)方面的經(jīng)驗(yàn)。 二、實(shí)驗(yàn)微生物學(xué)時(shí)期 ①列文虎克：荷蘭人，首臺顯微鏡，第一次觀察到微小生物的存在。 ②巴斯德：法國科學(xué)家。有機(jī)物既可以釀出美酒，也可變成醋，也可以變質(zhì)腐敗，都是由于微生物引起的，和微生物自身特點(diǎn)、生長環(huán)境等有關(guān)，開始了微生物生理學(xué)研究。 ③郭霍：德國科學(xué)家。固體培養(yǎng)基，標(biāo)本中細(xì)菌的分離和純化，染色方法，動物實(shí)驗(yàn)等。 ④琴納：英國鄉(xiāng)村醫(yī)生。從擠奶女工和中國古代的人痘接種法中受到啟發(fā)，創(chuàng)用了牛痘接種法。人類首次人工主動免疫。 ⑤貝林格：德國科學(xué)家。用含白喉抗毒素的動物免疫血清成功治愈一名白喉女孩。人類首次人工被動免疫。 ⑥伊凡諾夫斯基：俄國植物學(xué)家，發(fā)現(xiàn)第一個(gè)（植物）病毒：煙草花葉病病毒。 ⑦艾利希：首先合成化學(xué)藥物（砷凡納明）治療微生物感染（梅毒）。 ⑧弗萊明：第一個(gè)發(fā)現(xiàn)抗生素（青霉素）。 ⑨我國科學(xué)家：黃禎祥發(fā)現(xiàn)并首創(chuàng)了病毒體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)；湯非凡首次分離出沙眼衣原體，并用雞胚卵黃囊接種培養(yǎng)。 三、現(xiàn)代微生物學(xué)時(shí)期 1.新病原微生物的發(fā)現(xiàn) 2.微生物全基因組研究 3.微生物學(xué)診斷技術(shù)快速發(fā)展 4.疫苗研制的高速發(fā)展 提問：在生活中哪些方面與微生物有關(guān)？ 根據(jù)有無細(xì)胞、細(xì)胞分化程度分類。 如病毒。 包括細(xì)菌、支原體、衣原體、螺旋體、立克次體、放線菌。 如真菌。 有致病性的微生物，如引起甲肝、乙肝、艾滋病、結(jié)核病、狂犬病等 如在人或動物腸道內(nèi)有大量腸道菌群，對于正常人來說不會致病，但在某些情況下會引起腹瀉或其他感染。 如：碳素循環(huán)、氮素循環(huán)等，保持生態(tài)平衡 如：微生物肥料、微生物飼料、微生物農(nóng)藥等 如：釀醋、釀酒、制作饅頭、泡菜和酸奶等 如：抗生素、維生素、酶制劑的制備等 如：礦業(yè)、能源、石油、紡織等 如：降解塑料、處理污水等。 如：作為研究對象、基因工程中的應(yīng)用等。 如皮膚表面，口腔、鼻、咽部、消化道、泌尿生殖道等部位存在一定數(shù)量、一定種類的正常菌群。 可分為： ①細(xì)菌學(xué)、病毒學(xué)、真菌學(xué)等。 ②微生物生理學(xué)、微生物生態(tài)學(xué)、微生物遺傳學(xué)、微生物分子生物學(xué)、細(xì)胞微生物學(xué)等。 ③食品微生物學(xué)、藥學(xué)微生物學(xué)、工業(yè)微生物學(xué)、環(huán)境微生物學(xué)、土壤微生物學(xué)、海洋微生物學(xué)、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)等。 對象是病原微生物和機(jī)會致病性微生物 釀醋、釀酒、制作饅頭、泡菜和酸奶等的制備；肉類食物腌制或風(fēng)干后保存時(shí)間延長等；食物煮熟了才吃，水煮沸了才喝等。 對肺癆（肺結(jié)核）病原體的認(rèn)識：北宋 對鼠疫的流行特征的認(rèn)識：清 人痘接種法預(yù)防天花：明 免疫學(xué)的發(fā)展！ 如：HBV（1963年）、HAV（1973年）、HIV（1981年報(bào)道病例，1983年分離出病毒）、SARS冠狀病毒（2003年）、瘋牛?。?985年4月，英國）；還出現(xiàn)一些新的變異株，如，2009年4月從墨西哥和美國開始流行的豬流感疫情的致病株——甲型H1N1亞型流感病毒。 由形態(tài)診斷到生化、免疫技術(shù)診斷到現(xiàn)在的基因診斷 由全疫苗到亞單位疫苗到基因工程疫苗 （疫苗的介紹后面講） 復(fù)習(xí)思考及作業(yè)題布置： 1.什么是微生物、病原微生物？ 2.什么是微生物學(xué)、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)？ 3.微生物的特點(diǎn)、分類及與人類的關(guān)系？ 4.醫(yī)學(xué)微生物的發(fā)展史。 授課的創(chuàng)新點(diǎn)： 1.與日常生活中的微生物相聯(lián)系 參考資料（包括輔助教材、參考書、文獻(xiàn)等）： 1.醫(yī)學(xué)微生物學(xué)（第7版），周正任主編，人民衛(wèi)生出版社 2.醫(yī)學(xué)微生物學(xué)（第5版），陸德源主編，人民衛(wèi)生出版社 教研室意見： 教研室主任簽章： 年 月 日 課后記（即通過收集教學(xué)督導(dǎo)專家、同行和學(xué)生的反饋信息，認(rèn)真整理分析成功的經(jīng)驗(yàn)和不足之處，在課程結(jié)束后填寫） 課程名稱 醫(yī)學(xué)微生物學(xué) 授課題目（章節(jié)或主題） 第1章 細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu) 授課教師 吳高莉 所屬系（部） 基礎(chǔ)系 所屬教研室 病原生物學(xué) 職稱 講師 授課時(shí)間 年 月 日第 周星期 第 節(jié)第 次課 授課時(shí)數(shù) 2 授課班級 臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)（本科√ ?？啤酰? 教學(xué)課型 理論課√ 實(shí)驗(yàn)課□ 見習(xí)課□ 習(xí)題課□ 討論課□ 其它□ 教材名稱、作者、出版社及出版時(shí)間 《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》（第7版）李凡、劉晶星主編人民衛(wèi)生出版社 教學(xué)目的要求： 1．掌握G+菌與G-菌細(xì)胞壁的異同 2．掌握細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)：莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞 3．熟悉細(xì)菌的大小與形態(tài) 4．了解細(xì)菌的其他基本結(jié)構(gòu)：細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì) 5．了解細(xì)菌形態(tài)與結(jié)構(gòu)檢查法：顯微鏡與染色技術(shù) 重點(diǎn)： 1．G+菌與G-菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu) 2．細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu) 難點(diǎn)： 1．G+菌與G-菌細(xì)胞壁的異同 教學(xué)方法（請打√選擇）： 講授法√ 討論法□ 啟發(fā)式□ 自學(xué)輔導(dǎo)法□ 練習(xí)法（習(xí)題或操作）□ 讀書指導(dǎo)法□ PBL（以問題為中心的教學(xué)法）□ 其它□ 教學(xué)手段（請打√選擇）： 板書√ 實(shí)物□ 標(biāo)本□ 掛圖□ 模型□ 投影□ 幻燈□ 錄像□ CAI（計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)）√ 教學(xué)過程設(shè)計(jì)和教學(xué)內(nèi)容： 細(xì)菌（bacterium）：是屬原核生物界的一種單細(xì)胞微生物. 廣義細(xì)菌：包括細(xì)菌、放線菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體 狹義細(xì)菌：專指其中數(shù)量最大、種類最多、具有典型代表性的細(xì)菌 第一節(jié) 細(xì)菌的大小與形態(tài) 測量單位： 微米 （μm） 基本形態(tài)三種：球菌；桿菌；螺形菌（弧菌、螺菌） 第二節(jié) 細(xì)菌的結(jié)構(gòu) 一、細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu) （一）細(xì)胞壁 1.肽聚糖（peptidoglycan） （1）革蘭陽性菌肽聚糖 ①聚糖骨架 ②四肽側(cè)鏈 ③五肽交聯(lián)橋 （2）革蘭陰性菌肽聚糖 ①聚糖骨架 ②四肽側(cè)鏈 2.Ｇ＋菌特有成分：磷壁酸 3.Ｇ-菌特有成分：外膜 （1）脂蛋白： 位于肽聚糖和脂質(zhì)雙層之間，穩(wěn)定外膜 （2）脂質(zhì)雙層： 類似于細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，雙層內(nèi)鑲嵌著多種蛋白質(zhì)稱為外膜蛋白 （3）脂多糖(LPS)：G-菌內(nèi)毒素組成 脂質(zhì)A：毒性部分，無特異性 核心多糖：有屬特異性 特異多糖：有種特異性，菌體O抗原 4.細(xì)胞壁功能 （1）維持細(xì)菌形態(tài)，承受細(xì)胞內(nèi)高滲透壓 （2）參與菌體內(nèi)外的物質(zhì)交換 （3）帶有多種抗原表位，可以誘發(fā)機(jī)體的免疫應(yīng)答 （4）細(xì)胞壁的某些成分與細(xì)菌致病性有關(guān) 5.細(xì)胞壁缺陷菌（L型菌） 細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受到理化或生物因素的直接破壞或合成被抑制，這種細(xì)胞壁受損的細(xì)菌在高滲環(huán)境下仍可存活者稱為細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型。 （二）細(xì)胞膜 組成：脂質(zhì)雙層，蛋白質(zhì)（無膽固醇） 功能： 物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)；呼吸作用；合成作用；參與細(xì)菌分裂 中介體（mesosome) : 細(xì)胞膜內(nèi)陷、折疊形成的囊狀膜性結(jié)構(gòu)，多見于Ｇ＋菌。 功能：與分裂有關(guān)；類似真核細(xì)胞線粒體。 （三）細(xì)胞質(zhì) 成分：無色透明膠狀物，由水、蛋白質(zhì)、脂類、核酸及少量無機(jī)鹽組成 功能：細(xì)菌新陳代謝的場所 結(jié)構(gòu)： （1）核糖體（ribosome):蛋白質(zhì)合成場所 （2）質(zhì)粒（plasmid）：染色體外的遺傳物質(zhì)，雙股閉合環(huán)狀DNA。 （3）胞質(zhì)顆粒（cytoplasmic granule）：細(xì)菌儲存營養(yǎng)物質(zhì)。如：白喉?xiàng)U菌的異染顆粒，成分為RNA，多偏磷酸鹽 。 （四）核質(zhì)（nuclear material） 細(xì)菌的遺傳物質(zhì)稱為核質(zhì)或擬核，集中于細(xì)胞質(zhì)的某一區(qū)域，多在菌體中央，無核膜、核仁。 二、細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu) （一）莢膜（capsule）某些細(xì)菌細(xì)胞壁外包繞一層粘液樣物質(zhì)；普通染色不易著色，光鏡下可見透明環(huán)。 化學(xué)組成：多數(shù)為多糖，少數(shù)為多肽或透明質(zhì)酸 莢膜的形成：遺傳和環(huán)境因素 莢膜功能： 抗吞噬作用 抗有害物質(zhì)的損傷 粘附作用 （二）鞭毛（flagellum）許多細(xì)菌菌體外附著的細(xì)長而彎曲的絲狀物。 鞭毛的功能： 細(xì)菌的運(yùn)動器官 某些細(xì)菌鞭毛與致病有關(guān) 鞭毛蛋白有抗原性：H抗原 （三）菌毛（pilus）許多G－菌和少數(shù)G＋菌菌體表面存在著一種直的比鞭毛更細(xì)、更短的絲狀物，只有在電鏡下才能觀察。 化學(xué)組成：菌毛蛋白，有免疫原性 分類： ①普通菌毛 與黏附有關(guān) ②性菌毛 F+菌(雄菌)和F-菌(雌菌) 與遺傳信息接合轉(zhuǎn)移有關(guān) （四）芽胞（spore）某些細(xì)菌在一定環(huán)境條件下，胞質(zhì)脫水濃縮，在菌體內(nèi)部形成一個(gè)圓形或卵圓形的小體，是細(xì)菌的休眠形式。 芽胞的特點(diǎn)： 1) 保存有細(xì)菌全部生命活性。 2) 是細(xì)菌的休眠狀態(tài)，具有很強(qiáng)的抗高溫、抗干燥、抗化學(xué)消毒劑和抗射線能力。 3) 芽胞可發(fā)芽，形成新的菌體：一個(gè)細(xì)菌只形成一個(gè)芽胞，一個(gè)芽胞發(fā)芽也只生成一個(gè)菌體，芽胞不是細(xì)菌的繁殖方式。 4) 芽胞是滅菌指標(biāo)。 第三節(jié) 細(xì)菌形態(tài)與結(jié)構(gòu)檢查法 一、顯微鏡技術(shù) 二、染色技術(shù) 復(fù)習(xí)：原核細(xì)胞型微生物的特點(diǎn) 細(xì)菌染色后，由光學(xué)顯微鏡觀察。 細(xì)菌的大小形態(tài)不是固定不變的，受溫度、pH、營養(yǎng)成分、培養(yǎng)時(shí)間等環(huán)境因素影響。其基本形態(tài)指的是在適宜條件下適宜培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)生長的細(xì)菌的形態(tài)。 先圖解，整體介紹細(xì)菌的結(jié)構(gòu)，然后，分別介紹基本結(jié)構(gòu)和特殊結(jié)構(gòu)。 革蘭染色法將細(xì)菌分成兩大類：G+菌與G-菌 見圖：以金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌為例說明G+菌與G-菌細(xì)胞壁肽聚糖結(jié)構(gòu)異同 溶菌酶作用點(diǎn)：β-1、4糖苷鍵 青霉素作用的：五肽交聯(lián)橋與D-丙氨酸連接點(diǎn) 見圖：壁磷壁酸和膜磷壁酸/脂磷壁酸 見圖 總結(jié)： 1.為什么G+菌對青霉素的敏感性高于G-菌？ 2.G+菌和G-菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)區(qū)別。（見教材P13表1-1） G+菌細(xì)胞壁缺失后—原生質(zhì)體（protoplast） G-菌細(xì)胞壁缺失后—原生質(zhì)球（spheroplast） 臨床上一些慢性疾病排除其他病因之后要考慮L型細(xì)菌感染！ 結(jié)構(gòu)與真核細(xì)胞基本相同，但不含膽固醇。 鏈霉素能與30S亞基結(jié)合，紅霉素能與50S亞基結(jié)合，從而可以抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成。 如：白喉棒狀桿菌胞質(zhì)內(nèi)含有的異染顆粒。 可經(jīng)理化方法除去，不影響細(xì)菌生命活動。 如：肺炎鏈球菌在機(jī)體內(nèi)或含血清的培養(yǎng)基中可形成莢膜。 。 經(jīng)特殊染色增粗后光鏡下可見。 單毛菌運(yùn)動比周毛菌運(yùn)動快。 必須用電子顯微鏡才能看到。 細(xì)菌的毒力、耐藥性的轉(zhuǎn)移方式。 如：炭疽芽胞桿菌芽胞在有氧條件下形成，破傷風(fēng)梭菌芽胞在厭氧條件下形成。 原因： ①含水量少，蛋白質(zhì)不易變性。 ②芽胞結(jié)構(gòu)致密，理化因素不易透過。 ③特有成分吡啶二羧酸鈣鹽（DPA-Ca）能提高芽胞內(nèi)酶的熱穩(wěn)定性。 革蘭染色法過程：結(jié)晶紫初染—碘液媒染—95%乙醇脫色—稀釋石碳酸復(fù)紅液復(fù)染。 主要原因系兩者細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)不同。G+菌細(xì)胞壁肽聚糖層厚，乙醇不易進(jìn)入脫色；G-菌細(xì)胞壁肽聚糖層薄，外膜層厚，脂質(zhì)含量多，易被乙醇溶解，將結(jié)晶紫脫去，從而染上復(fù)紅液。 5min 15min 復(fù)習(xí)思考及作業(yè)題布置： 1.細(xì)菌大小測量單位，細(xì)菌的基本形態(tài)。 2.細(xì)胞壁的功能。 3. G+菌與G-菌細(xì)胞壁的異同。 4.什么是細(xì)菌L型？有何特點(diǎn)？ 5.細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)有哪些？各有何功能？ 授課的創(chuàng)新點(diǎn)： 1.概論與各論相聯(lián)系 2.講授與提問相結(jié)合 參考資料（包括輔助教材、參考書、文獻(xiàn)等）： 1.醫(yī)學(xué)微生物學(xué)（第6版），周正任主編，人民衛(wèi)生出版社 2.醫(yī)學(xué)微生物學(xué)（第5版），陸德源主編，人民衛(wèi)生出版社 教研室意見： 教研室主任簽章： 年 月 日 課后記（即通過收集教學(xué)督導(dǎo)專家、同行和學(xué)生的反饋信息，認(rèn)真整理分析成功的經(jīng)驗(yàn)和不足之處，在課程結(jié)束后填寫） 課程名稱 醫(yī)學(xué)微生物學(xué) 授課題目（章節(jié)或主題） 第2章 細(xì)菌的生理 授課教師 吳高莉 所屬系（部） 基礎(chǔ)系 所屬教研室 病原生物學(xué) 職稱 講師 授課時(shí)間 年 月 日第 周星期 第 節(jié)第 次課 授課時(shí)數(shù) 2 授課班級 臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)（本科√ 專科□） 教學(xué)課型 理論課√ 實(shí)驗(yàn)課□ 見習(xí)課□ 習(xí)題課□ 討論課□ 其它□ 教材名稱、作者、出版社及出版時(shí)間 《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》（第7版）李凡、劉晶星主編人民衛(wèi)生出版社 教學(xué)目的要求： 1．掌握細(xì)菌的人工培養(yǎng) 2．熟悉解細(xì)菌的營養(yǎng)與生長繁殖 3．了解細(xì)菌的理化性狀 4．了解細(xì)菌的新陳代謝和能量轉(zhuǎn)換 5．了解細(xì)菌的分類 重點(diǎn)： 1．細(xì)菌生長繁殖的條件及特點(diǎn) 2．細(xì)菌的人工培養(yǎng) 教學(xué)方法（請打√選擇）： 講授法√ 討論法□ 啟發(fā)式□ 自學(xué)輔導(dǎo)法□ 練習(xí)法（習(xí)題或操作）□ 讀書指導(dǎo)法□ PBL（以問題為中心的教學(xué)法）□ 其它□ 教學(xué)手段（請打√選擇）： 板書√ 實(shí)物□ 標(biāo)本□ 掛圖□ 模型□ 投影□ 幻燈□ 錄像□ CAI（計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)）√ 教學(xué)過程設(shè)計(jì)和教學(xué)內(nèi)容： 第一節(jié) 細(xì)菌的理化性狀 1.細(xì)菌的化學(xué)組成 一般：水、蛋白質(zhì)、糖類、脂肪、核酸和少數(shù)無機(jī)鹽 特殊：肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、DAP、DPA等 2. 細(xì)菌的物理性狀 （1）菌體半透明 （2）相對表面積大 （3）帶電現(xiàn)象 （4）半透性 （5）內(nèi)部滲透壓高 第二節(jié) 細(xì)菌的營養(yǎng)與生長繁殖 一、細(xì)菌的營養(yǎng)類型 1.自養(yǎng)菌 2.異養(yǎng)菌：腐生菌和寄生菌 二、細(xì)菌的營養(yǎng)物質(zhì) 1.水 2.碳源：來源于含碳的無機(jī)物或有機(jī)物，主要是糖類。 3.氮源：主要來源于有機(jī)（蛋白胨、牛肉膏等）或無機(jī)氮化物（銨鹽、硝酸鹽、尿素等）。 4.無機(jī)鹽 5.生長因子 三、影響細(xì)菌生長的環(huán)境因素 1.營養(yǎng)物質(zhì)：水、蛋白胨（氨基酸）、糖、無機(jī)鹽類等 2.氫離子濃度(pH)：多數(shù)病原菌最適pH為7.2~7.6 3.溫度：多數(shù)病原菌最適37℃ 4.氣體 對O2的需求： （1）專性需氧菌：如結(jié)核桿菌 （2）專性厭氧菌：如破傷風(fēng)梭菌 （3）兼性厭氧菌：大多數(shù)病原菌 （4）微需氧菌：如空腸彎曲 對CO2的需求： 大部分細(xì)菌在新陳代謝過程中產(chǎn)生的CO2可滿足需要。少數(shù)細(xì)菌需人工額外提供5%~10%的CO2，如腦膜炎奈瑟菌。 5.滲透壓 一般培養(yǎng)基滲透壓適于大多數(shù)細(xì)菌。 四、細(xì)菌的生長繁殖 1.生長方式 二分裂繁殖；繁殖速度一般20～30分鐘一代 2.生長曲線：遲緩期、對數(shù)期、穩(wěn)定期、衰退期 第三節(jié) 細(xì)菌的新陳代謝與能量轉(zhuǎn)換 營養(yǎng)物質(zhì)分解和轉(zhuǎn)化為能量的過程：分解代謝 所產(chǎn)生的能量用于細(xì)胞組分的合成：合成代謝 絕大多數(shù)細(xì)菌所需能量通過生物氧化作用（有機(jī)物氧化分解）獲得。 一、分解代謝產(chǎn)物和生化反應(yīng) 細(xì)菌對糖、蛋白質(zhì)的分解能力的不同，因而代謝產(chǎn)物各異，利用生物化學(xué)方法鑒別不同細(xì)菌稱為細(xì)菌的生化反應(yīng)。 糖發(fā)酵試驗(yàn) 大腸埃希菌分解乳糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣； 傷寒沙門菌不分解乳糖。 吲哚試驗(yàn) 大腸桿菌有色氨酸酶，分解色氨酸產(chǎn)生吲哚 甲基紅試驗(yàn) 大腸桿菌（+），產(chǎn)氣桿菌（-） VP試驗(yàn) 大腸桿菌（-），產(chǎn)氣桿菌（+） 二、合成代謝產(chǎn)物 1.熱原質(zhì) 細(xì)菌合成的一種注入人體內(nèi)引起發(fā)熱反應(yīng)的物質(zhì)。大多數(shù)是G-菌的脂多糖。 熱原質(zhì)耐高溫。 2.毒素和侵襲性酶 內(nèi)毒素——G－菌的脂多糖 外毒素——G＋菌和少數(shù)G－菌產(chǎn)生的蛋白質(zhì) 侵襲性酶——損傷機(jī)體組織，促進(jìn)細(xì)菌侵襲和擴(kuò)散，如卵磷脂酶 （產(chǎn)氣莢膜梭菌 ）、透明質(zhì)酸酶（鏈球菌）。 3.色素： 金黃色葡萄球菌——金黃色色素（脂溶性） 銅綠假單胞菌——-綠色色素（水溶性） 4.抗生素： 5.細(xì)菌素：只能殺傷有親緣關(guān)系的細(xì)菌，如大腸菌素。無治療意義，有助于細(xì)菌分型。 6.維生素：某些腸道菌合成，如B族維生素、VK。 第四節(jié) 細(xì)菌的人工培養(yǎng) 1.培養(yǎng)基（culture medium）：由適合細(xì)菌生長需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)配制，經(jīng)滅菌后制成的。 根據(jù)營養(yǎng)成分和作用分類： （1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基：滿足大多數(shù)細(xì)菌生長需要 （2）營養(yǎng)培養(yǎng)基：滿足營養(yǎng)要求高的細(xì)菌生長 （3）選擇培養(yǎng)基 （4）鑒別培養(yǎng)基 （5）厭氧培養(yǎng)基 根據(jù)物理性狀分類： （1）液體培養(yǎng)基 （2）半固體培養(yǎng)基 （3）固體培養(yǎng)基 2. 細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象 （1）液體培養(yǎng)基中生長現(xiàn)象 混濁：大多數(shù)細(xì)菌 沉淀：鏈狀生長的細(xì)菌 菌膜：專性需氧菌，如結(jié)核桿菌、枯草桿菌 （2）固體培養(yǎng)基中生長情況 分離培養(yǎng)：將標(biāo)本或培養(yǎng)物劃線接種在固體培養(yǎng)基的表面，因劃線的分散作用，使許多原混雜的細(xì)菌在固體培養(yǎng)基表面上散開。 純培養(yǎng)：挑取可疑菌落的細(xì)菌，重新劃線接種在另一固體培養(yǎng)基中，生長出來的菌落就是純培養(yǎng)物。 菌落（colony）：單個(gè)細(xì)菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)。 （3）半固體培養(yǎng)基中生長情況 有鞭毛細(xì)菌： 擴(kuò)散生長，周圍渾濁 無鞭毛細(xì)菌： 沿穿刺線生長，周圍透明 第五節(jié) 細(xì)菌的分類 一、細(xì)菌的分類 屬（genera） 由密切相關(guān)的種組成，如金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌屬于葡萄球菌屬。 種（species） 細(xì)菌的基本分類單位。 型（type） 同一種細(xì)菌基本性狀相同，而某些方面的特征稍有不同，便可分為不同的型別。 株（strain） 對不同來源的同一菌種的細(xì)菌稱為該菌的不同菌株。 二、細(xì)菌的命名 拉丁雙命名法，斜體書寫。前一字為屬名，名詞，首寫字母大寫；后一個(gè)字為種名，形容詞，小寫。也可以將屬名只用第一個(gè)字母大寫代替。 中文翻譯：種名在前，屬名在后。 吸收部分光線，折射部分光線，所以看見混濁的培養(yǎng)液。 利于物質(zhì)交換，代謝旺盛，繁殖迅速。 菌體中蛋白質(zhì)有兼性離子氨基酸組成，G+菌pI 2~3，G-菌pI 4~5。在近中性或弱堿性環(huán)境中，均帶負(fù)電荷。與帶正電荷的染料結(jié)合。 如細(xì)胞膜，利于物質(zhì)運(yùn)輸。 一般G+菌滲透壓達(dá)20~25個(gè)大氣壓，G-菌滲透壓達(dá)5~6個(gè)大氣壓，因?yàn)橛屑?xì)胞壁的保護(hù)，細(xì)菌在低滲環(huán)境下也能生長。 原料來源：無機(jī)物或有機(jī)物——自養(yǎng)或異養(yǎng) 能量產(chǎn)生方式：光合作用或生物氧化 所有病原菌都是異養(yǎng)菌，大部分是寄生菌。 水是生命之源。 碳源是細(xì)菌能量的主要來源和合成菌體組分， 氮源主要合成生命大分子物質(zhì)。 一般情況下，游離氮不能直接被利用，但是固氮菌（如根瘤菌）除外。 元素或微量元素。功能：①構(gòu)成有機(jī)化合物，成為菌體的成分；②作為酶或輔酶的組成部分，調(diào)節(jié)酶的活性；③調(diào)節(jié)菌體內(nèi)外的滲透壓；④維持生物大分子和細(xì)胞結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性；⑤有些元素作為能源。 生長必需但自身又不能合成，必須外界供給。如維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。例如，流感嗜血桿菌生長需要Ⅹ、Ⅴ因子。 霍亂弧菌最適pH 8.8~9.0，結(jié)核分枝桿菌最適pH 6.5~6.8。 鼠疫耶爾森菌最適溫度27~30℃。 結(jié)核分枝桿菌代時(shí)達(dá)18~20h，一般痰培養(yǎng)4周左右有結(jié)果。 將一定數(shù)量的細(xì)菌接種于培養(yǎng)液中，每隔一段時(shí)間取菌液測定活細(xì)菌數(shù)目。以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，以活細(xì)菌數(shù)目的對數(shù)為縱坐標(biāo)，繪制生長曲線。 可引起輸液發(fā)熱反應(yīng)，所以注射藥品應(yīng)嚴(yán)格消毒。 玻璃器皿中熱原質(zhì)用250℃高溫干烤破壞，液體中熱原質(zhì)用吸附劑和特殊石棉濾板出去，蒸餾法效果最好。 毒素以后介紹 抗生素是微生物在生命活動過程中產(chǎn)生的（有些是部分或全部合成的）只要極微量就能選擇性地抑制或影響其他生物機(jī)能的一類化學(xué)物質(zhì)。 如：營養(yǎng)肉湯配制： 蛋白胨10g，牛肉膏3g，NaCl 5g，蒸餾水1000ml，調(diào)pH7.4。. 制備過程：稱量（名稱、成分比例準(zhǔn)確）-蒸餾水溶解-調(diào)pH-滅菌-分裝-質(zhì)量鑒定（無菌試驗(yàn)、質(zhì)量鑒定）-立即使用，或放入4℃?zhèn)溆?，但不能超過一周。 從糞便標(biāo)本中篩選出致病細(xì)菌，如SS瓊脂、麥康凱培養(yǎng)基；含有某種抗生素的培養(yǎng)基等。 瓊脂：一種賦形劑，其營養(yǎng)價(jià)值忽略，加熱溶解，降溫至42℃開始凝固。瓊脂含量越高，其培養(yǎng)基硬度越大，反之，越小。 如：大腸埃希菌：Escherichia coli，可縮寫成，E.coli。Escherichia是屬名。 復(fù)習(xí)思考及作業(yè)題布置： 1.細(xì)菌生長繁殖需要的營養(yǎng)物質(zhì)及環(huán)境條件。 2.細(xì)菌個(gè)體生長繁殖的方式。 3.細(xì)菌生長曲線各期的作用？ 4.細(xì)菌合成代謝的產(chǎn)物有哪些？ 5.什么是培養(yǎng)基？培養(yǎng)基分類，及各類培養(yǎng)基的作用。 6.細(xì)菌在各種培養(yǎng)基中生長現(xiàn)象如何？ 授課的創(chuàng)新點(diǎn)： 1.概論與各論相結(jié)合。 2.講授與提問相結(jié)合。 參考資料（包括輔助教材、參考書、文獻(xiàn)等）： 1.醫(yī)學(xué)微生物學(xué)（第6版），周正任主編，人民衛(wèi)生出版社 2.醫(yī)學(xué)微生物學(xué)（第5版），陸德源主編，人民衛(wèi)生出版社 教研室意見： 教研室主任簽章： 年 月 日 課后記（即通過收集教學(xué)督導(dǎo)專家、同行和學(xué)生的反饋信息，認(rèn)真整理分析成功的經(jīng)驗(yàn)和不足之處，在課程結(jié)束后填寫） 課程名稱 醫(yī)學(xué)微生物學(xué) 授課題目（章節(jié)或主題） 第3章 消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全 授課教師 吳高莉 所屬系（部） 基礎(chǔ)系 所屬教研室 病原生物學(xué) 職稱 助教 授課時(shí)間 年 月 日第 一 周星期 第 節(jié)第 次課 授課時(shí)數(shù) 1 授課班級 臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)（本科√ ?？啤酰? 教學(xué)課型 理論課√ 實(shí)驗(yàn)課□ 見習(xí)課□ 習(xí)題課□ 討論課□ 其它□ 教材名稱、作者、出版社及出版時(shí)間 《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》（第7版）李凡、劉晶星主編人民衛(wèi)生出版社 教學(xué)目的要求： 1．掌握概念：滅菌、消毒、防腐、清潔、無菌和無菌操作 2．熟悉常用的物理消毒滅菌法 3．了解常用的化學(xué)消毒滅菌法 4．了解影響消毒滅菌效果的因素 5．了解病原微生物的分類及實(shí)驗(yàn)室生物安全 重點(diǎn)： 1．概念：滅菌、消毒、防腐、無菌 2．常用的物理消毒滅菌法的應(yīng)用 教學(xué)方法（請打√選擇）： 講授法√ 討論法□ 啟發(fā)式□ 自學(xué)輔導(dǎo)法□ 練習(xí)法（習(xí)題或操作）□ 讀書指導(dǎo)法□ PBL（以問題為中心的教學(xué)法）□ 其它□ 教學(xué)手段（請打√選擇）： 板書√ 實(shí)物□ 標(biāo)本□ 掛圖□ 模型□ 投影□ 幻燈□ 錄像□ CAI（計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)）√ 教學(xué)過程設(shè)計(jì)和教學(xué)內(nèi)容： 第一節(jié) 消毒滅菌常用術(shù)語 滅菌（sterilization）：殺滅物體上所有微生物的方法。 消毒（disinfection）：殺死物體上或環(huán)境中的病原微生物的方法。 防腐（antisepsis）：防止或抑制皮膚表面細(xì)菌生長繁殖的方法。 清潔（cleaning）：是指通過除去塵埃和一切污穢以減少微生物數(shù)量的過程。 無菌（asepsis）和無菌操作：無菌是無活菌的意思，多是滅菌的結(jié)果。防止細(xì)菌進(jìn)入人體 或其它物品的操作技術(shù)，稱為無菌操作。 第二節(jié) 消毒滅菌的方法 一、物理消毒滅菌法 （一）熱力滅菌法 1.干熱滅菌法 焚燒：廢棄物、動物尸體等 燒灼：接種環(huán)、試管口等 干烤：高溫下不變質(zhì)、不蒸發(fā)、不損壞的物品，如玻璃制皿、瓷器等 紅外線：利用電磁波的熱效應(yīng)，但是只能照射物品表面，物品加熱不均勻。 2.濕熱滅菌法 （1）巴氏消毒法(pasteurization) 適用于含有不耐熱成分的物品，如牛乳、酒類等。方法：一是61.1~62.8℃30min，一是71.7℃15~30sec。 （2）煮沸法 1個(gè)大氣壓下，100℃，一般細(xì)菌繁殖體幾分鐘能被殺死，細(xì)菌芽胞需1~2小時(shí)才被殺死。金屬、玻璃制皿都可用此法。 （3）高壓蒸汽滅菌法(autoclaving) 是最常用、效果最好的滅菌方法，適用于于耐高溫、耐濕物品，如一般培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)敷料、金屬制皿等。方法：103.4kPa（1.05kg/cm2或15磅/英寸2）蒸汽壓下，溫度121.3℃，維持15~20min。 （二）輻射殺菌法 1.紫外線 穿透力較弱，一般用于手術(shù)室、病房、實(shí)驗(yàn)室的空氣消毒，或不耐熱物品表面消毒。 2.電離輻射 β射線穿透性差，作用時(shí)間短，安全性好；γ射線穿透性強(qiáng)，作用時(shí)間慢，安全措施要求高。常用于一次性醫(yī)用塑料制品、食品、藥品、生物制劑的消毒滅菌。 3.微波（microwave） （三）濾過除菌法 濾菌器 (filter）：　主要是含有微細(xì)小孔的薄膜，有尼龍膜、硝酸纖維素膜等，孔徑有0.22μm、0.45μm等。用于不耐高溫的血清、抗生素等除菌。 （四）干燥與低溫抑菌法 二、 化學(xué)消毒滅菌法 消毒劑的主要種類 酚類：石炭酸、來蘇、氯己定 醇類：70%~75%乙醇、50%~80%異丙醇 醛類：甲醛、戊二醛 重金屬鹽類：升汞、1%硝酸銀 過氧化物類：過氧化氫、過氧乙酸、二氧化氯 含氯消毒劑：次氯酸鈉、次氯酸鈣 含碘化合物：碘酊、碘伏 烷化劑：環(huán)氧乙烷、甲醛、戊二醛 表面活性劑：苯扎溴銨、氯己定 第三節(jié) 消毒滅菌的運(yùn)用 皮膚、黏膜、空氣、飲水、環(huán)境、醫(yī)療器械、病人污染物品、病人排泄物與分泌物的消毒滅菌。 第四節(jié) 影響消毒滅菌效果的因素 1.消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間 2.微生物的種類與數(shù)量 3.溫度 4.酸堿度 5.有機(jī)物 第五節(jié) 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全 一、病原微生物的分類 根據(jù)傳染性和危害程度，病原微生物分為四類： 1. 第一類是指能夠引起人類或者動物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。 2.第二類是指能夠引起人類或者動物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。 3.第三類是指能夠引起人或動物疾病，但一般情況下對人、動物或環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。 4.第四類是指在通常情況下不會引起人或動物疾病的微生物。 二、病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)水平（BSL）分級 1. 一級，處理對人體、動植物或環(huán)境危害較低，不具有對健康成人、動植物致病的致病因子。 2. 二級，處理對人體、動植物或環(huán)境具有中等危害或具有潛在危險(xiǎn)的致病因子，對健康成人、動植物和環(huán)境不會造成嚴(yán)重危害，具有有效的預(yù)防和治療措施。 3. 三級，處理對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)性，主要通過氣溶膠使人類傳染上嚴(yán)重的甚至是致命的疾病，或?qū)又参锖铜h(huán)境具有高度危害的致病因子。通常有預(yù)防治療措施。 4. 四級 ，處理對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知的危險(xiǎn)的致病因子。沒有預(yù)防治療措施。 同一溫度下，濕熱滅菌法比干熱滅菌法效果好，因?yàn)椋孩贊駸嶂屑?xì)菌菌體蛋白較易變性凝固；②濕熱的穿透力比干熱大；③濕熱產(chǎn)生的蒸汽有潛熱效應(yīng)。 干燥時(shí)因?yàn)樗秩笔?，不利于?xì)菌生長，如各種風(fēng)干菜。 細(xì)菌在低溫下代謝減慢，生長也得到抑制，所以一般用低溫保存菌種。 高效消毒劑：含氯消毒劑、過氧化物消毒劑、醛類消毒劑 中效消毒劑：含碘消毒劑、醇類消毒劑 低效消毒劑：新潔爾滅、洗必泰、高錳酸鉀 自學(xué)，略 自學(xué)，略 有些化學(xué)試劑在高濃度時(shí)可作為消毒劑，在低濃度時(shí)作為防腐劑。注意醇類消毒劑的濃度！ 第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。 一、二級實(shí)驗(yàn)室不得從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動。 復(fù)習(xí)思考及作業(yè)題布置： 1.滅菌、消毒的概念。 2.常見的物理消毒滅菌法的應(yīng)用范圍。 3.常見的化學(xué)消毒劑及消毒原理、應(yīng)用范圍。 4.什么是生物安全？ 授課的創(chuàng)新點(diǎn)： 1.與日常生活中的疾病相聯(lián)系 2.講授與提問相結(jié)合 參考資料（包括輔助教材、參考書、文獻(xiàn)等）： 1.醫(yī)學(xué)微生物學(xué)（第6版），周正任主編，人民衛(wèi)生出版社 2.醫(yī)學(xué)微生物學(xué)（第5版），陸德源主編，人民衛(wèi)生出版社 教研室意見： 教研室主任簽章： 年 月 日 課后記（即通過收集教學(xué)督導(dǎo)專家、同行和學(xué)生的反饋信息，認(rèn)真整理分析成功的經(jīng)驗(yàn)和不足之處，在課程結(jié)束后填寫） 課程名稱 醫(yī)學(xué)微生物學(xué) 授課題目（章節(jié)或主題） 第4章 噬菌體 授課教師 吳高莉 所屬系（部） 基礎(chǔ)系 所屬教研室 病原生物學(xué) 職稱 講師 授課時(shí)間 年 月 日第 周星期 第 節(jié)第 次課 授課時(shí)數(shù) 0.5 授課班級 臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)（本科√ 專科□） 教學(xué)課型 理論課√ 實(shí)驗(yàn)課□ 見習(xí)課□ 習(xí)題課□ 討論課□ 其它□ 教材名稱、作者、出版社及出版時(shí)間 《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》（第7版）李凡、劉晶星主編人民衛(wèi)生出版社 教學(xué)目的要求： 1．掌握溶菌周期和溶原周期 2．掌握噬菌體溶菌現(xiàn)象 3．熟悉兩種噬菌體：毒性噬菌體和溫和噬菌體 4．了解噬菌體的生物學(xué)性狀 難點(diǎn)： 1．溶菌現(xiàn)象； 2．溶原性細(xì)菌的特點(diǎn)； 3．什么是前噬菌體？ 教學(xué)方法（請打√選擇）： 講授法√ 討論法□ 啟發(fā)式□ 自學(xué)輔導(dǎo)法□ 練習(xí)法（習(xí)題或操作）□ 讀書指導(dǎo)法□ PBL（以問題為中心的教學(xué)法）□ 其它□ 教學(xué)手段（請打√選擇）： 板書√ 實(shí)物□ 標(biāo)本□ 掛圖□ 模型□ 投影□ 幻燈□ 錄像□ CAI（計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)）√ 教學(xué)過程設(shè)計(jì)和教學(xué)內(nèi)容： 特點(diǎn)： ①噬菌體（bacteriophage）是感染細(xì)菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的病毒； ②個(gè)體微小，可以通過細(xì)菌濾器； ③無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，主要由衣殼（蛋白質(zhì)）和核酸組成； ④專性胞內(nèi)寄生； ⑤分布極廣； ⑥嚴(yán)格的宿主特異性。 第一節(jié) 噬菌體的生物學(xué)性狀 1.形態(tài)與結(jié)構(gòu) 三種基本形態(tài)：蝌蚪形、微球形、細(xì)桿形 蝌蚪形噬菌體結(jié)構(gòu)：由頭部和尾部組成。頭部呈六邊形立體對稱，由蛋白質(zhì)衣殼包繞核酸組成；尾部是管狀結(jié)構(gòu)，由中空的尾髓和外面包裹的尾鞘組成，尾部末端尚有尾板、尾刺和尾絲。 2.化學(xué)組成 核酸（DNA或RNA）和蛋白質(zhì) 第二節(jié) 毒性噬菌體與溫和噬菌體 1．毒性噬菌體：能在宿主菌細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖，產(chǎn)生許多子代噬菌體，并最終裂解細(xì)菌。 溶菌周期經(jīng)歷：吸附、穿入、生物合成、組裝成熟、釋放。 2．溫和噬菌體或溶原性噬菌體：噬菌體基因進(jìn)入宿主菌內(nèi)，不單獨(dú)復(fù)制，不產(chǎn)生子代噬菌體，也不引起細(xì)菌裂解，噬菌體基因整合于宿主菌染色體中，和細(xì)菌染色體一起復(fù)制，隨細(xì)菌的分裂而分配至子代細(xì)菌的基因組中。此過程稱為溶原周期。 可以用噬菌體進(jìn)行細(xì)菌鑒定與分型。 尾絲是噬菌體的吸附器官，能識別宿主細(xì)胞表面的特異性受體。 噬菌現(xiàn)象： 毒性噬菌體感染特異性的宿主菌，最終裂解宿主菌。在液體培養(yǎng)基中，噬菌體裂解宿主菌，菌液變澄清；在固體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基表面出現(xiàn)無細(xì)菌生長的透亮的空斑，稱為噬斑（plaque）。一個(gè)噬斑是一個(gè)噬菌體復(fù)制增殖并裂解宿主菌后形成的。通過噬斑的計(jì)數(shù)，可測知一定體積內(nèi)噬菌體的數(shù)目，即噬斑形成單位（PFU）數(shù)目。 整合到宿主菌染色體上的噬菌體基因稱為前噬菌體。 帶有前噬菌體的細(xì)菌稱為溶原性細(xì)菌。 溶原性細(xì)菌特點(diǎn)： ①能夠正常分裂； ②因?yàn)榍笆删w的插入，帶有了一些新的遺傳性狀； ③抵抗同種或有親緣關(guān)系的噬菌體重復(fù)感染； ④在理化或生物因素誘導(dǎo)下，前噬菌體可以脫離宿主菌染色體。脫離的噬菌體核酸進(jìn)行生物合成，組裝成熟，裂解宿主菌，釋放子代噬菌體，從而由溶原周期進(jìn)入溶菌周期。 復(fù)習(xí)思考及作業(yè)題布置： 1.溶菌周期和溶原周期。 2.如何由噬菌體鑒定細(xì)菌？ 3.什么是前噬菌體、溶原性細(xì)菌？ 4.溫和噬菌體由溶原周期向溶菌周期的轉(zhuǎn)變？ 授課的創(chuàng)新點(diǎn)： 1.理論與實(shí)驗(yàn)結(jié)合 2.圖解 參考資料（包括輔助教材、參考書、文獻(xiàn)等）： 1.醫(yī)學(xué)微生物學(xué)（第6版），周正任主編，人民衛(wèi)生出版社 2.醫(yī)學(xué)微生物學(xué)（第5版），陸德源主編，人民衛(wèi)生出版社 教研室意見： 教研室主任簽章： 年 月 日 課后記（即通過收集教學(xué)督導(dǎo)專家、同行和學(xué)生的反饋信息，認(rèn)真整理分析成功的經(jīng)驗(yàn)和不足之處，在課程結(jié)束后填寫） 課程名稱 醫(yī)學(xué)微生物學(xué) 授課題目（章節(jié)或主題） 第5章 細(xì)菌的遺傳與變異 授課教師 吳高莉 所屬系（部） 基礎(chǔ)系 所屬教研室 病原生物學(xué) 職稱 講師 授課時(shí)間 年 月 日第 周星期 第 節(jié)第 次課 授課時(shí)數(shù) 1 授課班級 臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)（本科√ ?？啤酰? 教學(xué)課型 理論課√ 實(shí)驗(yàn)課□ 見習(xí)課□ 習(xí)題課□ 討論課□ 其它□ 教材名稱、作者、出版社及出版時(shí)間 《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》（第7版）李凡、劉晶星主編人民衛(wèi)生出版社 教學(xué)目的要求： 1．掌握幾種基因轉(zhuǎn)移的方式 2．掌握細(xì)菌遺傳變異的醫(yī)學(xué)意義 3．熟悉細(xì)菌的遺傳物質(zhì) 4．了解遺傳與變異，遺傳性變異與非遺傳性變異的不同 5．了解基因圖版 重點(diǎn)： 1．質(zhì)粒； 2．幾種基因轉(zhuǎn)移方式：轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合和溶原性轉(zhuǎn)換； 3．細(xì)菌遺傳變異的醫(yī)學(xué)意義 難點(diǎn)： 1．幾種基因轉(zhuǎn)移方式：轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合和溶原性轉(zhuǎn)換 教學(xué)方法（請打√選擇）： 講授法√ 討論法□ 啟發(fā)式□ 自學(xué)輔導(dǎo)法□ 練習(xí)法（習(xí)題或操作）□ 讀書指導(dǎo)法□ PBL（以問題為中心的教學(xué)法）□ 其它□ 教學(xué)手段（請打√選擇）： 板書√ 實(shí)物□ 標(biāo)本□ 掛圖□ 模型□ 投影□ 幻燈□ 錄像□ CAI（計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)）√ 教學(xué)過程設(shè)計(jì)和教學(xué)內(nèi)容： 遺傳（heredity）---生物相似性 變異（variation） ---生物特異性 1）遺傳性變異（基因型變異） 2）非遺傳性變異（表型變異） 第一節(jié) 細(xì)菌的遺傳物質(zhì) 1. 細(xì)菌染色體：dsDNA，3.2～5106 bp 復(fù)制快；無組蛋白，無內(nèi)含子，為連續(xù)基因；單倍體 2. 質(zhì)粒（plasmid） 概念：細(xì)菌染色體外的遺傳物質(zhì)，是存在于細(xì)胞質(zhì)中閉合環(huán)狀雙鏈DNA。 特點(diǎn)：復(fù)制能力；轉(zhuǎn)移能力；整合能力；相容性；丟失或消除 功能：F質(zhì)粒－轉(zhuǎn)移；Vi質(zhì)粒－毒力；R質(zhì)粒－耐藥；Col質(zhì)粒－細(xì)菌素 3.轉(zhuǎn)座因子 1）插入序列 (insertion sequence，IS ): 兩端重復(fù)序列，與插入有關(guān)；中心序列有轉(zhuǎn)位酶基因 2）轉(zhuǎn)座子 (transposon， Tn)或復(fù)合轉(zhuǎn)座子（complex Tn）:兩端為IS ，中心序列有與轉(zhuǎn)位無關(guān)基因，如：毒素基因、耐藥基因等。 4.整合子 5.噬菌體基因組 第二節(jié) 基因的轉(zhuǎn)移與重組 轉(zhuǎn)移：供菌提供DNA；受菌接受DNA 重組：受菌獲得供菌DNA 1.轉(zhuǎn)化（transformation）： 供菌死亡時(shí)釋放或人工方法提取DNA被受菌直接主動攝取。 影響因素： 1）供受菌基因型：同源性；親緣關(guān)系近，轉(zhuǎn)化率高 2）感受態(tài)（competence）： 3）環(huán)境因素：Mg2＋、Ca2＋等可促進(jìn)轉(zhuǎn)化 2.接合（conjugation） 通過性菌毛將供菌DNA轉(zhuǎn)給受體菌，受體菌獲得供體菌性狀 3.轉(zhuǎn)導(dǎo)（transduction） 由噬菌體媒介，將供菌DNA轉(zhuǎn)給受菌。 （1）普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)： （2）局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)。 4.溶原性轉(zhuǎn)換（lysogenic conversion） 噬菌體DNA與菌染色體整合，受菌獲得新的性狀。 如不產(chǎn)毒白喉?xiàng)U菌從β-噬菌體中獲得編碼外毒素基因，變成產(chǎn)毒白喉?xiàng)U菌 第三節(jié) 基因突變 突變率：10-6~10-9 自發(fā)突變與誘發(fā)突變 突變與選擇 回復(fù)突變與抑制突變 第四節(jié) 細(xì)菌的遺傳變異在醫(yī)學(xué)上的實(shí)際意義 1.影響細(xì)菌學(xué)診斷 （1）形態(tài)結(jié)構(gòu)變異，如變形桿菌的鞭毛 （2）抗原性變異 （3）菌落的變異 2.毒力變異 如白喉?xiàng)U菌由無毒株變成有毒株，卡介苗（BCG）的制備 3.耐藥性變異 4.檢測致癌物 遺傳性變異與非遺傳性變異比較：①基因結(jié)構(gòu)（前者變化，后者無變化）；②可逆性（前者不可逆，后者可逆）；③穩(wěn)定性（前者穩(wěn)定，后者不穩(wěn)定）；④環(huán)境影響（前者不受影響，后者受影響）；⑤涉及細(xì)菌數(shù)（前者是個(gè)別，后者是接觸該環(huán)境的群體） 可以發(fā)生在同一條染色體上，也可發(fā)生在不同染色體之間，或者質(zhì)粒之間，或者染色體與質(zhì)粒之間 外源性遺傳物質(zhì)引起的變異。 見圖 Griffith的“小鼠體內(nèi)肺炎鏈球菌的轉(zhuǎn)化試驗(yàn)”說明：死亡的ⅢS型菌體內(nèi)的編碼莢膜的遺傳物質(zhì)進(jìn)入了活的ⅡR型菌體內(nèi)，重新編碼莢膜，使無莢膜菌株變成有莢膜菌株，能致小鼠死亡。 見圖 可以轉(zhuǎn)移F質(zhì)粒、R質(zhì)粒、染色體片段等。 見圖 載體是毒性噬菌體和溫和噬菌體；轉(zhuǎn)移的是供體菌染色體上裂解下的任何部位的DNA片段！ 載體是溫和噬菌體轉(zhuǎn)移的是前噬菌體連接位點(diǎn)兩側(cè)或一側(cè)相鄰的染色體DNA片段。 β棒狀桿菌噬菌體含有一種編碼毒素的基因，當(dāng)噬菌體感染無毒的白喉棒狀桿菌，噬菌體核酸整合到宿主菌染色體上，賦予宿主菌某些特殊性狀，比如編碼毒素，使白喉棒狀桿菌由無毒株變成有毒株。 問題：比較四種主要基因轉(zhuǎn)移方式的區(qū)別。 內(nèi)源性遺傳物質(zhì)改變。 “彷徨試驗(yàn)”和“影印試驗(yàn)”說明：自發(fā)突變的發(fā)生是隨機(jī)的、不定向的。噬菌體、抗生素沒有誘導(dǎo)作用，只是選擇作用，將發(fā)生自發(fā)突變的菌株篩選出來。 許多引起癌變的化學(xué)物質(zhì)、物理因素或生物因素都有可能引起細(xì)菌突變?？梢砸约?xì)菌作為模板，篩選可能有致癌作用的因素，如Ames試驗(yàn)。 復(fù)習(xí)思的考及作業(yè)題布置： 1.質(zhì)粒的概念，特點(diǎn)，常見的質(zhì)粒。 2.細(xì)菌遺傳變異的機(jī)制：基因轉(zhuǎn)移和基因突變 3.幾種主要基因轉(zhuǎn)移方式。 4.突變型細(xì)菌的篩選及突變株的意義。 5.細(xì)菌遺傳變異的醫(yī)學(xué)意義。 授課的創(chuàng)新點(diǎn)： 1.講授與提問相結(jié)合 2.圖解 參考資料（包括輔助教材、參考書、文獻(xiàn)等）： 1.醫(yī)學(xué)微生物學(xué)（第6版），周正任主編，人民衛(wèi)生出版社 2.醫(yī)學(xué)微生物學(xué)（第5版），陸德源主編，人民衛(wèi)生出版社 教研室意見： 教研室主任簽章： 年 月 日 課后記（即通過收集教學(xué)督導(dǎo)專家、同行和學(xué)生的反饋信息，認(rèn)真整理分析成功的經(jīng)驗(yàn)和不足之處，在課程結(jié)束后填寫） 課程名稱 醫(yī)學(xué)微生物學(xué) 授課題目（章節(jié)或主題） 第6章 細(xì)菌耐藥性 授課教師 吳高莉 所屬系（部） 基礎(chǔ)系