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《綠葉中色素的提取和分離》實驗的改進方案
摘要:生物學(xué)作為一門以實驗為基礎(chǔ)的學(xué)科,實驗教學(xué)在生物教學(xué)中占有極其重要的地位,現(xiàn)代教育倡導(dǎo)以學(xué)生為主體。本文通過對《綠葉中色素的提取和分離》實驗的改進,旨在達到以下目的:優(yōu)化實驗方案,簡化實驗操作,使得色素的提取和分離效果更加明顯,提高學(xué)生的實驗操作技能,拓展學(xué)生的創(chuàng)新思維。教師和學(xué)生一同探索,不斷創(chuàng)新和改進實驗教學(xué)。
關(guān)鍵詞:色素 提取 分離 改進
實驗《綠葉中色素的提取和分離》是人教版高中生物必修1《分子與細胞》中的重
2、點實驗。根據(jù)新課程標準所倡導(dǎo)的四個基本理念,即提高生物科學(xué)素養(yǎng)、面向全體學(xué)生、倡導(dǎo)探究性學(xué)習(xí)、注重與現(xiàn)實生活的聯(lián)系。基于此點,筆者結(jié)合實踐和教師們的反映,現(xiàn)在將《綠葉中色素的提取和分離》實驗改進如下:
一、對實驗材料的改進
教材中取材用5g新鮮的菠菜葉片提取色素。
不足:首先,菠菜葉肉細胞的葉綠體中葉綠素的含量并不高。通過查閱“有機化學(xué)實驗”教材中關(guān)于“菠菜葉中色素的提取、分離及鑒定”實驗得知,菠菜葉肉細胞的葉綠體中主要含四種色素,分別是B-胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b,這四種色素的比例是2:1:3:1,根據(jù)此比例可知葉綠素所占的比例約為4/7,并沒有達到課本上所說的3/4,含量
3、相對較少。而B-胡蘿卜素、葉綠素a所占比例分別是2/7、3/7,含量相對較高,這就是學(xué)生色素層析分離的結(jié)果為什么總是第二條帶(葉綠素a)及第四條帶(胡蘿卜素)比較明顯而第一條帶(葉綠素b)和第三條帶(葉黃素)不明顯。其次,,講授光合作用的時間與本地菠菜上市的時間不同。
改進:選好了材料,實驗就成功了一半。其實,本實驗可以找到多種材料來完成如木耳菜、青菜葉、韭菜等,,教師可提供多種材料供學(xué)生選擇或可讓學(xué)生提供一些好的建議。從中挑選出費時少,效果好的材料來進行實驗。筆者建議實驗材料用韭菜,韭菜一年可收割多茬,材料易獲??;韭菜葉片肉質(zhì)較厚,保水性好,可長時間保存而色素不易受到破壞;韭菜葉脈少,葉片
4、細長,柔軟,纖維少,易粉碎;葉綠素含量高,層析得到的四條色素帶清晰明顯。
二、對色素提取方法的改進
課本中安排的實驗操作是:稱取5g的綠葉,后放入研缽,向研缽中加入少許二氧化硅和碳酸鈣,再加入10ml無水乙醇,進行迅速、充分的研磨。將研磨液迅速倒入玻璃漏斗(漏斗基部放一塊單層尼龍布)中進行過濾。將濾液收集到試管中,及時用棉塞塞嚴盛有濾液的試管。
不足:根據(jù)實驗教學(xué)實踐可知,10ml的無水乙醇根本無法將剪碎的5g綠葉淹沒,也就是說,在研磨的過程中葉片幾乎都是暴露在空氣之中,葉綠素易被氧化分解且研磨過濾后得到的濾液太少。若加入無水乙醇過多,則導(dǎo)致色素溶液濃度過小,紙層析分離的色素帶不明顯,所
5、以這就是一個矛盾。此外,新鮮的綠色葉片含水量較高,實驗過程中研磨破碎的葉片既濕且粘滑,極難研磨充分,由于葉片含水量高,葉片中的水與無水乙醇任意比互溶,降低了無水乙醇的濃度,無水乙醇的濃度偏低,溶解色素的量減少,使實驗結(jié)果不清晰。
改進:葉綠體中色素的提取時將綠葉置于65℃左右水中燙40~50s后,再用冷水冷卻數(shù)秒鐘后用多層吸水紙將葉片中的水分除去,剪碎研磨后可大大提高無水乙醇對色素的提取率。由于學(xué)校條件限制,采用4層紗布包著研磨物并擠出濾液,得到墨綠色的色素提取液。
三、對色素分離方法的改進
教材中將干燥的定性濾紙剪成長與寬略小于試管長與寬的濾紙條,將濾紙條一端剪去兩角,在此端距
6、頂端1 cm處用鉛筆畫一條細橫線。用毛細吸管吸取少量濾液,沿鉛筆線均勻畫細線。待濾液線干后,重復(fù)畫線一兩次。將適量的層析液倒入試管,將濾紙條畫線一端朝下,輕輕插入層析液中,迅速塞緊試管口。
不足:教材中采用毛細吸管吸取濾液,畫線很難達到細、齊的要求,層析后的色素帶呈波浪狀,效果不是很理想。并且學(xué)生按部就班去操作容易出現(xiàn)濾液細線浸沒在層析液,濾紙條貼于試管內(nèi)壁等問題,這些會造成實驗的不成功。
改進:方案一,用較薄且干凈的蓋玻片的一側(cè)邊緣沾取色素提取液印在濾紙條上的方法,色素液晾干后再重復(fù)幾次,印的濾液線細、齊、均勻,比用毛細吸管省時、省力、省錢,層析分離后實驗效果很好。
7、 方案二,采用點樣法:將圓形定性濾紙蓋在培養(yǎng)皿上,在圓形定性濾紙中央用注射器吸取少量色素提起液點到圓形濾紙中央,色素液晾干后再重復(fù)幾次,點色素斑比劃濾液細線容易得多。在圓形濾紙中央的色素斑上,依次滴層析液,每滴中間間隔30s左右,幾分鐘后,觀察結(jié)果會得到近似同心圓的4個色素環(huán),由內(nèi)到外分別是黃綠色、藍綠色、黃色和橙黃色,實驗效果非常明顯。
所有的改進已經(jīng)敘述完成,筆者深知自己提供的提取及分離方案絕非最佳方案。但探索實驗方法的改進, 能有效地促進課程目標的實現(xiàn), 培養(yǎng)師生的動手能力和創(chuàng)新能力, 提高生物課的教學(xué)效率和師生生物科學(xué)素養(yǎng)。
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