（新課標Ⅱ）2019版高考生物一輪復習 專題24 傳統(tǒng)發(fā)酵技術與微生物的應用課件.ppt

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1、第十單元生物技術實踐 專題24 傳統(tǒng)發(fā)酵技術與微生物的應用,高考生物 (課標專用),1.(2017課標,37,15分)豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素,某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻,再將兩者置于適宜條件下進行發(fā)酵,并在32 h內定期取樣觀測發(fā)酵效果。回答下列問題: (1)該實驗的自變量是、。 (2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好,說明該發(fā)酵菌是。 (3)如果在實驗后,發(fā)現(xiàn)32 h內的發(fā)酵效果越來越好,且隨發(fā)酵時間呈直線上升關系,則無法確定發(fā)酵的最佳時間;若要確定最佳發(fā)酵時間,還需要做的事情是。,考點1傳統(tǒng)發(fā)酵

2、技術,五年高考,(4)從大豆到豆豉,大豆中的成分會發(fā)生一定的變化,其中,蛋白質轉變?yōu)?脂肪轉變?yōu)椤?答案(1)菌種發(fā)酵時間(2)好氧菌(3)延長發(fā)酵時間,觀測發(fā)酵效果,最好的發(fā)酵效果所對應的時間即為最佳發(fā)酵時間(4)氨基酸和肽脂肪酸和甘油,解析本題考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術的相關知識。(1)根據(jù)題中“甲、乙兩菌種”和“32 h內定期取樣觀測發(fā)酵效果”可確定該實驗的自變量是菌種類型和發(fā)酵時間。(2)發(fā)酵容器底層缺氧,上層氧氣相對充足,上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好,說明該發(fā)酵菌屬于好氧菌。(3)由于32 h內發(fā)酵效果隨發(fā)酵時間呈直線上升,所以若要確定最佳發(fā)酵時間,應該繼續(xù)延長發(fā)酵時間,觀測發(fā)酵效果,最好發(fā)酵

3、效果所對應的時間即為最佳發(fā)酵時間。(4)發(fā)酵過程中微生物會產生多種蛋白酶和脂肪酶,蛋白酶可使蛋白質分解為小分子的肽和氨基酸,脂肪酶可使脂肪分解為甘油和脂肪酸。,知識歸納關于傳統(tǒng)發(fā)酵技術的3個誤區(qū): (1)誤認為微生物培養(yǎng)基中都需有機碳源、氮源,自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)不需加有機碳源、固氮菌的培養(yǎng)不需加氮源。 (2)誤認為泡菜制作過程中乳酸和亞硝酸鹽的含量都是先增加后減少,在泡菜制作過程中乳酸含量先增加后保持穩(wěn)定。 (3)誤認為果酒、果醋制作過程中都需要無氧條件,果醋制作過程中利用的是醋酸菌的有氧呼吸,因此需要有氧條件。,2.(2016課標,39,15分,0.74)蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的。

4、回答下列問題: (1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程和是蘋果醋生產的第一階段,在酵母菌細胞的中進行,其產物乙醇與試劑反應呈現(xiàn)灰綠色,這一反應可用于乙醇的檢驗;過程在酵母菌細胞的中進行。與無氧條件相比,在有氧條件下,酵母菌的增殖速度。 (2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產生的乙醇轉變?yōu)榇姿岬倪^程,根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型,該過程需要在條件下才能完成。 (3)在生產過程中,第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同,第一階段的溫度(填“低于”或“高于”)第二階段的。 (4)醋酸桿菌屬于核生物,其細胞結構中(填“含有”或“不含有”)線粒體。,答案(1)細胞質基質重鉻酸鉀線粒體快(2)有氧(

5、3)低于(4)原不含有,解析(1)圖中過程和表示酵母菌無氧呼吸的第一、二階段,發(fā)生場所是細胞質基質;乙醇可在酸性條件下與重鉻酸鉀試劑發(fā)生顏色反應;過程表示有氧呼吸的第二、三階段,發(fā)生在線粒體中;與無氧呼吸相比,有氧呼吸過程釋放的能量多,所以在有氧條件下酵母菌的繁殖速度較快。(2)醋酸桿菌是好氧菌,所以乙醇轉變?yōu)榇姿岬倪^程需要在有氧條件下才能完成。(3)酵母菌和醋酸桿菌的最適生長溫度分別是 20 和3035 。(4)醋酸桿菌屬于細菌,是原核生物,原核細胞中不含有線粒體。,解題關鍵判斷出圖中所代表的過程分別為有氧呼吸和無氧呼吸的第一階段、無氧呼吸第二階段和有氧呼吸第二、三階段是解題關鍵。,3.(2

6、016天津理綜,10,12分)天津獨流老醋歷史悠久、獨具風味,其生產工藝流程如下圖。 淀粉類 (1)在糖化階段添加酶制劑需要控制反應溫度,這是因為酶。 (2)在酒精發(fā)酵階段,需添加酵母菌。在操作過程中,發(fā)酵罐先通氣,后密閉。通氣能提高的數(shù)量,有利于密閉時獲得更多的酒精產物。 (3)在醋酸發(fā)酵階段,獨流老醋采用獨特的分層固體發(fā)酵法,發(fā)酵30天。工藝如下。,發(fā)酵過程中,定期取樣測定醋酸桿菌密度變化,趨勢如圖。據(jù)圖分析,與顛倒前相比,B層醋酸桿菌在顛倒后密度變化的特點是,由此推測,影響醋酸桿菌密度變化的主要環(huán)境因素是。 乳酸含量高是獨流老醋風味獨特的重要成因。發(fā)酵過程中,發(fā)酵缸中層的醋醅有利于乳酸菌

7、繁殖,積累乳酸。 成熟醋醅中乳酸菌的種類明顯減少,主要原因是發(fā)酵后期營養(yǎng)物質消耗等環(huán)境因素的改變,加劇了不同種類乳酸菌的,淘汰了部分乳酸菌種類。,答案(1)在最適溫度條件下催化能力最強 (2)酵母菌 (3)先快速增長后趨于穩(wěn)定氧氣、營養(yǎng)物質、pH顛倒前的B層和顛倒后的A(或不翻動,或下)種間競爭(或競爭),解析(1)因酶在最適溫度下的催化能力最強,故發(fā)酵過程中需控制好反應溫度。(2)酵母菌是兼性厭氧型微生物,在有氧條件下分解有機物釋放能量多,繁殖快。(3)曲線圖顯示,與翻動前相比,B層在翻動后醋酸桿菌密度先快速增加而后趨于穩(wěn)定,對比翻動前后B層醋酸桿菌所處環(huán)境條件知,影響醋酸桿菌密度變化的主要

8、環(huán)境因素有氧氣濃度、pH及營養(yǎng)物質含量等。乳酸菌是厭氧型微生物,處于發(fā)酵缸下層的醋醅有利于乳酸菌發(fā)酵產生乳酸。隨著發(fā)酵時間的推移,環(huán)境中營養(yǎng)物質減少,代謝廢物增多,微生物生存條件惡劣,不同種乳酸菌間的競爭加劇,部分菌種因不適應環(huán)境而被淘汰。,審題方法解答本題的關鍵是理解獨流老醋的分層固體發(fā)酵的原理為有氧與無氧環(huán)境的更替。,4.(2015廣東理綜,29,16分)泡菜是我國的傳統(tǒng)食品之一,但制作過程中產生的亞硝酸鹽對人體健康有潛在危害。某興趣小組準備參加“科技創(chuàng)新大賽”,查閱資料得到圖。 (1)制作泡菜時,泡菜壇一般用水密封,目的是。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產物有。 (2)據(jù)圖,與第3天相比,第8天后

9、的泡菜更適于食用,因為后者;pH呈下降趨勢,原因是。,(3)該小組得到一株“優(yōu)選”乳酸菌(亞硝酸鹽還原酶活力比普通乳酸菌高5倍),擬參照資料的實驗方案和食鹽濃度(4%10%),探究與普通乳酸菌相比用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜過程中亞硝酸鹽含量的高低,并確定其最適條件。請你設計一個實驗結果記錄表,并推測實驗結論。,答案(1)創(chuàng)造無氧環(huán)境丙酮酸、H、ATP (2)亞硝酸鹽含量已接近最低水平乳酸積累 (3)結果記錄表 亞硝酸鹽含量(單位:mg/kg),注:其他合理答案酌情給分。 推測實驗結論: 用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜,亞硝酸鹽含量更低 最適條件是亞硝酸鹽含量最低時的食鹽濃度和發(fā)酵時間,解析(1)由于乳

10、酸菌是厭氧細菌,制作泡菜時,泡菜壇一般用水密封,目的是隔絕空氣,創(chuàng)造無氧環(huán)境。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產物是丙酮酸、H和ATP。(2)析圖可知,8天后的泡菜中亞硝酸鹽含量低,更適于食用。制作泡菜過程中,由于乳酸的積累,pH呈下降趨勢。(3)該實驗的目的是比較“優(yōu)選”乳酸菌和普通乳酸菌在制作泡菜過程中亞硝酸鹽含量的高低,并確定最適條件,故表格的設計要體現(xiàn)不同時間不同食鹽濃度下兩種乳酸菌的亞硝酸鹽含量的差異。實驗結論應是優(yōu)選乳酸菌制作的泡菜中亞硝酸鹽含量更低,并確定亞硝酸鹽含量最低時的食鹽濃度和發(fā)酵時間。,方法技巧設計實驗結果記錄表時注意將自變量、實驗對象和發(fā)酵時間設計在一個表格中。,5.(2017江

11、蘇單科,10,2分)下列關于“腐乳的制作”實驗,敘述正確的是() A.控制發(fā)酵溫度的主要目的是腐乳調味 B.腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用 C.毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉 D.成品腐乳表面的粘性物質主要由細菌產生,以下為教師用書專用,答案B本題考查腐乳制作的相關知識?？刂瓢l(fā)酵溫度的主要目的是使毛霉等微生物正常生長增殖,A錯誤;腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐和調味作用,B 正確;毛霉等微生物可分泌蛋白酶和脂肪酶,催化豆腐中的蛋白質水解為小分子肽和氨基酸,催化脂肪水解為脂肪酸和甘油,C 錯誤;成品腐乳表面的粘性物質主要由毛霉產生,D 錯誤。,6.(2017江蘇單科,25,3分)如圖

12、是探究果酒與果醋發(fā)酵的裝置示意圖。下列相關敘述正確的是(多選)(),A.改變通入氣體種類,可以研究呼吸作用類型對發(fā)酵的影響 B.果酒發(fā)酵中期通入氮氣,酵母菌將從有氧呼吸轉變?yōu)闊o氧呼吸 C.果醋的發(fā)酵周期與實驗設定的溫度密切相關 D.氣體入口與氣體出口可以交換使用,答案ABC本題主要考查果酒和果醋制作的相關知識。果酒和果醋發(fā)酵所利用的菌種分別是酵母菌、醋酸菌,其中酵母菌屬于兼性厭氧菌,而醋酸菌為需氧菌,因此改變通入氣體種類,可研究呼吸作用類型對發(fā)酵的影響,A正確;果酒發(fā)酵中期通入氮氣后,酵母菌可從有氧呼吸轉變?yōu)闊o氧呼吸,B正確;醋酸菌的最適生長溫度為3035 ,溫度過低會抑制酶活性,從而抑制果醋

13、的發(fā)酵周期,C正確;圖中的氣體入口與氣體出口不可以交換使用,因為與氣體入口相連的導管需要插入發(fā)酵瓶的底部,D錯誤。,7.(2016江蘇單科,7,2分)下列關于中學“腐乳的制作”實驗,敘述正確的是() A.加鹽主要是為了調節(jié)水分,利于毛霉生長 B.加料酒主要是為了滅菌,避免腐敗變質 C.發(fā)酵過程中起主要作用的是乳酸桿菌 D.實驗室制作的腐乳不宜直接食用,答案D加鹽主要是為了調節(jié)水分,同時也能抑制微生物的生長,A錯誤;加料酒可以抑制微生物的生長,同時能使腐乳具有獨特的香味,并非滅菌,B錯誤;發(fā)酵過程中起主要作用的是毛霉,C錯誤;實驗室制作的腐乳,未經(jīng)嚴格檢測,不宜直接食用,D正確。,知識拓展毛霉、

14、酵母菌、蘑菇等屬于真菌。,8.(2015江蘇單科,24,3分)如圖為蘋果酒的發(fā)酵裝置示意圖,下列敘述錯誤的是(多選)() A.發(fā)酵過程中酒精的產生速率越來越快 B.集氣管中的氣體是酵母菌無氧呼吸產生的CO2 C.發(fā)酵過程中酵母種群呈“J”型增長 D.若發(fā)酵液表面出現(xiàn)菌膜,最可能原因是發(fā)酵瓶漏氣,答案ABC本題主要考查果酒發(fā)酵裝置分析等相關知識。隨著發(fā)酵時間延長,酒精積累量越來越多,由于過高濃度酒精對酵母菌發(fā)酵起抑制作用,所以發(fā)酵后期酒精產生速率越來越慢,A錯誤;酵母菌發(fā)酵瓶需留1/3空間,有少量空氣存在,因此集氣管中的CO2氣體由有氧呼吸和無氧呼吸產生,B錯誤;發(fā)酵過程中酵母菌受原料、代謝產物

15、影響,其種群呈“S”型增長,C錯誤;發(fā)酵液表面出現(xiàn)菌膜,應主要為醋酸桿菌,醋酸桿菌為好氧菌,因此可推測出現(xiàn)的原因是發(fā)酵瓶漏氣,D正確。,9.(2015江蘇單科,17,2分)關于“腐乳的制作”實驗,下列敘述錯誤的是() A.將腐乳坯堆積起來會導致堆內溫度升高,影響毛霉生長 B.腐乳坯若被細菌污染,則腐乳坯表面會出現(xiàn)黏性物 C.勤向腐乳坯表面噴水,有利于毛霉菌絲的生長 D.裝壇階段加入料酒,可有效防止雜菌污染,答案C本題考查腐乳制作的相關知識。毛霉生長需要適宜的溫度(范圍是1518 )和濕度,將腐乳坯堆積起來時會因毛霉等的呼吸作用釋放能量而使堆內溫度升高,影響了毛霉生長,勤向腐乳坯表面噴水,會改變

16、腐乳坯的濕度,又會導致雜菌污染,不利于毛霉菌絲的生長,故A正確、C錯誤;腐乳坯若被細菌污染,細菌會在腐乳坯上進行代謝,產生黏性物,B正確;裝壇階段加入料酒,不僅可以調味,還能有效防止雜菌污染,D正確。,10.(2014廣東理綜,4,4分)下列敘述錯誤的是() A.醋酸菌在無氧條件下利用乙醇產生醋酸 B.酵母菌在無氧條件下利用葡萄汁產生酒精 C.泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵 D.腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶,答案A醋酸菌是一種好氧菌,故A錯誤;酵母菌在無氧條件下可進行酒精發(fā)酵,B正確;泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵原理,C正確;腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶的分解作用

17、,D正確。,11.(2013江蘇單科,14,2分)某研究性學習小組以櫻桃番茄為材料進行果酒、果醋發(fā)酵實驗。下列相關敘述正確的是() A.酵母菌是嗜溫菌,所以果酒發(fā)酵所需的最適溫度較高 B.先供氧進行果醋發(fā)酵,然后隔絕空氣進行果酒發(fā)酵 C.與人工接種的發(fā)酵相比,自然發(fā)酵獲得的產品品質更好 D.適當加大接種量可以提高發(fā)酵速率、抑制雜菌生長繁殖,答案D本題考查果酒和果醋的制作的相關知識。果酒發(fā)酵一般將溫度控制在1825 ,而果醋發(fā)酵的適宜溫度為3035 ,因此果醋發(fā)酵所需的最適溫度較高;應該先隔絕空氣進行果酒發(fā)酵,然后植入醋酸桿菌,通入空氣,進行果醋發(fā)酵,因為醋酸桿菌可以將酒精轉變?yōu)榇姿?與人工接種

18、的發(fā)酵相比,自然發(fā)酵過程中菌種量比較少,且菌種本身品質不好,因此,自然發(fā)酵獲得的產品品質較差;適當加大接種量,能提高發(fā)酵速率、抑制雜菌生長繁殖。,12.(2016浙江自選,17,10分)某研究小組以紫葡萄為原料制作葡萄酒的基本流程和裝置示意圖如下。 請回答: (1)制作葡萄漿前,對葡萄進行清洗和用色的高錳酸鉀溶液浸泡。制作酵母懸液時,在干酵母中加入少量溫水和極少量蔗糖,待酵母懸液中出現(xiàn)即可。 (2)裝瓶后開始的一段時間,發(fā)酵瓶中溶解氧的含量變化是。發(fā)酵過程中,發(fā)酵瓶中酒精的含量變化是。 (3)下列關于裝置中有水彎管作用的敘述,錯誤的是。 A.隔絕氣體出入,B.使發(fā)酵瓶內外的壓強基本平衡 C.減

19、少雜菌污染 D.有利于發(fā)酵瓶內形成缺氧環(huán)境 (4)實驗中,判斷發(fā)酵完畢的依據(jù)是。 A.發(fā)酵瓶中pH開始下降 B.發(fā)酵瓶中停止出現(xiàn)氣泡 C.發(fā)酵瓶中酒精濃度達到30% D.發(fā)酵瓶中酵母菌數(shù)量急劇減少 (5)欲利用葡萄酒制作果醋,發(fā)酵瓶中應加入的菌種是,該菌種在條件下能將乙醇氧化為醋酸。,答案(1)紅(紫)氣泡 (2)減少增加 (3)A (4)B (5)醋化醋桿菌有氧,解析(1)制作酵母菌懸浮液時,在干酵母中加入少量溫水和極少量蔗糖,若懸浮液中出現(xiàn)氣泡,說明酵母菌已經(jīng)活化。(2)裝瓶后開始的一段時間,酵母菌進行有氧呼吸,瓶內的溶氧量減少。隨酵母菌無氧發(fā)酵時間的延長,發(fā)酵瓶中酒精含量增加。(3)裝置

20、中有水彎管可維持發(fā)酵瓶內的無氧環(huán)境,防止空氣中的雜菌污染發(fā)酵液,同時也可將發(fā)酵產生的氣體排到瓶外,維持瓶內外壓強基本平衡,故A錯誤。(4)酵母菌進行無氧發(fā)酵有CO2產生,故判斷發(fā)酵完畢的依據(jù)是發(fā)酵瓶中不再有氣泡產生。(5)醋化醋桿菌在有氧條件下可以將乙醇轉化為乙醛,再將乙醛轉化為醋酸。,13.(2012海南單科,30,15分)回答下列關于腐乳制作的問題: (1)腐乳是豆腐經(jīng)微生物發(fā)酵后制成的食品。多種微生物參與了該發(fā)酵過程,其中起主要作用的微生物是,其產生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質水解為和;其產生的能將豆腐中的脂肪水解為和。 (2)發(fā)酵完成后需加鹽腌制,加鹽還可以抑制生長。 (3)腐乳制作的后

21、期可加入由酒和多種香辛料配制而成的鹵湯。鹵湯除具有一定的防腐作用外,還能使腐乳具有獨特的。,答案(1)毛霉肽氨基酸脂肪酶甘油脂肪酸 (2)微生物 (3)風味(其他合理答案也給分),解析本題考查腐乳制作過程的相關知識。(1)腐乳是以豆腐為原料,在毛霉以及多種微生物參與下發(fā)酵而制成的食品,富含易被人體吸收的多種營養(yǎng)物質,如多肽、氨基酸等。(2)在發(fā)酵完成后的腌制過程中,加鹽能抑制微生物的生長,防止豆腐塊腐敗變質。(3)鹵湯除能防腐外,還可使腐乳具有獨特的風味。,1.(2018課標,37,15分)在生產、生活和科研實踐中,經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。 回答下列問題: (1)在實驗室中,玻璃和

22、金屬材質的實驗器具(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。 (2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點是。 (3)密閉空間內的空氣可采用紫外線照射消毒,其原因是紫外線能。在照射前,適量噴灑,可強化消毒效果。 (4)水廠供應的自來水通常是經(jīng)過(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。 (5)某同學在使用高壓蒸汽滅菌鍋時,若壓力達到設定要求,而鍋內并沒有達到相應溫度,最可能的原因是。,考點2微生物的培養(yǎng)和應用,答案(1)可以(2)在達到消毒目的的同時,營養(yǎng)物質損失較少(3)破壞DNA結構消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內冷空氣排盡,解析(1)

23、能耐高溫的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金屬用具可以采用干熱滅菌法滅菌。(2)用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法對牛奶消毒,可以殺死牛奶中的微生物,并且使牛奶的營養(yǎng)成分損失較少,而煮沸消毒法會破壞牛奶的營養(yǎng)成分。(3)紫外線照射可以破壞DNA結構,殺死物體表面或空氣中的微生物;在照射前,適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液,可以加強消毒效果。(4)水廠供應的自來水通常是經(jīng)過氯氣消毒的。(5)高壓蒸汽滅菌時,若不排盡鍋內的冷空氣,會使鍋內溫度不達標。,知識歸納消毒與滅菌 (1)消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒

24、法,對實驗室的空氣常用紫外線或化學藥物消毒。 (2)滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物,包括芽孢和孢子。常用的滅菌方法有:灼燒滅菌法、干熱滅菌法和高壓蒸汽滅菌法等。,2.(2018課標,37,15分)將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養(yǎng)基。 回答下列問題: (1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選,則培養(yǎng)基中應加入鏈霉素以抑制的生長,加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。 (2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質,營養(yǎng)物質類型除氮源外還有(答出兩點即可)。氮源進入細胞后,可參與合成的生物

25、大分子有(答出兩點即可)。 (3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培養(yǎng),平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是,該方法能篩選出產淀粉酶微生物的原理是 。 (4)甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結果:,甲同學涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133; 乙同學涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。 有人認為這兩位同學的結果中,乙同學的結果可信度低,其原因是 。,答案(1)細菌選擇(2)碳源、無機鹽蛋白質、核酸 (3)碘液淀粉遇碘液顯藍

26、色,產淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解,形成透明圈(4)乙同學的結果中,1個平板的計數(shù)結果與另2個相差懸殊,結果的重復性差,解析本題主要考查微生物的培養(yǎng)與應用。(1)鏈霉素可抑制細菌生長,從功能上看,添加鏈霉素的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)微生物正常生長需要的營養(yǎng)物質有無機鹽、氮源、碳源等。氮源進入細胞后,可以用于合成含氮大分子物質,如核酸、蛋白質等。(3)淀粉遇碘液顯藍色,若淀粉被水解,則產淀粉酶的菌落周圍的淀粉被水解,形成以菌落為中心的透明圈。(4)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)目時,為保證統(tǒng)計結果的準確性,一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進行計數(shù),取結果差別不大組別的平均值,進而得出計數(shù)結果。而乙

27、同學的結果中,1個平板的計數(shù)結果與另2個相差懸殊,即乙同學的結果可信度低。,知識歸納微生物的計數(shù)方法 (1)顯微鏡直接計數(shù)法:利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板,在顯微鏡下計數(shù)一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。缺點:因不能區(qū)分死菌與活菌而使計數(shù)結果偏大。 (2)活菌計數(shù)法:利用稀釋涂布平板法接種,通過統(tǒng)計菌落數(shù)目計算樣品中的活菌數(shù)。缺點:當兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落,因此統(tǒng)計結果偏小。,3.(2018課標,37,15分)回答下列與酵母菌有關的問題: (1)分離培養(yǎng)酵母菌通常使用(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基應采用滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種

28、在平板上,培養(yǎng)一段時間后可觀察到菌落,菌落的含義是。 (2)酵母菌液體培養(yǎng)時,若通入氧氣,可促進(填“菌體快速增殖”“乙醇產生”或“乳酸產生”);若進行厭氧培養(yǎng),可促進(填“菌體快速增殖”“乙醇產生”或“乳酸產生”)。 (3)制作面包時,為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松軟的原因是。,答案(1)麥芽汁瓊脂高壓蒸汽由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體(2)菌體快速增殖乙醇產生(3)酵母菌分解葡萄糖會產生CO2,CO2使面包松軟,解析(1)常用含葡萄糖較多的麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基分離培養(yǎng)酵母菌。培養(yǎng)基常采用高壓蒸汽滅菌法滅菌。菌落是由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體

29、。(2)有氧氣存在時,酵母菌有氧呼吸產生的大量能量可用于快速增殖;無氧氣存在時,酵母菌進行無氧呼吸產生乙醇和CO2。(3)酵母菌進行細胞呼吸可產生CO2,故用酵母菌制作的面包會變得松軟。,易錯警示不同培養(yǎng)基的用途 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基常用于培養(yǎng)細菌,MS培養(yǎng)基常用于植物組織培養(yǎng),麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基常用于培養(yǎng)酵母菌。,4.(2018江蘇單科,31,8分)酵母的蛋白質含量可達自身干重的一半,可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進行培養(yǎng),這樣既可減少污染又可降低生產成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母,并進行大量培養(yǎng)。下圖所示為操作流程,請回答下列問題: (1)配制培養(yǎng)基時,按照

30、培養(yǎng)基配方準確稱量各組分,將其溶解、定容后,調節(jié)培養(yǎng)基的,及時對培養(yǎng)基進行分裝,并進行滅菌。 (2)取步驟中不同梯度的稀釋液加入標記好的無菌培養(yǎng)皿中,在步驟中將溫度約(在25 、50 或80 中選擇)的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻,冷凝后倒置培養(yǎng)。 (3)挑取分離平板中長出的單菌落,按步驟所示進行劃線。下列敘述合理的有。 a.為保證無菌操作,接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌,b.劃線時應避免劃破培養(yǎng)基表面,以免不能形成正常菌落 c.挑取菌落時,應挑取多個菌落,分別測定酵母細胞中甲醇的含量 d.可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度,獲得甲醇高耐受株 (4)步驟中,為使酵母數(shù)量迅速增加,培養(yǎng)過程中需保證充足的

31、營養(yǎng)和供應。為監(jiān)測酵母的活細胞密度,將發(fā)酵液稀釋1 000 倍后,經(jīng)等體積臺盼藍染液染色,用2516型血細胞計數(shù)板計數(shù)5 個中格中的細胞數(shù),理論上色細胞的個數(shù)應不少于,才能達到每毫升3109個活細胞的預期密度。,答案(1)pH高壓蒸汽(濕熱)(2)50 (3)a、b、d (4)氧氣無30,解析本題主要考查微生物的培養(yǎng)與計數(shù)的相關知識。(1)培養(yǎng)基在定容后、分裝前需要調節(jié)pH;分裝后還需要進行高壓蒸汽(濕熱)滅菌。(2)倒平板時溫度不宜過高,以防燙傷;同時溫度也不能太低,以防培養(yǎng)基凝固而無法形成平板,因此倒平板時溫度應選擇50 左右。(3)平板劃線時,需保證無菌操作,以防混入雜菌而影響分離結果。

32、因此操作過程中所用的接種針、接種環(huán)在使用之前都必須滅菌;劃線時不能劃破培養(yǎng)基表面,以免影響菌落的正常形態(tài)進而影響后期觀察;挑取菌落時,應挑取單個菌落;通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度,可獲得利用甲醇能力強的菌株,即甲醇高耐受株。(4)為擴大培養(yǎng)過程,欲使酵母數(shù)量迅速增加,應為酵母菌提供充足的營養(yǎng)和O2。臺盼藍染液能將死的酵母菌染成藍色,而活的酵母菌不能被染色。假設5個中方格中有x個活酵母菌,由題意可知:(x5)10-41 0002=3109,由此解得x=30。,方法技巧酵母菌計數(shù)的常用方法血細胞計數(shù)板 (1)以25格16格的計數(shù)板為例,計數(shù)時除了4個角上的中方格外,還要加上中央的一個中方格,共計

33、數(shù)5個中方格(共80個小方格)內的酵母菌。 (2)計數(shù)公式: 1 mL懸液中的酵母菌數(shù)量=(80個小方格內酵母菌數(shù)量/80)400104稀釋倍數(shù)。,5.(2017課標,37,15分)某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉栴}: (1)有些細菌能分解尿素,有些細菌則不能,原因是前者能產生。能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產物CO2作為碳源,原因是。但可用葡萄糖作為碳源,進入細菌體內的葡萄糖的主要作用是(答出兩點即可)。 (2)為了篩選可分解尿素的細菌,在配制培養(yǎng)基時,應選擇(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作為氮源,不選擇其他兩組的原因是。 (3

34、)用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有(答出兩點即可)。,答案(1)脲酶分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物,不能利用CO2來合成有機物為細胞生命活動提供能量,為其他有機物的合成提供原料 (2)尿素其他兩組都含有NH4NO3,能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用 (3)為細菌生長提供無機營養(yǎng),作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定,解析此題考查微生物的培養(yǎng)與利用。(1)尿素不能直接被植物吸收,但土壤中某些細菌可以產生脲酶將尿素分解成氨和CO2,進而被植物吸收。土壤中能分解尿素的細菌是異養(yǎng)型細菌,它們不能直接利用CO2合成有機物,只能以現(xiàn)

35、成的葡萄糖等有機物為碳源。構成微生物培養(yǎng)基的成分主要是水、無機鹽、碳源和氮源,葡萄糖在微生物培養(yǎng)基中既可作為碳源,也可作為能源。(2)不同微生物對營養(yǎng)物質的需求不同,在培養(yǎng)基中加入特定的某種化學物質以抑制其他微生物的生長或促進所需微生物的生長,這樣的培養(yǎng)基就可以起選擇作用。為獲得分解尿素的細菌,可以把尿素作為唯一氮源。(3)微生物培養(yǎng)基中應包括水、無機鹽、碳源和氮源等,另外,不同的微生物對pH的要求不同。培養(yǎng)基中的KH2PO4和Na2HPO4既可為細菌生長提供無機營養(yǎng),又可保持培養(yǎng)基的特定pH。,易錯警醒培養(yǎng)基中只加入尿素一種氮源,可將可分解尿素的細菌分離出來,這樣的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基;培養(yǎng)基

36、中加入酚紅指示劑,可分解尿素的細菌可將尿素分解形成氨,氨與水結合呈堿性,會使酚紅指示劑呈紅色,從而形成紅色的透明圈,這樣的培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基。,6.(2017江蘇單科,31,7分)苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中,對環(huán)境有嚴重危害。小明同學準備依據(jù)下圖操作步驟,從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題: (1)酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作為碳源的有。 (2)將采集到的樣品接種培養(yǎng),苯酚用量應隨轉接次數(shù)增加而逐漸,以達到富集酚降解菌的目的。若如圖平板中菌落過于密集,應進一步,以便于菌落計數(shù)與分離。制備平板培養(yǎng)基時除了需要水、營養(yǎng)

37、物質外,還必須添加。 (3)如圖為連續(xù)劃線法示意圖,在圖中(填圖中序號)區(qū)域更易獲得單菌落。,(4)采用比色測定法(使用苯酚顯色劑)檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進行顯色反應,下表中15號比色管的苯酚濃度應分別為。,如果廢水為50 mg/L苯酚溶液,降解后約有21%的苯酚殘留,則需將殘留液稀釋(填序號:51020)倍后,再進行比色。,答案(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀釋涂布凝固劑(3)(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8,解析本題考查微生物分離的相關知識。(1)酚降解菌培養(yǎng)基中的蛋白胨和苯酚為酚降解菌生長提供碳源。(2)轉接的目的之一是富集降解苯酚能力強的酚降解菌,隨轉

38、接次數(shù)增多,培養(yǎng)基中的苯酚含量應逐漸增加。若平板中菌落過于密集,則需進一步稀釋,降低菌體密度后再涂布培養(yǎng),以便于菌落分離與計數(shù)。制備平板培養(yǎng)基時,需添加瓊脂等凝固劑。(3)連續(xù)劃線時,在劃線的末端菌體密度最低,即在劃線的末端最易獲得單菌落。(4)1號比色管應為空白對照組,由6號比色管中苯酚濃度知,15號比色管苯酚濃度應為0.2 mg/L、0.4 mg/L、0.6 mg/L、 0.8 mg/L。廢水為50 mg/L苯酚溶液,降解后殘留的苯酚濃度約為5021%=10.5(mg/L),則需對殘留液進行20倍稀釋后10.520=0.525(mg/L),才可以進行比色。,7.(2016課標,39,15分

39、,0.681)空氣中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物,以了解教室內不同高度空氣中微生物的分布情況。實驗步驟如下: 配制培養(yǎng)基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O); 制作無菌平板; 設置空白對照組和若干實驗組,進行相關操作; 將各組平板置于37 恒溫箱中培養(yǎng)一段時間,統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù)。 回答下列問題: (1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于。若要完成步驟,該培養(yǎng)基中的成分X通常是。 (2)步驟中,實驗組的操作是。 (3)若在某次調查中,某一實驗組平板上菌落平均數(shù)為36個/平板,而空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落,這種結果說

40、明在此次調查中出現(xiàn)了現(xiàn)象。若將30(即36-6)個/平板作為本組菌落數(shù)的平均值,該做法(填“正確”或“不正確”)。,答案(1)牛肉膏、蛋白胨瓊脂 (2)將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上,開蓋暴露一段時間 (3)污染不正確,解析(1)培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨可為培養(yǎng)基中的微生物提供氮源;制備固體培養(yǎng)基需加入瓊脂。(2)該實驗的目的是了解教室內不同高度空氣中微生物的分布情況,所以需在教室不同高度的位置分別用平板收集微生物即開蓋暴露一段時間。(3)該實驗中空白對照組不應出現(xiàn)菌落,若空白對照組出現(xiàn)了菌落,則說明此次調查中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象,實驗組的污染情況不能確定,故不能用實驗組與空白對照組菌

41、落數(shù)的差值作為實驗結果,而應重新進行實驗。,方法技巧第(2)問實驗組的操作,實質上是考查實驗組如何控制自變量和如何進行微生物培養(yǎng)中的接種操作,在回答的時候應從這兩方面進行具體的描述。,8.(2016課標,39,15分,0.24)某同學用新鮮的泡菜濾液為實驗材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明,乳酸菌產生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?；卮鹣铝袉栴}: (1)分離純化乳酸菌時,首先需要用對泡菜濾液進行梯度稀釋,進行梯度稀釋的理由是 。 (2)推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有和。分離純化時應挑選出的菌落作為候選菌。 (3)乳酸菌在-20 長期保存時,菌液中常需

42、要加入一定量的(填“蒸餾水”“甘油”或“碳酸鈣”)。,答案(1)無菌水泡菜濾液中菌的濃度高,直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落 (2)鑒別乳酸菌中和產生的乳酸(或酸)具有透明圈 (3)甘油,解析(1)分離純化乳酸菌時,由于泡菜濾液中菌的濃度高,因此需要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀釋,其目的是將聚集在一起的乳酸菌分散成單個細胞,以便在培養(yǎng)基表面形成單菌落。(2)乳酸菌代謝過程中可產生乳酸,若在培養(yǎng)基中加入碳酸鈣,則碳酸鈣既可以中和乳酸,又可以在乳酸菌菌落的周圍出現(xiàn)明顯透明圈,據(jù)此可以用于乳酸菌的鑒別。(3)乳酸菌在-20 長期保存時,為了避免水結冰產生冰晶損傷細胞,在菌液中常需要加入一定量的甘油。,方法

43、技巧第(2)問中可以根據(jù)學科間知識的聯(lián)系推測碳酸鈣的作用,化學上學過碳酸鈣可以中和酸;也可以依據(jù)題干信息“固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明,乳酸菌產生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣”推測,乳酸菌產生乳酸將碳酸鈣溶解,菌落周圍出現(xiàn)透明圈,碳酸鈣起到鑒別作用。,9.(2015課標,39,15分,0.6127)已知微生物A可以產生油脂,微生物B可以產生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產?；卮鹩嘘P問題: (1)顯微觀察時,微生物A菌體中的油脂通常可用染色。微生物A產生的油脂不易揮發(fā),可選用(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。 (2)為了從自然界中獲得能產生脂肪酶的微生物B的單菌落,可從

44、含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣,并應選用以為碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 (3)若要測定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù),可在顯微鏡下用直接計數(shù);若要測定其活菌數(shù)量,可選用法進行計數(shù)。 (4)為了確定微生物B產生的脂肪酶的最適溫度,某同學測得相同時間內,在35 、40 、 45 溫度下降解10 g油脂所需酶量依次為4 mg、1 mg、6 mg,則上述三個溫度中,條件下該酶活力最小。為了進一步確定該酶的最適溫度,應圍繞設計后續(xù)實驗。,答案(1)蘇丹(或蘇丹)萃取法 (2)油脂 (3)血細胞計數(shù)板稀釋涂布平板 (4)4540,解析本題主要考查了植物油脂的染色和提取方法、選擇培養(yǎng)基的配制、微生物的計數(shù)以及

45、確定酶的最適溫度的實驗設計等。(1)脂肪可用蘇丹染液(或蘇丹染液)進行染色。微生物A產生的油脂不易揮發(fā),不能用水蒸氣蒸餾法提取,應用萃取法加以提取。(2)能產生脂肪酶的微生物B可存在于含有油料作物種子的腐爛物的土壤中,為了選擇培養(yǎng),固體培養(yǎng)基上應以油脂作為唯一碳源。(3)測定培養(yǎng)液中的微生物的菌體數(shù),可在顯微鏡下用血細胞計數(shù)板直接計數(shù);而要測定活菌數(shù),則可利用稀釋涂布平板法進行計數(shù)。(4)酶量需要最多的溫度下,其酶活力最小,即酶活力最小的溫度應為45 。三個溫度下酶活力最大的溫度是40 ,但40 不一定是該酶的最適溫度,故應圍繞40 設計后續(xù)實驗。,評分細則(1)蘇丹(或蘇丹)(2分)專用術語

46、, “丹”容易寫錯,寫成數(shù)字3或4的不得分。 萃取法(2分)專用術語,錯字不得分。 (2)油脂(3分),脂肪、油、甘油三酯、植物油、動物油等都給分,脂質、原油、油料不給分。 (3)血細胞計數(shù)板(2分),血球計數(shù)板、血細胞計數(shù)法也給分。稀釋涂布平板(2分)專用術語,稀釋涂布,稀釋平板涂布不給分。 (4)45、40(每空2分,共4分),唯一答案。,10.(2014課標,39,15分,0.5106)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}: (1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶,該酶是由3種組分組成的復合酶,其中的葡萄糖苷酶可將分解成。 (2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)

47、時,CR可與纖維素形成色復合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時,培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的。 (3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落,某同學設計了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表):,注:“+”表示有,“-”表示無。 據(jù)表判斷,培養(yǎng)基甲(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是;培養(yǎng)基乙(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是 。,答案(1)纖維二糖葡萄糖(2)紅透明圈(3)不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能培養(yǎng)基中沒有纖維素,不會形成CR纖維素紅色復合物,即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌,解析(1)纖維素酶是一種復合酶,

48、一般認為它至少包括三種組分:C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,葡萄糖苷酶將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)剛果紅可與纖維素形成紅色復合物,但并不與水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應。用含有剛果紅的纖維素培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時,由于纖維素被分解,紅色復合物無法形成,培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。(3)培養(yǎng)基甲未使用瓊脂,為液體培養(yǎng)基,不能用于分離單菌落。含有纖維素和剛果紅(CR)的培養(yǎng)基可分離和鑒別纖維素分解菌。,11.(2014課標,39,15分,0.5527)為了調查某河流的水質狀況,某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量,并進行了細菌分離等工作。回答

49、下列問題: (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前,隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間,這樣做的目的是;然后,將1 mL水樣稀釋100倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液;經(jīng)適當培養(yǎng)后,3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時,接種環(huán)通過滅菌,在第二次及以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是。 (3)示意圖A和B中,表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果。,(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進行靜置培養(yǎng),另一部

50、分進行振蕩培養(yǎng)。結果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中的含量,同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高的利用率。,答案(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8107 (2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落 (3)B (4)溶解氧營養(yǎng)物質,解析(1)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間,可依據(jù)是否產生菌落確定培養(yǎng)基的滅菌效果是否理想。由樣品中菌株數(shù)計算公式(CV)M知:1 mL水樣中菌株數(shù)為(380.1)100=3.8104,故每升水樣中的活菌數(shù)為3.8107。(2)利用接種環(huán)接種時,接種環(huán)需灼燒滅菌。利用平板劃線法分離細菌時,在第二次及以后劃

51、線時,總是從上一次劃線的末端開始,可以將聚集的菌體逐步稀釋以便得到單個菌落。(3)稀釋涂布平板法是用涂布器將菌液均勻涂布在培養(yǎng)基表面,故培養(yǎng)后產生的菌落應隨機分布在培養(yǎng)基表面,即B表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果。(4)液體培養(yǎng)基通過振蕩可提高溶氧量,同時使菌體與營養(yǎng)物質充分接觸,提高營養(yǎng)物質的利用率,從而提高細菌的生長速度。,12.(2016江蘇單科,25,3分)漆酶屬于木質素降解酶類,在環(huán)境修復、農業(yè)生產等領域有著廣泛用途。下圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過程,相關敘述正確的是(多選)() A.生活污水中含有大量微生物,是分離產漆酶菌株的首選樣品 B.篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的

52、底物,通過菌落特征挑出產漆酶的菌落 C.在涂布平板上長出的菌落,再通過劃線進一步純化 D.斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物,可在常溫下長期保存菌株,以下為教師用書專用,答案BC產漆酶的微生物主要生活在木質素含量較高的環(huán)境中,生活污水中含有大量的微生物,不是分離產漆酶菌株的首選樣品;篩選產漆酶微生物的培養(yǎng)基中應加入木質素等漆酶降解的底物,因不同菌種的菌落特征不同,故可通過菌落特征挑選產漆酶的菌落;題圖顯示,通過涂布平板法進行初步篩選,再通過平板劃線法進一步純化;微生物長期保存應用甘油管藏法,保存溫度為-20 。,13.(2015江蘇單科,19,2分)做“微生物的分離與培養(yǎng)”實驗時,下列敘述正確的是()

53、 A.高壓滅菌加熱結束時,打開放氣閥使壓力表指針回到零后,開啟鍋蓋 B.倒平板時,應將打開的皿蓋放到一邊,以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上 C.為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應趁熱快速挑取菌落 D.用記號筆標記培養(yǎng)皿中菌落時,應標記在皿底上,答案D本題考查微生物的分離與培養(yǎng)的相關知識。高壓滅菌加熱結束時,需先切斷電源,讓滅菌鍋內溫度降至100 以下,壓力表的指針回到零時,再打開鍋蓋,A錯誤;倒平板時,應將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,而不能將培養(yǎng)皿蓋完全打開,以防污染,B錯誤;接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后需待冷卻后挑取菌落,C錯誤。,14.(2013江蘇單科,18,2分)某研究小組從有機廢水中分離微生物用于廢水

54、處理。下列敘述正確的是() A.培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進行滅菌 B.轉換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進行劃線 C.接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng) D.培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次,答案B本題考查了微生物實驗室培養(yǎng)的相關知識。培養(yǎng)基滅菌后再分裝到培養(yǎng)皿中;轉換劃線角度前要灼燒接種環(huán),冷卻后再從上次劃線的末端開始進行劃線;接種后的培養(yǎng)皿需放在恒溫箱中進行培養(yǎng),一般12 h和24 h后觀察記錄。,15.(2013安徽理綜,6,6分)圖為通過DNA分子雜交鑒定含有某特定DNA的細菌克隆示意圖。下列敘述正確的是() A.根據(jù)培養(yǎng)皿中菌落數(shù)可以準確計算樣品中含有的活菌實際數(shù)目 B.外源DNA必須位于重組質粒

55、的啟動子和終止子之間才能進行復制 C.重組質粒與探針能進行分子雜交是因為DNA分子脫氧核糖和磷酸交替連接 D.放射自顯影結果可以顯示原培養(yǎng)皿中含有特定DNA的細菌菌落位置,答案D本題主要考查微生物的計數(shù)和DNA分子雜交等相關知識。根據(jù)培養(yǎng)皿中菌落數(shù)只能估算樣品中含有的活菌數(shù)目;外源DNA必須位于重組質粒的啟動子和終止子之間才能夠進行轉錄;重組質粒與探針因堿基互補配對能進行分子雜交;用放射性標記的DNA探針與特定DNA分子雜交后,洗去未結合的探針,放射自顯影結果可以顯示原培養(yǎng)皿中含特定DNA的細菌菌落位置。,16.(2012北京理綜,5,6分)高中生物學實驗中,在接種時不進行嚴格無菌操作對實驗結

56、果影響最大的一項是() A.將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中 B.將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上 C.將轉基因植物葉片接種到無菌培養(yǎng)基上 D.將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上,答案C本題主要考查幾種常見生物學實驗對無菌操作的要求。生產果酒和腐乳時對無菌的要求不是很高,接種不需要進行嚴格的無菌操作;土壤浸出液中含有多種雜菌,所以利用選擇培養(yǎng)基篩選土壤浸出液中特定微生物時,不進行嚴格無菌操作也不會影響實驗結果;植物組織培養(yǎng)技術成功的關鍵是無菌條件,若接種時不進行嚴格無菌操作將可能導致實驗失敗,故C項符合題意。,17.(2012山東基本能力,55,1分)除了高溫加熱以外,其他滅菌方法還有()

57、 A.紫外線照射B.真空包裝 C.用保鮮膜密閉D.添加防腐劑,答案A此題考查滅菌的方法。滅菌是使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物(包括芽孢和孢子)。本題中真空包裝、添加防腐劑、用保鮮膜密閉都起到了抑菌作用,紫外線照射使細菌的蛋白質變性,核酸受破壞,是滅菌方法。,18.(2016四川理綜,10,12分)圖甲是從土壤中篩選產脲酶細菌的過程,圖乙是脲酶基因轉錄的mRNA部分序列。 圖甲 圖乙 (1)圖中選擇培養(yǎng)基應以為唯一氮源;鑒別培養(yǎng)基還需添加作指示劑,產脲酶,細菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后,其菌落周圍的指示劑將變成色。 (2)在5個細菌培養(yǎng)基平板上,均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0

58、.1 mL,培養(yǎng)一段時間后,平板上長出的細菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。 該過程采取的接種方法是,每克土壤樣品中的細菌數(shù)量為108個;與血細胞計數(shù)板計數(shù)法相比,此計數(shù)方法測得的細菌數(shù)較。 (3)現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活,突變后基因轉錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個核苷酸,使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼(終止密碼有UAG、UGA和UAA)。突變基因轉錄的mRNA中,終止密碼為,突變基因表達的蛋白含個氨基酸。,答案(1)尿素酚紅紅(2)稀釋涂布平板法1.75少(3)UGA115,解析(1)脲酶由分解尿素的細菌產生,故需用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基篩選該類微生物。分

59、解尿素的細菌合成的脲酶可以將尿素分解成氨,故培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑后,菌落周圍將出現(xiàn)紅色。(2)稀釋涂布平板法常用來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù),在計數(shù)時一般選擇菌落數(shù)在 30300的平板進行計數(shù),并取平均值。每克樣品中的菌株數(shù)=(C/V)M 。因培養(yǎng)基上兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落,故統(tǒng)計結果往往較實際數(shù)目少;而用血細胞計數(shù)板計數(shù)時,死亡的、活的菌體都計數(shù)在內。(3)乙圖顯示,mRNA在箭頭以前有273個核苷酸(為91個密碼子),箭頭處增加的70個核苷酸與后續(xù)的AG剛好組成24個密碼子,后面的UGA為終止密碼。突變基因表達的蛋白質含91+24=115(個)氨基酸。,知識歸納微生

60、物菌體計數(shù)方法通常有稀釋涂布平板法、顯微鏡直接計數(shù)法、濾膜法等。稀釋涂布平板法為活菌計數(shù)法,顯微鏡直接計數(shù)法計的是死、活菌的總數(shù)。,19.(2015江蘇單科,31,8分)人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動物的胃,可用來發(fā)酵處理秸稈,提高秸稈的營養(yǎng)價值。為了增強發(fā)酵效果,研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產菌株,并對其降解纖維素能力進行了研究。請回答下列問題: (1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中,下列選項不需要的是(填序號)。 酒精燈培養(yǎng)皿顯微鏡無菌水 (2)在涂布平板時,滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是。 (3)向試管內分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時,若試管口粘附有培養(yǎng)基,需要用酒精棉球擦凈的原因是。 (4

61、)剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物,但并不與纖維素降解產物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上,篩到了幾株有透明降解圈的菌落(見圖)。圖中降解圈大小與纖維素酶的有關。圖中降解纖維素能力最強的菌株是(填圖中序號)。,(5)研究人員用篩選到的纖維素酶高產菌株J1和J4,在不同溫度和pH條件下進行發(fā)酵,測得發(fā)酵液中酶活性的結果見下圖,推測菌株更適合用于人工瘤胃發(fā)酵,理由是。,答案(1) (2)培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液,導致菌體堆積,影響分離效果 (3)避免培養(yǎng)基污染棉塞 (4)量與活性 (5)J4發(fā)酵過程會產熱和產酸,J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高,解析本題考查

62、微生物培養(yǎng)與分離的相關知識。(1)樣品稀釋需用無菌水,在培養(yǎng)基中涂布接種時需在酒精燈的火焰旁進行。(2)涂布平板時,滴加到培養(yǎng)基表面的菌液一般為0.1 mL,量過大將導致菌體密度過大而影響分離效果。(3)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時,試管口粘有培養(yǎng)基易造成雜菌滋生,故應用酒精棉球擦凈。(4)纖維素酶活性越大,菌落周圍被分解的纖維素量也越大,菌落周圍的透明圈也就越大。故圖中降解纖維素能力最強的菌株為。(5)發(fā)酵過程中由于呼吸作用產生較多的熱量和有機酸,故應選擇較高溫度和酸性環(huán)境中活性較高J4酶。,20.(2015浙江自選,17,10分)某工廠為了生產耐高溫植酸酶飼料添加劑,開展了產該酶菌株的篩選、酶的固

63、定化及其特性分析研究,其流程如下圖所示: 請回答: (1)土壤懸液首先經(jīng)80 處理15分鐘,共目的是篩選出。 (2)在無菌條件下,將經(jīng)過處理的土壤懸液進行,然后涂布于含有植酸鈉的固體培養(yǎng)基上。培養(yǎng)后觀察到,其周圍出現(xiàn)透明水解圈,圈的直徑大小與強弱有關。,(3)篩選獲得的菌株經(jīng)鑒定后,將優(yōu)良菌株進行液體擴大培養(yǎng)。培養(yǎng)時需要振蕩,其主要目的是。液體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基相比,不含有的成分是。 (4)在合適條件下,將提純的植酸酶與海藻酸鈉混合后,滴加到一定濃度的鈣離子溶液中,使液滴形成凝膠固體小球。該過程是對酶進行。 A.吸附B.包埋C.裝柱D.洗滌 (5)溫度與植酸酶相對酶活性的關系如圖所示。下列敘述

64、錯誤的是。,A.測試溫度中,固定化與非固定化植酸酶的最適溫度分別為60 和45 B.測試溫度范圍內,固定化植酸酶的相對酶活性波動低于非固定化植酸酶 C.固定化與非固定化植酸酶相比,相對酶活性在80%以上時的溫度范圍較寬 D.65 時固定化與非固定化植酸酶的相對酶活性因蛋白質變性而位于最低點,答案(1)耐高溫菌株 (2)稀釋單菌落植酸酶的活性 (3)供氧瓊脂 (4)B (5)D,解析(1)用80 高溫處理土壤懸液可以篩選出耐高溫菌株。(2)經(jīng)無菌處理的土壤懸液利用稀釋涂布平板法進行接種;培養(yǎng)后可觀察到有的單菌落周圍出現(xiàn)透明圈,這是耐高溫菌株產生的植酸酶水解形成的,透明圈越大,說明植酸酶的活性越高

65、。(3)將液體培養(yǎng)基振蕩可提高培養(yǎng)液中氧的含量,固體培養(yǎng)基具有固體狀態(tài)是因為制備培養(yǎng)基時加入了瓊脂。(4)將植酸酶與海藻酸鈉混合,然后制成凝膠珠,這是利用包埋法固定化酶。(5)對比曲線可知,65 時非固定化植酸酶因蛋白質變性而活性最低,但此溫度條件下固定化植酸酶活性雖然降低,但不一定發(fā)生了蛋白質變性,故選D。,21.(2014江蘇單科,30,8分)為了獲得-胡蘿卜素產品,某小組開展了產-胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實驗。請回答下列問題: (1)實驗用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是;為了減少滅菌后器皿被污染,滅菌前應該。 (2)為了篩選出酵母菌,培養(yǎng)基中添加了青霉素,其目的是。 (3)如圖是滅菌鍋

66、及其局部剖面示意圖,圖中甲、乙、丙指示的依次是。(填序號),安全閥、放氣閥、壓力表 放氣閥、安全閥、壓力表 安全閥、放氣閥、溫度表 放氣閥、安全閥、溫度表 (4)為了將分離到的菌株純化,挑取了菌落在3塊相同平板上劃線,結果其中一塊平板的各劃線區(qū)均未見菌生長,最可能的原因是。 (5)為增加-胡蘿卜素提取量,在研磨酵母細胞時,添加石英砂的目的是;研磨時(填“需要”或“不需要”)添加CaCO3,理由是。,答案(1)干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)用牛皮紙(報紙)包扎器皿 (2)抑制細菌(放線菌)生長 (3) (4)接種環(huán)溫度過高,菌被殺死 (5)有助于研磨充分不需要-胡蘿卜素較耐酸,解析(1)培養(yǎng)皿滅菌方法通常有干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)兩種。用牛皮紙(或報紙)包扎器皿后再滅菌,可防止滅菌后的器皿被再次污染。(2)青霉素可抑制細菌、放線菌的生長,但對酵母菌生長無影響,故培養(yǎng)基中添加青霉素可以篩選出酵母菌。(3)滅菌鍋中的甲、乙、丙分別表示安全閥、放氣閥和壓力表。(4)該接種過程中的3塊平板