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1、 主講:蒲小燕單位:青海大學(xué)醫(yī)學(xué)院 組 織 學(xué) （ histology） ： 研 究 機(jī) 體 微 細(xì) 結(jié) 構(gòu) 及 其 相 關(guān) 功 能 的 科 學(xué) 胚 胎 學(xué) （ embryology） ： 研 究 人 體 發(fā) 生 、 生 長(zhǎng) 及 其 發(fā) 育 機(jī) 制 的 一 門(mén) 科 學(xué) 組織學(xué)緒論 Histology Introduction 三、組織學(xué)技術(shù) 一、 組織學(xué)的概念 二、顯微鏡的應(yīng)用四 、組織學(xué)的學(xué)習(xí)方法 一、組織學(xué)的概念 機(jī)體的微細(xì)結(jié)構(gòu)是用顯微鏡及其相關(guān)功能的科學(xué) 。（細(xì)胞、組織、器官、系統(tǒng)）研究 紅細(xì)胞 白細(xì)胞 肌細(xì)胞 精子 神經(jīng)細(xì)胞 組織器官系統(tǒng) 細(xì)胞 細(xì)胞間質(zhì) （細(xì)胞外基質(zhì)）+上皮組織結(jié)締組
2、織肌組織神經(jīng)組織成人有11015個(gè)細(xì)胞,約210種. 細(xì)胞膜 細(xì)胞質(zhì) 細(xì)胞核細(xì)胞提出組織建立形成21種 透 射 電 鏡 -觀 察 細(xì) 胞 內(nèi) 部 結(jié) 構(gòu) 掃 描 電 鏡 -觀 察 組 織 或 細(xì) 胞 表 面 的 立 體 結(jié) 構(gòu)電子顯微鏡光學(xué)顯微鏡解剖光學(xué)顯微鏡（放大鏡）組織光學(xué)顯微鏡1、顯微鏡的分類(lèi)二、顯微鏡的應(yīng)用0.2um物體放大1000倍 鏡下結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)稱(chēng) LM 結(jié)構(gòu)發(fā)明于16世紀(jì)0.2nm物體放大1000倍 鏡下結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)稱(chēng) EM 結(jié)構(gòu)發(fā)明于1932年2、顯微鏡的特點(diǎn)三、組織學(xué)技術(shù) 石蠟切片法（用于教學(xué)） 冷凍切片法（用于臨床檢驗(yàn)） （肝、腎、淋巴結(jié)等）非切片法（牙齒、血液、疏松結(jié)締組織等）切片
3、法涂 片鋪片（撕片） 磨 片 取材（一）、石蠟切片法1、快速殺死動(dòng)物取材。2、組織愈新鮮愈好。 3、材料大小一般不超過(guò) 0.5cm3。固定1、動(dòng)物的組織在離體后便很快地進(jìn)行解體 , 這些變化可能是由于細(xì)菌或是由于其 本身所含酶的作用。2、在動(dòng)物死后應(yīng)立即將其固定起來(lái),停止其分解作用 , 盡可能保存其結(jié)構(gòu)及成分,并能抵抗各個(gè)步驟處理時(shí)所產(chǎn)生的損壞作用。 3、常用的固定液有 10% 福爾馬林 , Bouin 液 , 苦味酸、乙醇。4、固定時(shí)間為24小時(shí)-很長(zhǎng)。沖洗1、用水將固定液置換。2、時(shí)間為24小時(shí)。脫水1、組織必須先脫去水分 , 才能包埋于蠟中。2、脫水的步驟是陸續(xù)經(jīng) 70% 、 80% 、
4、 90% 、 95% 、 100 % 各級(jí)酒精 , 以去凈組織塊內(nèi)的水分 , 并完全由酒精所代替 。3、時(shí)間為3-6小時(shí) 透明1、因石蠟不溶于 酒精而溶于二甲苯 , 因而再用二甲苯替代酒精 , 同時(shí)因組織浸于油質(zhì)二甲苯 中也就變得透明了。2、時(shí)間為24小時(shí)。 浸蠟1、將透明好的組織快放入溶化 的石蠟中，置于保溫箱。2、時(shí)間為35小時(shí)。包埋最后把組織放在保持于 52 58C 的已溶解的石蠟中，置于常溫下。 切片待冷卻后就變成堅(jiān)硬的組織蠟塊 , 便可以進(jìn)行切片了。 貼片染色（二）染色方法 蘇 木 精（H ematoxylin）伊 紅（Eosin）堿 性 染 料將 嗜 堿 性 物 質(zhì)（本 身 酸 性
5、）染 成 藍(lán) 色 酸 性 染 料將 嗜 酸 性 物 質(zhì)（本 身 堿 性）染 成 紅 色細(xì) 胞 核 中 的 DNA、RNA，細(xì) 胞質(zhì) 中的RNA 細(xì) 胞 質(zhì)、膜 性 結(jié) 構(gòu)（線 粒 體、溶 酶 體、滑 面 內(nèi) 質(zhì) 網(wǎng)）(嗜堿性) (嗜酸性) Giemsa染色 、銀染色特殊染色:HE染色： 嗜中性巨噬細(xì)胞 消化分解1、形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系3、立體和斷面的關(guān)系5、前后聯(lián)系,對(duì)比總結(jié)功能(有溶酶體)四、組織學(xué)的學(xué)習(xí)方法2、理論和實(shí)踐的關(guān)系4、靜態(tài)與動(dòng)態(tài) 多 糖 PA氧 化 醛 Schiff試 劑 紫 紅 色 沉 淀五、 H istochemistry and Cytochemistry 組織化學(xué)與細(xì)胞
6、化學(xué) 試劑 + 組織中待檢物質(zhì) 有色沉淀 （多糖、酶、脂類(lèi)、核酸） ( periodic acid Schiff reaction)： 是確定組織或細(xì)胞中有無(wú)多糖的方法。 原理：PAS反應(yīng) 單柱上皮不同方位的切片圖 結(jié)構(gòu)與功能舒張狀態(tài)收縮狀態(tài) 靜態(tài)與動(dòng)態(tài) 綜合與比較 細(xì)胞膜 （ 一 ） 、 cytoplasm 基 質(zhì) 核 糖 體 ribosome 細(xì) 胞 器 內(nèi) 質(zhì) 網(wǎng) ER 高 爾 基 復(fù) 合 體 G olgi 溶 酶 體 Lys 線 粒 體 Mit 過(guò) 氧 化 物 酶 體 peroxisome 中 心 體 centrosome 細(xì) 胞 骨 架 cytoskeleton 包 含 物 :糖 原 、 脂 滴 、 分 泌 顆 粒 線 粒 體 Mit ： 能 量 供 應(yīng) 站 線 粒 體粗 面 內(nèi) 質(zhì) 網(wǎng)
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