《15第十五章自身免疫性疾病的免疫學檢驗》由會員分享，可在線閱讀，更多相關《15第十五章自身免疫性疾病的免疫學檢驗（50頁珍藏版）》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。
1、第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 返回總目錄返回總目錄目錄目錄 概述概述 1自身免疫性疾病的免疫學檢查自身免疫性疾病的免疫學檢查 2自身抗體的檢測實驗選擇的原則自身抗體的檢測實驗選擇的原則 3小結(jié)小結(jié)4第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 l 自身耐受自身耐受(self-tolerance) ：正常情況下，免疫系統(tǒng)正常情況下，免疫系統(tǒng) 對宿主自身的組織和細胞不產(chǎn)生免疫應答。對宿主自身
2、的組織和細胞不產(chǎn)生免疫應答。l 自身免疫自身免疫 (autoimmunity)：當某種原因使自身耐受當某種原因使自身耐受 性破壞時，免疫系統(tǒng)就會對自身組織成分、細胞成性破壞時，免疫系統(tǒng)就會對自身組織成分、細胞成 分及其產(chǎn)物發(fā)生免疫應答。分及其產(chǎn)物發(fā)生免疫應答。第一節(jié)第一節(jié) 概述概述第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 l 自身免疫病自身免疫病( (autoimmune disease,AID) )：是自身免是自身免疫應答過強或持續(xù)時間過久，表現(xiàn)為質(zhì)和量的異常，疫應答過強或持續(xù)時間過久，表現(xiàn)為質(zhì)和量的異常，所產(chǎn)生的自身抗體和（或）自身致敏淋巴細胞對表所產(chǎn)生的自身
3、抗體和（或）自身致敏淋巴細胞對表達自身靶抗原的細胞和組織發(fā)動攻擊，導致?lián)p傷或達自身靶抗原的細胞和組織發(fā)動攻擊，導致?lián)p傷或功能障礙，并出現(xiàn)相應臨床癥狀。功能障礙，并出現(xiàn)相應臨床癥狀。第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 一、自身免疫病與風濕性疾病一、自身免疫病與風濕性疾病l 風濕性疾病風濕性疾?。╮heumatic diseases）泛指影響骨、關泛指影響骨、關 節(jié)及周圍軟組織等一組疾病，簡稱風濕病。節(jié)及周圍軟組織等一組疾病，簡稱風濕病。第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 l結(jié)締組織病結(jié)締組織病(connective tiss
4、ue disease,CTD) 是指是指病變主要發(fā)生于結(jié)締組織，有組織黏液樣水腫、病變主要發(fā)生于結(jié)締組織，有組織黏液樣水腫、纖維蛋白樣變性及壞死性血管炎等基本病理變化纖維蛋白樣變性及壞死性血管炎等基本病理變化的一組疾病。的一組疾病。l以往所指的結(jié)締組織病或膠原病是風濕性疾病的以往所指的結(jié)締組織病或膠原病是風濕性疾病的一部分，它們和風濕性疾病不可完全等同。一部分，它們和風濕性疾病不可完全等同。 第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 1.1.發(fā)生與感染、遺傳、性激素等因素有關，屬發(fā)生與感染、遺傳、性激素等因素有關，屬AIDAID；2.2.結(jié)締組織及血管的慢性炎癥為
5、其基本病理變化；結(jié)締組織及血管的慢性炎癥為其基本病理變化；3.3.病變可累及多系統(tǒng)、多器官；病變可累及多系統(tǒng)、多器官；4.4.發(fā)病情況差異大，為異質(zhì)性疾病；發(fā)病情況差異大，為異質(zhì)性疾?。?.5.以關節(jié)、肌肉、軟組織等疼痛為主要癥狀；以關節(jié)、肌肉、軟組織等疼痛為主要癥狀；6.6.血清中可查出多種自身抗體；血清中可查出多種自身抗體；7.7.對糖皮質(zhì)激素及免疫抑制劑藥物治療有療效；對糖皮質(zhì)激素及免疫抑制劑藥物治療有療效；8.8.病程慢性、反復、進行性，最終可導致殘疾或死亡。病程慢性、反復、進行性，最終可導致殘疾或死亡。 風濕病的臨床特點風濕病的臨床特點第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身
6、免疫性疾病的免疫學檢驗 二、自身免疫病的共同特征二、自身免疫病的共同特征血中測到高效價的自身抗體血中測到高效價的自身抗體/ /自身應答性自身應答性T淋巴細胞淋巴細胞自身抗體自身抗體/ /自身應答性自身應答性T淋巴細胞作用于表達自淋巴細胞作用于表達自身抗原的組織細胞，造成其損傷或功能障礙身抗原的組織細胞，造成其損傷或功能障礙動物實驗可復制與動物實驗可復制與AID相似的動物模型，相似的動物模型，并能通過并能通過血清或致敏的淋巴細胞可使疾病被動轉(zhuǎn)移血清或致敏的淋巴細胞可使疾病被動轉(zhuǎn)移大多數(shù)自身免疫病是自發(fā)性或特發(fā)性的，外因可有大多數(shù)自身免疫病是自發(fā)性或特發(fā)性的，外因可有一定影響一定影響 ，病情的轉(zhuǎn)歸
7、與自身免疫應答強度相關，病情的轉(zhuǎn)歸與自身免疫應答強度相關有遺傳傾向，反復發(fā)作和慢性遷延，部分自身免疫有遺傳傾向，反復發(fā)作和慢性遷延，部分自身免疫性疾病易發(fā)于女性，應用免疫抑制劑治療有效性疾病易發(fā)于女性，應用免疫抑制劑治療有效 第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 三、自身免疫病的分類三、自身免疫病的分類 按自身抗原分類按自身抗原分類 器官特異性自身免疫性疾病器官特異性自身免疫性疾病器官非特異性自身免疫性疾病器官非特異性自身免疫性疾病患者的病變常局限于患者的病變常局限于某一特定的器官，由某一特定的器官，由對器官的特異性抗原對器官的特異性抗原的免疫應答引起的免疫應
8、答引起全身性或系統(tǒng)性自身全身性或系統(tǒng)性自身免疫性疾?。换颊叩拿庖咝约膊?；患者的病變可見于多種器官病變可見于多種器官及結(jié)締組織（結(jié)締組及結(jié)締組織（結(jié)締組織病或膠原病織病或膠原?。┑谑逭碌谑逭?自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 器官特異性器官特異性病病 名名自自 身身 抗抗 原原橋本甲狀腺炎橋本甲狀腺炎甲狀腺球蛋白和甲狀腺微粒體甲狀腺球蛋白和甲狀腺微粒體甲狀腺功能亢進甲狀腺功能亢進( (Graves病病) )TSH受體受體Addison病病腎上腺皮質(zhì)細胞腎上腺皮質(zhì)細胞自身免疫性萎縮性胃炎自身免疫性萎縮性胃炎胃壁細胞、內(nèi)因子胃壁細胞、內(nèi)因子潰瘍性結(jié)腸炎潰瘍性結(jié)腸炎結(jié)腸黏膜細胞
9、結(jié)腸黏膜細胞重癥肌無力重癥肌無力乙酰膽堿受體乙酰膽堿受體交感性眼炎交感性眼炎眼晶狀體蛋白眼晶狀體蛋白胰島素依賴型糖尿病胰島素依賴型糖尿病胰島胰島細胞細胞胰島素抵抗型糖尿病胰島素抵抗型糖尿病胰島素受體胰島素受體原發(fā)性膽汁性肝硬化原發(fā)性膽汁性肝硬化小膽管上皮細胞小膽管上皮細胞第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 器官非特異性器官非特異性病病 名名自自 身身 抗抗 原原系統(tǒng)性紅斑狼瘡系統(tǒng)性紅斑狼瘡細胞核成分、細胞漿成分細胞核成分、細胞漿成分類風濕性關節(jié)炎類風濕性關節(jié)炎變性變性IgG、類風濕相關的核抗原、類風濕相關的核抗原干燥綜合征干燥綜合征涎腺上皮細胞涎腺上皮細胞混
10、合性結(jié)締組織病混合性結(jié)締組織病細胞核細胞核( (RNP) )自身免疫性溶血性貧血自身免疫性溶血性貧血紅細胞紅細胞特發(fā)性血小板減少性紫癜特發(fā)性血小板減少性紫癜血小板血小板特發(fā)性白細胞減少癥特發(fā)性白細胞減少癥白細胞白細胞硬皮病硬皮病細胞核蛋白、細胞核染色體著絲點細胞核蛋白、細胞核染色體著絲點多發(fā)性肌炎多發(fā)性肌炎細胞核蛋白細胞核蛋白第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 器官特異性和器官非特異性的特征性區(qū)別器官特異性和器官非特異性的特征性區(qū)別器官特異性器官特異性器官非特異性器官非特異性自身抗體和病變具器官特異性自身抗體和病變具器官特異性自身抗體和病變無器官特異性自身抗
11、體和病變無器官特異性極少量自身抗原與淋巴樣系統(tǒng)極少量自身抗原與淋巴樣系統(tǒng)接觸接觸大量自身抗原進入免疫系統(tǒng)大量自身抗原進入免疫系統(tǒng)實質(zhì)病變可能由實質(zhì)病變可能由變態(tài)反應變態(tài)反應或自身抗體所致或自身抗體所致病變由抗原抗體復合物所致病變由抗原抗體復合物所致治療原則為控制代謝缺陷治療原則為控制代謝缺陷治療原則為抑制炎癥治療原則為抑制炎癥和抗體形成和抗體形成有發(fā)生器官內(nèi)癌癥的傾向有發(fā)生器官內(nèi)癌癥的傾向有發(fā)生淋巴網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞有發(fā)生淋巴網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞腫瘤的傾向腫瘤的傾向抗原與弗氏佐劑共同免疫動物抗原與弗氏佐劑共同免疫動物可誘導產(chǎn)生器官特異性抗體可誘導產(chǎn)生器官特異性抗體動物被刺激后不產(chǎn)生抗體動物被刺激后不產(chǎn)生抗體
12、第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 分類分類疾病疾病結(jié)締組織結(jié)締組織系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征、類風濕性關節(jié)炎、混合系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征、類風濕性關節(jié)炎、混合性結(jié)締組織病性結(jié)締組織病內(nèi)分泌系統(tǒng)內(nèi)分泌系統(tǒng)橋本甲狀腺炎、橋本甲狀腺炎、Graves病、病、Addison病、胰島素依賴性病、胰島素依賴性糖尿病糖尿病消化系統(tǒng)消化系統(tǒng)萎縮性胃炎、潰瘍性胃炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化萎縮性胃炎、潰瘍性胃炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化血液系統(tǒng)血液系統(tǒng)惡性貧血、自身免疫性溶血性貧血、特發(fā)性血小板減少惡性貧血、自身免疫性溶血性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜性紫癜心血管系統(tǒng)心血管系統(tǒng)風濕性
13、心肌炎風濕性心肌炎泌尿系統(tǒng)泌尿系統(tǒng)腎小球腎炎腎小球腎炎呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)特發(fā)性肺纖維化特發(fā)性肺纖維化神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)系統(tǒng)重癥肌無力、多發(fā)性神經(jīng)炎重癥肌無力、多發(fā)性神經(jīng)炎皮膚皮膚蕁麻疹蕁麻疹按發(fā)病部位的解剖系統(tǒng)分類按發(fā)病部位的解剖系統(tǒng)分類第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 （一）自身抗原形成（一）自身抗原形成分分子子模模擬擬四、自身免疫病的發(fā)病機制四、自身免疫病的發(fā)病機制隱蔽抗原的釋放隱蔽抗原的釋放自身抗原改變自身抗原改變第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 多
14、克隆激活多克隆激活（二）免疫系統(tǒng)發(fā)育和免疫調(diào)節(jié)異常（二）免疫系統(tǒng)發(fā)育和免疫調(diào)節(jié)異常胸腺胸腺 骨髓骨髓 功能異常功能異常Th1和和Th2細胞功能失衡細胞功能失衡第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 （三）遺傳因素（三）遺傳因素第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 1.1.自身抗體的作用自身抗體的作用 （四）（四）AID的病理損傷機制的病理損傷機制l抗血細胞表面抗原的抗體抗血細胞表面抗原的抗體 第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 1.1.自身抗體的作用自身抗體的作用抗細胞表面受體抗體抗細胞表面受
15、體抗體 重癥肌無力重癥肌無力 第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 抗細胞表面受體抗體抗細胞表面受體抗體毒性彌漫性甲狀腺腫（毒性彌漫性甲狀腺腫（GravesGraves病）發(fā)病機制示意圖?。┌l(fā)病機制示意圖第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 自身抗體自身抗體抗核抗體抗核抗體腎小球、關節(jié)、皮膚和腎小球、關節(jié)、皮膚和其它多種器官的毛細血管壁其它多種器官的毛細血管壁結(jié)合結(jié)合循環(huán)中的核抗原循環(huán)中的核抗原 多部位脈管炎多部位脈管炎 系統(tǒng)性紅斑狼瘡形成形成可溶性抗原可溶性抗原抗體抗體IC 反復沉積反復沉積1. 1. 自身抗體自身抗體的作用
16、：的作用： 自身抗體與自身抗體與相應抗原形相應抗原形成的免疫復成的免疫復合物合物 第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 2. 2. 自身應答性自身應答性T淋巴細胞作用淋巴細胞作用 針對自身抗原發(fā)生免疫應答的針對自身抗原發(fā)生免疫應答的T細胞可引起組織細胞可引起組織 損傷，這類疾病屬于損傷，這類疾病屬于型超敏反應引起的疾病。型超敏反應引起的疾病。 3. 3. 巨嗜細胞和巨嗜細胞和NK細胞的作用細胞的作用 巨噬細胞在巨噬細胞在AID的組織損傷中也起重要作用。巨的組織損傷中也起重要作用。巨噬細胞被細胞因子激活后，就具有細胞毒作用。噬細胞被細胞因子激活后，就具有細胞毒作
17、用。 （四）（四）AID的病理損傷機制的病理損傷機制返回章目錄返回章目錄第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 l 抗核抗體（抗核抗體（antinuclear antibody，ANA):): 是以是以真核細胞的核成分為靶抗原的自身抗體的總稱；真核細胞的核成分為靶抗原的自身抗體的總稱； l 在某些因素作用下改變細胞核某些成分性質(zhì)，激在某些因素作用下改變細胞核某些成分性質(zhì)，激發(fā)機體產(chǎn)生許多抗不同核成分的抗體；發(fā)機體產(chǎn)生許多抗不同核成分的抗體；第二節(jié)第二節(jié) 自身免疫性疾病的免疫學檢查自身免疫性疾病的免疫學檢查一、抗核抗體測定一、抗核抗體測定第十五章第十五章 自身免疫
18、性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 lANA主要是主要是IgG，也有也有IgM、IgA、IgD和和IgE；lANA無器官特異性和種屬特異性無器官特異性和種屬特異性；lANA主要存在于血清中；主要存在于血清中；l將檢出將檢出ANA作為作為AID存在的依據(jù)。存在的依據(jù)。第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 抗抗DNA抗體：抗體：抗抗dsDNA/ /抗抗nDNA、抗、抗ssDNA/ /抗抗dDNA等等 抗組蛋白抗體抗組蛋白抗體( (AHA) )：抗抗H1、抗、抗H2A、抗、抗H2B、 抗抗H3、抗、抗H4抗體抗體等等 抗非組蛋白抗體：抗非組蛋白抗體：抗抗n
19、RNP/ /抗抗U1RNP、抗、抗Scl-70、 抗抗SSA、抗、抗Sm、抗、抗SSB、抗、抗Jo-1、抗、抗Rib抗體、抗體、 AnuA、抗、抗DNP、抗、抗DE多肽抗體、抗多肽抗體、抗DM53抗體抗體 抗抗RANA抗體、抗著絲點、抗抗體、抗著絲點、抗Ku抗體等抗體等 抗核仁抗體：抗核仁抗體：抗抗PM-Scl抗體、抗抗體、抗Th/To抗體、抗體、 抗抗U3-RNP、抗、抗4-6-S-RNA抗體等抗體等（一）（一）ANA的類型和臨床意義的類型和臨床意義 ANA譜譜第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 抗天然抗天然DNA ( (native DNA,nDNA)
20、) 抗體抗體，又稱抗雙，又稱抗雙鏈鏈DNA (double stranded DNA,dsDNA) 抗體?？贵w?？棺冃钥棺冃訢NA (denatured DNA,dDNA) 抗體抗體，又稱抗單，又稱抗單鏈鏈DNA (single stranded DNA,ssDNA)抗體。抗體。對對SLE有高特異性有高特異性; ;SLE診斷標準之一。診斷標準之一。緩解期降低緩解期降低70%90%SLE活動期增高活動期增高藥物療效藥物療效抗抗dsDNA抗體抗體 抗抗DNA抗體抗體第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 抗組蛋白抗體抗組蛋白抗體（anti-histonic anti
21、body,AHA）： 由由H1、H2A、H2B、H3和和H4五個亞單位，各自都五個亞單位，各自都 有特異性抗體；有特異性抗體；AHA檢檢出出百百分分率率抗抗dsDNAdsDNA507090100藥物誘導藥物誘導性狼瘡只性狼瘡只能檢出此能檢出此SLEAHAAHA抗抗組蛋白組蛋白抗體抗體第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 可提取性核抗原可提取性核抗原 (extractable nuclear antigen,ENA) 是鹽水可提取性核抗原的總稱，是非組蛋白的核蛋是鹽水可提取性核抗原的總稱，是非組蛋白的核蛋 白，屬酸性核蛋白抗原，由許多小分子量的白，屬酸性核蛋白抗
22、原，由許多小分子量的RNARNA和多和多 肽組成。肽組成。抗抗ENA抗體抗體第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 對風濕病有特異診斷價值的有以下七種：對風濕病有特異診斷價值的有以下七種： 抗抗nRNP(nuclear RNP,nRNP)抗體；抗體； 抗抗Sm抗體抗體； 抗抗SSA抗體；抗體； 抗抗SSB抗體；抗體； 抗抗Scl-70抗體；抗體； 抗抗Jo-1抗體；抗體； 抗核糖體抗體抗核糖體抗體 。第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 抗抗DNP抗體（抗核蛋白抗體）：抗體（抗核蛋白抗體）：核蛋白核蛋白(DNP)抗原由抗原由DN
23、A和蛋白質(zhì)組成。和蛋白質(zhì)組成。DNP抗原有不溶性抗原有不溶性和可溶性兩種，可分別產(chǎn)生相應的抗體。和可溶性兩種，可分別產(chǎn)生相應的抗體。 檢出檢出百分百分率率抗抗DNP20406080 SLE非活動期非活動期 SLE活動期活動期抗不溶性抗不溶性DNP抗體抗體抗抗DNP抗抗DNP100RA滑滑膜液中膜液中抗抗DNP抗可溶性抗可溶性DNP抗體抗體抗抗DNP抗體抗體第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 抗核小體抗體抗核小體抗體（anti-nucleosome antibody，AnuA)l 是細胞核染色質(zhì)的基本單位是細胞核染色質(zhì)的基本單位;l 細胞凋亡而致核小體大量蓄積
24、，細胞凋亡而致核小體大量蓄積， 誘導誘導B細胞產(chǎn)生的細胞產(chǎn)生的AnuA是是SLE 特異性的標志抗體。特異性的標志抗體?？箍筪sDNA抗體抗體 抗核小體抗體抗核小體抗體 抗抗dsDNA和抗和抗Sm陰性的陰性的SLE陽性陽性率為率為60%80%，特異性，特異性97%。 抗抗核小體核小體抗體抗體第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 常見常見AID的的ANA陽性檢出率陽性檢出率疾病疾病ANA（% %）疾病疾病ANA（% %）SLE9595SS70708080MCTD9595PM/DM3030PSS85859595RA20203030第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免
25、疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 （二）（二）ANA的檢測方法的檢測方法 l將患者血清先進行稀釋，可以做定量試驗，在將患者血清先進行稀釋，可以做定量試驗，在1:80稀釋仍呈陽性時，對稀釋仍呈陽性時，對SLE的診斷有較大的參考價值。的診斷有較大的參考價值。 形成胞核基質(zhì)形成胞核基質(zhì)ANA抗人抗人Ig FITC1.1.熒光免疫法熒光免疫法第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 抗核抗體核型與相關疾病抗核抗體核型與相關疾病核型核型熒光圖形熒光圖形抗體抗體相關疾病相關疾病周邊型周邊型核周環(huán)狀熒光核周環(huán)狀熒光抗抗dsDNAdsDNASLESLE、慢活肝炎、慢活肝炎均質(zhì)型
26、均質(zhì)型核呈均質(zhì)熒光核呈均質(zhì)熒光抗抗DNADNA、AHAAHA、 AnuAAnuASLESLE、RARA、PSSPSS、慢性、慢性肝病肝病斑點型斑點型核內(nèi)顆粒狀熒光核內(nèi)顆粒狀熒光抗抗ENAENAMCTDMCTD、SLESLE、PSSPSS、SSSS、PMPM核仁型核仁型核仁有熒光核仁有熒光抗核仁抗體抗核仁抗體PSSPSS、雷諾現(xiàn)象、雷諾現(xiàn)象、SLESLE著絲點型著絲點型核漿細小相同顆粒核漿細小相同顆粒熒光熒光抗著絲點抗著絲點PSSPSS、CRESTCREST綜合征綜合征第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 均質(zhì)型均質(zhì)型抗核抗體核型抗核抗體核型著絲點型著絲點型核仁
27、型核仁型斑點型斑點型第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 例：間接免疫熒光法（例：間接免疫熒光法（IIF法）法） 測定抗測定抗dsDNA抗體抗體l 短膜蟲的動基體內(nèi)含有大量純的短膜蟲的動基體內(nèi)含有大量純的 dsDNA，無其他抗原干擾，可用，無其他抗原干擾，可用 作基質(zhì)來測定抗作基質(zhì)來測定抗dsDNA抗體。抗體。l 短膜蟲替換小鼠肝切片或肝印片或短膜蟲替換小鼠肝切片或肝印片或 Hep2，制成抗原基質(zhì)，制成抗原基質(zhì)抗抗dsDNA抗人抗人IgG FITC, 陽性結(jié)果可見鞭毛一端的動基體顯示清晰的熒光。陽性結(jié)果可見鞭毛一端的動基體顯示清晰的熒光。l 測定抗測定抗dsD
28、NA抗體具有特異性強、敏感性高的優(yōu)點?？贵w具有特異性強、敏感性高的優(yōu)點。第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 用用ELISA間接法檢測抗間接法檢測抗dsDNA抗體、抗體、抗組蛋白抗體和抗核小體抗體?？菇M蛋白抗體和抗核小體抗體。2. ELISA法法第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳聚丙烯酰胺凝膠電泳待檢血清待檢血清按分子大小分開不同區(qū)帶按分子大小分開不同區(qū)帶 分離分離轉(zhuǎn)印轉(zhuǎn)印NC膜上膜上抗抗ENA與膜上相應抗原帶結(jié)合與膜上相應抗原帶結(jié)合抗人抗人IgGHRPNCENA抗抗ENA抗人抗人IgGHRP顯色顯
29、色3. IBT法法第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 l 類風濕因子類風濕因子(rheumatoid factor,RF): 是抗變性是抗變性IgG的的 自身抗體，為自身抗體，為19S的的IgM，也可見，也可見7S的的IgG和和IgA。 與人變性與人變性IgG結(jié)合，不與正常結(jié)合，不與正常IgG發(fā)生凝集反應。發(fā)生凝集反應。 l RF出現(xiàn)在類風濕性關節(jié)炎（出現(xiàn)在類風濕性關節(jié)炎（RA）患者中，約）患者中，約70%70% 90%90%的血清中和約的血清中和約60%60%的滑膜液中可檢出的滑膜液中可檢出IgG類類RF；二、類風濕因子測定二、類風濕因子測定第十五章第十五
30、章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 l IgG類抗體與相應抗原結(jié)合后，即發(fā)生變性；類抗體與相應抗原結(jié)合后，即發(fā)生變性；l 在炎癥過程中也可發(fā)生在炎癥過程中也可發(fā)生IgG變性變性，構(gòu)成自身抗，構(gòu)成自身抗 原，刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生各種抗原，刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生各種抗IgG抗體；抗體；l 滑膜液中的滑膜液中的IgG類類RF與變性與變性IgG結(jié)合形成中等結(jié)合形成中等 大小的大小的IC，比血清中，比血清中IgM類類RF更易致病。更易致病。第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 （一）（一）RF檢測方法檢測方法1 RF檢測最常采用的試驗方法。檢測最常采用的試驗
31、方法。 將將IgG吸附在聚苯乙烯膠乳顆粒上作為診吸附在聚苯乙烯膠乳顆粒上作為診斷試劑，與待檢血清中的斷試劑，與待檢血清中的RF結(jié)合，出現(xiàn)膠乳結(jié)合，出現(xiàn)膠乳凝集顆粒。但此法的靈敏度和特異性均不高，凝集顆粒。但此法的靈敏度和特異性均不高，而且只能檢出血清中的而且只能檢出血清中的IgM類類RF。間接膠乳凝集試驗間接膠乳凝集試驗第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 2 將待檢血清稀釋成一定濃度，再加入定量變將待檢血清稀釋成一定濃度，再加入定量變性性IgG診斷試劑，立即用透射比濁或速率散射比診斷試劑，立即用透射比濁或速率散射比濁儀測定血清中的濁儀測定血清中的RF。此法具
32、有速度快、敏感。此法具有速度快、敏感性高（達性高（達ng/L水平）、精密度高（水平）、精密度高（CV5%5%）、）、穩(wěn)定性好、能定量分析的優(yōu)點，但仍局限在穩(wěn)定性好、能定量分析的優(yōu)點，但仍局限在IgM類類RF的檢測。的檢測。 免疫比濁法免疫比濁法第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 3 IgM、IgG和和IgA類類RF需要用需要用RIA法或法或ELISA法等方法檢測，但前者有放射性污染，故臨床上法等方法檢測，但前者有放射性污染，故臨床上多采用多采用ELISA間接法或雙抗原夾心法進行測定。間接法或雙抗原夾心法進行測定。 ELISA法法第十五章第十五章 自身免疫性疾
33、病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 （二）臨床應用（二）臨床應用常見常見AID的的RF陽性檢出率陽性檢出率疾病疾病RF（% %）疾病疾病RF（% %）干燥綜合征干燥綜合征9595結(jié)節(jié)性多動脈炎結(jié)節(jié)性多動脈炎5050類風濕類風濕70709090系統(tǒng)性紅斑狼瘡系統(tǒng)性紅斑狼瘡3030硬皮病硬皮病/ /皮肌炎皮肌炎8080混合性結(jié)締組織病混合性結(jié)締組織病2525RF在診斷在診斷RA患者時并非特異的，也非唯一標準?；颊邥r并非特異的，也非唯一標準。慢性活動性肝炎及老年人均可有不同程度的陽性率。慢性活動性肝炎及老年人均可有不同程度的陽性率。 第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的
34、免疫學檢驗 三、其他自身抗體測定三、其他自身抗體測定自身抗體的類型、檢測方法及臨床意義自身抗體的類型、檢測方法及臨床意義自身抗體類型自身抗體類型檢測方法檢測方法臨床意義臨床意義抗甲狀腺球蛋白抗體抗甲狀腺球蛋白抗體( (A-TG) )熒光免疫法、熒光免疫法、ELISA、RIA橋本甲狀腺炎橋本甲狀腺炎抗甲狀腺過氧化物酶抗體抗甲狀腺過氧化物酶抗體,),)ELISAGraves 病病, ,橋本甲狀腺炎橋本甲狀腺炎抗乙酰膽堿受體抗體抗乙酰膽堿受體抗體( (AchR-Ab) )ELISA、RIA重癥肌無力重癥肌無力抗平滑肌抗體抗平滑肌抗體( (SMA)熒光免疫法、熒光免疫法、ELISA、RIA自身免疫性肝
35、炎自身免疫性肝炎, ,慢性活動性肝炎慢性活動性肝炎, ,原發(fā)性膽汁性肝硬化原發(fā)性膽汁性肝硬化抗線粒體抗體抗線粒體抗體( (AMA)熒光免疫法、熒光免疫法、ELISA、RIARA,SS,SLE,原發(fā)性膽汁性肝硬化原發(fā)性膽汁性肝硬化, ,慢性活動性肝炎慢性活動性肝炎, ,持續(xù)性肝阻塞持續(xù)性肝阻塞抗胃壁細胞抗體抗胃壁細胞抗體熒光免疫法熒光免疫法惡性貧血惡性貧血抗胰島素抗體（抗胰島素抗體（IAA）ELISA胰島素依賴性糖尿病胰島素依賴性糖尿病抗精子抗體（抗精子抗體（AsAb）ELISA、熒光免疫法、熒光免疫法不育癥不育癥, ,不孕癥不孕癥抗紅細胞抗體抗紅細胞抗體直接凝集試驗、直接凝集試驗、Coombs
36、試驗試驗新生兒溶血新生兒溶血, ,自身免疫性溶血性貧血自身免疫性溶血性貧血抗血小板抗體抗血小板抗體ELISA法、法、ABC-ELISA法法原發(fā)性血小板減少性紫癜、輸血史原發(fā)性血小板減少性紫癜、輸血史抗心磷脂抗體（抗心磷脂抗體（ACA）RIA、ELISASLE,血栓血栓, ,自發(fā)性流產(chǎn)自發(fā)性流產(chǎn), ,血小板減少血小板減少抗腎小球基底膜抗體抗腎小球基底膜抗體( (GBM-Ab) )熒光免疫法熒光免疫法Goodpasture綜合征綜合征, ,狼瘡腎炎狼瘡腎炎返回章目錄返回章目錄第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 1.1.篩選試驗與確診性試驗的合理組合；篩選試驗與確
37、診性試驗的合理組合；2.2.結(jié)合臨床癥狀選擇性檢測相關的自身抗體；結(jié)合臨床癥狀選擇性檢測相關的自身抗體；3.3.切忌盲目的全面檢測自身抗體。切忌盲目的全面檢測自身抗體。4.4.通常以抗核抗體作為篩選試驗，通常以抗核抗體作為篩選試驗，ANA在許多在許多AID中中 可呈陽性?？沙赎栃浴?.5.ANA陽性時，再進行針對特異性靶抗原成分的自身陽性時，再進行針對特異性靶抗原成分的自身 抗體的檢測，達到明確診斷的目的?？贵w的檢測，達到明確診斷的目的。 第三節(jié)第三節(jié) 自身抗體的檢測實驗選擇的原則自身抗體的檢測實驗選擇的原則 一、自身抗體檢測的一般原則一、自身抗體檢測的一般原則第十五章第十五章 自身免疫性疾病
38、的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 二、實驗室方法的選擇及結(jié)果的確認二、實驗室方法的選擇及結(jié)果的確認IIF法法篩選試驗篩選試驗 ANA抗抗dsDNAIB法法ELISA法法IFA法法特異性實驗特異性實驗抗原基質(zhì)片抗原基質(zhì)片(Hep-2(Hep-2細胞、細胞、小鼠肝印片小鼠肝印片/ /切片切片) )，加入，加入自身抗體后與抗原成分相自身抗體后與抗原成分相結(jié)合，再與熒光標記的抗結(jié)合，再與熒光標記的抗抗體結(jié)合，根據(jù)熒光在細抗體結(jié)合，根據(jù)熒光在細胞上的著色部位進行定位胞上的著色部位進行定位分析。分析。 特異性純化抗原包被載特異性純化抗原包被載體，檢測特異性自身抗體，檢測特異性自身抗體；特異性抗原不易
39、純體；特異性抗原不易純化或不明確，用化或不明確，用ELISA法和法和IBT法等檢測自身法等檢測自身抗體會有一定誤差?？贵w會有一定誤差。 返回章目錄返回章目錄第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 小小 結(jié)結(jié) 自身免疫病自身免疫病是由于某種原因使自身免疫應答過是由于某種原因使自身免疫應答過強或持續(xù)時間過久，表現(xiàn)為質(zhì)和量的異常，所產(chǎn)強或持續(xù)時間過久，表現(xiàn)為質(zhì)和量的異常，所產(chǎn)生的自身抗體和（或）自身致敏淋巴細胞對表達生的自身抗體和（或）自身致敏淋巴細胞對表達自身靶抗原的細胞和組織發(fā)動攻擊，導致?lián)p傷或自身靶抗原的細胞和組織發(fā)動攻擊，導致?lián)p傷或功能障礙，并出現(xiàn)相應臨床癥狀
40、。功能障礙，并出現(xiàn)相應臨床癥狀。第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 風濕病風濕病泛指影響骨、關節(jié)及周圍軟組織等一泛指影響骨、關節(jié)及周圍軟組織等一組疾病。組疾病。結(jié)締組織病結(jié)締組織病是指病變主要發(fā)生于結(jié)締組是指病變主要發(fā)生于結(jié)締組織，具有組織黏液樣水腫、纖維蛋白樣變性及壞織，具有組織黏液樣水腫、纖維蛋白樣變性及壞死性血管炎等基本病理變化的一組疾病。自身免死性血管炎等基本病理變化的一組疾病。自身免疫病的實驗室診斷主要依賴抗核抗體和類風濕因疫病的實驗室診斷主要依賴抗核抗體和類風濕因子等的測定，其臨床意義對不同自身免疫病的患子等的測定，其臨床意義對不同自身免疫病的患者有區(qū)別，其表現(xiàn)是多樣性的。者有區(qū)別，其表現(xiàn)是多樣性的。返回章目錄返回章目錄第十五章第十五章 自身免疫性疾病的免疫學檢驗自身免疫性疾病的免疫學檢驗 THANK YOU FOR YOUR ATTENTION!返回總目錄返回總目錄
15第十五章自身免疫性疾病的免疫學檢驗
