高考生物 第十單元 專題二十二 微生物的利用課件.ppt

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專題二十二微生物的利用 微生物的實驗室培養(yǎng) 1 微生物的培養(yǎng) 稱量 滅菌 倒平板 平板劃線 稀釋涂布平板法 1 無菌技術 主要包括 消毒方法 常用法 法 常用滅菌方法 滅菌 接種環(huán) 接種針等金屬器具 滅菌 主要針對玻璃器皿等 滅菌 主要針對等 消毒和滅菌 煮沸消毒 巴氏消毒 灼燒 干熱 高壓蒸汽 培養(yǎng)基 2 如圖為倒平板操作過程 操作時要待培養(yǎng)基時 在附近進行 制備固體培養(yǎng)基最后要將平板倒置 其主要目的是 冷卻到50 左右 酒精燈火焰 防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠滴入培養(yǎng) 基造成污染 3 平板劃線操作 接種環(huán) 瓊脂固體 4 稀釋涂布平板法 先將菌液進行后涂布平板 在稀釋度足夠高的菌液里 聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞 從而在培養(yǎng)基表面形成 一系列梯度稀釋 單個菌落 2 菌種保藏的兩種方法 4 冰箱 甘油保藏法保存 微生物的分離與計數 1 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數 1 微生物的篩選原理 人為提供的條件 包括營養(yǎng) 溫度 pH等 同時其他微生物生長 可以通過配制培養(yǎng)基 控制等選擇目的微生物 2 活菌數目的計數 法和 有利于目的菌株生長 抑制或阻止 選擇 培養(yǎng)條件 稀釋涂布平板 顯微鏡直接計數法 3 實驗流程 土壤溶液 系列稀釋 4 尿素分解菌的鑒定 在以為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入 培養(yǎng)某種細菌后 如果pH升高 指示劑將 說明該細菌能夠 尿素 酚紅指示劑 變紅 分解尿素 2 分解纖維素的細菌的分離 1 鑒定纖維素分解菌的方法 利用染色法 如果含有的培養(yǎng)基中出現 則說明很可能含有纖維素分解菌 2 纖維素分解菌的篩選原理 剛果紅可以與形成紅色復合物 但并不和水解后的發(fā)生這種反應 剛果紅 纖維素 透明圈 纖維素 纖維二糖和葡萄糖 3 分離土壤中纖維素分解菌的實驗方案 富含纖維素 增加纖維素分解菌的濃度 鑒別纖維素分解菌 產生透明圈的菌落 1 比較選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基 微生物的實驗室培養(yǎng) 2 消毒與滅菌的比較 典例1 2014 山東四市聯考 從土壤中分離分解尿素的細菌的一般過程為 采集土樣 稀釋 純化分離 性能測定 下表為分離分解尿素的細菌所用的培養(yǎng)基配方 據圖表信息 回答有關問題 1 該培養(yǎng)基含有培養(yǎng)微生物所需要的各種基本成分 其中最主要的碳源是 氮源是 2 獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是 其中培養(yǎng)基常用 法滅菌 3 微生物分離純化的方法通常有 法和 法 如果計數 只能用 法 在下面所示的四種菌落分布圖中 不可能是用該方法得到的是 填字母 4 鑒定某種細菌是否能夠分解尿素 應該在培養(yǎng)基中加入 指示劑 若該細菌能夠分解尿素 則指示劑變?yōu)?色 原理是 5 如圖是微生物平板劃線示意圖 劃線的順序為1 2 3 4 5 下列操作方法正確的是 A 操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B 劃線操作必須在火焰上進行C 在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D 在1 2 3 4 5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)進行滅菌 解析 1 微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基的基本成分是碳源 氮源 水 無機鹽 題中表格內顯示的主要碳源是葡萄糖 氮源是尿素 2 培養(yǎng)基的滅菌常用高壓蒸汽滅菌法 3 分離純化微生物常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法 計數時只能用稀釋涂布平板法 4 在細菌分解尿素的過程中 細菌合成的脲酶將尿素分解成氨 氨會使培養(yǎng)基的pH升高 5 在每次劃線前后都要對接種環(huán)進行滅菌 接種環(huán)的滅菌方法是在酒精燈上灼燒 接種時劃線操作是在酒精燈火焰附近進行的 在5個區(qū)域中 只要有單個活的所需細菌 通過培養(yǎng)即可獲得所需菌落 答案 1 葡萄糖尿素 2 防止外來雜菌的入侵高壓蒸汽滅菌 3 平板劃線稀釋涂布平板稀釋涂布平板D 4 酚紅紅在細菌分解尿素的過程中 細菌合成的脲酶將尿素分解成氨 氨會使培養(yǎng)基的pH升高 5 D 1 分離微生物的兩種常用方法 微生物的分離與計數 2 尿素細菌與纖維素分解菌篩選原理的比較 3 微生物的數量測定方法 典例2 2015 河南鄭州模擬 35 40 的甲醛水溶液 福爾馬林 可作為防腐劑 其防腐的原理是使蛋白質變性 自然界中存在能分解甲醛的細菌和真菌 如圖為分離和純化分解甲醛細菌的實驗過程 請分析回答有關問題 1 過程的目的是 過程培養(yǎng)出的是 2 上述實驗中 不需要進行滅菌處理的是 培養(yǎng)基滅菌的常用方法為 3 由 的接種可選用 法 通過培養(yǎng)能獲得 經過 過程后 取樣測定甲醛濃度 選出 再分離 培養(yǎng)菌株 此菌種異化作用的類型是 4 為研究甲醛初始濃度對菌株降解甲醛能力的影響 進行了相應實驗并得到如圖結果 由圖可知 當甲醛的初始濃度小于1200mg L時 菌株 當甲醛的初始濃度增高至1600mg L時 48h后菌株對甲醛的降解能力很弱 甚至失去降解能力 其原因可能是 5 欲檢測上述活性污泥中細菌總數 下列操作的敘述 其中錯誤的是 A 用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 經高溫 高壓滅菌后倒平板B 取104 105 106倍的土壤稀釋液和無菌水各0 1mL 分別涂布于各組平板上C 將實驗組和對照組平板倒置 37 恒溫培養(yǎng)24 48小時D 確定對照組無菌后 選擇菌落數在300以上的實驗組平板進行計數 解析 過程是擴大培養(yǎng) 其目的是增加目的菌的數量 濃度 過程培養(yǎng)基中甲醛為唯一碳源 用以篩選出分解甲醛的細菌 活性污泥含菌種 不需滅菌 其余培養(yǎng)基及裝置都要經過滅菌 常用的在固體培養(yǎng)基上接種的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法 通過 過程的選擇培養(yǎng) 可得到單個菌落 經過 過程培養(yǎng) 根據培養(yǎng)液中甲醛的濃度可判斷該菌種分解甲醛的能力 甲醛濃度越低 該菌種分解甲醛的能力越強 圖中甲醛初始濃度為400 1200mg L的3條曲線最終都可降到0 說明該初始濃度的甲醛可被完全降解 采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數目時 一般選擇菌落數在30 300的平板進行計數 答案 1 增加目的菌的菌群數量 提高目的菌的種群密度 以甲醛為唯一碳源的細菌 2 活性污泥高壓蒸汽滅菌法 3 平板劃線 稀釋涂布平板 單個菌落甲醛濃度最低的培養(yǎng)瓶需氧型 4 可以完全降解甲醛甲醛濃度過高會使菌體蛋白質變性 從而降低了細菌降解甲醛的能力 甲醛濃度過高會產生毒害作用 降低了細菌降解甲醛的能力 5 D 以題說法 關注微生物分離與計數中的 兩個對照組 一個重復組 1 兩個對照組 2 一個重復組為了排除偶然因素的影響 確保計數準確 在同一稀釋度下 至少對3個平板進行重復計數 然后求出平均值 并根據平板所對應的稀釋度計算出樣品中細菌的數目 如果某個平板的菌落數與其他差別甚遠 說明該平板操作過程中出現失誤 應舍棄