2019-2020年高中生物 專題檢測 專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用（含解析）新人教版選修1.doc

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2019-2020年高中生物 專題檢測 專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用（含解析）新人教版選修1 考查知識點及角度 難度及題號 基礎(chǔ) 中檔 稍難 微生物的實驗室培養(yǎng) 1、2、4、5、6、8 微生物的分離與計數(shù) 3、7 9、13、14 15 分解纖維素的微生物的分離 10、11、12 (　　)。 ①土壤取樣　②稱取10 g土壤加入盛有90 mL無菌水的錐形瓶中?、畚?.1 mL進行平板涂布　④依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107稀釋度 A．①→②→③→④ B．①→③→②→④ C．①→②→④→③ D．①→④→②→③ 解析　在分離土壤中某細(xì)菌時，應(yīng)先選取土樣(10 g)，然后加無菌水獲得土壤浸出液，并進行不同倍數(shù)稀釋，最后將稀釋液涂布到培養(yǎng)基表面進行培養(yǎng)，并分離和計數(shù)。 答案　C 4．防止雜菌入侵，獲得純凈的培養(yǎng)物，是研究和應(yīng)用微生物的前提。下列敘述錯誤的是 (　　)。 A．實驗室里可以用紫外線或化學(xué)藥物進行消毒 B．接種環(huán)、接種針等金屬用具，直接在酒精燈火焰的內(nèi)焰部位灼燒滅菌 C．在實驗室中，切不可吃東西、喝水，離開實驗室時一定要洗手，以防止被微生物感染 D．使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進行滅菌處理，以免污染環(huán)境 解析　對接種環(huán)等金屬用具進行灼燒滅菌，應(yīng)放在酒精燈火焰的充分燃燒層即外焰處。 答案　B 5．下列關(guān)于細(xì)菌的敘述，錯誤的是 (　　)。 A．硝化細(xì)菌能以NH3作為氮源和能源物質(zhì) B．某些細(xì)菌可以利用光能固定CO2合成有機物 C．生長因子是某些細(xì)菌生長過程中需要額外補充的營養(yǎng)物質(zhì) D．含伊紅和美藍(lán)試劑的培養(yǎng)基不能用來鑒別牛奶中的大腸桿菌 解析　本題考查微生物的相關(guān)知識。硝化細(xì)菌能夠進行化能合成作用，把NH3轉(zhuǎn)換成硝態(tài)氮，并能利用化學(xué)反應(yīng)中釋放的化學(xué)能，A項正確；紅螺菌在沒有有機物的情況下，能夠利用光能，固定CO2合成有機物，B項正確；生長因子是微生物生長不可缺少的微量有機物，因此某些細(xì)菌的生長過程中需要額外提供生長因子，C項正確；利用含伊紅和美藍(lán)試劑的培養(yǎng)基可以鑒別乳制品和飲水中的大腸桿菌，D項錯誤。 答案　D 6．下列操作需要在火焰旁進行的一組是 (　　)。 ①土壤取樣　②稱取土壤?、巯♂屚寥廊芤骸、芡坎计桨? ⑤微生物的培養(yǎng) A．①②③④⑤ B．②③④⑤ C．③④⑤ D．②③④ 解析　本實驗要求無菌操作，因此在實驗室中暴露在空氣中的操作均需要在火焰旁進行。土壤的取樣是在室外進行的。 答案　D 7．有三位同學(xué)，利用稀釋涂布平板法來測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)。在對應(yīng)稀釋106倍的培養(yǎng)基中，得到如表所示的結(jié)果。你認(rèn)為下列數(shù)據(jù)中最接近真實值的是 (　　)。 同學(xué) 統(tǒng)計菌落數(shù) 平均值 甲 230 230 乙 21　212　256 163 丙 222　260 241 A.230 B．163 C．241 D．236 解析　甲同學(xué)只涂了一個平板，乙同學(xué)涂了2個平板，實驗用數(shù)據(jù)說服力不夠。 答案　B 8．下表是關(guān)于對四種生物能源、碳源、氮源、新陳代謝類型的描述，其中正確的一組是 (　　)。 硝化細(xì)菌 乳酸菌 根瘤菌 衣藻 能源 利用化學(xué)能 分解乳酸 固定N2 利用光能 碳源 CO2 糖類 糖類 CO2 氮源 NH3 N2 N2 NO 代謝類型 自養(yǎng)需氧型 異養(yǎng)厭氧型 異養(yǎng)需氧型 自養(yǎng)需氧型 A.硝化細(xì)菌與乳酸菌 B．乳酸菌與根瘤菌 C．根瘤菌與衣藻 D．硝化細(xì)菌與衣藻 解析　乳酸菌不能直接利用N2，且能量來源為糖類；根瘤菌進行生命活動所需要的能量來自于糖類等有機物分解。 答案　D 9．通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在碳源為纖維素的培養(yǎng)基上，大部分微生物無法生長；在培養(yǎng)基中加入青霉素，可以抑制細(xì)菌和放線菌。利用上述方法能從混雜的微生物群體中分別分離出 (　　)。 ①大腸桿菌　②霉菌?、鄯啪€菌?、芾w維素分解菌 A．④② B．①② C．①③ D．③④ 解析　本題考查了微生物分離知識。纖維素分解菌可以利用纖維素，大部分微生物卻不能，培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌，但霉菌能夠生長。 答案　A 10．纖維素酶的測定方法一般是 (　　)。 A．對纖維素進行定量測定 B．對纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進行定量測定 C．對纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的纖維二糖進行定量測定 D．對纖維素分解菌進行定量測定 解析　纖維素酶的測定方法一般是采用對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進行定量測定。 答案　B 11．利用農(nóng)作物秸稈等纖維質(zhì)原料生產(chǎn)的乙醇，經(jīng)加工可制成燃料乙醇，從而減少了對石油資源的依賴，下圖為生產(chǎn)燃料乙醇的簡要流程，據(jù)圖分析錯誤的一項是 (　　)。 A．要得到微生物A，最好選擇富含纖維素的土壤采集土樣 B．圖中②過程常用的微生物B是酵母菌 C．微生物A和微生物B可利用的碳源相同 D．可用纖維素酶制劑代替微生物A起作用 解析　微生物A所用碳源為纖維素，微生物B所用碳源為纖維素降解物。 答案　C 12．使用剛果紅染色時，加入剛果紅應(yīng)在 (　　)。 ①制備培養(yǎng)基時?、谔荻认♂寱r　③倒平板時?、芡坎紩r ⑤長出菌落時 A．①③ B．②⑤ C．③⑤ D．④⑤ 解析　常用的剛果紅染色法有兩種，一種是先培養(yǎng)微生物，長出菌落后再加入剛果紅進行顏色反應(yīng)；另一種是倒平板時就加入剛果紅。最終，兩種染色法都可以在培養(yǎng)基上觀察到以纖維素分解菌為中心的透明圈。 答案　C 二、非選擇題(3小題，共40分) 13．(8分)(xx濟南模擬)白僵菌高孢粉是國家林業(yè)局推廣的高效生物殺蟲劑之一，應(yīng)用于多種林木和農(nóng)作物害蟲的防治。白僵菌分生孢子在寄主表皮、氣孔或消化道上，遇適宜條件開始萌發(fā)，生出芽管。同時產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶、幾丁質(zhì)酶等溶解昆蟲的表皮，通過芽管入侵蟲體，在蟲體內(nèi)生長繁殖，消耗寄主體內(nèi)的養(yǎng)分，產(chǎn)生各種毒素，形成大量菌絲和孢子，布滿蟲體全身。 請根據(jù)上述材料回答下面的問題。 (1)從自然菌樣中篩選較理想的生產(chǎn)用菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→______→性能測定。白僵菌的菌樣應(yīng)從______中采集。 (2)分離白僵菌菌種的培養(yǎng)基屬于______培養(yǎng)基。在配制白僵菌培養(yǎng)基時常加入蔗糖、硫酸銨、硝酸鉀等成分，蔗糖屬于______(營養(yǎng)物質(zhì))。 (3)白僵菌純化培養(yǎng)常用的接種方法是_______________________________ 和______。 (4)分離與培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基和接種工具都要進行__________處理，利用高溫可以使微生物的__________等物質(zhì)發(fā)生變性。 解析　(1)富集培養(yǎng)后，需進行純種分離。 (2)篩選目的菌株需制備選擇培養(yǎng)基。 (3)進行純化培養(yǎng)的接種方法為平板劃線法和稀釋涂布平板法。 (4)培養(yǎng)基和接種工具需進行滅菌處理；高溫可導(dǎo)致蛋白質(zhì)和核酸變性。 答案　(1)純種分離　感病昆蟲　(2)選擇　碳源　(3)平板劃線法　稀釋涂布平板法　(4)滅菌　蛋白質(zhì)和核酸 14．(14分)自然界中的微生物往往是混雜生長的。人們在研究微生物時一般要將它們分離提純，然后進行數(shù)量的測定。下面是對大腸桿菌進行數(shù)量測定的實驗，請回答有關(guān)問題。步驟如下： (1)制備稀釋倍數(shù)為102、103、104、105、106的系列稀釋液。 (2)為了得到更加準(zhǔn)確的結(jié)果，你選用______(填“平板劃線法”或“稀釋涂布平板法”)接種樣品。 (3)適宜溫度下培養(yǎng)。 ①為測定大腸桿菌數(shù)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果，正確可信的是 (　　)。 A．一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是23 B．兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是22和26，取平均值24 C．三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為21、5和52，取平均值26 D．四個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、30、24和25，取平均值25 ②一同學(xué)在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，測得平板上菌落數(shù)的平均值為23.4，那么每毫升樣品中的菌落數(shù)是(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2 mL)______。 ③用這種方法測定密度，實際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量______，原因是________________________________________________________________ _______________________________________________________________。 ④某同學(xué)在測定大腸桿菌的密度時發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落，能否肯定該大腸桿菌的品系被污染了？______。為什么？_____________________________________________________________ __________________________________________________________。 解析　測定大腸桿菌數(shù)量時，平板數(shù)目至少為3個，數(shù)目越多，取得的平均值越接近于真實值。出現(xiàn)雜菌的原因有多方面的，如接種的菌種污染、制備培養(yǎng)基時污染、接種時操作污染、培養(yǎng)過程中的污染等等。 答案　(2)稀釋涂布平板法　①D?、?.17108　③多 當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察的是一個菌落 ④不能　因為不能排除雜菌來自培養(yǎng)基或來自培養(yǎng)過程 15．(18分)某化工廠的污水池中，含有一種有害的、難于降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌(目的菌)。實驗的主要步驟如下圖所示。請分析回答問題。 (1)接種前需要對培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿等進行滅菌，常用的滅菌方法是______。培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選______。 (2)實驗需要振蕩培養(yǎng)，由此推測“目的菌”的代謝類型是______。 (3)培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量______的培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使“目的菌”的數(shù)量______。 (4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時，為獲得單菌落進行繼續(xù)篩選，常采用平板劃線法或______法，接種后，應(yīng)將培養(yǎng)皿______(填“正放”或“倒置”)。 (5)下列有關(guān)平板劃線操作的敘述，錯誤的是(　　)。 A．在操作的第一步以及每次劃線之前都要將接種環(huán)放在火焰上灼燒 B．將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)液 C．蘸取菌液和劃線要在火焰旁進行 D．劃線時要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連 (6)實驗結(jié)束時，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行______處理后，才能倒掉。 (7)若用水葫蘆來去除該污染物，是否可行？ ______________________________________________________________。 解析　本題借助生產(chǎn)實例考查微生物的實驗室培養(yǎng)的基礎(chǔ)知識。培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿等常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法；培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選到能降解化合物A的目的菌；振蕩培養(yǎng)可以增加培養(yǎng)液中的氧含量，再依據(jù)培養(yǎng)液中含有有機化合物可以推出“目的菌”的代謝類型是異養(yǎng)需氧型；培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量減少的培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，目的是使“目的菌”的數(shù)量增加；轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時，為獲得單菌落進行繼續(xù)篩選，常采用平板劃線法或稀釋涂布平板法，接種后，應(yīng)將培養(yǎng)皿倒置，以防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染；利用平板劃線法獲得單菌落，劃線時不能將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連，這樣做不能得到單個菌落；實驗結(jié)束時，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行滅菌處理后，才能倒掉，以防止污染環(huán)境；用水葫蘆來去除該污染物是不可取的，因為水葫蘆會造成外來物種的入侵。 答案　(1)高壓蒸汽滅菌法　目的菌　(2)異養(yǎng)需氧型 (3)減少　增加　(4)稀釋涂布平板　倒置　(5)D (6)滅菌　(7)否 B卷 (時間：45分鐘　滿分：100分) 考查知識點及角度 難度及題號 基礎(chǔ) 中檔 稍難 微生物的實驗室培養(yǎng) 1、2、3、6 微生物的分離與計數(shù) 4、5 13、14 分解纖維素的微生物的分離 7、8、9、 10、11、 12 15 一、選擇題(12小題，每小題5分，共60分) 1．下列常用的無菌操作中，錯誤的是 (　　)。 A．無菌操作不要求殺死培養(yǎng)基中的一切細(xì)菌 B．用酒精擦拭雙手的方法是對操作者進行消毒 C．實驗操作過程應(yīng)在酒精燈火焰附近進行 D．玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)可用酒精擦拭 解析　本題考查微生物培養(yǎng)過程中的無菌操作，應(yīng)從無菌操作的概念和基本方法入手解答，對于不同的對象要用不同的消毒或滅菌方法。無菌技術(shù)是用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染，而不是殺死培養(yǎng)基中的一切細(xì)菌。對操作者應(yīng)用較溫和的方法進行消毒。實驗操作過程應(yīng)在酒精燈火焰附近進行，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。對無菌操作用到的玻璃器皿要用干熱滅菌的方法徹底消滅其中的微生物，用酒精擦拭不能達到目的。 答案　D 2．下列有關(guān)培養(yǎng)基配制原則表述正確的是 (　　)。 A．任何培養(yǎng)基都必須加入碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水及生長因子 B．碳源和氮源必須具有一定比例，碳元素的含量最多，其次為氮元素 C．微生物的生長除受營養(yǎng)因素影響外，還受pH、氧、滲透壓的影響 D．固體培養(yǎng)基一定需要加入瓊脂 解析　有些微生物能利用無機環(huán)境中的碳源、氮源，有些能自己合成生長因子，所以培養(yǎng)這些微生物時培養(yǎng)基中可不加入碳源、氮源、生長因子等，如培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基中可不加碳源。培養(yǎng)基中的碳源、氮源需要有一定的比例，碳源一般是微生物需求量最大的營養(yǎng)成分，但有些培養(yǎng)基可不含碳源或氮源。固體培養(yǎng)基是在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑而制成的，但瓊脂不是唯一的凝固劑。 答案　C 3．下表為某種培養(yǎng)基的配方，根據(jù)表格可以判斷出 (　　)。 成分 含量 成分 含量 K2HPO4 2 g (NH4)2SO4 1.4 g MgSO47H2O 0.3 g CaCl2 0.3 g 纖維素粉 20 g 瓊脂 20 g 水 1 000 mL pH 5.5 A.此培養(yǎng)基可以用來篩選生產(chǎn)纖維素酶的菌種 B．此培養(yǎng)基因原料來源廣泛，可用于工業(yè)生產(chǎn) C．此培養(yǎng)基可以用來篩選自生固氮菌 D．此培養(yǎng)基中含有微生物所必需的五類營養(yǎng)要素 解析　此培養(yǎng)基中以纖維素粉為唯一碳源，所以可以用來篩選生產(chǎn)纖維素酶的菌種，培養(yǎng)基含有銨鹽，不能用來篩選自生固氮菌；培養(yǎng)基中含有水、無機鹽、碳源、氮源四類營養(yǎng)要素。工業(yè)生產(chǎn)一般用天然培養(yǎng)基。 答案　A 4．用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目，其結(jié)果與實際值相比 (　　)。 A．比實際值高 B．比實際值低 C．和實際值一致 D．比實際值可能高也可能低 解析　培養(yǎng)基上的一個菌落也可能由相連的兩個或多個菌體繁殖而來，因此統(tǒng)計的活菌數(shù)要少于菌體實際數(shù)目。 答案　B 5．從土壤中分離獲得某種微生物的步驟是 (　　)。 ①土壤取樣?、谔荻认♂尅、圻x擇培養(yǎng)?、芡坎寂囵B(yǎng)　⑤篩選菌株 A．①②③④⑤ B．①③②④⑤ C．①②④③⑤ D．①④②③⑤ 解析　從土壤中分離獲得某種微生物的步驟為：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布培養(yǎng)→篩選菌株。 答案　B 6．(xx煙臺檢測)細(xì)菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理，這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌 (　　)。 A．接種針、手、培養(yǎng)基 B．高壓鍋、手、接種針 C．培養(yǎng)基、手、接種針 D．接鐘針、手、高壓鍋 解析　此題考查學(xué)生對無菌技術(shù)的掌握。高壓蒸汽滅菌鍋是滅菌的一個設(shè)備，通常用于培養(yǎng)基的滅菌。用酒精擦拭雙手是消毒的一種方法?；鹧孀茻梢匝杆購氐椎販缇m用于微生物的接種工具，如接種環(huán)。 答案　C 7．在分離分解纖維素的微生物實驗中，下列關(guān)于土壤取樣的敘述，不正確的是 (　　)。 A．可選取深層的土壤作為樣品 B．可選取樹林中多年落葉的腐殖土作為樣品 C．可選取樹林中多年積累的枯枝敗葉作為樣品 D．可把濾紙埋在土壤中經(jīng)過30 d左右，再選取已腐爛的濾紙作為樣品 解析　纖維素分解菌大多分布在富含纖維素的環(huán)境中，因此采樣時可選擇B、C兩項所述的環(huán)境，或者將富含纖維素的物質(zhì)如濾紙，埋在土壤中經(jīng)過30 d左右，再從已腐爛的濾紙上篩選纖維素分解菌。絕大多數(shù)細(xì)菌分布在距地表3～8 cm的土壤層，故不可選取深層土壤作樣品，否則細(xì)菌數(shù)目很少。 答案　A 8．在加入剛果紅的培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈的菌落是 (　　)。 A．分解尿素的細(xì)菌 B．硝化細(xì)菌 C．分解纖維素的細(xì)菌 D．乳酸菌 解析　分解纖維素的細(xì)菌能將纖維素分解，剛果紅－纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。 答案　C 9．對纖維素分解菌進行選擇培養(yǎng)時，用液體培養(yǎng)基的原因是 (　　)。 A．用液體培養(yǎng)基可獲得大量菌體 B．纖維素分解菌適宜在液體培養(yǎng)基上生長 C．在液體培養(yǎng)基中纖維素分解菌繁殖速度更快 D．用液體培養(yǎng)基可獲得高純度的纖維素分解菌 解析　纖維素分解菌在固體培養(yǎng)基上也能大量繁殖，也能獲得大量菌體。液體培養(yǎng)基中各種菌株混雜在一起，很難得到高純度的纖維素分解菌。在對纖維素分解菌進行選擇培養(yǎng)時，用液體培養(yǎng)基的目的是在液體培養(yǎng)基中纖維素分解菌繁殖速度更快。 答案　C 10．要將能分解纖維素的細(xì)菌從土壤中分離出來，應(yīng)將它們接種在 (　　)。 A．加入指示劑的鑒別培養(yǎng)基上 B．含有蛋白胨的固體培養(yǎng)基上 C．只含纖維素粉而無其他碳源的選擇培養(yǎng)基上 D．含四大營養(yǎng)要素的培養(yǎng)基上 解析　選擇纖維素分解菌的培養(yǎng)基中應(yīng)含有該種菌生長發(fā)育所需的營養(yǎng)條件，而其他菌種在這種培養(yǎng)基上不能生長。 答案　C 11．下列的物質(zhì)能與剛果紅形成紅色復(fù)合物的是 (　　)。 A．葡萄糖 B．纖維二糖 C．麥芽糖 D．纖維素 解析　剛果紅是一種酸性染料，它可以和多糖形成復(fù)合物，A、B、C都不是多糖。 答案　D 12．分離土壤中纖維素分解菌用到的方法是 (　　)。 ①稀釋倒平板法?、谕坎计桨宸ā、蹎渭?xì)胞挑取法?、苓x擇培養(yǎng)基分離 A．①② B．②③④ C．②③ D．①③④ 解析　分離土壤中纖維素分解菌時，先進行選擇培養(yǎng)，增大纖維素分解菌的濃度，即富集培養(yǎng)，梯度稀釋后涂布平板培養(yǎng)，最后單細(xì)胞挑取以獲得純培養(yǎng)。 答案　B 二、非選擇題(3小題，共40分) 13．(8分)廣東省是我國甘蔗生產(chǎn)區(qū)之一。甘蔗是一種高光效的C4植物，單位面積產(chǎn)量很高，種植面積日益擴大，目前已成為南方地區(qū)燃料酒精生產(chǎn)的重要原料。利用甘蔗生產(chǎn)燃料酒精的一般工藝流程為：甘蔗→榨汁(蔗糖)→酵母發(fā)酵→蒸餾→成品(燃料酒精)。 (1)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精發(fā)酵菌種，對野生酵母菌進行誘變后通過篩選可以得到具有這些特性的突變菌，誘變及篩選過程如下： 步驟1：野生菌液體培養(yǎng)一段時間后接受紫外線照射誘變處理。 步驟2：制備選擇培養(yǎng)基。在基本培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，注意__________________和________，加瓊脂后滅菌，制成固體平板。 步驟3：將紫外線照射后的菌液稀釋涂布平板。 步驟4：根據(jù)_________________________________________________，篩選出突變菌。 (2)上述步驟2、3和4的依據(jù)分別是 __________________________________________________________________ _______________________________________________________________。 解析　(1)要篩選耐高糖和耐酸的菌種，培養(yǎng)基中必須加入高濃度蔗糖和調(diào)低pH，能在選擇培養(yǎng)基上生長的即為所需菌種。(2)步驟2是給其提供高糖或酸性的篩選環(huán)境；步驟3是為了獲得單菌落；步驟4是根據(jù)能生長的菌株具有耐高糖和耐酸的特性篩選出突變菌。 答案　(1)添加高濃度蔗糖(葡萄糖)　調(diào)低pH　是否能在選擇培養(yǎng)基上生長　(2)提供高糖和酸性的篩選環(huán)境；獲得單菌落；能生長的菌落具有耐高糖和耐酸的特性 14．(16分)現(xiàn)有金黃色的葡萄球菌、硝化細(xì)菌和圓褐固氮菌3種細(xì)菌的混合物，某研究性學(xué)習(xí)小組的同學(xué)擬通過下面的實驗把它們分離開，并獲得純種，請完善下列實驗方案并回答相關(guān)問題。 (1)實驗步驟： ①配制三種固體培養(yǎng)基A、B、C，分別控制A________；B________；C________，其他條件均滿足生長要求，將這三種培養(yǎng)基分別分成兩份，依次標(biāo)上A1和A2、B1和B2、C1和C2。 ②在培養(yǎng)基A1、B1、C1中分別接種______，放在適宜的條件下培養(yǎng)3～4 d。 ③挑取A1、B1、C1上的正常生長的菌落中的菌，分別接種在培養(yǎng)基A2、B2、C2上，放在適宜的條件下培養(yǎng)3～4 d。 (2)結(jié)果預(yù)測： 在A1培養(yǎng)基上存活的是________，在B1培養(yǎng)基上存活的是________，在C1培養(yǎng)基上存活的是_______________________。 (3)實驗步驟③的目的是 ___________________________________________________________。 解析　分離混合菌應(yīng)根據(jù)各菌種的代謝特點配制培養(yǎng)基：金黃色葡萄球菌為異養(yǎng)型耐高滲、硝化細(xì)菌為自養(yǎng)型不耐高滲、圓褐固氮菌為自生固氮微生物且異養(yǎng)不耐高滲。只需配制高滲培養(yǎng)基、無有機碳培養(yǎng)基、無氮培養(yǎng)基即可將三種細(xì)菌分離出來。 答案　(1) ①加入高濃度的食鹽　無氮源　無有機碳源　②三種細(xì)菌的混合物 (2)金黃色的葡萄球菌　圓褐固氮菌　硝化細(xì)菌 (3)對分離的菌種進一步純化 15．(16分)有些微生物含有纖維素酶，通過對這些微生物的研究和應(yīng)用，使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn)酒精，用纖維素酶處理服裝面料等。纖維素酶可以通過微生物進行發(fā)酵生產(chǎn)，為了提高酶的產(chǎn)量，請你設(shè)計一個實驗，利用誘變育種的方法，獲得產(chǎn)生纖維素酶較多的菌株。 (1)寫出實驗步驟： ①__________________________________________________________； ②制備含有纖維素的固體培養(yǎng)基若干； ③____________________________________________________________； ④一段時間后，取培養(yǎng)基______，觀察記錄菌落周圍透明圈的大小情況。 (2)預(yù)期實驗結(jié)果及結(jié)論。 解析　本題設(shè)計實驗時包括兩方面內(nèi)容，首先是對現(xiàn)有菌種進行誘變處理，由于變異具有不定向性，獲得的菌種可能有高纖維素酶產(chǎn)量的也可能有低纖維素酶產(chǎn)量的，還需要對處理后的菌種進行篩選，需要利用篩選纖維素分解菌的培養(yǎng)基，應(yīng)用剛果紅染色法進行篩選。根據(jù)實驗組與對照組中透明圈的大小來判斷產(chǎn)生的纖維素酶的多少，相同時間內(nèi)形成的透明圈越大，說明產(chǎn)生的纖維素酶量越多。 答案　(1)①將培養(yǎng)好的生產(chǎn)菌株分成兩組，一組用一定劑量的誘變劑處理，另一組不處理，作為對照?、郯颜T變組的大量菌株接種到多個含有纖維素的固體培養(yǎng)基上，同時接種對照組(未處理的菌株)。把它們置于相同的條件下培養(yǎng) ④用剛果紅染色 (2)預(yù)期實驗結(jié)果及結(jié)論： ①誘變組中有些菌落周圍的透明圈與對照組相比較大，說明誘變育種獲得了高纖維素酶產(chǎn)量的菌種。 ②誘變組中有些菌落周圍的透明圈與對照組相同，說明誘變育種沒有菌株發(fā)生變化。 ③誘變組中有些菌落周圍的透明圈與對照組相比較小，說明誘變育種獲得了低纖維素酶產(chǎn)量的菌種。