《微生物實驗-細(xì)菌培養(yǎng) 接種PPT課件》由會員分享,可在線閱讀,更多相關(guān)《微生物實驗-細(xì)菌培養(yǎng) 接種PPT課件(22頁珍藏版)》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。
1、第二次實驗課 內(nèi) 容1.細(xì)菌培養(yǎng)法錄象2.根底培養(yǎng)基制備講解示教3. 細(xì)菌接種法一份/組講解4.人體、物品中細(xì)菌檢查一份/組講解5.飛沫、空氣中細(xì)菌檢查一份/桌講解6.觀察細(xì)菌代謝產(chǎn)物講解7. 第一次實驗報告評講 根底培養(yǎng)基的制備去筋膜黃牛肉絞碎500g參加1000ml蒸餾水直接煮沸2小時 調(diào)整酸堿度至pH 7.6過濾,補(bǔ)足失水重新校正pH一次分裝,高壓滅菌,15磅(121.3)1520分鐘檢菌如無細(xì)菌生長(液體透明)即可應(yīng)用脫脂紗布過濾,按比例參加1蛋白胨、0.5%NaCl,0.1%K2HPO4加熱溶解補(bǔ)足水至1000ml4浸泡過夜煮沸半小時 人 體 、 物 品 中 細(xì) 菌 檢 查手衣發(fā)錢材
2、 料 : 普 通 平 板 1份 /組 蓋 上 , 標(biāo) 記 , 置 37 , 18-24h后 觀 察 。 飛沫、空氣中細(xì)菌檢查材料:血平板 1份/組 距口1520cm用力咳嗽三次置空氣中避日光照射30分鐘飛 沫空 氣蓋 上 , 標(biāo) 記 , 置 37 , 18-24h后 觀 察 。 結(jié)果觀察血平板 表皮葡萄球菌在血瓊脂平板培養(yǎng)基上形成不溶血的菌落。甲型溶血性鏈球菌形成的溶血現(xiàn)象也稱為甲型溶血現(xiàn)象或草綠色溶血現(xiàn)象,屬于不完全溶血。金黃色葡萄球菌形成的溶血現(xiàn)象也稱為乙型溶血現(xiàn)象,屬于完全溶血。 細(xì)菌培養(yǎng)接種法平板劃線法菌種:混合菌液材料:普通平板用具:接種環(huán)方法:分區(qū)劃線1區(qū)2區(qū)3區(qū)4區(qū)原始區(qū)域 半固
3、體培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)基 細(xì)菌培養(yǎng)接種法-斜面接種、液體接種、半固體菌種:大腸桿菌或葡萄球菌斜面材料:斜面、液體、半固體培養(yǎng)基用具:接種環(huán)、接種針 液體培養(yǎng)基 結(jié)果觀察普通平板 普通瓊脂平板培養(yǎng)基上,大腸埃希菌形成菌苔和菌落生長現(xiàn)象。注意:大小、顏色、透明度、凸起度、外表枯燥或濕潤、光滑或粗糙、邊緣是否整齊及血平板上的溶血情況。 結(jié)果觀察液體培養(yǎng)基 結(jié)果觀察斜面培養(yǎng)基瓊脂斜面培養(yǎng)基上大腸埃希菌形成的菌苔生長現(xiàn)象菌苔mossy指細(xì)菌生長繁殖后,在培養(yǎng)基 外表形成的一層培養(yǎng)物 結(jié)果觀察半固體培養(yǎng)基1、 擴(kuò)散生長:具有動力的細(xì)菌,可見培養(yǎng)物擴(kuò)散和培養(yǎng)基變混濁。即有鞭毛的細(xì)菌:由穿刺線向外擴(kuò)散生長羽毛狀或云
4、霧狀2、原位生長:沒有動力的細(xì)菌,可見培養(yǎng)物沒有擴(kuò)散,培養(yǎng)基仍然澄清。即無鞭毛的細(xì)菌: 沿穿刺線生長 2 1 1 2 細(xì)菌代謝產(chǎn)物觀察 細(xì)菌的酶不一樣,對營養(yǎng)物質(zhì)的分解能力不一樣,產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物也不一樣。常見:糖發(fā)酵試驗吲哚indol試驗甲基紅methyl red實驗VPVoges-Proskauer試驗枸櫞酸鹽利用citrate utilization試驗?zāi)蛩孛冈囼?硫化氫試驗 糖發(fā)酵試驗不同細(xì)菌分解糖類的能力和代謝產(chǎn)物不同。 甲基紅methyl red實驗M - 甲基紅methyl red實驗葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇 甲基紅 -葡萄糖丙酮酸 甲基紅 + 吲哚indol試驗I-吲哚indol
5、試驗色氨酸吲哚玫瑰吲哚 對二甲基氨基苯甲醛 枸櫞酸鹽利用試驗C -枸櫞酸鹽利用citrate utilization試驗利用枸櫞酸鹽生長 +不能利用 - 硫化氫試驗硫化氫試驗醋酸鉛培養(yǎng)基某些細(xì)菌分解含硫氨基酸,生成H2S,H2S遇鐵鹽如硫化亞鐵、醋酸鉛等,那么形成黑褐色硫化鐵鉛沉淀物,而呈黑色為。 尿素酶試驗 產(chǎn)生氨使培養(yǎng)基變堿,指示劑顯紅色,為陽性。如:變形桿菌為陽性。 IMViC試驗I - 吲哚indol試驗M - 甲基紅methyl red試驗V - VPVoges-Proskauer試驗C -枸櫞酸鹽利用citrate utilization試驗IMViC試驗 I M Vi C試驗 大腸埃希菌 + + - - 產(chǎn)氣桿菌 - - + + IMViC試驗:是吲哚、甲基紅、V-P以及枸櫞酸鹽利用試驗四者的合稱。常用于腸道桿菌的鑒定。 實驗小結(jié)1、三類培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基用于增菌; 均勻混濁、沉淀、外表生長 半固體培養(yǎng)基觀察動力;保存菌種6個 月;穿刺線,擴(kuò)散生長 固體培養(yǎng)基別離純化;保存菌種1個月 菌落、菌苔2、IMViC試驗 第三次實驗課內(nèi)容1、熱力對細(xì)菌和芽胞的殺菌作用2、紫外線的殺菌作用3、常用化學(xué)消毒劑的殺菌作用和抗生素敏感試驗4、耐藥性變異;5、細(xì)菌的鞭毛變異;6、高壓滅菌器的使用;7、細(xì)菌的鑒定程序;8、全自動微生物分析儀的根本原理及簡單操作步驟