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1、實(shí)驗(yàn)十三 瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn) 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)掌握瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)的原理與應(yīng)用 熟悉掌握其基本操作方法 二、實(shí)驗(yàn)原理 沉淀反應(yīng)是指 可溶性抗原 與相應(yīng)抗體特異 性結(jié)合，在二者 比例適當(dāng) 并有 電解質(zhì) 存在 及一定的 溫度條件 下，可形成肉眼可見的 沉淀物的反應(yīng)。 根據(jù)反應(yīng)中使用的介質(zhì)和檢測(cè)方法不同， 可將沉淀反應(yīng)分為 液相沉淀反應(yīng) 和 凝膠內(nèi) 沉淀反應(yīng) 兩種類型 適合比例性 抗體含量 抗原含量 前帶 后帶 等價(jià)帶 網(wǎng)格學(xué)說 （ lattice theory） 抗體過剩 抗原過剩 抗體抗體比例合適 液相沉淀反應(yīng) 環(huán)狀沉淀 絮狀沉淀（免疫比濁） 凝膠內(nèi)沉淀反應(yīng) 單向瓊脂擴(kuò)散 雙向瓊脂擴(kuò)散 免疫電泳 凝膠內(nèi)
2、沉淀反應(yīng) 免疫擴(kuò)散技術(shù) 免疫電泳技術(shù) 單向擴(kuò)散試驗(yàn) 雙向擴(kuò)散試驗(yàn) 火箭電泳 對(duì)流電泳 免疫電泳 免疫擴(kuò)散 根據(jù)沉淀線的數(shù)量 、 位置和形狀 ， 與已知的標(biāo)準(zhǔn) (或正常 )抗原抗體形 成的沉淀線比較 ， 即可對(duì)樣品中所 含成分及其性質(zhì)進(jìn)行分析 、 鑒定 。 由于電場(chǎng)的作用，限制了抗原、抗體的 自由擴(kuò)散，而使其定向泳動(dòng)，因而增加 了試驗(yàn)的靈敏度，并縮短反應(yīng)時(shí)間。 根據(jù)樣品的沉淀峰長度即可計(jì)算出待測(cè) 抗原的含量；反之，當(dāng)瓊脂中抗原濃度 固定時(shí)，便可測(cè)定待測(cè)抗體的含量。 三、實(shí)驗(yàn)器材 兔抗 BSA抗體 BSA 0.01mol/LPBS緩沖液 1%離子瓊脂 打孔器 四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及步驟 1、瓊脂板制作 2、打孔 3、加樣 4、反應(yīng) 5、結(jié)果觀察
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