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選修一 專題5課題3《血紅蛋白的提取和分離》測(cè)試卷
(時(shí)間:40分鐘 滿分:100分)
班級(jí) 姓名 學(xué)號(hào)
一、選擇題(每題3分,共60分)
1、凝膠色譜法是根據(jù)( )分離蛋白質(zhì)的有效方法。
A.分子的大小 B.相對(duì)分子質(zhì)量的大小 C.帶電荷的多少 D.溶解度
2、電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下向著與其所帶電荷( )的電極移動(dòng)。
A.相同 B.相反 C.相對(duì)
2、 D.相向
3、血液由血漿和各種血細(xì)胞組成,其中( )的含量最多。
A.白細(xì)胞 B.血小板 C.紅細(xì)胞 D.淋巴細(xì)胞
4、為防止血液凝固,在采血容器中要預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)? )。
A. NaCl B.甲苯 C.蒸餾水 D.檸檬酸鈉
5、將攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移到離心管中,離心后,可以明顯看到試管中的溶液分為4層,其中第3層是( )
A.無(wú)色透明的甲苯層 B.脂溶性物質(zhì)的沉淀層
C.血紅蛋白的水溶液 D.其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物
6、凝膠色譜分離法分離
3、蛋白質(zhì)時(shí),凝膠的種類較多,但其作用的共同點(diǎn)是 ( )
A.改變蛋白質(zhì)分子通過(guò)凝膠時(shí)的路徑
B.吸附一部分蛋白質(zhì),從而影響蛋白質(zhì)分子的移動(dòng)速度
C.將酶或細(xì)胞固定在凝膠中
D.與蛋白質(zhì)分子進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),從而影響其移動(dòng)速度
7、下列各項(xiàng)中,一般不影響凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)中的分離度的是 ( )
A.層析柱高 B.層析柱的直徑 C.緩沖溶液 D.樣品的分布
8、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中決定蛋白質(zhì)或多肽移動(dòng)速度的主要因素是 ( )
A.蛋白質(zhì)分子所帶的電荷
B.蛋白質(zhì)分子的形狀
C.蛋白質(zhì)分子的相對(duì)分子質(zhì)量
D.緩沖溶液的pH
9
4、、為了提取血紅蛋白,從學(xué)校附近的屠宰場(chǎng)索取新鮮的豬血,對(duì)豬血處理的正確操作是( )
A.要在采血容器中預(yù)先加人抗凝血?jiǎng)幟仕徕c
B.取血回來(lái)后,馬上進(jìn)行高速長(zhǎng)時(shí)問(wèn)離心
C.將離心后的血細(xì)胞加入清水緩慢攪拌
D.重復(fù)洗滌直到上清液呈紅色為止
10、下面說(shuō)法不正確的是 ( )
A.在一定范圍內(nèi),緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對(duì)溶液pH的影響,維持pH基本不變
B.緩沖溶液通常由1~2種緩沖劑溶解于水中配制而成
C.電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程
D.透析袋能使大分子自由進(jìn)出,而將小分子保留在袋內(nèi)
11、蛋白質(zhì)的提取和分離分為哪幾步( )
5、A.樣品處理、凝膠色譜操作、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳
B.樣品處理、凝膠色譜操作、純化
C.樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定
D.樣品處理、純化、粗分離、純度鑒定
12、洗滌紅細(xì)胞時(shí),離心所采用的方法是( )
A.低速長(zhǎng)時(shí)間離心 B.低速短時(shí)間離心 C.高速長(zhǎng)時(shí)間離心 D.高速短時(shí)間離心
13、凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)中使用的凝膠是交聯(lián)葡聚糖凝膠(Sephadex G一75),其中G、75的含義為( )
A、G表示凝膠的使用量,75表示加75 g水
B、G表示凝膠的交聯(lián)程度,75表示需加熱到75℃
C、G表示凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍,75表示每克
6、凝膠膨脹時(shí)吸水7.5g
D、G表示凝膠的膨脹體積,75表示每克凝膠膨脹時(shí)體積可達(dá)75cm3
14、在裝填凝膠柱時(shí),不能有氣泡存在的原因是( )
A.氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果
B.氣泡阻礙蛋白質(zhì)的運(yùn)動(dòng)
C.氣泡與蛋白質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)
D.氣泡在裝填凝膠的時(shí)候,使凝膠不緊密
15、樣品的加入和洗脫的操作不正確的是( )
A.加樣前,打開(kāi)色譜柱下端的流出口,使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到凝膠面的下面
B.加樣后,打開(kāi)下端出口,使樣品滲入凝膠床內(nèi)
C.等樣品完全進(jìn)入凝膠層后,關(guān)閉下端出口
D.用吸管小心的將1
7、ml透析后的樣品加到色譜柱的頂端,不要破壞凝膠面
16、下列是有關(guān)血紅蛋白提取和分離的相關(guān)操作,其中正確的是( )
A.洗脫液接近色譜柱底端時(shí)開(kāi)始收集流出液 B.用蒸餾水重復(fù)洗滌紅細(xì)胞
C.血紅蛋白釋放后應(yīng)低速短時(shí)間離心 D.可采集豬血作為實(shí)驗(yàn)材料
17、下列有關(guān)提取和分離血紅蛋白的程度敘述不正確的是( )
A.樣品的處理就是通過(guò)一系列操作收集到血紅蛋白溶液
B.可通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去,即樣品的純化
C.通過(guò)透析可以去除樣品中分子質(zhì)量較大的雜質(zhì),此為樣品的粗提取
D.可通過(guò)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血紅蛋白的純度
8、
18、在血紅蛋白的整個(gè)提取過(guò)程中,不斷用磷酸緩沖液處理的目的是 ( )。
A.防止血紅蛋白被氧化
B.血紅蛋白是一種兩性物質(zhì),需要酸中和
C.磷酸緩沖液會(huì)加速血紅蛋白的提取過(guò)程
D.讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內(nèi),維持其結(jié)構(gòu)和功能
19、下圖中,可表示為相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)在凝膠中的移動(dòng)過(guò)程的是( )
20、下圖是用除去DNA的濾液進(jìn)行血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)的裝置,下列有關(guān)敘述不正確的是 ( )。
A.首先用圖甲裝置對(duì)濾液進(jìn)行處理,其目的是去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)
B.圖乙裝置的試管中收集到的液體中最先出現(xiàn)的是相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)
9、
C.用圖乙裝置分離血紅蛋白時(shí),待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí),用試管收集流出液,每管收集5 mL,連續(xù)收集
D.圖丙裝置中電泳法分離提純血紅蛋白的原理是血紅蛋白帶有一定量的電荷,在電場(chǎng)的作用下向一極移動(dòng)
二、非選擇題(共40分)
21、(每空2分,共12分)下面是凝膠色譜法分離血紅蛋白時(shí)樣品的加入(圖I)和洗脫(圖Ⅱ)示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。
(1)在加樣示意圖中,正確的加樣順序
是 。
(2)用吸管加樣時(shí),應(yīng)注意正確操作,分別是
① 。
②貼著管壁加樣。
③
10、 。
(3)等樣品 時(shí),才加入緩沖液。
待 接近色譜柱底端時(shí),用試管收集流出液,每 mL收集一管,連續(xù)收集。
22、(除第(3)每空1分外,其余每空2分,共10分)
PCR技術(shù)可擴(kuò)增DNA分子,電泳技術(shù)是將待測(cè)樣品放在光滑的凝膠薄膜上,并加上直流電場(chǎng),可利用分子帶電荷不同分離和分析氨基酸和多核苷酸片段等有機(jī)物。這兩項(xiàng)技術(shù)綜合應(yīng)用于現(xiàn)代刑偵,可以獲得最可靠的證據(jù)。如圖是一次尋找嫌犯的測(cè)試結(jié)果:圖甲是把遺跡中含有21個(gè)氨基酸的多肽
11、進(jìn)行水解,將氨基酸混合物進(jìn)行電泳的結(jié)果;圖乙是通過(guò)提取罪犯B遺跡DNA和四位嫌犯的DNA進(jìn)行擴(kuò)增,并采用特定限制酶處理后進(jìn)行電泳所得到的一組DNA指紋圖譜。
(1)在同一電場(chǎng)下,由于蛋白質(zhì)或DNA的 以及 、 不同而產(chǎn)生不同的遷移方向或速度,從而實(shí)現(xiàn)樣品的分離。
(2)在電泳過(guò)程中,帶電分子會(huì)向著 的電極移動(dòng)。
(3)由圖甲得知,多肽由 種氨基酸組成;由圖乙可知B最可能的對(duì)象是 。
23、(每空1分,共8分)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白。這
12、種蛋白質(zhì)具有極強(qiáng)的抗菌能力,受到研究者重視。
(1)分離該抗菌蛋白可用電泳法,其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的 、大小及形狀不同,在電場(chǎng)中的 不同而實(shí)現(xiàn)分離。
(2)可用金黃色葡萄球菌來(lái)檢驗(yàn)該蛋白的體外抗菌特性。抗菌實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細(xì)菌生長(zhǎng)提供 和 。
(3)分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)一定時(shí)間后,比較兩種培養(yǎng)基中菌落的 ,確定該蛋白質(zhì)的抗菌效果。
(4)細(xì)菌培養(yǎng)常用的接種方法有 和
13、 。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,對(duì)使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行 處理。
24、(每空2分,共10分)測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量是研究蛋白質(zhì)的一項(xiàng)重要技術(shù),常用凝膠(由多孔性網(wǎng)狀物質(zhì)構(gòu)成的顆粒,其孔能讓小分子物質(zhì)進(jìn)出)過(guò)濾法測(cè)定,即在一根垂直的玻璃柱中裝滿凝膠,然后在其上端加入蛋白質(zhì)混合液并用緩沖液進(jìn)行洗脫。根據(jù)各種蛋白質(zhì)洗脫的先后順序可以比較它們的相對(duì)分子質(zhì)量大小。利用下列材料,鑒定樣品液(含有A、B兩種相對(duì)分子質(zhì)量大小不同的蛋白質(zhì))中蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小。
材料用具:支架臺(tái)、符合要求的凝膠柱、吸管、緩沖液洗脫瓶、帶有開(kāi)關(guān)的玻璃導(dǎo)管、橡膠軟管、夾子、
14、試管若干、足量的緩沖液等。
(1)實(shí)驗(yàn)步驟:
①加樣前先 。
②加樣: 。
③洗脫: 。
④收集并檢測(cè)它們洗脫的先后順序。
(2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論:
15、 。
(3)請(qǐng)用坐標(biāo)圖表示出不同蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量大小與洗脫液體積的關(guān)系:
選修一 專題5課題3《血紅蛋白的提取和分離》測(cè)試卷
參考答案
一、選擇題(每題3分,共60分)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
B
B
C
D
C
A
C
C
A
D
C
B
C
A
A
D
C
D
B
B
二、非選擇題(共40分)
21、(每空2分,共12分)
(1)④→①→②→③
(2)不要觸及破壞凝膠面 使
16、吸管管口沿管壁環(huán)繞移動(dòng)
(3)完全進(jìn)入凝膠層 紅色的蛋白質(zhì) 5
22、(除第(3)每空1分外,其余每空2分,共10分)
(1)帶電性質(zhì) 分子大小 形狀不同
(2)與所帶電荷相反
(3)7 F2
23、(每空1分,共8分)
(1)電荷(帶電情況) 遷移速度
(2)碳源 氮源
(3)數(shù)量
(4)平板劃線法 稀釋涂布平板法 滅菌
24、(每空2分,共10分)
(1)
①先將凝膠柱垂直固定在支架臺(tái)上,打開(kāi)色譜柱下端的流出口,使柱內(nèi)凝膠面上緩沖液緩慢下降到與凝膠面平齊,關(guān)閉出口
②用吸管小心將1mlA、B兩種蛋白質(zhì)的混合樣液加到色譜柱頂端,注意不要破壞凝膠面;打開(kāi)下端出口,使樣品滲入凝膠床內(nèi)后,關(guān)閉下端出口
③小心加入緩沖液到適當(dāng)高度,連接緩沖液洗脫瓶,打開(kāi)下端出口,用緩沖液進(jìn)行洗脫
(2) 若經(jīng)過(guò)檢測(cè)A先于B洗脫出來(lái),則A的相對(duì)分子質(zhì)量大于B;相反,A小于B
(3)
專心---專注---專業(yè)