2019版高考生物一輪復(fù)習(xí) 第二部分 第十二單元 生物技術(shù)實踐 第39講 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用練習(xí) 新人教版.doc

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第39講 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用1(2018廣東惠州模擬)日前微博傳言手機細(xì)菌比馬桶多。如圖，央視和北京衛(wèi)視通過實驗展示調(diào)查結(jié)果?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問題：(1)該實驗需制備培養(yǎng)基，培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、_。(2)據(jù)圖，兩電視臺均采用_法接種，該方法需要_(多選)。A接種環(huán)B酒精燈C移液管 D涂布器E無菌水(3)通過觀察菌落的_，可知手機屏幕和馬桶按鈕都存在多種微生物。兩電視臺實驗操作均正確且完全一致，但報道結(jié)果截然不同，你認(rèn)為原因是：_。(4)按圖操作取樣面積，實驗員測定某手機屏幕的細(xì)菌數(shù)量，將10 mL菌懸液進(jìn)行梯度稀釋，分別取0.1 mL稀釋倍數(shù)為102的樣品液接種到三個培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，統(tǒng)計菌落數(shù)分別為48、50、52，則該手機屏幕的細(xì)菌數(shù)為_個/平方厘米。該實驗對照組該如何設(shè)置_。解析：(1)微生物培養(yǎng)基的成分一般包括水、碳源、氮源和無機鹽。(2)根據(jù)圖形分析，該實驗的接種方法為稀釋涂布平板法，該方法用到的工具有酒精燈、移液管、涂布器、無菌水等。(3)不同的菌落形態(tài)、大小不同，圖示兩個電視臺調(diào)查的手機屏幕和馬桶按鈕都有多種形態(tài)的菌落，即存在多種微生物。兩電視臺實驗操作均正確且完全一致，但報道結(jié)果截然不同，可能是因為手機的取樣和馬桶的取樣都不相同。(4)根據(jù)提供的數(shù)據(jù)進(jìn)行計算，某手機屏幕的細(xì)菌數(shù)(485052)31020.110(55)2104(個/平方厘米)。答案：(1)氮源和無機鹽(2)稀釋涂布平板BCDE(3)形態(tài)、大小手機的取樣和馬桶的取樣都不相同(4)2104取培養(yǎng)基涂布0.1 mL無菌水進(jìn)行培養(yǎng)2(2018吉林長春模擬)下面是篩選抗鏈霉素大腸桿菌的實驗步驟及相關(guān)圖解。實驗步驟：把大量對鏈霉素敏感的大腸桿菌接種在不含鏈霉素的培養(yǎng)基1的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。待其長出密集的小菌落后，用影印法接種到不含鏈霉素的培養(yǎng)基2上，隨即再影印到含有鏈霉素的培養(yǎng)基3上，進(jìn)行培養(yǎng)。在培養(yǎng)基3上出現(xiàn)了個別抗鏈霉素的菌落，將其挑選出。請回答：(1)配制培養(yǎng)基時除了滿足基本的營養(yǎng)條件外，還需滿足微生物生長對特殊營養(yǎng)物質(zhì)、_、_的要求。(2)從功能上看，含有鏈霉素的培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。若在培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍(lán)，則培養(yǎng)皿中長出的菌落顏色為_。由圖可知，1號培養(yǎng)基接種的方法為_。(3)對2和3進(jìn)行比較，在2上找到與3上相應(yīng)的菌落，挑取其中一個菌落接種到_(填“含鏈霉素”或“不含鏈霉素”)的培養(yǎng)基上，如果有較多的菌落出現(xiàn)，則說明該抗性基因突變發(fā)生在該菌接觸鏈霉素之_(填“前”或“后”)。(4) 3中的菌落比1、2中的菌落少很多，這說明了基因突變具有_的特點。解析：(1)配制培養(yǎng)基時在提供幾種基本營養(yǎng)條件的基礎(chǔ)上，還需滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。(2)鏈霉素是抗生素，對大腸桿菌具有選擇作用。在伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基上，大腸桿菌菌落顏色為黑色。由題圖可知，1號培養(yǎng)基接種的方法為稀釋涂布平板法。(3)培養(yǎng)基2和培養(yǎng)基3上相同的菌落，是具有相同性狀的大腸桿菌形成的，將培養(yǎng)基2中一個相應(yīng)菌落接種到含鏈霉素的培養(yǎng)基上，若出現(xiàn)較多的菌落，則說明該抗性基因突變發(fā)生在該菌接觸鏈霉素之前。(4)抗鏈霉素性狀是大腸桿菌基因突變后獲得的性狀，3號培養(yǎng)皿中的菌落比1號、2號中的菌落少很多，這說明了基因突變頻率很低。答案：(1)pH氧氣(2)選擇黑色稀釋涂布平板法(3)含鏈霉素前(4)頻率低/低頻性3微生物強化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油黏度的原理，通過向油井中注入含微生物的水來提高采油率的新技術(shù)。以下是人們篩選、純化和擴大培養(yǎng)該類微生物的實驗操作。請回答下列問題：(1)土壤是微生物的大本營，該類微生物應(yīng)取自_的土壤。(2)為篩選和純化該類微生物，從功能上分，應(yīng)選用_培養(yǎng)基。常用的接種方法是_和_。(3)接種后，應(yīng)密封培養(yǎng)的原因是_，培養(yǎng)一段時間后在培養(yǎng)基上形成降油圈，此時選取_就可獲得高效菌株。(4)擴大培養(yǎng)過程中需要對微生物進(jìn)行計數(shù)。取0.2 mL樣品，用固體培養(yǎng)基對其培養(yǎng)，最后統(tǒng)計三個平板，菌落數(shù)分別是200、180、220。則樣品中微生物的數(shù)量為_個/mL。該統(tǒng)計結(jié)果_(填“低于”“高于”)實際值。解析：(1)在長期被石油污染的土壤中生存下來的微生物，能降解石油，所以取樣時，應(yīng)從含石油多的土壤中采集。(2)從功能上分，應(yīng)選用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選和純化該類微生物；常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(3)該類微生物是厭氧微生物，接種后應(yīng)密封培養(yǎng)；培養(yǎng)一段時間后在培養(yǎng)基上可形成降油圈，降油圈越大，說明該處的微生物降解石油的能力越強，所以應(yīng)選擇降油圈大的菌落進(jìn)行培養(yǎng)以獲得高效菌株。(4)計算微生物的數(shù)量應(yīng)取三個平板的平均值，即(200180220)0.21 000(個/mL)，該結(jié)果會低于實際值，因為當(dāng)兩個或多個菌落連在一起時，平板上觀察到的只是單個菌落數(shù)。答案：(1)長期被石油污染(含石油多的)(2)選擇平板劃線法稀釋涂布平板法(3)該類微生物是厭氧型的降油圈大的菌落(4)1 000低于4某同學(xué)要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌，并統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數(shù)目，培養(yǎng)基配方如下。將各種物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL，再經(jīng)高溫滅菌，制成固體培養(yǎng)基備用。KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O蛋白胨葡萄糖尿素瓊脂1.4 g2.1 g0.2 g1.0 g10.0 g1.0 g15.0 g(1)根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)能否分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌？_(填“能”或“不能”)，原因是_。(2)培養(yǎng)基常用_法滅菌，培養(yǎng)皿常用_法滅菌，待培養(yǎng)基冷卻到_(填“20”、“30”、“40”或“50”) 左右時，在_附近倒平板，等平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，可以防止_，造成污染。(3)要統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數(shù)目，宜采用_法接種，根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的_就能大約推測出樣品中活菌數(shù)。(4)培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_。解析：(1)該培養(yǎng)基中含有蛋白胨和尿素，蛋白胨和尿素中都含有氮元素，故尿素不是唯一氮源，該培養(yǎng)基不能選擇出只以尿素為氮源的微生物。(2)培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，培養(yǎng)皿常用干熱滅菌法滅菌。倒平板操作需要在酒精燈火焰附近進(jìn)行。等平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，可以防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。(3)要統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數(shù)目，宜采用稀釋涂布平板法接種。根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)目就能大約推測出樣品中活菌數(shù)。(4)檢測固體培養(yǎng)基是否被污染的方法是：將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。答案：(1)不能培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物(培養(yǎng)基含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素)(2)高壓蒸汽滅菌干熱滅菌50酒精燈火焰培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基(3)(稀釋)涂布平板菌落數(shù)目(4)將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生5下列是關(guān)于分離土壤中能夠分解纖維素的微生物的問題，請回答：(1)某些微生物能分解纖維素，因為他們能產(chǎn)生纖維素酶，纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即_和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成_。(2)實驗室中篩選微生物的原理是_。篩選纖維素分解菌應(yīng)先將從土壤中獲得的微生物在以纖維素為唯一碳源的_(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基上進(jìn)行選擇培養(yǎng)，選擇培養(yǎng)的目的是_。(3)用剛果紅染色法對分離出的微生物進(jìn)行篩選，剛果紅可以與纖維素形成_，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的_。從培養(yǎng)基的用途上分類，剛果紅培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。解析：(1)纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖。(2)實驗室中篩選微生物的原理是人為提供有利于目的菌株生長的條件，同時抑制或阻止其他微生物生長。篩選纖維素分解菌時用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。(3)在培養(yǎng)基中加入剛果紅，剛果紅可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。答案：(1)C1酶、CX酶纖維二糖(2)人為提供有利于目的菌株生長的條件，同時抑制或阻止其他微生物生長(合理即可)液體增加纖維素分解菌的濃度(3)紅色復(fù)合物透明圈鑒別6莠去津是一種含氮農(nóng)藥，在土壤中不易降解，為修復(fù)被其污染的土壤，可按下面程序選育能降解莠去津的細(xì)菌(目的菌)。請據(jù)圖回答：(已知莠去津在水中溶解度低，含過量莠去津的固體培養(yǎng)基不透明)(1)由圖推斷，從A瓶到C瓶液體培養(yǎng)的過程稱為_。圖中固體培養(yǎng)基比培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基多添加了_作為凝固劑，從功能上講，這兩種培養(yǎng)基都屬于_培養(yǎng)基。(2)在將C瓶菌種接種到固體培養(yǎng)基之前通常要進(jìn)行_。圖中將菌種接種到固體培養(yǎng)基的方法是_，對所用接種工具常采用的滅菌方法是_。(3)一段時間后，培養(yǎng)基出現(xiàn)無透明帶和有透明帶兩種菌落，我們篩選的目的菌是_(填“有透明帶”或“無透明帶”)菌落中的細(xì)菌，該菌落生長所需的氮元素主要來源于_。解析：(1)通過圖解可以看出A瓶到C瓶中的培養(yǎng)液中除莠去津外沒有其他氮源，而本實驗的目的是選擇分解莠去津的細(xì)菌，所以該過程是通過選擇培養(yǎng)基選擇能夠分解莠去津的細(xì)菌。通常情況下，固體培養(yǎng)基比液體培養(yǎng)基中多加入的凝固劑是瓊脂。(2)從培養(yǎng)液中選取細(xì)菌進(jìn)行涂布培養(yǎng)，如果直接進(jìn)行接種，培養(yǎng)基中的菌落將會很密，無法進(jìn)行純化，通過梯度稀釋后再接種，培養(yǎng)基中菌落將會分開，這時就可以進(jìn)行純化和分離了。通過培養(yǎng)基上的菌落分布特征可以判斷接種方式為稀釋涂布平板法。涂布平板操作所用的接種工具是涂布器，常用灼燒滅菌法對涂布器進(jìn)行滅菌。(3)能夠分解培養(yǎng)基中的莠去津的菌落周圍會形成透明帶，所以選擇的目的菌是有透明帶菌落中的細(xì)菌。答案：(1)選擇培養(yǎng)瓊脂選擇(2)梯度稀釋稀釋涂布平板法灼燒滅菌(3)有透明帶莠去津