《瓊脂擴(kuò)散實驗》PPT課件

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實驗十三 瓊脂擴(kuò)散試驗 一、實驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)掌握瓊脂擴(kuò)散試驗的原理與應(yīng)用熟悉掌握其基本操作方法 二、實驗原理沉淀反應(yīng)是指可溶性抗原與相應(yīng)抗體特異性結(jié)合，在二者比例適當(dāng)并有電解質(zhì)存在及一定的溫度條件下，可形成肉眼可見的沉淀物的反應(yīng)。根據(jù)反應(yīng)中使用的介質(zhì)和檢測方法不同，可將沉淀反應(yīng)分為液相沉淀反應(yīng)和凝膠內(nèi)沉淀反應(yīng)兩種類型 適 合 比 例 性抗體含量抗原含量前帶后帶等價帶 網(wǎng)格學(xué)說（lattice theory）抗體過剩抗原過?？贵w抗體比例合適 液相沉淀反應(yīng)環(huán)狀沉淀絮狀沉淀（免疫比濁） 凝膠內(nèi)沉淀反應(yīng)單向瓊脂擴(kuò)散雙向瓊脂擴(kuò)散免疫電泳 凝膠內(nèi)沉淀反應(yīng)免疫擴(kuò)散技術(shù)免疫電泳技術(shù)單向擴(kuò)散試驗雙向擴(kuò)散試驗火箭電泳對流電泳免疫電泳 免 疫 擴(kuò) 散 根據(jù)沉淀線的數(shù)量、位置和形狀，與已知的標(biāo)準(zhǔn)(或正常)抗原抗體形成的沉淀線比較，即可對樣品中所含成分及其性質(zhì)進(jìn)行分析、鑒定。 由于電場的作用，限制了抗原、抗體的自由擴(kuò)散，而使其定向泳動，因而增加了試驗的靈敏度，并縮短反應(yīng)時間。 根據(jù)樣品的沉淀峰長度即可計算出待測抗原的含量；反之，當(dāng)瓊脂中抗原濃度固定時，便可測定待測抗體的含量。 三、實驗器材兔抗BSA抗體 BSA 0.01mol/LPBS緩沖液 1%離子瓊脂打孔器 四、實驗內(nèi)容及步驟 1、瓊脂板制作 2、打孔 3、加樣 4、反應(yīng) 5、結(jié)果觀察