《醫(yī)學微生物學》教案.doc

教 案 2010 ~ 2011 學年第 一 學期 課 程 名 稱 醫(yī)學微生物學 開 課 系 部 基礎醫(yī)學系 開課教研室 病原生物學教研室 授 課 教 師 吳高莉 職 稱 講師 授 課 班 級 臨床醫(yī)學 學 生 人 數(shù) 長 沙 醫(yī) 學 院 教 務 處 制 長 沙 醫(yī) 學 院 教 案 課程名稱 醫(yī)學微生物學 授課題目（章節(jié)或主題） 緒論 授課教師 吳高莉 所屬系（部） 基礎系 所屬教研室 病原生物學 職稱 講師 授課時間 年 月 日第 周星期 第 節(jié)第 次課 授課時數(shù) 1 授課班級 臨床醫(yī)學專業(yè)（本科√ 專科□） 教學課型 理論課√ 實驗課□ 見習課□ 習題課□ 討論課□ 其它□ 教材名稱、作者、出版社及出版時間 《醫(yī)學微生物學》（第7版）李凡、劉晶星主編人民衛(wèi)生出版社 教學目的要求： 1．什么是微生物？微生物的特點、分類、與人類的關系。 2．什么是微生物學？什么是醫(yī)學微生物學？醫(yī)學微生物學研究范圍。 3．醫(yī)學微生物學發(fā)展簡史 重點： 1．熟悉微生物的概念、特點、分類、與人類的關系。 2．了解微生物學、醫(yī)學微生物學的研究范圍 教學方法（請打√選擇）： 講授法√ 討論法□ 啟發(fā)式□ 自學輔導法□ 練習法（習題或操作）□ 讀書指導法□ PBL（以問題為中心的教學法）□ 其它□ 教學手段（請打√選擇）： 板書□ 實物□ 標本□ 掛圖□ 模型□ 投影□ 幻燈□ 錄像□ CAI（計算機輔助教學）√ 教學過程設計和教學內容： 第一節(jié) 微生物與病原微生物 一、微生物（microorganism） 1.概念：自然界中一群體形微小、結構簡單，肉眼直接看不見，必須借助顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)千倍，甚至數(shù)萬倍才能觀察到的微小生物。 2.特點：種類繁多、分布廣泛、形體微小、結構簡單、增殖迅速、容易變異 3.分類 ： ①非細胞型微生物：無細胞結構，無產生能量酶；含有一種核酸（RNA或DNA)。 ②原核細胞型微生物：細胞器不完整，只有核糖體；擬核，無核仁、核膜； DNA和RNA同時存在。 ③真核細胞型微生物：細胞器完整；有細胞核，有核仁、核膜。 4.與人類的關系： （1）少數(shù)微生物引起人類和動、植物的病害； ①病原微生物 ②機會致病性微生物 正常情況下不致病，特殊情況下致病的微生物。 （2）絕大多數(shù)微生物對人類和動物、植物是有益的，而且有些是必需的。 ①在自然界物質循環(huán)中的作用 ②在農業(yè)方面的作用 ③在食品方面的作用 ④在制藥方面的作用 ⑤在工業(yè)方面的作用 ⑥在環(huán)境保護方面的作用 ⑦在生命科學中的作用 ⑧人類和動物體內的正常菌群 第二節(jié) 微生物學和醫(yī)學微生物學 一、微生物學（microbiology） 概念：生命科學的一個重要分支，研究微生物的種類、分布、形態(tài)、結構、代謝、生長繁殖、遺傳、進化及與人、動、植物等相互關系的一門科學。 二、醫(yī)學微生物學（medical microbiology） 概念：研究與醫(yī)學有關的病原微生物生物學特性、致病性和免疫機制以及特異性診、防治措施，以控制和消滅感染性疾病和與之有關的免疫損傷等疾病，達到保障和提高人類健康水平的目的。 第三節(jié) 醫(yī)學微生物學發(fā)展簡史 一、微生物學經驗時期 在生活生產（主要是食品）、醫(yī)學方面的經驗。 二、實驗微生物學時期 ①列文虎克：荷蘭人，首臺顯微鏡，第一次觀察到微小生物的存在。 ②巴斯德：法國科學家。有機物既可以釀出美酒，也可變成醋，也可以變質腐敗，都是由于微生物引起的，和微生物自身特點、生長環(huán)境等有關，開始了微生物生理學研究。 ③郭霍：德國科學家。固體培養(yǎng)基，標本中細菌的分離和純化，染色方法，動物實驗等。 ④琴納：英國鄉(xiāng)村醫(yī)生。從擠奶女工和中國古代的人痘接種法中受到啟發(fā)，創(chuàng)用了牛痘接種法。人類首次人工主動免疫。 ⑤貝林格：德國科學家。用含白喉抗毒素的動物免疫血清成功治愈一名白喉女孩。人類首次人工被動免疫。 ⑥伊凡諾夫斯基：俄國植物學家，發(fā)現(xiàn)第一個（植物）病毒：煙草花葉病病毒。 ⑦艾利希：首先合成化學藥物（砷凡納明）治療微生物感染（梅毒）。 ⑧弗萊明：第一個發(fā)現(xiàn)抗生素（青霉素）。 ⑨我國科學家：黃禎祥發(fā)現(xiàn)并首創(chuàng)了病毒體外細胞培養(yǎng)技術；湯非凡首次分離出沙眼衣原體，并用雞胚卵黃囊接種培養(yǎng)。 三、現(xiàn)代微生物學時期 1.新病原微生物的發(fā)現(xiàn) 2.微生物全基因組研究 3.微生物學診斷技術快速發(fā)展 4.疫苗研制的高速發(fā)展 提問：在生活中哪些方面與微生物有關？ 根據(jù)有無細胞、細胞分化程度分類。 如病毒。 包括細菌、支原體、衣原體、螺旋體、立克次體、放線菌。 如真菌。 有致病性的微生物，如引起甲肝、乙肝、艾滋病、結核病、狂犬病等 如在人或動物腸道內有大量腸道菌群，對于正常人來說不會致病，但在某些情況下會引起腹瀉或其他感染。 如：碳素循環(huán)、氮素循環(huán)等，保持生態(tài)平衡 如：微生物肥料、微生物飼料、微生物農藥等 如：釀醋、釀酒、制作饅頭、泡菜和酸奶等 如：抗生素、維生素、酶制劑的制備等 如：礦業(yè)、能源、石油、紡織等 如：降解塑料、處理污水等。 如：作為研究對象、基因工程中的應用等。 如皮膚表面，口腔、鼻、咽部、消化道、泌尿生殖道等部位存在一定數(shù)量、一定種類的正常菌群。 可分為： ①細菌學、病毒學、真菌學等。 ②微生物生理學、微生物生態(tài)學、微生物遺傳學、微生物分子生物學、細胞微生物學等。 ③食品微生物學、藥學微生物學、工業(yè)微生物學、環(huán)境微生物學、土壤微生物學、海洋微生物學、醫(yī)學微生物學等。 對象是病原微生物和機會致病性微生物 釀醋、釀酒、制作饅頭、泡菜和酸奶等的制備；肉類食物腌制或風干后保存時間延長等；食物煮熟了才吃，水煮沸了才喝等。 對肺癆（肺結核）病原體的認識：北宋 對鼠疫的流行特征的認識：清 人痘接種法預防天花：明 免疫學的發(fā)展！ 如：HBV（1963年）、HAV（1973年）、HIV（1981年報道病例，1983年分離出病毒）、SARS冠狀病毒（2003年）、瘋牛?。?985年4月，英國）；還出現(xiàn)一些新的變異株，如，2009年4月從墨西哥和美國開始流行的豬流感疫情的致病株——甲型H1N1亞型流感病毒。 由形態(tài)診斷到生化、免疫技術診斷到現(xiàn)在的基因診斷 由全疫苗到亞單位疫苗到基因工程疫苗 （疫苗的介紹后面講） 復習思考及作業(yè)題布置： 1.什么是微生物、病原微生物？ 2.什么是微生物學、醫(yī)學微生物學？ 3.微生物的特點、分類及與人類的關系？ 4.醫(yī)學微生物的發(fā)展史。 授課的創(chuàng)新點： 1.與日常生活中的微生物相聯(lián)系 參考資料（包括輔助教材、參考書、文獻等）： 1.醫(yī)學微生物學（第7版），周正任主編，人民衛(wèi)生出版社 2.醫(yī)學微生物學（第5版），陸德源主編，人民衛(wèi)生出版社 教研室意見： 教研室主任簽章： 年 月 日 課后記（即通過收集教學督導專家、同行和學生的反饋信息，認真整理分析成功的經驗和不足之處，在課程結束后填寫） 課程名稱 醫(yī)學微生物學 授課題目（章節(jié)或主題） 第1章 細菌的形態(tài)與結構 授課教師 吳高莉 所屬系（部） 基礎系 所屬教研室 病原生物學 職稱 講師 授課時間 年 月 日第 周星期 第 節(jié)第 次課 授課時數(shù) 2 授課班級 臨床醫(yī)學專業(yè)（本科√ 專科□） 教學課型 理論課√ 實驗課□ 見習課□ 習題課□ 討論課□ 其它□ 教材名稱、作者、出版社及出版時間 《醫(yī)學微生物學》（第7版）李凡、劉晶星主編人民衛(wèi)生出版社 教學目的要求： 1．掌握G+菌與G-菌細胞壁的異同 2．掌握細菌的特殊結構：莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞 3．熟悉細菌的大小與形態(tài) 4．了解細菌的其他基本結構：細胞膜、細胞質、核質 5．了解細菌形態(tài)與結構檢查法：顯微鏡與染色技術 重點： 1．G+菌與G-菌細胞壁結構 2．細菌的特殊結構 難點： 1．G+菌與G-菌細胞壁的異同 教學方法（請打√選擇）： 講授法√ 討論法□ 啟發(fā)式□ 自學輔導法□ 練習法（習題或操作）□ 讀書指導法□ PBL（以問題為中心的教學法）□ 其它□ 教學手段（請打√選擇）： 板書√ 實物□ 標本□ 掛圖□ 模型□ 投影□ 幻燈□ 錄像□ CAI（計算機輔助教學）√ 教學過程設計和教學內容： 細菌（bacterium）：是屬原核生物界的一種單細胞微生物. 廣義細菌：包括細菌、放線菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體 狹義細菌：專指其中數(shù)量最大、種類最多、具有典型代表性的細菌 第一節(jié) 細菌的大小與形態(tài) 測量單位： 微米 （μm） 基本形態(tài)三種：球菌；桿菌；螺形菌（弧菌、螺菌） 第二節(jié) 細菌的結構 一、細菌的基本結構 （一）細胞壁 1.肽聚糖（peptidoglycan） （1）革蘭陽性菌肽聚糖 ①聚糖骨架 ②四肽側鏈 ③五肽交聯(lián)橋 （2）革蘭陰性菌肽聚糖 ①聚糖骨架 ②四肽側鏈 2.Ｇ＋菌特有成分：磷壁酸 3.Ｇ-菌特有成分：外膜 （1）脂蛋白： 位于肽聚糖和脂質雙層之間，穩(wěn)定外膜 （2）脂質雙層： 類似于細胞膜結構，雙層內鑲嵌著多種蛋白質稱為外膜蛋白 （3）脂多糖(LPS)：G-菌內毒素組成 脂質A：毒性部分，無特異性 核心多糖：有屬特異性 特異多糖：有種特異性，菌體O抗原 4.細胞壁功能 （1）維持細菌形態(tài)，承受細胞內高滲透壓 （2）參與菌體內外的物質交換 （3）帶有多種抗原表位，可以誘發(fā)機體的免疫應答 （4）細胞壁的某些成分與細菌致病性有關 5.細胞壁缺陷菌（L型菌） 細菌細胞壁的肽聚糖結構受到理化或生物因素的直接破壞或合成被抑制，這種細胞壁受損的細菌在高滲環(huán)境下仍可存活者稱為細菌細胞壁缺陷型。 （二）細胞膜 組成：脂質雙層，蛋白質（無膽固醇） 功能： 物質轉運；呼吸作用；合成作用；參與細菌分裂 中介體（mesosome) : 細胞膜內陷、折疊形成的囊狀膜性結構，多見于Ｇ＋菌。 功能：與分裂有關；類似真核細胞線粒體。 （三）細胞質 成分：無色透明膠狀物，由水、蛋白質、脂類、核酸及少量無機鹽組成 功能：細菌新陳代謝的場所 結構： （1）核糖體（ribosome):蛋白質合成場所 （2）質粒（plasmid）：染色體外的遺傳物質，雙股閉合環(huán)狀DNA。 （3）胞質顆粒（cytoplasmic granule）：細菌儲存營養(yǎng)物質。如：白喉桿菌的異染顆粒，成分為RNA，多偏磷酸鹽 。 （四）核質（nuclear material） 細菌的遺傳物質稱為核質或擬核，集中于細胞質的某一區(qū)域，多在菌體中央，無核膜、核仁。 二、細菌的特殊結構 （一）莢膜（capsule）某些細菌細胞壁外包繞一層粘液樣物質；普通染色不易著色，光鏡下可見透明環(huán)。 化學組成：多數(shù)為多糖，少數(shù)為多肽或透明質酸 莢膜的形成：遺傳和環(huán)境因素 莢膜功能： 抗吞噬作用 抗有害物質的損傷 粘附作用 （二）鞭毛（flagellum）許多細菌菌體外附著的細長而彎曲的絲狀物。 鞭毛的功能： 細菌的運動器官 某些細菌鞭毛與致病有關 鞭毛蛋白有抗原性：H抗原 （三）菌毛（pilus）許多G－菌和少數(shù)G＋菌菌體表面存在著一種直的比鞭毛更細、更短的絲狀物，只有在電鏡下才能觀察。 化學組成：菌毛蛋白，有免疫原性 分類： ①普通菌毛 與黏附有關 ②性菌毛 F+菌(雄菌)和F-菌(雌菌) 與遺傳信息接合轉移有關 （四）芽胞（spore）某些細菌在一定環(huán)境條件下，胞質脫水濃縮，在菌體內部形成一個圓形或卵圓形的小體，是細菌的休眠形式。 芽胞的特點： 1) 保存有細菌全部生命活性。 2) 是細菌的休眠狀態(tài)，具有很強的抗高溫、抗干燥、抗化學消毒劑和抗射線能力。 3) 芽胞可發(fā)芽，形成新的菌體：一個細菌只形成一個芽胞，一個芽胞發(fā)芽也只生成一個菌體，芽胞不是細菌的繁殖方式。 4) 芽胞是滅菌指標。 第三節(jié) 細菌形態(tài)與結構檢查法 一、顯微鏡技術 二、染色技術 復習：原核細胞型微生物的特點 細菌染色后，由光學顯微鏡觀察。 細菌的大小形態(tài)不是固定不變的，受溫度、pH、營養(yǎng)成分、培養(yǎng)時間等環(huán)境因素影響。其基本形態(tài)指的是在適宜條件下適宜培養(yǎng)時間內生長的細菌的形態(tài)。 先圖解，整體介紹細菌的結構，然后，分別介紹基本結構和特殊結構。 革蘭染色法將細菌分成兩大類：G+菌與G-菌 見圖：以金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌為例說明G+菌與G-菌細胞壁肽聚糖結構異同 溶菌酶作用點：β-1、4糖苷鍵 青霉素作用的：五肽交聯(lián)橋與D-丙氨酸連接點 見圖：壁磷壁酸和膜磷壁酸/脂磷壁酸 見圖 總結： 1.為什么G+菌對青霉素的敏感性高于G-菌？ 2.G+菌和G-菌細胞壁結構區(qū)別。（見教材P13表1-1） G+菌細胞壁缺失后—原生質體（protoplast） G-菌細胞壁缺失后—原生質球（spheroplast） 臨床上一些慢性疾病排除其他病因之后要考慮L型細菌感染！ 結構與真核細胞基本相同，但不含膽固醇。 鏈霉素能與30S亞基結合，紅霉素能與50S亞基結合，從而可以抑制細菌蛋白質的合成。 如：白喉棒狀桿菌胞質內含有的異染顆粒。 可經理化方法除去，不影響細菌生命活動。 如：肺炎鏈球菌在機體內或含血清的培養(yǎng)基中可形成莢膜。 。 經特殊染色增粗后光鏡下可見。 單毛菌運動比周毛菌運動快。 必須用電子顯微鏡才能看到。 細菌的毒力、耐藥性的轉移方式。 如：炭疽芽胞桿菌芽胞在有氧條件下形成，破傷風梭菌芽胞在厭氧條件下形成。 原因： ①含水量少，蛋白質不易變性。 ②芽胞結構致密，理化因素不易透過。 ③特有成分吡啶二羧酸鈣鹽（DPA-Ca）能提高芽胞內酶的熱穩(wěn)定性。 革蘭染色法過程：結晶紫初染—碘液媒染—95%乙醇脫色—稀釋石碳酸復紅液復染。 主要原因系兩者細胞壁結構不同。G+菌細胞壁肽聚糖層厚，乙醇不易進入脫色；G-菌細胞壁肽聚糖層薄，外膜層厚，脂質含量多，易被乙醇溶解，將結晶紫脫去，從而染上復紅液。 5min 15min 復習思考及作業(yè)題布置： 1.細菌大小測量單位，細菌的基本形態(tài)。 2.細胞壁的功能。 3. G+菌與G-菌細胞壁的異同。 4.什么是細菌L型？有何特點？ 5.細菌的特殊結構有哪些？各有何功能？ 授課的創(chuàng)新點： 1.概論與各論相聯(lián)系 2.講授與提問相結合 參考資料（包括輔助教材、參考書、文獻等）： 1.醫(yī)學微生物學（第6版），周正任主編，人民衛(wèi)生出版社 2.醫(yī)學微生物學（第5版），陸德源主編，人民衛(wèi)生出版社 教研室意見： 教研室主任簽章： 年 月 日 課后記（即通過收集教學督導專家、同行和學生的反饋信息，認真整理分析成功的經驗和不足之處，在課程結束后填寫） 課程名稱 醫(yī)學微生物學 授課題目（章節(jié)或主題） 第2章 細菌的生理 授課教師 吳高莉 所屬系（部） 基礎系 所屬教研室 病原生物學 職稱 講師 授課時間 年 月 日第 周星期 第 節(jié)第 次課 授課時數(shù) 2 授課班級 臨床醫(yī)學專業(yè)（本科√ ?？啤酰? 教學課型 理論課√ 實驗課□ 見習課□ 習題課□ 討論課□ 其它□ 教材名稱、作者、出版社及出版時間 《醫(yī)學微生物學》（第7版）李凡、劉晶星主編人民衛(wèi)生出版社 教學目的要求： 1．掌握細菌的人工培養(yǎng) 2．熟悉解細菌的營養(yǎng)與生長繁殖 3．了解細菌的理化性狀 4．了解細菌的新陳代謝和能量轉換 5．了解細菌的分類 重點： 1．細菌生長繁殖的條件及特點 2．細菌的人工培養(yǎng) 教學方法（請打√選擇）： 講授法√ 討論法□ 啟發(fā)式□ 自學輔導法□ 練習法（習題或操作）□ 讀書指導法□ PBL（以問題為中心的教學法）□ 其它□ 教學手段（請打√選擇）： 板書√ 實物□ 標本□ 掛圖□ 模型□ 投影□ 幻燈□ 錄像□ CAI（計算機輔助教學）√ 教學過程設計和教學內容： 第一節(jié) 細菌的理化性狀 1.細菌的化學組成 一般：水、蛋白質、糖類、脂肪、核酸和少數(shù)無機鹽 特殊：肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、DAP、DPA等 2. 細菌的物理性狀 （1）菌體半透明 （2）相對表面積大 （3）帶電現(xiàn)象 （4）半透性 （5）內部滲透壓高 第二節(jié) 細菌的營養(yǎng)與生長繁殖 一、細菌的營養(yǎng)類型 1.自養(yǎng)菌 2.異養(yǎng)菌：腐生菌和寄生菌 二、細菌的營養(yǎng)物質 1.水 2.碳源：來源于含碳的無機物或有機物，主要是糖類。 3.氮源：主要來源于有機（蛋白胨、牛肉膏等）或無機氮化物（銨鹽、硝酸鹽、尿素等）。 4.無機鹽 5.生長因子 三、影響細菌生長的環(huán)境因素 1.營養(yǎng)物質：水、蛋白胨（氨基酸）、糖、無機鹽類等 2.氫離子濃度(pH)：多數(shù)病原菌最適pH為7.2~7.6 3.溫度：多數(shù)病原菌最適37℃ 4.氣體 對O2的需求： （1）專性需氧菌：如結核桿菌 （2）專性厭氧菌：如破傷風梭菌 （3）兼性厭氧菌：大多數(shù)病原菌 （4）微需氧菌：如空腸彎曲 對CO2的需求： 大部分細菌在新陳代謝過程中產生的CO2可滿足需要。少數(shù)細菌需人工額外提供5%~10%的CO2，如腦膜炎奈瑟菌。 5.滲透壓 一般培養(yǎng)基滲透壓適于大多數(shù)細菌。 四、細菌的生長繁殖 1.生長方式 二分裂繁殖；繁殖速度一般20～30分鐘一代 2.生長曲線：遲緩期、對數(shù)期、穩(wěn)定期、衰退期 第三節(jié) 細菌的新陳代謝與能量轉換 營養(yǎng)物質分解和轉化為能量的過程：分解代謝 所產生的能量用于細胞組分的合成：合成代謝 絕大多數(shù)細菌所需能量通過生物氧化作用（有機物氧化分解）獲得。 一、分解代謝產物和生化反應 細菌對糖、蛋白質的分解能力的不同，因而代謝產物各異，利用生物化學方法鑒別不同細菌稱為細菌的生化反應。 糖發(fā)酵試驗 大腸埃希菌分解乳糖，產酸產氣； 傷寒沙門菌不分解乳糖。 吲哚試驗 大腸桿菌有色氨酸酶，分解色氨酸產生吲哚 甲基紅試驗 大腸桿菌（+），產氣桿菌（-） VP試驗 大腸桿菌（-），產氣桿菌（+） 二、合成代謝產物 1.熱原質 細菌合成的一種注入人體內引起發(fā)熱反應的物質。大多數(shù)是G-菌的脂多糖。 熱原質耐高溫。 2.毒素和侵襲性酶 內毒素——G－菌的脂多糖 外毒素——G＋菌和少數(shù)G－菌產生的蛋白質 侵襲性酶——損傷機體組織，促進細菌侵襲和擴散，如卵磷脂酶 （產氣莢膜梭菌 ）、透明質酸酶（鏈球菌）。 3.色素： 金黃色葡萄球菌——金黃色色素（脂溶性） 銅綠假單胞菌——-綠色色素（水溶性） 4.抗生素： 5.細菌素：只能殺傷有親緣關系的細菌，如大腸菌素。無治療意義，有助于細菌分型。 6.維生素：某些腸道菌合成，如B族維生素、VK。 第四節(jié) 細菌的人工培養(yǎng) 1.培養(yǎng)基（culture medium）：由適合細菌生長需要的各種營養(yǎng)物質配制，經滅菌后制成的。 根據(jù)營養(yǎng)成分和作用分類： （1）基礎培養(yǎng)基：滿足大多數(shù)細菌生長需要 （2）營養(yǎng)培養(yǎng)基：滿足營養(yǎng)要求高的細菌生長 （3）選擇培養(yǎng)基 （4）鑒別培養(yǎng)基 （5）厭氧培養(yǎng)基 根據(jù)物理性狀分類： （1）液體培養(yǎng)基 （2）半固體培養(yǎng)基 （3）固體培養(yǎng)基 2. 細菌在培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象 （1）液體培養(yǎng)基中生長現(xiàn)象 混濁：大多數(shù)細菌 沉淀：鏈狀生長的細菌 菌膜：專性需氧菌，如結核桿菌、枯草桿菌 （2）固體培養(yǎng)基中生長情況 分離培養(yǎng)：將標本或培養(yǎng)物劃線接種在固體培養(yǎng)基的表面，因劃線的分散作用，使許多原混雜的細菌在固體培養(yǎng)基表面上散開。 純培養(yǎng)：挑取可疑菌落的細菌，重新劃線接種在另一固體培養(yǎng)基中，生長出來的菌落就是純培養(yǎng)物。 菌落（colony）：單個細菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細菌集團。 （3）半固體培養(yǎng)基中生長情況 有鞭毛細菌： 擴散生長，周圍渾濁 無鞭毛細菌： 沿穿刺線生長，周圍透明 第五節(jié) 細菌的分類 一、細菌的分類 屬（genera） 由密切相關的種組成，如金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌屬于葡萄球菌屬。 種（species） 細菌的基本分類單位。 型（type） 同一種細菌基本性狀相同，而某些方面的特征稍有不同，便可分為不同的型別。 株（strain） 對不同來源的同一菌種的細菌稱為該菌的不同菌株。 二、細菌的命名 拉丁雙命名法，斜體書寫。前一字為屬名，名詞，首寫字母大寫；后一個字為種名，形容詞，小寫。也可以將屬名只用第一個字母大寫代替。 中文翻譯：種名在前，屬名在后。 吸收部分光線，折射部分光線，所以看見混濁的培養(yǎng)液。 利于物質交換，代謝旺盛，繁殖迅速。 菌體中蛋白質有兼性離子氨基酸組成，G+菌pI 2~3，G-菌pI 4~5。在近中性或弱堿性環(huán)境中，均帶負電荷。與帶正電荷的染料結合。 如細胞膜，利于物質運輸。 一般G+菌滲透壓達20~25個大氣壓，G-菌滲透壓達5~6個大氣壓，因為有細胞壁的保護，細菌在低滲環(huán)境下也能生長。 原料來源：無機物或有機物——自養(yǎng)或異養(yǎng) 能量產生方式：光合作用或生物氧化 所有病原菌都是異養(yǎng)菌，大部分是寄生菌。 水是生命之源。 碳源是細菌能量的主要來源和合成菌體組分， 氮源主要合成生命大分子物質。 一般情況下，游離氮不能直接被利用，但是固氮菌（如根瘤菌）除外。 元素或微量元素。功能：①構成有機化合物，成為菌體的成分；②作為酶或輔酶的組成部分，調節(jié)酶的活性；③調節(jié)菌體內外的滲透壓；④維持生物大分子和細胞結構的穩(wěn)定性；⑤有些元素作為能源。 生長必需但自身又不能合成，必須外界供給。如維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。例如，流感嗜血桿菌生長需要Ⅹ、Ⅴ因子。 霍亂弧菌最適pH 8.8~9.0，結核分枝桿菌最適pH 6.5~6.8。 鼠疫耶爾森菌最適溫度27~30℃。 結核分枝桿菌代時達18~20h，一般痰培養(yǎng)4周左右有結果。 將一定數(shù)量的細菌接種于培養(yǎng)液中，每隔一段時間取菌液測定活細菌數(shù)目。以培養(yǎng)時間為橫坐標，以活細菌數(shù)目的對數(shù)為縱坐標，繪制生長曲線。 可引起輸液發(fā)熱反應，所以注射藥品應嚴格消毒。 玻璃器皿中熱原質用250℃高溫干烤破壞，液體中熱原質用吸附劑和特殊石棉濾板出去，蒸餾法效果最好。 毒素以后介紹 抗生素是微生物在生命活動過程中產生的（有些是部分或全部合成的）只要極微量就能選擇性地抑制或影響其他生物機能的一類化學物質。 如：營養(yǎng)肉湯配制： 蛋白胨10g，牛肉膏3g，NaCl 5g，蒸餾水1000ml，調pH7.4。. 制備過程：稱量（名稱、成分比例準確）-蒸餾水溶解-調pH-滅菌-分裝-質量鑒定（無菌試驗、質量鑒定）-立即使用，或放入4℃?zhèn)溆?，但不能超過一周。 從糞便標本中篩選出致病細菌，如SS瓊脂、麥康凱培養(yǎng)基；含有某種抗生素的培養(yǎng)基等。 瓊脂：一種賦形劑，其營養(yǎng)價值忽略，加熱溶解，降溫至42℃開始凝固。瓊脂含量越高，其培養(yǎng)基硬度越大，反之，越小。 如：大腸埃希菌：Escherichia coli，可縮寫成，E.coli。Escherichia是屬名。 復習思考及作業(yè)題布置： 1.細菌生長繁殖需要的營養(yǎng)物質及環(huán)境條件。 2.細菌個體生長繁殖的方式。 3.細菌生長曲線各期的作用？ 4.細菌合成代謝的產物有哪些？ 5.什么是培養(yǎng)基？培養(yǎng)基分類，及各類培養(yǎng)基的作用。 6.細菌在各種培養(yǎng)基中生長現(xiàn)象如何？ 授課的創(chuàng)新點： 1.概論與各論相結合。 2.講授與提問相結合。 參考資料（包括輔助教材、參考書、文獻等）： 1.醫(yī)學微生物學（第6版），周正任主編，人民衛(wèi)生出版社 2.醫(yī)學微生物學（第5版），陸德源主編，人民衛(wèi)生出版社 教研室意見： 教研室主任簽章： 年 月 日 課后記（即通過收集教學督導專家、同行和學生的反饋信息，認真整理分析成功的經驗和不足之處，在課程結束后填寫） 課程名稱 醫(yī)學微生物學 授課題目（章節(jié)或主題） 第3章 消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全 授課教師 吳高莉 所屬系（部） 基礎系 所屬教研室 病原生物學 職稱 助教 授課時間 年 月 日第 一 周星期 第 節(jié)第 次課 授課時數(shù) 1 授課班級 臨床醫(yī)學專業(yè)（本科√ ?？啤酰? 教學課型 理論課√ 實驗課□ 見習課□ 習題課□ 討論課□ 其它□ 教材名稱、作者、出版社及出版時間 《醫(yī)學微生物學》（第7版）李凡、劉晶星主編人民衛(wèi)生出版社 教學目的要求： 1．掌握概念：滅菌、消毒、防腐、清潔、無菌和無菌操作 2．熟悉常用的物理消毒滅菌法 3．了解常用的化學消毒滅菌法 4．了解影響消毒滅菌效果的因素 5．了解病原微生物的分類及實驗室生物安全 重點： 1．概念：滅菌、消毒、防腐、無菌 2．常用的物理消毒滅菌法的應用 教學方法（請打√選擇）： 講授法√ 討論法□ 啟發(fā)式□ 自學輔導法□ 練習法（習題或操作）□ 讀書指導法□ PBL（以問題為中心的教學法）□ 其它□ 教學手段（請打√選擇）： 板書√ 實物□ 標本□ 掛圖□ 模型□ 投影□ 幻燈□ 錄像□ CAI（計算機輔助教學）√ 教學過程設計和教學內容： 第一節(jié) 消毒滅菌常用術語 滅菌（sterilization）：殺滅物體上所有微生物的方法。 消毒（disinfection）：殺死物體上或環(huán)境中的病原微生物的方法。 防腐（antisepsis）：防止或抑制皮膚表面細菌生長繁殖的方法。 清潔（cleaning）：是指通過除去塵埃和一切污穢以減少微生物數(shù)量的過程。 無菌（asepsis）和無菌操作：無菌是無活菌的意思，多是滅菌的結果。防止細菌進入人體 或其它物品的操作技術，稱為無菌操作。 第二節(jié) 消毒滅菌的方法 一、物理消毒滅菌法 （一）熱力滅菌法 1.干熱滅菌法 焚燒：廢棄物、動物尸體等 燒灼：接種環(huán)、試管口等 干烤：高溫下不變質、不蒸發(fā)、不損壞的物品，如玻璃制皿、瓷器等 紅外線：利用電磁波的熱效應，但是只能照射物品表面，物品加熱不均勻。 2.濕熱滅菌法 （1）巴氏消毒法(pasteurization) 適用于含有不耐熱成分的物品，如牛乳、酒類等。方法：一是61.1~62.8℃30min，一是71.7℃15~30sec。 （2）煮沸法 1個大氣壓下，100℃，一般細菌繁殖體幾分鐘能被殺死，細菌芽胞需1~2小時才被殺死。金屬、玻璃制皿都可用此法。 （3）高壓蒸汽滅菌法(autoclaving) 是最常用、效果最好的滅菌方法，適用于于耐高溫、耐濕物品，如一般培養(yǎng)基、生理鹽水、手術敷料、金屬制皿等。方法：103.4kPa（1.05kg/cm2或15磅/英寸2）蒸汽壓下，溫度121.3℃，維持15~20min。 （二）輻射殺菌法 1.紫外線 穿透力較弱，一般用于手術室、病房、實驗室的空氣消毒，或不耐熱物品表面消毒。 2.電離輻射 β射線穿透性差，作用時間短，安全性好；γ射線穿透性強，作用時間慢，安全措施要求高。常用于一次性醫(yī)用塑料制品、食品、藥品、生物制劑的消毒滅菌。 3.微波（microwave） （三）濾過除菌法 濾菌器 (filter）：　主要是含有微細小孔的薄膜，有尼龍膜、硝酸纖維素膜等，孔徑有0.22μm、0.45μm等。用于不耐高溫的血清、抗生素等除菌。 （四）干燥與低溫抑菌法 二、 化學消毒滅菌法 消毒劑的主要種類 酚類：石炭酸、來蘇、氯己定 醇類：70%~75%乙醇、50%~80%異丙醇 醛類：甲醛、戊二醛 重金屬鹽類：升汞、1%硝酸銀 過氧化物類：過氧化氫、過氧乙酸、二氧化氯 含氯消毒劑：次氯酸鈉、次氯酸鈣 含碘化合物：碘酊、碘伏 烷化劑：環(huán)氧乙烷、甲醛、戊二醛 表面活性劑：苯扎溴銨、氯己定 第三節(jié) 消毒滅菌的運用 皮膚、黏膜、空氣、飲水、環(huán)境、醫(yī)療器械、病人污染物品、病人排泄物與分泌物的消毒滅菌。 第四節(jié) 影響消毒滅菌效果的因素 1.消毒劑的性質、濃度與作用時間 2.微生物的種類與數(shù)量 3.溫度 4.酸堿度 5.有機物 第五節(jié) 病原微生物實驗室生物安全 一、病原微生物的分類 根據(jù)傳染性和危害程度，病原微生物分為四類： 1. 第一類是指能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經宣布消滅的微生物。 2.第二類是指能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。 3.第三類是指能夠引起人或動物疾病，但一般情況下對人、動物或環(huán)境不構成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物。 4.第四類是指在通常情況下不會引起人或動物疾病的微生物。 二、病原微生物實驗室生物安全防護水平（BSL）分級 1. 一級，處理對人體、動植物或環(huán)境危害較低，不具有對健康成人、動植物致病的致病因子。 2. 二級，處理對人體、動植物或環(huán)境具有中等危害或具有潛在危險的致病因子，對健康成人、動植物和環(huán)境不會造成嚴重危害，具有有效的預防和治療措施。 3. 三級，處理對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險性，主要通過氣溶膠使人類傳染上嚴重的甚至是致命的疾病，或對動植物和環(huán)境具有高度危害的致病因子。通常有預防治療措施。 4. 四級 ，處理對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知的危險的致病因子。沒有預防治療措施。 同一溫度下，濕熱滅菌法比干熱滅菌法效果好，因為：①濕熱中細菌菌體蛋白較易變性凝固；②濕熱的穿透力比干熱大；③濕熱產生的蒸汽有潛熱效應。 干燥時因為水分缺失，不利于細菌生長，如各種風干菜。 細菌在低溫下代謝減慢，生長也得到抑制，所以一般用低溫保存菌種。 高效消毒劑：含氯消毒劑、過氧化物消毒劑、醛類消毒劑 中效消毒劑：含碘消毒劑、醇類消毒劑 低效消毒劑：新潔爾滅、洗必泰、高錳酸鉀 自學，略 自學，略 有些化學試劑在高濃度時可作為消毒劑，在低濃度時作為防腐劑。注意醇類消毒劑的濃度！ 第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。 一、二級實驗室不得從事高致病性病原微生物實驗活動。 復習思考及作業(yè)題布置： 1.滅菌、消毒的概念。 2.常見的物理消毒滅菌法的應用范圍。 3.常見的化學消毒劑及消毒原理、應用范圍。 4.什么是生物安全？ 授課的創(chuàng)新點： 1.與日常生活中的疾病相聯(lián)系 2.講授與提問相結合 參考資料（包括輔助教材、參考書、文獻等）： 1.醫(yī)學微生物學（第6版），周正任主編，人民衛(wèi)生出版社 2.醫(yī)學微生物學（第5版），陸德源主編，人民衛(wèi)生出版社 教研室意見： 教研室主任簽章： 年 月 日 課后記（即通過收集教學督導專家、同行和學生的反饋信息，認真整理分析成功的經驗和不足之處，在課程結束后填寫） 課程名稱 醫(yī)學微生物學 授課題目（章節(jié)或主題） 第4章 噬菌體 授課教師 吳高莉 所屬系（部） 基礎系 所屬教研室 病原生物學 職稱 講師 授課時間 年 月 日第 周星期 第 節(jié)第 次課 授課時數(shù) 0.5 授課班級 臨床醫(yī)學專業(yè)（本科√ 專科□） 教學課型 理論課√ 實驗課□ 見習課□ 習題課□ 討論課□ 其它□ 教材名稱、作者、出版社及出版時間 《醫(yī)學微生物學》（第7版）李凡、劉晶星主編人民衛(wèi)生出版社 教學目的要求： 1．掌握溶菌周期和溶原周期 2．掌握噬菌體溶菌現(xiàn)象 3．熟悉兩種噬菌體：毒性噬菌體和溫和噬菌體 4．了解噬菌體的生物學性狀 難點： 1．溶菌現(xiàn)象； 2．溶原性細菌的特點； 3．什么是前噬菌體？ 教學方法（請打√選擇）： 講授法√ 討論法□ 啟發(fā)式□ 自學輔導法□ 練習法（習題或操作）□ 讀書指導法□ PBL（以問題為中心的教學法）□ 其它□ 教學手段（請打√選擇）： 板書√ 實物□ 標本□ 掛圖□ 模型□ 投影□ 幻燈□ 錄像□ CAI（計算機輔助教學）√ 教學過程設計和教學內容： 特點： ①噬菌體（bacteriophage）是感染細菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的病毒； ②個體微小，可以通過細菌濾器； ③無細胞結構，主要由衣殼（蛋白質）和核酸組成； ④專性胞內寄生； ⑤分布極廣； ⑥嚴格的宿主特異性。 第一節(jié) 噬菌體的生物學性狀 1.形態(tài)與結構 三種基本形態(tài)：蝌蚪形、微球形、細桿形 蝌蚪形噬菌體結構：由頭部和尾部組成。頭部呈六邊形立體對稱，由蛋白質衣殼包繞核酸組成；尾部是管狀結構，由中空的尾髓和外面包裹的尾鞘組成，尾部末端尚有尾板、尾刺和尾絲。 2.化學組成 核酸（DNA或RNA）和蛋白質 第二節(jié) 毒性噬菌體與溫和噬菌體 1．毒性噬菌體：能在宿主菌細胞內復制增殖，產生許多子代噬菌體，并最終裂解細菌。 溶菌周期經歷：吸附、穿入、生物合成、組裝成熟、釋放。 2．溫和噬菌體或溶原性噬菌體：噬菌體基因進入宿主菌內，不單獨復制，不產生子代噬菌體，也不引起細菌裂解，噬菌體基因整合于宿主菌染色體中，和細菌染色體一起復制，隨細菌的分裂而分配至子代細菌的基因組中。此過程稱為溶原周期。 可以用噬菌體進行細菌鑒定與分型。 尾絲是噬菌體的吸附器官，能識別宿主細胞表面的特異性受體。 噬菌現(xiàn)象： 毒性噬菌體感染特異性的宿主菌，最終裂解宿主菌。在液體培養(yǎng)基中，噬菌體裂解宿主菌，菌液變澄清；在固體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基表面出現(xiàn)無細菌生長的透亮的空斑，稱為噬斑（plaque）。一個噬斑是一個噬菌體復制增殖并裂解宿主菌后形成的。通過噬斑的計數(shù)，可測知一定體積內噬菌體的數(shù)目，即噬斑形成單位（PFU）數(shù)目。 整合到宿主菌染色體上的噬菌體基因稱為前噬菌體。 帶有前噬菌體的細菌稱為溶原性細菌。 溶原性細菌特點： ①能夠正常分裂； ②因為前噬菌體的插入，帶有了一些新的遺傳性狀； ③抵抗同種或有親緣關系的噬菌體重復感染； ④在理化或生物因素誘導下，前噬菌體可以脫離宿主菌染色體。脫離的噬菌體核酸進行生物合成，組裝成熟，裂解宿主菌，釋放子代噬菌體，從而由溶原周期進入溶菌周期。 復習思考及作業(yè)題布置： 1.溶菌周期和溶原周期。 2.如何由噬菌體鑒定細菌？ 3.什么是前噬菌體、溶原性細菌？ 4.溫和噬菌體由溶原周期向溶菌周期的轉變？ 授課的創(chuàng)新點： 1.理論與實驗結合 2.圖解 參考資料（包括輔助教材、參考書、文獻等）： 1.醫(yī)學微生物學（第6版），周正任主編，人民衛(wèi)生出版社 2.醫(yī)學微生物學（第5版），陸德源主編，人民衛(wèi)生出版社 教研室意見： 教研室主任簽章： 年 月 日 課后記（即通過收集教學督導專家、同行和學生的反饋信息，認真整理分析成功的經驗和不足之處，在課程結束后填寫） 課程名稱 醫(yī)學微生物學 授課題目（章節(jié)或主題） 第5章 細菌的遺傳與變異 授課教師 吳高莉 所屬系（部） 基礎系 所屬教研室 病原生物學 職稱 講師 授課時間 年 月 日第 周星期 第 節(jié)第 次課 授課時數(shù) 1 授課班級 臨床醫(yī)學專業(yè)（本科√ ?？啤酰? 教學課型 理論課√ 實驗課□ 見習課□ 習題課□ 討論課□ 其它□ 教材名稱、作者、出版社及出版時間 《醫(yī)學微生物學》（第7版）李凡、劉晶星主編人民衛(wèi)生出版社 教學目的要求： 1．掌握幾種基因轉移的方式 2．掌握細菌遺傳變異的醫(yī)學意義 3．熟悉細菌的遺傳物質 4．了解遺傳與變異，遺傳性變異與非遺傳性變異的不同 5．了解基因圖版 重點： 1．質粒； 2．幾種基因轉移方式：轉化、轉導、接合和溶原性轉換； 3．細菌遺傳變異的醫(yī)學意義 難點： 1．幾種基因轉移方式：轉化、轉導、接合和溶原性轉換 教學方法（請打√選擇）： 講授法√ 討論法□ 啟發(fā)式□ 自學輔導法□ 練習法（習題或操作）□ 讀書指導法□ PBL（以問題為中心的教學法）□ 其它□ 教學手段（請打√選擇）： 板書√ 實物□ 標本□ 掛圖□ 模型□ 投影□ 幻燈□ 錄像□ CAI（計算機輔助教學）√ 教學過程設計和教學內容： 遺傳（heredity）---生物相似性 變異（variation） ---生物特異性 1）遺傳性變異（基因型變異） 2）非遺傳性變異（表型變異） 第一節(jié) 細菌的遺傳物質 1. 細菌染色體：dsDNA，3.2～5106 bp 復制快；無組蛋白，無內含子，為連續(xù)基因；單倍體 2. 質粒（plasmid） 概念：細菌染色體外的遺傳物質，是存在于細胞質中閉合環(huán)狀雙鏈DNA。 特點：復制能力；轉移能力；整合能力；相容性；丟失或消除 功能：F質粒－轉移；Vi質粒－毒力；R質粒－耐藥；Col質粒－細菌素 3.轉座因子 1）插入序列 (insertion sequence，IS ): 兩端重復序列，與插入有關；中心序列有轉位酶基因 2）轉座子 (transposon， Tn)或復合轉座子（complex Tn）:兩端為IS ，中心序列有與轉位無關基因，如：毒素基因、耐藥基因等。 4.整合子 5.噬菌體基因組 第二節(jié) 基因的轉移與重組 轉移：供菌提供DNA；受菌接受DNA 重組：受菌獲得供菌DNA 1.轉化（transformation）： 供菌死亡時釋放或人工方法提取DNA被受菌直接主動攝取。 影響因素： 1）供受菌基因型：同源性；親緣關系近，轉化率高 2）感受態(tài)（competence）： 3）環(huán)境因素：Mg2＋、Ca2＋等可促進轉化 2.接合（conjugation） 通過性菌毛將供菌DNA轉給受體菌，受體菌獲得供體菌性狀 3.轉導（transduction） 由噬菌體媒介，將供菌DNA轉給受菌。 （1）普遍性轉導： （2）局限性轉導。 4.溶原性轉換（lysogenic conversion） 噬菌體DNA與菌染色體整合，受菌獲得新的性狀。 如不產毒白喉桿菌從β-噬菌體中獲得編碼外毒素基因，變成產毒白喉桿菌 第三節(jié) 基因突變 突變率：10-6~10-9 自發(fā)突變與誘發(fā)突變 突變與選擇 回復突變與抑制突變 第四節(jié) 細菌的遺傳變異在醫(yī)學上的實際意義 1.影響細菌學診斷 （1）形態(tài)結構變異，如變形桿菌的鞭毛 （2）抗原性變異 （3）菌落的變異 2.毒力變異 如白喉桿菌由無毒株變成有毒株，卡介苗（BCG）的制備 3.耐藥性變異 4.檢測致癌物 遺傳性變異與非遺傳性變異比較：①基因結構（前者變化，后者無變化）；②可逆性（前者不可逆，后者可逆）；③穩(wěn)定性（前者穩(wěn)定，后者不穩(wěn)定）；④環(huán)境影響（前者不受影響，后者受影響）；⑤涉及細菌數(shù)（前者是個別，后者是接觸該環(huán)境的群體） 可以發(fā)生在同一條染色體上，也可發(fā)生在不同染色體之間，或者質粒之間，或者染色體與質粒之間 外源性遺傳物質引起的變異。 見圖 Griffith的“小鼠體內肺炎鏈球菌的轉化試驗”說明：死亡的ⅢS型菌體內的編碼莢膜的遺傳物質進入了活的ⅡR型菌體內，重新編碼莢膜，使無莢膜菌株變成有莢膜菌株，能致小鼠死亡。 見圖 可以轉移F質粒、R質粒、染色體片段等。 見圖 載體是毒性噬菌體和溫和噬菌體；轉移的是供體菌染色體上裂解下的任何部位的DNA片段！ 載體是溫和噬菌體轉移的是前噬菌體連接位點兩側或一側相鄰的染色體DNA片段。 β棒狀桿菌噬菌體含有一種編碼毒素的基因，當噬菌體感染無毒的白喉棒狀桿菌，噬菌體核酸整合到宿主菌染色體上，賦予宿主菌某些特殊性狀，比如編碼毒素，使白喉棒狀桿菌由無毒株變成有毒株。 問題：比較四種主要基因轉移方式的區(qū)別。 內源性遺傳物質改變。 “彷徨試驗”和“影印試驗”說明：自發(fā)突變的發(fā)生是隨機的、不定向的。噬菌體、抗生素沒有誘導作用，只是選擇作用，將發(fā)生自發(fā)突變的菌株篩選出來。 許多引起癌變的化學物質、物理因素或生物因素都有可能引起細菌突變?？梢砸约毦鳛槟０?，篩選可能有致癌作用的因素，如Ames試驗。 復習思的考及作業(yè)題布置： 1.質粒的概念，特點，常見的質粒。 2.細菌遺傳變異的機制：基因轉移和基因突變 3.幾種主要基因轉移方式。 4.突變型細菌的篩選及突變株的意義。 5.細菌遺傳變異的醫(yī)學意義。 授課的創(chuàng)新點： 1.講授與提問相結合 2.圖解 參考資料（包括輔助教材、參考書、文獻等）： 1.醫(yī)學微生物學（第6版），周正任主編，人民衛(wèi)生出版社 2.醫(yī)學微生物學（第5版），陸德源主編，人民衛(wèi)生出版社 教研室意見： 教研室主任簽章： 年 月 日 課后記（即通過收集教學督導專家、同行和學生的反饋信息，認真整理分析成功的經驗和不足之處，在課程結束后填寫） 課程名稱 醫(yī)學微生物學 授課題目（章節(jié)或主題） 第6章 細菌耐藥性 授課教師 吳高莉 所屬系（部） 基礎系