2019-2020年高中生物難點(diǎn)剖析 222 動物細(xì)胞融合與單克隆抗體學(xué)案 新人教版選修3.doc
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2019-2020年高中生物難點(diǎn)剖析 222 動物細(xì)胞融合與單克隆抗體學(xué)案 新人教版選修3 疏導(dǎo)引導(dǎo) 1.動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較 比較項目 細(xì)胞融合的原理 細(xì)胞融合的方法 誘導(dǎo)方法 用法 植物體細(xì)胞雜交 細(xì)胞膜的流動性 去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合 離心、電激、振動、顯微操作、聚乙二醇等試劑誘導(dǎo) 克服遠(yuǎn)源雜交不親和,獲得雜種植株 動物細(xì)胞融合 細(xì)胞膜的流動性 使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合 除應(yīng)用植物體細(xì)胞雜交手段外,再加滅活的病毒誘導(dǎo) 制備單克隆抗體的技術(shù)之一 2.單克隆抗體的制備和應(yīng)用 1975年,英國科學(xué)家Milstein和Kohler開創(chuàng)了將產(chǎn)生抗體的單個細(xì)胞同瘤細(xì)胞雜交的技術(shù),他們因此而獲得1984年的諾貝爾醫(yī)學(xué)獎。動物受到外界抗原刺激后可發(fā)生免疫反應(yīng),產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,這一職能是由B淋巴細(xì)胞承擔(dān)的;瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下可以無限傳代,是“永久”的細(xì)胞。Milstein和Kohler為了大量制備純化的單克隆抗體,他們的設(shè)計方法是:把小鼠骨髓瘤細(xì)胞與免疫過的小鼠脾細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞)在聚乙二醇或滅活的病毒的介導(dǎo)下發(fā)生融合。融合后的雜交瘤細(xì)胞具有兩種親本細(xì)胞的特性,一方面可分泌抗體,另一方面像瘤細(xì)胞一樣,可在體外培養(yǎng)條件下或移植到體內(nèi)無限增殖,從而分泌大量的化學(xué)性質(zhì)單一、特異強(qiáng)的抗體——單克隆抗體。 單克隆抗體技術(shù)的最主要優(yōu)點(diǎn)是:可以用不純的抗原分子制備純化的單克隆抗體,甚至在所需抗原僅占原混合物中極少比例的情況下,也能獲得該抗原的單克隆抗體,其原因是可以從產(chǎn)生各種不同抗體的各種雜交瘤混合群體中篩選出產(chǎn)生特異抗體的雜交瘤。原則上可以制備出各種單克隆抗體,每種單克隆抗體可作為特殊的探針,用細(xì)胞學(xué)方法確定蛋白質(zhì)在細(xì)胞中的部位或用于純化各種蛋白,以研究其結(jié)構(gòu)和功能。用單克隆抗體技術(shù)與基因克隆技術(shù)相結(jié)合的方法為分離和鑒定新的蛋白質(zhì)和基因開辟了一條廣闊途徑。 單克隆抗體技術(shù)的應(yīng)用:(1)臨床診斷。例如,用單克隆抗體對血清中甲脂蛋白水平的測定可以診斷肝癌。用單克隆抗體測定人體絨毛膜中促性腺激素和白細(xì)胞T200,可以診斷人體惡性淋巴瘤。在傳染病的診斷上使用單克隆抗體不但診斷準(zhǔn)確,還可以大大縮短診斷時間。(2)單克隆抗體還可以作為載體,運(yùn)載抗癌藥物,形成“生物導(dǎo)彈”,治療腫瘤。目前至少下述幾類抗癌藥物可連接于單克隆抗體:①放射性核素;②毒素(植物毒素和蓖麻毒素、細(xì)胞毒素,如白喉毒素等);③化療藥物(如長春新堿、苯丁酸氮、柔毛霉素);④免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)劑(如二硝基氯苯)。 活學(xué)巧用 【例1】 如下圖所示為細(xì)胞融合技術(shù)的一些過程: (1)從A、B細(xì)胞到C細(xì)胞的過程中,必須用 處理。 (2)若A、B細(xì)胞為植物細(xì)胞,那么這樣的細(xì)胞已經(jīng)用酶降解脫掉了 ,這種酶可能是 酶,由此生成的A和B細(xì)胞稱為 。 (3)若A細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞,B細(xì)胞為B淋巴細(xì)胞,那么D細(xì)胞稱為 細(xì)胞,由D細(xì)胞連續(xù)分裂產(chǎn)生大量細(xì)胞的過程,稱為 過程。這種細(xì)胞既能無限繁殖,又能產(chǎn)生 。 (4)若A為人細(xì)胞,B為鼠細(xì)胞,并分別用紅、綠熒光染料標(biāo)記細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì),在C細(xì)胞階段時,細(xì)胞一半發(fā)紅色熒光,一半發(fā)綠色熒光。到D細(xì)胞階段,兩種顏色的熒光均勻分布,請解釋原因。 解題提示:此題是對植物細(xì)胞雜交、動物細(xì)胞雜交以及細(xì)胞膜的特性比較全面的考查。據(jù)課本中的知識,植物細(xì)胞外有一層細(xì)胞壁,阻礙了植物體細(xì)胞的雜交。因此,植物體細(xì)胞雜交的第一步是去掉細(xì)胞壁,分離出有活力的原生質(zhì)體。那么要去掉細(xì)胞壁就要利用酶的專一性這一特點(diǎn)。因?yàn)榧?xì)胞壁成分為纖維素和果膠,所以要用纖維素酶、果膠酶分解植物細(xì)胞的細(xì)胞壁。第二步就是讓不同植物體細(xì)胞的原生質(zhì)體融合,融合必須通過一定的技術(shù)手段進(jìn)行人工誘導(dǎo)。單克隆抗體制備過程需得到化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。科學(xué)家發(fā)現(xiàn),在動物發(fā)生免疫過程中,每一個B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體,要想獲得大量的單一抗體,必須用單個B淋巴細(xì)胞進(jìn)行克隆,形成細(xì)胞群。但在體外培養(yǎng)條件下,一個B淋巴細(xì)胞不可能無限增殖,這就需B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞在滅活的仙臺病毒或聚乙二醇的誘導(dǎo)下融合,再篩選出雜交瘤細(xì)胞。由于雜交瘤細(xì)胞繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì),既能分泌特異性抗體,又能大量繁殖。最后考查了細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)特點(diǎn):具有一定的流動性。 答案:(1)誘導(dǎo)劑?。?)細(xì)胞壁 纖維素 原生質(zhì)體?。?)雜交瘤 克隆 特異性抗體 (4)細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)是可以移動的。- 1.請仔細(xì)閱讀文檔,確保文檔完整性,對于不預(yù)覽、不比對內(nèi)容而直接下載帶來的問題本站不予受理。
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