《單向免疫瓊脂擴(kuò)散.ppt》由會(huì)員分享,可在線閱讀,更多相關(guān)《單向免疫瓊脂擴(kuò)散.ppt(15頁珍藏版)》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。
1、一,2%離子瓊脂; PBS (pH7.2,0.01M) ; 標(biāo)準(zhǔn)已知陽性血清; 稀釋的待測(cè)血清標(biāo)本(濃度分別為1/30、51/40、1/50) ; 免疫瓊擴(kuò)陽性血清; 已知標(biāo)準(zhǔn)瓊擴(kuò)抗原,診斷抗原; 濕盒(容器內(nèi)加濕紗布或泡沫塑料) ; 打孔器(孔徑3mm) ; 打孔模板 ; 微量加樣器;,血漿 的主要作用是運(yùn)載血細(xì)胞,運(yùn)輸維持人體生命活動(dòng)所需的物質(zhì)和體內(nèi)產(chǎn)生的廢物等。血漿相當(dāng)于結(jié)締組織的細(xì)胞間質(zhì)。是血液的重要組成分,呈淡黃色液體(因含有膽紅素)。血漿的化學(xué)成分中,水分占9092,溶質(zhì)以血漿蛋白為主。血漿蛋白是多種蛋白質(zhì)的總稱,用鹽析法可將其分為白蛋白、球蛋白和纖維蛋白原三類。血漿蛋白質(zhì)的功
2、能有:維持血漿膠體滲透壓;組成血液緩沖體系,參與維持血液酸堿平衡;運(yùn)輸營(yíng)養(yǎng)和代謝物質(zhì),血漿蛋白質(zhì)為親水膠體,許多難溶于水的物質(zhì)與其結(jié)合變?yōu)橐兹苡谒奈镔|(zhì);營(yíng)養(yǎng)功能,血漿蛋白分解產(chǎn)生的氨基酸,可用于合成組織蛋白質(zhì)或氧化分解供應(yīng)能量;參與凝血和免疫作用。血漿的無機(jī)鹽主要以離子狀態(tài)存在,正負(fù)離子總量相等,保持電中性。這些離子在維持血漿晶體滲透壓、酸堿平衡、以及神經(jīng)-肌肉的正常興奮性等方面起著重要作用。血漿的各種化學(xué)成分常在一定范圍內(nèi)不斷地變動(dòng),其中以葡萄糖、蛋白質(zhì)、脂肪和激素等的濃度最易受營(yíng)養(yǎng)狀況和機(jī)體活動(dòng)情況的影響,而無機(jī)鹽濃度的變動(dòng)范圍較小。血漿的理化特性相對(duì)恒定是內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的首要表現(xiàn)。,血清:
3、是指血液中既不含血細(xì)胞(血清不含紅細(xì)胞和白細(xì)胞)也不含凝固因子的成分;也就是除去纖維蛋白原的血漿,血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng)被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點(diǎn)是與血漿最大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時(shí)間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基
4、本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學(xué)成分的分析,都以血清為樣品。 人體的血液由有形成分和無形成分組成,白血球、紅血球、血小板是有形成分,血清是血液中的無形成分。用顯微鏡可以觀察到血液中的白血球、紅血球、血小板等有形成分,血清為去除纖維蛋白原后的無形成分,顏色微黃,透亮。 血清的基本成分是水,水中溶有蛋白質(zhì)、脂肪、糖、無機(jī)鹽、維生素等營(yíng)養(yǎng)成分,也溶有人體代謝產(chǎn)物。血清中有抗體,這是被稱作免疫球蛋白的蛋白質(zhì)。,抗毒血清: 因制作時(shí)是將蛇毒、病原菌產(chǎn)的毒等小量多次地注射到免子、馬血管內(nèi),每日慢慢加大注射量,一定時(shí)間后,因該動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生抗體,經(jīng)檢測(cè),達(dá)到一定效價(jià)后,就可以抽血。血液分離血清后再經(jīng)
5、提純,就成了抗毒血清。 如蛇、白喉、破傷風(fēng)、狂犬病抗毒血清等都是如此制備,用來治療相應(yīng)毒素反應(yīng)。 該生物制劑是異種血清,對(duì)人會(huì)有過敏反應(yīng),注射前均要做皮試。陰性可注射,陽性必需作脫敏療法才行。,破傷風(fēng)抗毒素 是一種免疫馬血清,對(duì)人體是一種異性蛋白,具有抗原性(過敏反應(yīng)),因此在用藥前先作過敏試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果為陰性可直接注射破傷風(fēng)抗毒素,試驗(yàn)結(jié)果為陽性者,則應(yīng)進(jìn)行脫敏注射,即小劑量分4---5次注射破傷風(fēng)抗毒素。在用過破傷風(fēng)抗毒素超過一周者,如再使用,還須重作皮膚試驗(yàn)。,抗血清或抗體仍能產(chǎn)生可觀察到的標(biāo)準(zhǔn)免疫反應(yīng)時(shí)的稀釋度。如抗血清的效價(jià)為1:1000,即抗血清稀釋1000倍時(shí)仍能產(chǎn)生可觀察到的免疫反應(yīng)。,效價(jià),指抗體的物理狀態(tài)及其在體內(nèi)的滯留時(shí)間,以其與抗原反應(yīng)的多少來表示其免疫效果,稱為抗體效價(jià)。,抗體效價(jià)測(cè)定,抗體效價(jià)測(cè)定是根據(jù)大分子顆??乖谄湎鄳?yīng)的抗體相結(jié)合,在適量的電解質(zhì)存在及一定的溫度下,經(jīng)過一定時(shí)間可出現(xiàn)肉眼可見的凝集團(tuán)塊,醫(yī)學(xué)稱為凝集反應(yīng),一般均以標(biāo)準(zhǔn)抗原測(cè)定免疫血清或患者血清中抗體的效價(jià)。,