高考生物二輪復(fù)習(xí) 專(zhuān)題十七 基因工程和細(xì)胞工程課件

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1、專(zhuān)題17基因工程和細(xì)胞工程 答案速填：答案速填：限制酶限制酶DNADNA連接酶連接酶目的基因的獲取目的基因的獲取檢測(cè)與鑒定檢測(cè)與鑒定基因基因全能性全能性新品種新品種細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖流動(dòng)性流動(dòng)性 骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞考點(diǎn)一考點(diǎn)一基因工程和蛋白質(zhì)工程基因工程和蛋白質(zhì)工程【知識(shí)【知識(shí)方法方法】1.1.獲取目的基因的獲取目的基因的3 3種途徑：種途徑：(1)(1)從基因文庫(kù)中獲取。從基因文庫(kù)中獲取。(2)PCR(2)PCR技術(shù)擴(kuò)增。技術(shù)擴(kuò)增。(3)(3)化學(xué)方法人工合成?；瘜W(xué)方法人工合成。2.2.基因表達(dá)載體的組成：基因表達(dá)載體的組成：目的基因目的基因+ +啟動(dòng)子啟動(dòng)子+ +終止子終止子+ +標(biāo)記基因

2、標(biāo)記基因+ +復(fù)制原點(diǎn)。復(fù)制原點(diǎn)。3.3.目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法：目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法：(1)(1)導(dǎo)入植物細(xì)胞。導(dǎo)入植物細(xì)胞。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法；基因槍法；花粉管通道法?；ǚ酃芡ǖ婪?。(2)(2)導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞：顯微注射法。導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞：顯微注射法。(3)(3)導(dǎo)入微生物細(xì)胞：導(dǎo)入微生物細(xì)胞：CaCa2+2+處理法處理法( (感受態(tài)細(xì)胞法感受態(tài)細(xì)胞法) )。4.4.目的基因的檢測(cè)與鑒定的方法：目的基因的檢測(cè)與鑒定的方法：(1)(1)檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞：檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞：DNADNA分子雜交法。分子雜交法。(2)(2)檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出檢測(cè)目

3、的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNAmRNA：分子雜交技術(shù)。：分子雜交技術(shù)。(3)(3)檢測(cè)目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)：抗原檢測(cè)目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)：抗原抗體雜交抗體雜交技術(shù)。技術(shù)。(4)(4)個(gè)體生物學(xué)水平鑒定：根據(jù)表達(dá)性狀判斷。個(gè)體生物學(xué)水平鑒定：根據(jù)表達(dá)性狀判斷。5.5.基因工程的常考點(diǎn)：基因工程的?？键c(diǎn)：(1)(1)目的基因插入位置：?jiǎn)?dòng)子與終止子之間。目的基因插入位置：?jiǎn)?dòng)子與終止子之間。(2)(2)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞沒(méi)有堿基互補(bǔ)配對(duì)現(xiàn)象。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞沒(méi)有堿基互補(bǔ)配對(duì)現(xiàn)象。(3)(3)常用的受體細(xì)胞。常用的受體細(xì)胞。植物：受精卵、體細(xì)胞。植物：受精卵、體細(xì)胞。動(dòng)物：受精卵。動(dòng)物：

4、受精卵。微生物：大腸桿菌、酵母菌等。微生物：大腸桿菌、酵母菌等。(4)(4)原核生物作為受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)：多為單細(xì)胞、繁殖原核生物作為受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)：多為單細(xì)胞、繁殖快、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少。快、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少。6.6.蛋白質(zhì)工程：蛋白質(zhì)工程：(1)(1)步驟。步驟。預(yù)期蛋白質(zhì)功能；預(yù)期蛋白質(zhì)功能；設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)；設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)；推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列；推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列；找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列；酸序列；鑒定蛋白質(zhì)的生物功能。鑒定蛋白質(zhì)的生物功能。(2)(2)產(chǎn)物：產(chǎn)生自然界中沒(méi)有的新蛋白質(zhì)。產(chǎn)物：產(chǎn)生自然界中沒(méi)有的新蛋白質(zhì)?！疽族e(cuò)【易錯(cuò)警示警示】1.1.限制酶

5、使磷酸二酯鍵斷開(kāi)，解旋酶使氫鍵斷開(kāi)。限制酶使磷酸二酯鍵斷開(kāi)，解旋酶使氫鍵斷開(kāi)。2.2.通過(guò)通過(guò)PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增技術(shù)擴(kuò)增DNADNA時(shí)，利用高溫使氫鍵斷裂。時(shí)，利用高溫使氫鍵斷裂。3.3.使用限制酶的注意點(diǎn)：使用限制酶的注意點(diǎn)：(1)(1)一般用同一種限制酶切割載體和獲取目的基因。一般用同一種限制酶切割載體和獲取目的基因。(2)(2)不同的限制酶也能切割出相同的黏性末端。不同的限制酶也能切割出相同的黏性末端。4.4.基因組文庫(kù)包含了某種生物的全部基因，基因組文庫(kù)包含了某種生物的全部基因，cDNAcDNA文庫(kù)文庫(kù)只包含某種生物的部分基因。只包含某種生物的部分基因。5.5.基因工程中的載體與細(xì)胞

6、膜上的載體不同。基因工程中的載體與細(xì)胞膜上的載體不同。6.6.啟動(dòng)子、終止子：?jiǎn)?dòng)子、終止子：(1)(1)啟動(dòng)子啟動(dòng)子(DNA(DNA片段片段)起始密碼子起始密碼子( (位于位于RNARNA上上) )。(2)(2)終止子終止子(DNA(DNA片段片段)終止密碼子終止密碼子( (位于位于RNARNA上上) )。7.7.目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)植物或微生物。目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)植物或微生物。8.8.目的基因插入質(zhì)粒后，不會(huì)影響質(zhì)粒的復(fù)制。目的基因插入質(zhì)粒后，不會(huì)影響質(zhì)粒的復(fù)制。9.9.轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合播種，會(huì)降低轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合播種，會(huì)降低害蟲(chóng)種群中的抗

7、性基因頻率的增長(zhǎng)速率。害蟲(chóng)種群中的抗性基因頻率的增長(zhǎng)速率?！镜淅镜淅? 1】(2015(2015全國(guó)卷全國(guó)卷T40)HIVT40)HIV屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒，屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒，是艾滋病的病原體。回答下列問(wèn)題：是艾滋病的病原體。回答下列問(wèn)題：(1)(1)用基因工程方法制備用基因工程方法制備HIVHIV的某蛋白的某蛋白( (目的蛋白目的蛋白) )時(shí)，時(shí)，可先提取可先提取HIVHIV中的中的_，以其作為模板，在，以其作為模板，在_的作用下合成的作用下合成_，獲取該目的，獲取該目的蛋白的基因，構(gòu)建重組表達(dá)載體，隨后導(dǎo)入受體細(xì)胞。蛋白的基因，構(gòu)建重組表達(dá)載體，隨后導(dǎo)入受體細(xì)胞。(2)(2)從受體細(xì)胞中分離純化

8、出目的蛋白，該蛋白作為抗從受體細(xì)胞中分離純化出目的蛋白，該蛋白作為抗原注入機(jī)體后，刺激機(jī)體產(chǎn)生的可與此蛋白結(jié)合的相原注入機(jī)體后，刺激機(jī)體產(chǎn)生的可與此蛋白結(jié)合的相應(yīng)分泌蛋白是應(yīng)分泌蛋白是_。該分泌蛋白可用于檢測(cè)受。該分泌蛋白可用于檢測(cè)受試者血清中的試者血清中的HIVHIV，檢測(cè)的原理是，檢測(cè)的原理是_。(3)(3)已知某種菌導(dǎo)致的肺炎在健康人群中罕見(jiàn)，但是在已知某種菌導(dǎo)致的肺炎在健康人群中罕見(jiàn)，但是在艾滋病患者中卻多發(fā)。引起這種現(xiàn)象的根本原因是艾滋病患者中卻多發(fā)。引起這種現(xiàn)象的根本原因是HIVHIV主要感染和破壞了患者的部分主要感染和破壞了患者的部分_細(xì)胞，降細(xì)胞，降低了患者免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能。

9、低了患者免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能。(4)(4)人的免疫系統(tǒng)有人的免疫系統(tǒng)有_癌細(xì)胞的功能，艾滋癌細(xì)胞的功能，艾滋病患者由于免疫功能缺陷，易發(fā)生惡性腫瘤。病患者由于免疫功能缺陷，易發(fā)生惡性腫瘤。答案：答案：(1)RNA(1)RNA逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶cDNAcDNA( (或或DNA)DNA)(2)(2)抗體抗原抗體特異性結(jié)合抗體抗原抗體特異性結(jié)合(3)T(3)T(或或T T淋巴淋巴) )(4)(4)監(jiān)控和清除監(jiān)控和清除【解題技法【解題技法】關(guān)鍵詞突破法關(guān)鍵詞突破法1.1.點(diǎn)睛：點(diǎn)睛：(1)(1)快速找出每道小題的快速找出每道小題的“題眼題眼”或關(guān)鍵詞?；蜿P(guān)鍵詞。(2)(2)答題時(shí)一定要用專(zhuān)業(yè)術(shù)語(yǔ)或教材原話

10、。答題時(shí)一定要用專(zhuān)業(yè)術(shù)語(yǔ)或教材原話。2.2.答題分析：答題分析：(1)(1)關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞1 1：目的蛋白。：目的蛋白。合成途合成途徑：徑：RNA_RNA_受體細(xì)胞受體細(xì)胞目的蛋白。目的蛋白。作為抗原：可刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體，抗體可與目的蛋作為抗原：可刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體，抗體可與目的蛋白白( (抗原抗原)_)_結(jié)合。結(jié)合。cDNAcDNA( (或或DNA)DNA)構(gòu)建基因表達(dá)載體構(gòu)建基因表達(dá)載體特異性特異性(2)(2)關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞2 2：免疫系統(tǒng)的功能。：免疫系統(tǒng)的功能。防衛(wèi)功能：防衛(wèi)功能：T T細(xì)胞參與體液免疫和細(xì)胞免疫細(xì)胞參與體液免疫和細(xì)胞免疫_(dá)會(huì)大大會(huì)大大降低防衛(wèi)功能。降低防衛(wèi)功能。監(jiān)控和清除功

11、能：艾滋病患者免疫功能缺陷監(jiān)控和清除功能：艾滋病患者免疫功能缺陷監(jiān)控和清除癌細(xì)胞能力降低監(jiān)控和清除癌細(xì)胞能力降低惡性腫瘤。惡性腫瘤。破壞破壞T T細(xì)胞細(xì)胞【母題探究【母題探究】借題猜押其他命題點(diǎn)借題猜押其他命題點(diǎn)押題點(diǎn)押題點(diǎn)1 1：人：人工合成目的基因常用的方法有哪些？工合成目的基因常用的方法有哪些？_。押題點(diǎn)押題點(diǎn)2 2：基因工程?？紵狳c(diǎn)：基因工程?？紵狳c(diǎn)：(1)(1)基因工程的核心步驟是基因工程的核心步驟是_?；瘜W(xué)合成法、反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法、反轉(zhuǎn)錄法和PCRPCR擴(kuò)增法擴(kuò)增法基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建(2)(2)常用工具。常用工具。限制酶限制酶：獲?。韩@取_和切割和切割_。DN

12、ADNA連接酶的種類(lèi)：連接酶的種類(lèi)：_連接酶和連接酶和_連接連接酶。酶。載體。載體。a.a.能在細(xì)胞內(nèi)能在細(xì)胞內(nèi)_：穩(wěn)定保存。：穩(wěn)定保存。b.b.具有切割位點(diǎn)：供具有切割位點(diǎn)：供_插入其中。插入其中。c.c.具有具有_：供重組：供重組DNADNA的鑒定和選擇。的鑒定和選擇。目的基因目的基因載體載體E EcoliDNAcoliDNAT T4 4DNADNA自我復(fù)制自我復(fù)制外源外源DNADNA片段片段標(biāo)記基因標(biāo)記基因【題組過(guò)關(guān)【題組過(guò)關(guān)】1.(1.(新題預(yù)測(cè)新題預(yù)測(cè)) )下列是生物學(xué)技術(shù)制備抗體的兩個(gè)途徑下列是生物學(xué)技術(shù)制備抗體的兩個(gè)途徑模式簡(jiǎn)圖。模式簡(jiǎn)圖。(1)(1)過(guò)程過(guò)程得到的得到的Y Y細(xì)

13、胞稱(chēng)為細(xì)胞稱(chēng)為_(kāi)。過(guò)。過(guò)程程和和得到的單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是得到的單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是_。(2)(2)抗體抗體1 1與抗體與抗體2 2的氨基酸排列順序相同，兩者的空間的氨基酸排列順序相同，兩者的空間結(jié)構(gòu)是否相同？結(jié)構(gòu)是否相同？_，為什么？，為什么？_。(3)(3)在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子是在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子是_識(shí)別和結(jié)識(shí)別和結(jié)合的部位，它的作用是驅(qū)動(dòng)合的部位，它的作用是驅(qū)動(dòng)V1V1基因的基因的_。(4)(4)質(zhì)粒上的標(biāo)記基因的作用是質(zhì)粒上的標(biāo)記基因的作用是_。(5)(5)過(guò)程過(guò)程要用到的主要酶是要用到的主要酶是_。【解析【解析】(1)(1)過(guò)程過(guò)程為誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程，得到的為誘

14、導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程，得到的Y Y細(xì)胞為雜交瘤細(xì)胞。過(guò)程細(xì)胞為雜交瘤細(xì)胞。過(guò)程和和得到的單克隆抗體最得到的單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是：特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備。主要的優(yōu)點(diǎn)是：特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備。(2)(2)大腸桿菌的細(xì)胞中沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，大腸桿大腸桿菌的細(xì)胞中沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，大腸桿菌產(chǎn)生的抗體菌產(chǎn)生的抗體2 2沒(méi)有經(jīng)過(guò)內(nèi)質(zhì)沒(méi)有經(jīng)過(guò)內(nèi)質(zhì)和高爾基體的加工，雜交瘤細(xì)胞中有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基和高爾基體的加工，雜交瘤細(xì)胞中有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體體，雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體1 1經(jīng)過(guò)了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體經(jīng)過(guò)了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工，所以抗體的加工，所以抗體1 1與抗體

15、與抗體2 2的空間結(jié)構(gòu)不同。的空間結(jié)構(gòu)不同。(3)(3)啟動(dòng)子是啟動(dòng)子是RNARNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，它的作用聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，它的作用是驅(qū)動(dòng)是驅(qū)動(dòng)V1V1基因的轉(zhuǎn)錄。基因的轉(zhuǎn)錄。(4)(4)質(zhì)粒上的標(biāo)記基因的作用是：鑒別受體細(xì)胞中是否質(zhì)粒上的標(biāo)記基因的作用是：鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的受體細(xì)胞篩選出含有目的基因，從而將有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)。來(lái)。(5)(5)過(guò)程過(guò)程是以是以RNARNA為模板合成為模板合成DNA(V1DNA(V1基因基因) )的過(guò)程，為的過(guò)程，為逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，所用的酶為逆轉(zhuǎn)錄酶。逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，所用的酶為逆轉(zhuǎn)錄酶。答案：答案：(1)(1)雜

16、交瘤細(xì)胞特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大雜交瘤細(xì)胞特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備量制備(2)(2)不同抗體不同抗體2 2形成過(guò)程沒(méi)有經(jīng)過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體形成過(guò)程沒(méi)有經(jīng)過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工，抗體的加工，抗體1 1形成過(guò)程經(jīng)過(guò)了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加形成過(guò)程經(jīng)過(guò)了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工工(3)RNA(3)RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄聚合酶轉(zhuǎn)錄(4)(4)鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將有目的鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)(5)(5)逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶【加固訓(xùn)練【加固訓(xùn)練】繼哺乳動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后，膀胱生物反繼哺乳動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后

17、，膀胱生物反應(yīng)器的研究也取得了一定進(jìn)展。最近，科學(xué)家培養(yǎng)出應(yīng)器的研究也取得了一定進(jìn)展。最近，科學(xué)家培養(yǎng)出一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并分泌到尿液中，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：激素并分泌到尿液中，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)(1)獲得人的生長(zhǎng)激素基因的方法有從基因文庫(kù)中獲取、獲得人的生長(zhǎng)激素基因的方法有從基因文庫(kù)中獲取、_、_等。等。(2)(2)在構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中，人的生長(zhǎng)激素基因用在構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中，人的生長(zhǎng)激素基因用_進(jìn)行切割。進(jìn)行切割。(3)(3)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫荏w細(xì)胞，常用方法將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫荏w細(xì)胞，常用

18、方法是是_。進(jìn)行基因轉(zhuǎn)。進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移時(shí)，通常要將外源基因轉(zhuǎn)入移時(shí)，通常要將外源基因轉(zhuǎn)入_(_(細(xì)胞細(xì)胞) )中，原中，原因是因是_；一般可采用一般可采用_技術(shù)檢測(cè)外源基因技術(shù)檢測(cè)外源基因是否插入了小鼠的基因組中。但在研制膀胱生物反應(yīng)是否插入了小鼠的基因組中。但在研制膀胱生物反應(yīng)器時(shí)，應(yīng)使外源基因在小鼠的器時(shí)，應(yīng)使外源基因在小鼠的_細(xì)細(xì)胞中特異性表達(dá)。胞中特異性表達(dá)?！窘馕觥窘馕觥?1)(1)目的基因的獲取一般有目的基因的獲取一般有3 3種方法，即種方法，即PCRPCR技技術(shù)擴(kuò)增、人工合成、從基因文庫(kù)中獲取。術(shù)擴(kuò)增、人工合成、從基因文庫(kù)中獲取。(2)(2)切割目的切割目的基因的酶是限制酶?；虻?/p>

19、酶是限制酶。(3)(3)若受體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞，一般若受體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞，一般選用顯微注射法將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。常用的受選用顯微注射法將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。常用的受體細(xì)胞是受精卵，受精卵較易表現(xiàn)出全能性。檢測(cè)外體細(xì)胞是受精卵，受精卵較易表現(xiàn)出全能性。檢測(cè)外源基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞常用源基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞常用DNADNA分子雜交技術(shù)。膀胱分子雜交技術(shù)。膀胱生物反應(yīng)器要用膀胱上皮細(xì)胞作為受體細(xì)胞。生物反應(yīng)器要用膀胱上皮細(xì)胞作為受體細(xì)胞。答案：答案：(1)PCR(1)PCR技術(shù)擴(kuò)增人工合成技術(shù)擴(kuò)增人工合成(2)(2)限制酶限制酶(3)(3)顯微注射法受精卵顯微注射法受精卵( (早期胚胎早期胚胎)

20、 )受精卵受精卵( (或早期或早期胚胎胚胎) )具有全能性，可使外源基因在相應(yīng)組織細(xì)胞表達(dá)具有全能性，可使外源基因在相應(yīng)組織細(xì)胞表達(dá)DNADNA分子雜交膀胱上皮分子雜交膀胱上皮2.(20152.(2015全國(guó)卷全國(guó)卷)已知生物體內(nèi)有一種蛋白質(zhì)已知生物體內(nèi)有一種蛋白質(zhì)(P)(P)，該蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，由該蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，由305305個(gè)氨基酸組成。如果個(gè)氨基酸組成。如果將將P P分子中分子中158158位的絲氨酸變成亮氨酸，位的絲氨酸變成亮氨酸，240240位的谷氨酰位的谷氨酰胺變成苯丙氨酸，改變后的蛋白質(zhì)胺變成苯丙氨酸，改變后的蛋白質(zhì)(P(P1 1) )不但保留不但保留P P的功的功

21、能，而且具有了酶的催化活性。回答下列問(wèn)題：能，而且具有了酶的催化活性。回答下列問(wèn)題：(1)(1)從上述資料可知，若要改變蛋白質(zhì)的功能，可以從上述資料可知，若要改變蛋白質(zhì)的功能，可以考慮對(duì)蛋白質(zhì)的考慮對(duì)蛋白質(zhì)的_進(jìn)行改造。進(jìn)行改造。(2)(2)以以P P基因序列為基礎(chǔ)，獲得基因序列為基礎(chǔ)，獲得P P1 1基因的途徑有修飾基因的途徑有修飾_基因或合成基因或合成_基因。所獲得基因。所獲得的基因表達(dá)時(shí)是遵循中心法則的，中心法則的全部?jī)?nèi)的基因表達(dá)時(shí)是遵循中心法則的，中心法則的全部?jī)?nèi)容包括容包括_的復(fù)制；以及遺傳信息在不同分的復(fù)制；以及遺傳信息在不同分子之間的流動(dòng)，即：子之間的流動(dòng)，即：_。(3)(3)蛋

22、白質(zhì)工程也被稱(chēng)為第二代基因工程，其基本途徑蛋白質(zhì)工程也被稱(chēng)為第二代基因工程，其基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)，通過(guò)是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)，通過(guò)_和和_，進(jìn)而確定相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，進(jìn)而確定相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，據(jù)此獲得基因，再經(jīng)表達(dá)、純化獲得蛋白質(zhì)，之后還據(jù)此獲得基因，再經(jīng)表達(dá)、純化獲得蛋白質(zhì)，之后還需要對(duì)蛋白質(zhì)的生物需要對(duì)蛋白質(zhì)的生物_進(jìn)行鑒定。進(jìn)行鑒定?！窘馕觥窘馕觥勘绢}考查蛋白質(zhì)工程和中心法則的相關(guān)內(nèi)容。本題考查蛋白質(zhì)工程和中心法則的相關(guān)內(nèi)容。(1)(1)蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)P P1 1是由蛋白質(zhì)是由蛋白質(zhì)P P改變了兩個(gè)氨基酸序列得到改變了兩個(gè)氨基酸序列得到的，故若要改變蛋白質(zhì)的功能，可

23、以考慮對(duì)蛋白質(zhì)的的，故若要改變蛋白質(zhì)的功能，可以考慮對(duì)蛋白質(zhì)的氨基酸序列進(jìn)行改造。氨基酸序列進(jìn)行改造。(2)P(2)P1 1基因可以在基因可以在P P基因的基礎(chǔ)上經(jīng)修飾改造而成，也基因的基礎(chǔ)上經(jīng)修飾改造而成，也可以根據(jù)氨基酸序列用化學(xué)方法合成。中心法則的內(nèi)可以根據(jù)氨基酸序列用化學(xué)方法合成。中心法則的內(nèi)容為：容為：包括包括DNADNA的復(fù)制，的復(fù)制，RNARNA的復(fù)制，遺傳信息由的復(fù)制，遺傳信息由DNARNADNARNA、由由RNADNARNADNA、由、由RNARNA蛋白質(zhì)五個(gè)過(guò)程。蛋白質(zhì)五個(gè)過(guò)程。(3)(3)蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功

24、能出發(fā)發(fā)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列( (基因基因) )。該基因表達(dá)。該基因表達(dá)后得到相應(yīng)蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)是否符合我們的設(shè)計(jì)要求，后得到相應(yīng)蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)是否符合我們的設(shè)計(jì)要求，還需要進(jìn)一步對(duì)蛋白質(zhì)的生物功能進(jìn)行檢測(cè)與鑒定。還需要進(jìn)一步對(duì)蛋白質(zhì)的生物功能進(jìn)行檢測(cè)與鑒定。答案：答案：(1)(1)氨基酸序列氨基酸序列( (或結(jié)構(gòu)或結(jié)構(gòu)) )(2)P(2)PP P1 1DNADNA和和RNA(RNA(或遺傳物質(zhì)或遺傳物質(zhì)) )DNARNADNARNA、RNADNARNADNA、RNARNA蛋白質(zhì)蛋白

25、質(zhì)( (或轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄、或轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄、翻譯翻譯) )(3)(3)設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測(cè)氨基酸序列功能設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測(cè)氨基酸序列功能3.(20163.(2016全國(guó)卷全國(guó)卷)圖圖(a)(a)中的三個(gè)中的三個(gè)DNADNA片段上依次表片段上依次表示出了示出了EcoREcoR、BamHBamH和和Sau3ASau3A三種限制性核酸內(nèi)切三種限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列與切割位點(diǎn)，圖酶的識(shí)別序列與切割位點(diǎn)，圖(b)(b)為某種表達(dá)載體的示為某種表達(dá)載體的示意圖意圖( (載體上的載體上的EcoREcoR、Sau3ASau3A的切點(diǎn)是唯一的的切點(diǎn)是唯一的) )。根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題：根據(jù)基因

26、工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題：(1)(1)經(jīng)經(jīng)BamHBamH酶切后得到的目的基因可以與上述表達(dá)載酶切后得到的目的基因可以與上述表達(dá)載體被體被_酶切后的產(chǎn)物連接，理由是酶切后的產(chǎn)物連接，理由是_。(2)(2)若某人利用圖若某人利用圖(b)(b)所示的表達(dá)載體獲得了甲、乙、所示的表達(dá)載體獲得了甲、乙、丙三種含有目的基因的重組子，如圖丙三種含有目的基因的重組子，如圖(c)(c)所示。這三種所示。這三種重組子中，不能在宿主細(xì)胞中表達(dá)目的基因產(chǎn)物的有重組子中，不能在宿主細(xì)胞中表達(dá)目的基因產(chǎn)物的有_，不能表達(dá)的原因是，不能表達(dá)的原因是_。(3)DNA(3)DNA連接酶是將兩個(gè)連接酶是將兩個(gè)DNADNA片

27、段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有有_和和_，其中，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是既能連接黏性末端又能連接平末端的是_?！窘忸}指導(dǎo)【解題指導(dǎo)】解答本題需明確：解答本題需明確：(1)(1)圖示信息：圖圖示信息：圖(a)(a)中三種酶的識(shí)別序列，圖中三種酶的識(shí)別序列，圖(b)(b)中終中終止子、啟動(dòng)子的位置，圖止子、啟動(dòng)子的位置，圖(c)(c)中目的基因的插入位置。中目的基因的插入位置。(2)(2)關(guān)鍵知識(shí)：只有兩種限制性核酸內(nèi)切酶剪切時(shí)識(shí)別關(guān)鍵知識(shí)：只有兩種限制性核酸內(nèi)切酶剪切時(shí)識(shí)別的序列相同時(shí)，才能被的序列相同時(shí)，才能被DNADNA連接酶連接；啟動(dòng)子啟動(dòng)目連接酶連接；啟動(dòng)

28、子啟動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄，終止子終止轉(zhuǎn)錄過(guò)程，插入二者之間的的基因轉(zhuǎn)錄，終止子終止轉(zhuǎn)錄過(guò)程，插入二者之間的目的基因才能正常表達(dá)。目的基因才能正常表達(dá)?！窘馕觥窘馕觥勘绢}主要考查限制性核酸內(nèi)切酶和本題主要考查限制性核酸內(nèi)切酶和DNADNA連接酶連接酶的作用及基因表達(dá)載體的構(gòu)建。的作用及基因表達(dá)載體的構(gòu)建。(1)BamH(1)BamH和和Sau3ASau3A的共同識(shí)別序列是的共同識(shí)別序列是GATCGATC，二，二者切割形成的黏性末端相同，可以被者切割形成的黏性末端相同，可以被DNADNA連接酶連接。連接酶連接。(2)(2)在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子應(yīng)位于目的基因的前端，在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子應(yīng)位于目的基

29、因的前端，終止子應(yīng)位于目的基因的后端，這樣目的基因才能順終止子應(yīng)位于目的基因的后端，這樣目的基因才能順利地轉(zhuǎn)錄并完成翻譯過(guò)程，即順利表達(dá)，圖中所示甲、利地轉(zhuǎn)錄并完成翻譯過(guò)程，即順利表達(dá)，圖中所示甲、丙均不符。丙均不符。(3)(3)常見(jiàn)的常見(jiàn)的DNADNA連接酶有連接酶有T T4 4DNADNA連接酶和連接酶和EcoliDNAEcoliDNA連接連接酶，酶，T T4 4DNADNA連接酶既能連接黏性末端，又能連接平末端。連接酶既能連接黏性末端，又能連接平末端。答案：答案：(1)Sau3A(1)Sau3A兩種酶切割后產(chǎn)生的片段具有相兩種酶切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端同的黏性末端(2)(2)甲

30、和丙甲中目的基因插入在啟動(dòng)子的上游，丙中甲和丙甲中目的基因插入在啟動(dòng)子的上游，丙中目的基因插入在終止子的下游，二者的目的基因均不目的基因插入在終止子的下游，二者的目的基因均不能被轉(zhuǎn)錄能被轉(zhuǎn)錄( (其他合理答案亦可其他合理答案亦可) )(3)EcoliDNA(3)EcoliDNA連接酶連接酶T T4 4DNADNA連接酶連接酶T T4 4DNADNA連接酶連接酶【易錯(cuò)提醒【易錯(cuò)提醒】(1)(1)不能正確分析啟動(dòng)子和終止子的作用，不能正確分析啟動(dòng)子和終止子的作用，對(duì)目的基因能否順利表達(dá)判斷不清。對(duì)目的基因能否順利表達(dá)判斷不清。(2)(2)書(shū)寫(xiě)有誤，如誤將書(shū)寫(xiě)有誤，如誤將“連接酶連接酶”寫(xiě)成寫(xiě)成“連

31、結(jié)酶連結(jié)酶”。4.(20164.(2016海南高考海南高考) )基因工程又稱(chēng)為基因工程又稱(chēng)為DNADNA重組技術(shù)，回重組技術(shù)，回答相關(guān)問(wèn)題：答相關(guān)問(wèn)題：(1)(1)在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑，即在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑，即_和從和從_中分離。中分離。(2)(2)利用某植物的成熟葉片為材料，同時(shí)構(gòu)建利用某植物的成熟葉片為材料，同時(shí)構(gòu)建cDNAcDNA文庫(kù)文庫(kù)和基因組文庫(kù)，兩個(gè)文庫(kù)相比，和基因組文庫(kù)，兩個(gè)文庫(kù)相比，cDNAcDNA文庫(kù)中含有的基文庫(kù)中含有的基因數(shù)目比基因組文庫(kù)中的少，其原因是因數(shù)目比基因組文庫(kù)中的少，其原因是_。(3)(3)在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子是在

32、基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子是_聚合酶識(shí)聚合酶識(shí)別并結(jié)合的部位。若采用原核生物作為基因表達(dá)載體別并結(jié)合的部位。若采用原核生物作為基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞，最常用的原核生物是的受體細(xì)胞，最常用的原核生物是_。(4)(4)將目的基因通過(guò)基因槍法導(dǎo)入植物細(xì)胞時(shí)，常用的將目的基因通過(guò)基因槍法導(dǎo)入植物細(xì)胞時(shí)，常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有攜帶目的基因的金屬顆粒有_和和_顆粒。顆粒?！窘馕觥窘馕觥勘绢}主要考查目的基因的獲取方法、基因表本題主要考查目的基因的獲取方法、基因表達(dá)載體的構(gòu)建方法、目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法。達(dá)載體的構(gòu)建方法、目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法。(1)(1)在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑

33、，既在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑，既可在核苷酸序列已知的情況下人工合成，也可用限制可在核苷酸序列已知的情況下人工合成，也可用限制酶對(duì)生物材料的酶對(duì)生物材料的DNADNA切割，再選取。切割，再選取。(2)cDNA(2)cDNA文庫(kù)是由文庫(kù)是由mRNAmRNA反轉(zhuǎn)錄獲得的，其中只含有葉細(xì)反轉(zhuǎn)錄獲得的，其中只含有葉細(xì)胞已轉(zhuǎn)錄胞已轉(zhuǎn)錄( (或已表達(dá)或已表達(dá)) )的基因，而基因組文庫(kù)中含有該的基因，而基因組文庫(kù)中含有該植物的全部基因。植物的全部基因。(3)(3)在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子是在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子是RNARNA聚合酶識(shí)別并結(jié)聚合酶識(shí)別并結(jié)合的部位。若采用原核生物作為基因表達(dá)載體

34、的受體合的部位。若采用原核生物作為基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞，最常用的原核生物是大腸桿菌。細(xì)胞，最常用的原核生物是大腸桿菌。(4)(4)將目的基因通過(guò)基因槍法導(dǎo)入植物細(xì)胞時(shí)，常用的將目的基因通過(guò)基因槍法導(dǎo)入植物細(xì)胞時(shí)，常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有金粉和鎢粉顆粒。攜帶目的基因的金屬顆粒有金粉和鎢粉顆粒。答案：答案：(1)(1)人工合成生物材料人工合成生物材料( (其他合理答案亦可其他合理答案亦可) )(2)cDNA(2)cDNA文庫(kù)中只含有葉細(xì)胞已轉(zhuǎn)錄文庫(kù)中只含有葉細(xì)胞已轉(zhuǎn)錄( (或已表達(dá)或已表達(dá)) )的基因，的基因，而基因組文庫(kù)中含有該植物的全部基因而基因組文庫(kù)中含有該植物的全部基因( (其他合

35、理答案其他合理答案亦可亦可) )(3)RNA(3)RNA大腸桿菌大腸桿菌( (或細(xì)菌或細(xì)菌) )(4)(4)金粉鎢粉金粉鎢粉【方法技巧【方法技巧】“四步法四步法”解決基因工程操作程序題解決基因工程操作程序題第一步第一步“三辨三辨”：分辨限制酶的種類(lèi)、識(shí)別序列和切：分辨限制酶的種類(lèi)、識(shí)別序列和切割位點(diǎn)。割位點(diǎn)。第二步第二步“三找三找”：找出標(biāo)記基因、目的基因及其插入：找出標(biāo)記基因、目的基因及其插入位點(diǎn)。位點(diǎn)。第三步第三步“一析一析”：分析目的基因插入質(zhì)粒后是否破壞：分析目的基因插入質(zhì)粒后是否破壞了標(biāo)記基因。了標(biāo)記基因。第四步第四步“一理一理”：理清判斷目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)：理清判斷目的基因是否

36、導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法。一般用含有某種抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)受體胞的方法。一般用含有某種抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)受體菌，如果有兩種抗生素抗性基因，還需判斷用哪一種菌，如果有兩種抗生素抗性基因，還需判斷用哪一種抗生素來(lái)檢測(cè)?？股貋?lái)檢測(cè)。5.(20165.(2016天津高考天津高考) )人血清白蛋白人血清白蛋白(HSA)(HSA)具有重要的醫(yī)具有重要的醫(yī)用價(jià)值，只能從人血漿中制備。下圖是以基因工程技用價(jià)值，只能從人血漿中制備。下圖是以基因工程技術(shù)獲取重組術(shù)獲取重組HSA(rHSAHSA(rHSA) )的兩條途徑。的兩條途徑。(1)(1)為獲取為獲取HSAHSA基因，首先需采集人的血液，提取基因，首先需采集人的

37、血液，提取_合成總合成總cDNAcDNA，然后以，然后以cDNAcDNA為模板，采用為模板，采用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增技術(shù)擴(kuò)增HSAHSA基因。下圖中箭頭表示一條引物結(jié)合模板的位置及基因。下圖中箭頭表示一條引物結(jié)合模板的位置及擴(kuò)增方向，請(qǐng)用箭頭在方框內(nèi)標(biāo)出另一條引物的位置擴(kuò)增方向，請(qǐng)用箭頭在方框內(nèi)標(biāo)出另一條引物的位置及擴(kuò)增方向。及擴(kuò)增方向。(2)(2)啟動(dòng)子通常具有物種及組織特異性，構(gòu)建在水稻胚啟動(dòng)子通常具有物種及組織特異性，構(gòu)建在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)rHSArHSA的載體，需要選擇的啟動(dòng)子是的載體，需要選擇的啟動(dòng)子是_(_(填寫(xiě)字母，單選填寫(xiě)字母，單選) )。A.A.人血細(xì)胞

38、啟動(dòng)子人血細(xì)胞啟動(dòng)子B.B.水稻胚乳細(xì)胞啟動(dòng)子水稻胚乳細(xì)胞啟動(dòng)子C.C.大腸桿菌啟動(dòng)子大腸桿菌啟動(dòng)子D.D.農(nóng)桿菌啟動(dòng)子農(nóng)桿菌啟動(dòng)子(3)(3)利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過(guò)程中，需添加酚利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過(guò)程中，需添加酚類(lèi)物質(zhì)，其目的是類(lèi)物質(zhì)，其目的是_。(4)(4)人體合成的初始人體合成的初始HSAHSA多肽，需要經(jīng)過(guò)膜系統(tǒng)加工形多肽，需要經(jīng)過(guò)膜系統(tǒng)加工形成正確的空間結(jié)構(gòu)才能有活性。與途徑成正確的空間結(jié)構(gòu)才能有活性。與途徑相比，選擇相比，選擇途徑途徑獲取獲取rHSArHSA的優(yōu)勢(shì)是的優(yōu)勢(shì)是_。(5)(5)為證明為證明rHSArHSA具有醫(yī)用價(jià)值，須確認(rèn)具有醫(yī)用價(jià)值，須確認(rèn)rHSA

39、rHSA與與_的生物學(xué)功能一致。的生物學(xué)功能一致?！窘馕觥窘馕觥勘绢}主要考查基因工程的基本操作步驟和基本題主要考查基因工程的基本操作步驟和基因工程的應(yīng)用等相關(guān)知識(shí)。因工程的應(yīng)用等相關(guān)知識(shí)。(1)(1)合成總合成總cDNAcDNA需要提取細(xì)胞中的所有需要提取細(xì)胞中的所有mRNAmRNA，再通過(guò)逆，再通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程獲得。采用轉(zhuǎn)錄過(guò)程獲得。采用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增技術(shù)擴(kuò)增HSAHSA基因時(shí)，兩條引基因時(shí)，兩條引物分別與每條模板鏈的物分別與每條模板鏈的33端結(jié)合，擴(kuò)增的方向相反。端結(jié)合，擴(kuò)增的方向相反。(2)(2)因?yàn)閱?dòng)子通常具有物種及組織特異性，所以在水因?yàn)閱?dòng)子通常具有物種及組織特異性，所以在水

40、稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)rHSArHSA時(shí)，需要選擇水稻胚乳細(xì)時(shí)，需要選擇水稻胚乳細(xì)胞的啟動(dòng)子。胞的啟動(dòng)子。(3)(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過(guò)程中，酚類(lèi)物質(zhì)可以農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過(guò)程中，酚類(lèi)物質(zhì)可以吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，有利于目的基因的轉(zhuǎn)吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，有利于目的基因的轉(zhuǎn)移。移。(4)(4)水稻是具有生物膜系統(tǒng)的真核生物，水稻細(xì)胞能對(duì)水稻是具有生物膜系統(tǒng)的真核生物，水稻細(xì)胞能對(duì)初始初始rHSArHSA多肽進(jìn)行高效加工，而大腸桿菌是原核生物，多肽進(jìn)行高效加工，而大腸桿菌是原核生物，原核細(xì)胞中沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等具膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞原核細(xì)胞中沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾

41、基體等具膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器，不能對(duì)初始器，不能對(duì)初始rHSArHSA多肽進(jìn)行高效加工。多肽進(jìn)行高效加工。(5)(5)為證明為證明rHSArHSA具有醫(yī)用價(jià)值，須確認(rèn)具有醫(yī)用價(jià)值，須確認(rèn)rHSArHSA與天然的與天然的HSAHSA生物學(xué)功能一致。生物學(xué)功能一致。答案：答案：(1)(1)總總RNA(RNA(或或mRNA)mRNA)(2)B(2)B(3)(3)吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，有利于目的基因成吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化功轉(zhuǎn)化(4)(4)水稻是真核生物，具有膜系統(tǒng)，能對(duì)初始水稻是真核生物，具有膜系統(tǒng)，能對(duì)初始rHSArHSA多肽多肽進(jìn)行高效加工進(jìn)行高效加工(5)HSA(5

42、)HSA6.(20166.(2016全國(guó)卷全國(guó)卷)某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源DNADNA插入插入AmpAmpr r或或TetTetr r中會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活中會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活( (AmpAmpr r表示氨表示氨芐青霉素抗性基因，芐青霉素抗性基因，TetTetr r表示四環(huán)素抗性基因表示四環(huán)素抗性基因) )。有人。有人將此質(zhì)粒載體用將此質(zhì)粒載體用BamHBamH酶切后，與用酶切后，與用BamHBamH酶切獲得酶切獲得的目的基因混合，加入的目的基因混合，加入DNADNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng)，用得連接酶進(jìn)行連接反應(yīng)，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌，結(jié)果大腸桿菌有的未到的

43、混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌，結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種，分被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種，分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌?；卮鹣铝袉?wèn)題：目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌。回答下列問(wèn)題：(1)(1)質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件有有_(_(答出兩點(diǎn)即可答出兩點(diǎn)即可) )。而作為基因表達(dá)載體，除滿足上述基本條件外，還需而作為基因表達(dá)載體，除滿足上述基本條件外，還需具有啟動(dòng)子和終止子。具有啟動(dòng)子和終止子。(2)(2

44、)如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在上述如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基四種大腸桿菌細(xì)胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的，其原因是因的細(xì)胞是不能區(qū)分的，其原因是_；并且并且_和和_的細(xì)的細(xì)胞也是不能區(qū)分的，其原因是胞也是不能區(qū)分的，其原因是_。在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含。在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌單菌落，還有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌單菌落，還需使用含有需使用含有_的固體培養(yǎng)基。的固體培養(yǎng)基。(3)(3)基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，基因工程中，某

45、些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其其DNADNA復(fù)制所需的原料來(lái)自復(fù)制所需的原料來(lái)自_?！窘馕觥窘馕觥勘绢}考查基因工程的相關(guān)知識(shí)。本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)。(1)(1)質(zhì)粒被選用為基因工程的載體是因?yàn)椋壕哂幸粋€(gè)或質(zhì)粒被選用為基因工程的載體是因?yàn)椋壕哂幸粋€(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)；具有自我復(fù)制能力；帶有標(biāo)記基多個(gè)限制酶切點(diǎn)；具有自我復(fù)制能力；帶有標(biāo)記基因；對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)害。因；對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)害。(2)(2)未轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的細(xì)胞都不能在含有未轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的細(xì)胞都不能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，故這兩種不可區(qū)分。含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，故這兩種不可區(qū)分。含有質(zhì)粒載體和含有插入了目

46、的基因的重組質(zhì)粒的細(xì)胞有質(zhì)粒載體和含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的細(xì)胞在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上都能生長(zhǎng)，這兩種也不在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上都能生長(zhǎng)，這兩種也不可區(qū)分。因目的基因插入位點(diǎn)在四環(huán)素抗性基因上，可區(qū)分。因目的基因插入位點(diǎn)在四環(huán)素抗性基因上，四環(huán)素抗性基因被破壞，在獲得的單個(gè)菌落中各挑取四環(huán)素抗性基因被破壞，在獲得的單個(gè)菌落中各挑取少許分別接種到含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上，不能生長(zhǎng)的少許分別接種到含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上，不能生長(zhǎng)的為要篩選的菌落，即含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒為要篩選的菌落，即含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌。的大腸桿菌。(3)(3)噬菌體營(yíng)寄生生活，能利用宿主細(xì)胞內(nèi)的

47、原料和場(chǎng)噬菌體營(yíng)寄生生活，能利用宿主細(xì)胞內(nèi)的原料和場(chǎng)所進(jìn)行自身所進(jìn)行自身DNADNA的復(fù)制和蛋白質(zhì)的合成。的復(fù)制和蛋白質(zhì)的合成。答案：答案：(1)(1)能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因(2)(2)二者均不含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上二者均不含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均不生長(zhǎng)含有質(zhì)粒載體含有插入了目的基因的重均不生長(zhǎng)含有質(zhì)粒載體含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒組質(zhì)粒( (或含有重組質(zhì)?；蚝兄亟M質(zhì)粒) )二者均含有氨芐青霉素抗二者均含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)四環(huán)素性基因，在該培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)四環(huán)素(3)(3)受體細(xì)胞受體細(xì)胞考點(diǎn)二考點(diǎn)二細(xì)胞工程細(xì)胞

48、工程【知識(shí)【知識(shí)方法方法】1.1.細(xì)胞工程概念的?？键c(diǎn)：細(xì)胞工程概念的?？键c(diǎn)：(1)(1)定向性：按照人的意愿。定向性：按照人的意愿。(2)(2)目的：改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)和獲得細(xì)胞產(chǎn)品。目的：改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)和獲得細(xì)胞產(chǎn)品。2.2.植物組織培養(yǎng)常考點(diǎn)：植物組織培養(yǎng)?？键c(diǎn)：(1)(1)條件：無(wú)菌、離體。條件：無(wú)菌、離體。(2)(2)培養(yǎng)基組成：無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)、有機(jī)營(yíng)養(yǎng)、激素、瓊脂。培養(yǎng)基組成：無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)、有機(jī)營(yíng)養(yǎng)、激素、瓊脂。3.3.植物體細(xì)胞雜交?？键c(diǎn)：植物體細(xì)胞雜交?？键c(diǎn)：(1)(1)制備原生質(zhì)體：用纖維素酶和果膠酶處理。制備原生質(zhì)體：用纖維素酶和果膠酶處理。(2)(2)原生質(zhì)體融合：離心、振

49、動(dòng)、電激、聚乙二醇。原生質(zhì)體融合：離心、振動(dòng)、電激、聚乙二醇。(3)(3)雜種細(xì)胞形成的標(biāo)志：新細(xì)胞壁的形成。雜種細(xì)胞形成的標(biāo)志：新細(xì)胞壁的形成。4.4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)?？键c(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)?？键c(diǎn)：(1)(1)條件。條件。無(wú)菌、無(wú)毒；無(wú)菌、無(wú)毒；特殊營(yíng)養(yǎng)：血清、血漿；特殊營(yíng)養(yǎng)：血清、血漿；適宜的適宜的溫度和溫度和pHpH；氣體環(huán)境：含氣體環(huán)境：含95%95%的空氣加的空氣加5%CO5%CO2 2的混合的混合氣體。氣體。(2)(2)兩大階段：原代培養(yǎng)兩大階段：原代培養(yǎng)細(xì)胞株；傳代培養(yǎng)細(xì)胞株；傳代培養(yǎng)細(xì)胞系。細(xì)胞系。5.5.動(dòng)物細(xì)胞核移植?？键c(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞核移植常考點(diǎn)：(1)(1)受體細(xì)胞：去核的卵母細(xì)

50、胞。受體細(xì)胞：去核的卵母細(xì)胞。(2)(2)原因：原因：營(yíng)養(yǎng)豐富；營(yíng)養(yǎng)豐富；體積大，易操作；體積大，易操作；含有刺含有刺激細(xì)胞核恢復(fù)分裂能力的物質(zhì)。激細(xì)胞核恢復(fù)分裂能力的物質(zhì)。6.6.核移植獲得的克隆動(dòng)物與提供細(xì)胞核的親本性狀可核移植獲得的克隆動(dòng)物與提供細(xì)胞核的親本性狀可能不同：能不同：(1)(1)克隆動(dòng)物遺傳物質(zhì)來(lái)自?xún)蓚€(gè)親本?？寺?dòng)物遺傳物質(zhì)來(lái)自?xún)蓚€(gè)親本。(2)(2)發(fā)育過(guò)程中可能發(fā)生基因突變或染色體變異。發(fā)育過(guò)程中可能發(fā)生基因突變或染色體變異。(3)(3)外界環(huán)境條件可能引起不遺傳的變異。外界環(huán)境條件可能引起不遺傳的變異。7.7.制備單克隆抗體?？键c(diǎn)：制備單克隆抗體?？键c(diǎn)：(1)3(1)3種

51、細(xì)胞特點(diǎn)不同。種細(xì)胞特點(diǎn)不同。免疫后的免疫后的B B淋巴細(xì)胞：能分泌抗體，不能大量增殖。淋巴細(xì)胞：能分泌抗體，不能大量增殖。骨髓瘤細(xì)胞：能大量增殖，不能分泌抗體。骨髓瘤細(xì)胞：能大量增殖，不能分泌抗體。雜交瘤細(xì)胞：既能分泌抗體，又能大量增殖。雜交瘤細(xì)胞：既能分泌抗體，又能大量增殖。(2)2(2)2次篩選目的不同。次篩選目的不同。第第1 1次：獲得雜種細(xì)胞。次：獲得雜種細(xì)胞。第第2 2次：獲得能分泌所需特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。次：獲得能分泌所需特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞?！疽族e(cuò)【易錯(cuò)警示警示】1.1.制備人工種子需要植物組織培養(yǎng)到叢芽或胚狀體階制備人工種子需要植物組織培養(yǎng)到叢芽或胚狀體階段。段。2.2

52、.正確認(rèn)識(shí)正確認(rèn)識(shí)3 3類(lèi)細(xì)胞的來(lái)源：類(lèi)細(xì)胞的來(lái)源：(1)(1)雜種細(xì)胞：植物體細(xì)胞雜交。雜種細(xì)胞：植物體細(xì)胞雜交。(2)(2)重組細(xì)胞：核移植。重組細(xì)胞：核移植。(3)(3)雜交細(xì)胞：動(dòng)物細(xì)胞融合。雜交細(xì)胞：動(dòng)物細(xì)胞融合。3.3.原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別：是否進(jìn)行了分瓶培養(yǎng)。原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別：是否進(jìn)行了分瓶培養(yǎng)。4.4.核移植技術(shù)獲得的動(dòng)物與供核動(dòng)物的性狀并不完全核移植技術(shù)獲得的動(dòng)物與供核動(dòng)物的性狀并不完全相同。相同。5.5.動(dòng)植物的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)都需要在無(wú)菌條件下動(dòng)植物的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)都需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行。進(jìn)行。6.6.植物組織培養(yǎng)中添加蔗糖的目的是提供營(yíng)養(yǎng)和調(diào)節(jié)植物組織

53、培養(yǎng)中添加蔗糖的目的是提供營(yíng)養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓。滲透壓?！镜淅镜淅? 2】(2016(2016全國(guó)卷全國(guó)卷T40)T40)下圖表示通過(guò)核移下圖表示通過(guò)核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物( (二倍體二倍體) )的流程。的流程。回答下列問(wèn)題：回答下列問(wèn)題：(1)(1)圖中圖中A A表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為2n2n，則其性染，則其性染色體的組成可為色體的組成可為_(kāi)。過(guò)程。過(guò)程表示去除細(xì)胞表示去除細(xì)胞核，該過(guò)程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行，核，該過(guò)程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行，去核時(shí)常采用去核時(shí)常采用_的方法。的方法。代表的過(guò)程是代

54、表的過(guò)程是_。(2)(2)經(jīng)過(guò)多次傳代后，供體細(xì)胞中經(jīng)過(guò)多次傳代后，供體細(xì)胞中_的穩(wěn)定性的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此，選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。會(huì)降低。因此，選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。(3)(3)若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同，從若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是_。(4)(4)與克隆羊與克隆羊“多莉多莉”培育成功一樣，其他克隆動(dòng)物的培育成功一樣，其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了成功獲得也證明了_。答案：答案：(1)XX(1)XX或或XYXY顯微操作胚胎移植顯微操作胚胎移植(2)(2)遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)(3)(3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳

55、物質(zhì)會(huì)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響(4)(4)動(dòng)物已分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性動(dòng)物已分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性【解題技法【解題技法】流程圖分析法流程圖分析法1.1.點(diǎn)睛：點(diǎn)睛：(1)(1)首先抓住流程圖的主體，明確流程圖的關(guān)鍵點(diǎn)。首先抓住流程圖的主體，明確流程圖的關(guān)鍵點(diǎn)。(2)(2)結(jié)合題干中的文字?jǐn)⑹?，逐一分析各個(gè)環(huán)節(jié)，完成結(jié)合題干中的文字?jǐn)⑹?，逐一分析各個(gè)環(huán)節(jié)，完成圖文轉(zhuǎn)換，獲取相應(yīng)的步驟信息。圖文轉(zhuǎn)換，獲取相應(yīng)的步驟信息。2.2.答題分析：答題分析：(1)(1)提供體細(xì)胞的供體可能為雌性，也可能為雄性，提供體細(xì)胞的供體可能為雌性，

56、也可能為雄性，因此圖中因此圖中A(A(正常細(xì)胞核正常細(xì)胞核) )的性染色體組成為的性染色體組成為_(kāi)。常采用常采用_去核法來(lái)去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核。去核法來(lái)去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核。過(guò)程表示將早期胚胎移入受體，其過(guò)程為過(guò)程表示將早期胚胎移入受體，其過(guò)程為_(kāi)。XXXX或或XYXY顯微操作顯微操作胚胎移植胚胎移植(2)(2)取供體動(dòng)物的體細(xì)胞培養(yǎng)，一般選用傳代取供體動(dòng)物的體細(xì)胞培養(yǎng)，一般選用傳代1010代以?xún)?nèi)代以?xún)?nèi)的細(xì)胞，因?yàn)榈募?xì)胞，因?yàn)?010代以?xún)?nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍代以?xún)?nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型，保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。超過(guò)體核型，保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。超過(guò)1010代代繼

57、續(xù)繼續(xù)培養(yǎng)，則其培養(yǎng)，則其_(_(或核型或核型) )的的穩(wěn)定性會(huì)降低。穩(wěn)定性會(huì)降低。遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)(3)(3)克隆動(dòng)物的細(xì)胞核基因來(lái)自供體，因此大部分性狀克隆動(dòng)物的細(xì)胞核基因來(lái)自供體，因此大部分性狀與供體相同，但細(xì)胞質(zhì)基因與供體相同，但細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)自受體來(lái)自受體( (或提供卵母細(xì)胞或提供卵母細(xì)胞的個(gè)體的個(gè)體) )，即，即_會(huì)對(duì)克隆會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響，這就決定了克隆動(dòng)物的動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響，這就決定了克隆動(dòng)物的性狀與性狀與供體不完全相同。供體不完全相同。受體細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)受體細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)(4)(4)克隆動(dòng)物的培育采用的是核移植技術(shù)克隆動(dòng)物的培育采用的是核移植技術(shù)，

58、核移植技術(shù)，核移植技術(shù)的原理是：的原理是：_。已經(jīng)分化的動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性已經(jīng)分化的動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性【母題探究【母題探究】借題猜押其他命題點(diǎn)借題猜押其他命題點(diǎn)押題點(diǎn)押題點(diǎn)1 1：克?。嚎寺?dòng)物用到的技術(shù)手段有哪些？動(dòng)物用到的技術(shù)手段有哪些？_。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植胚胎移植押題點(diǎn)押題點(diǎn)2 2：動(dòng)物細(xì)胞核移植的：動(dòng)物細(xì)胞核移植的3 3個(gè)?？键c(diǎn)：個(gè)常考點(diǎn)：(1)(1)該過(guò)程伴該過(guò)程伴有兩個(gè)細(xì)胞的融合，體現(xiàn)了細(xì)胞膜的有兩個(gè)細(xì)胞的融合，體現(xiàn)了細(xì)胞膜的_。(2)(2)重組細(xì)胞發(fā)育成新個(gè)體體現(xiàn)了重組細(xì)胞發(fā)育成新個(gè)體體現(xiàn)了_

59、。(3)(3)利用核移植技術(shù)獲得的動(dòng)物與供核動(dòng)物性狀利用核移植技術(shù)獲得的動(dòng)物與供核動(dòng)物性狀_(_(填填“完全完全”或或“不完全不完全”) )相同。相同。流動(dòng)性流動(dòng)性動(dòng)物體細(xì)胞核的全動(dòng)物體細(xì)胞核的全能性能性不完不完全全【題組過(guò)關(guān)【題組過(guò)關(guān)】1.(20161.(2016湖北名校聯(lián)考湖北名校聯(lián)考) )眼蟲(chóng)是一種含有葉綠體的原眼蟲(chóng)是一種含有葉綠體的原生動(dòng)物。據(jù)此，某同學(xué)認(rèn)為動(dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞在理生動(dòng)物。據(jù)此，某同學(xué)認(rèn)為動(dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞在理論上是可以實(shí)現(xiàn)雜交的。他設(shè)計(jì)了一個(gè)具體的實(shí)驗(yàn)方論上是可以實(shí)現(xiàn)雜交的。他設(shè)計(jì)了一個(gè)具體的實(shí)驗(yàn)方案如圖：案如圖：請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：(1)(1)實(shí)驗(yàn)

60、方案中，步驟實(shí)驗(yàn)方案中，步驟A A為除去細(xì)胞壁得到為除去細(xì)胞壁得到_，常用的除去細(xì)胞壁的酶為常用的除去細(xì)胞壁的酶為_(kāi)。(2)(2)步驟步驟B B為為_(kāi)，受體動(dòng)物必須接受，受體動(dòng)物必須接受_處理，以確保其生理狀態(tài)適合接受胚胎。處理，以確保其生理狀態(tài)適合接受胚胎。(3)(3)誘導(dǎo)融合可以采用一些物理方法，如誘導(dǎo)融合可以采用一些物理方法，如_等，等，也可以使用化學(xué)藥品也可以使用化學(xué)藥品_進(jìn)行誘導(dǎo)。進(jìn)行誘導(dǎo)。(4)(4)進(jìn)行動(dòng)物胚胎細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要用進(jìn)行動(dòng)物胚胎細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要用_將將組織塊或貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞。組織塊或貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞。(5)(5)誘導(dǎo)植物材料形成愈傷組織的兩類(lèi)

61、關(guān)鍵激素是誘導(dǎo)植物材料形成愈傷組織的兩類(lèi)關(guān)鍵激素是_?！窘馕觥窘馕觥?1)(1)植物細(xì)胞除去細(xì)胞壁得到原生質(zhì)體。依據(jù)植物細(xì)胞除去細(xì)胞壁得到原生質(zhì)體。依據(jù)植物細(xì)胞壁的成分，常用纖維素酶和果膠酶除去細(xì)胞植物細(xì)胞壁的成分，常用纖維素酶和果膠酶除去細(xì)胞壁。壁。(2)(2)步驟步驟B B為胚胎移植。要確保受體動(dòng)物生理狀態(tài)適合為胚胎移植。要確保受體動(dòng)物生理狀態(tài)適合接受胚胎，必須進(jìn)行同期發(fā)情處理。接受胚胎，必須進(jìn)行同期發(fā)情處理。(3)(3)誘導(dǎo)融合的物理方法有離心、振動(dòng)和電激，化學(xué)藥誘導(dǎo)融合的物理方法有離心、振動(dòng)和電激，化學(xué)藥品有聚乙二醇。品有聚乙二醇。(4)(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使

62、細(xì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散開(kāi)。胞分散開(kāi)。(5)(5)誘導(dǎo)植物材料形成愈傷組織的兩類(lèi)關(guān)鍵激素是生長(zhǎng)誘導(dǎo)植物材料形成愈傷組織的兩類(lèi)關(guān)鍵激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。素和細(xì)胞分裂素。答案：答案：(1)(1)原生質(zhì)體纖維素酶和果膠酶原生質(zhì)體纖維素酶和果膠酶(2)(2)胚胎移植同期發(fā)情胚胎移植同期發(fā)情(3)(3)離心、振動(dòng)和電激聚乙二醇離心、振動(dòng)和電激聚乙二醇(4)(4)胰蛋白酶或膠原蛋白酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶(5)(5)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素2.(2.(新題預(yù)測(cè)新題預(yù)測(cè)) )科學(xué)家通過(guò)誘導(dǎo)黑鼠體細(xì)胞去分化獲得科學(xué)家通過(guò)誘導(dǎo)黑鼠體細(xì)胞去分化獲得誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞誘導(dǎo)性多

63、能干細(xì)胞( (iPSiPS) )，繼而利用，繼而利用iPSiPS細(xì)胞培育出與細(xì)胞培育出與黑鼠遺傳特性相同的克隆鼠，流程如下：黑鼠遺傳特性相同的克隆鼠，流程如下：(1)(1)從黑鼠體內(nèi)獲得體細(xì)胞后，對(duì)其進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱(chēng)從黑鼠體內(nèi)獲得體細(xì)胞后，對(duì)其進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱(chēng)為為_(kāi)，培養(yǎng)的細(xì)胞在貼壁生長(zhǎng)至鋪滿培養(yǎng)，培養(yǎng)的細(xì)胞在貼壁生長(zhǎng)至鋪滿培養(yǎng)皿底時(shí)停止分裂，這種現(xiàn)象稱(chēng)為皿底時(shí)停止分裂，這種現(xiàn)象稱(chēng)為_(kāi)。(2)(2)圖中圖中2-2-細(xì)胞胚胎可用細(xì)胞胚胎可用_方法從灰鼠輸卵管方法從灰鼠輸卵管內(nèi)獲得，也可從灰鼠體內(nèi)取出卵子，通過(guò)內(nèi)獲得，也可從灰鼠體內(nèi)取出卵子，通過(guò)_后后進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)獲得。進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)獲得。(

64、3)(3)圖中重組囊胚通過(guò)圖中重組囊胚通過(guò)_技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)繼技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，暫不移入的胚胎可使用續(xù)發(fā)育，暫不移入的胚胎可使用_方法保存。方法保存。(4)(4)小鼠胚胎干細(xì)胞小鼠胚胎干細(xì)胞(ES)(ES)可由囊胚的可由囊胚的_分離分離培養(yǎng)獲得，培養(yǎng)獲得，iPSiPS與與ESES細(xì)胞同樣具有細(xì)胞同樣具有_，有，有望在對(duì)人類(lèi)望在對(duì)人類(lèi)iPSiPS細(xì)胞進(jìn)行定向誘導(dǎo)分化后用于疾病的細(xì)細(xì)胞進(jìn)行定向誘導(dǎo)分化后用于疾病的細(xì)胞治療。胞治療?！窘馕觥窘馕觥?1)(1)分析流程圖可知，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，對(duì)其分析流程圖可知，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，對(duì)其進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱(chēng)為原代培養(yǎng)，培養(yǎng)的細(xì)胞在貼壁生進(jìn)行的初次培養(yǎng)

65、稱(chēng)為原代培養(yǎng)，培養(yǎng)的細(xì)胞在貼壁生長(zhǎng)至鋪滿培養(yǎng)皿底時(shí)停止分裂，這種現(xiàn)象稱(chēng)為接觸抑長(zhǎng)至鋪滿培養(yǎng)皿底時(shí)停止分裂，這種現(xiàn)象稱(chēng)為接觸抑制。制。(2)(2)圖中圖中2-2-細(xì)胞胚胎可用沖卵方法從灰鼠輸卵管內(nèi)獲得，細(xì)胞胚胎可用沖卵方法從灰鼠輸卵管內(nèi)獲得，也可從灰鼠體內(nèi)取出卵子，通過(guò)體外受精后進(jìn)行早期也可從灰鼠體內(nèi)取出卵子，通過(guò)體外受精后進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)獲得。胚胎培養(yǎng)獲得。(3)(3)重組囊胚通過(guò)胚胎移植技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)重組囊胚通過(guò)胚胎移植技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，暫不移入的胚胎可使用超低溫冷凍方法保存。育，暫不移入的胚胎可使用超低溫冷凍方法保存。(4)(4)小鼠胚胎干細(xì)胞小鼠胚胎干細(xì)胞(ES)(E

66、S)可由囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞分離可由囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞分離培養(yǎng)獲得，培養(yǎng)獲得，iPSiPS與與ESES細(xì)胞同樣具有發(fā)育全能性。細(xì)胞同樣具有發(fā)育全能性。答案：答案：(1)(1)原代培養(yǎng)接觸抑制原代培養(yǎng)接觸抑制(2)(2)沖卵體外受精沖卵體外受精(3)(3)胚胎移植超低溫冷凍胚胎移植超低溫冷凍(4)(4)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞發(fā)育全能性?xún)?nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞發(fā)育全能性【知識(shí)總結(jié)【知識(shí)總結(jié)】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(1)(1)選用幼齡動(dòng)物組織或胚胎進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的原因：幼選用幼齡動(dòng)物組織或胚胎進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的原因：幼齡動(dòng)物組織或胚胎的細(xì)胞分化程度低，增殖能力很強(qiáng)，齡動(dòng)物組織或胚胎的細(xì)胞分化程度低，增殖能力很強(qiáng)，更易于培養(yǎng)。更易于培養(yǎng)。(2)(2)不選用胃蛋白酶分散細(xì)胞的原因：多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培不選用胃蛋白酶分散細(xì)胞的原因：多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜養(yǎng)的適宜pHpH為為7.27.27.47.4，此環(huán)境下胃蛋白酶沒(méi)有活性，此環(huán)境下胃蛋白酶沒(méi)有活性，而胰蛋白酶活性較高。而胰蛋白酶活性較高。(3)(3)分散成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)的目的：一方面是消除接觸抑分散成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)的目的：一方面是消除接觸抑制，使細(xì)胞容易與周?chē)呐囵B(yǎng)液進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)和代謝廢