2019版高考生物總復(fù)習(xí) 第十一單元 生物技術(shù)實(shí)踐 第2講 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課時(shí)跟蹤練.doc

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第2講 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 課時(shí)跟蹤練 1．(2014全國(guó)卷Ⅱ)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作。回答下列問(wèn)題： (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是______________________________________________； 然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_(kāi)_______。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)____________滅菌。在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線。這樣做的目的是___________________。 (3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。 (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)_______的利用率。 解析：(1)為了檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，隨機(jī)取滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察空白平板上是否出現(xiàn)菌落。0.1 mL稀釋液中平均有(39＋38＋37)/3＝38個(gè)活菌，則每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為38/0.1＝380個(gè)，則稀釋前每毫升水樣中活菌數(shù)目為380100＝3.8104個(gè)，則每升水樣中活菌數(shù)目為3.81041 000＝3.8107個(gè)。(2)接種環(huán)、接種針等金屬用具可直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，以達(dá)到迅速?gòu)氐诇缇哪康?。在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線，其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落。(3)比較圖A和圖B可以看出：A培養(yǎng)基中細(xì)菌的分布呈線性，是用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果；B培養(yǎng)基中細(xì)菌均勻分布，是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率，因此振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。 答案：(1)檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　3.8107個(gè)　 (2)灼燒　將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落　 (3)B　(4)溶解氧　營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 2．(2013全國(guó)卷Ⅱ)臨床使用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性。 回答下列問(wèn)題： (1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用________法或________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。 (2)取該單菌落適當(dāng)稀釋?zhuān)胈_______法接種于固體培養(yǎng)基表面，在37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，使其均勻生長(zhǎng)，布滿平板。 (3)為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周?chē)霈F(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素A________；含B的濾紙片周?chē)鷽](méi)有出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素B________；含C的濾紙片周?chē)耐该魅Ρ群珹的小，說(shuō)明__________________________；含D的濾紙片周?chē)耐该魅σ脖群珹的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的________。 (4)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素________。 解析：(1)實(shí)驗(yàn)室中對(duì)微生物純化培養(yǎng)時(shí)，常用的接種方法有劃線法和稀釋涂布法。(2)若讓已經(jīng)獲得的單個(gè)菌落在固體培養(yǎng)基上大量且均勻繁殖，常用涂布器把稀釋的菌液均勻涂滿整個(gè)平板。(3)對(duì)某種抗生素越敏感的致病菌，在該抗生素存在的范圍內(nèi)，越不易生存，形成的透明圈就越大。但是，如果在透明圈中還有菌落生存，則說(shuō)明這個(gè)菌落的細(xì)菌耐藥性很強(qiáng)。(4)通過(guò)(3)可知，在應(yīng)用時(shí)，要想殺死某致病菌，就得選擇能使該致病菌大量死亡，即產(chǎn)生的透明圈大的那種抗生素。 答案：(1)平板劃線　稀釋涂布(或涂布) (2)涂布　(3)敏感　不敏感　該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A的弱　耐藥菌　(4)A 3．為了調(diào)查成都自來(lái)水的水質(zhì)情況，某研究小組對(duì)自來(lái)水水樣中的細(xì)菌含量進(jìn)行了測(cè)定，請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)在微生物的培養(yǎng)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)室對(duì)培養(yǎng)基滅菌常用的方法是____________。為防止冷凝水影響細(xì)菌的生長(zhǎng)，需將培養(yǎng)皿________培養(yǎng)。 (2)若小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，劃線時(shí)落在培養(yǎng)基上共畫(huà)了5個(gè)區(qū)域，則共需要________次灼燒接種環(huán)。該培養(yǎng)基從物理狀態(tài)上看，屬于________培養(yǎng)基。 (3)檢測(cè)自來(lái)水中大腸桿菌的數(shù)量，可選用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基，伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基除了為大腸桿菌的生長(zhǎng)繁殖提供水和碳源外，還可以提供______________等基本營(yíng)養(yǎng)成分。該研究小組在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因____________而遺漏菌落的數(shù)目，如果接種后一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如下圖所示，推測(cè)接種時(shí)可能的操作失誤是____________。 解析：(1)微生物的培養(yǎng)基常用高壓蒸氣滅菌法進(jìn)行滅菌。為防止冷凝水影響細(xì)菌的生長(zhǎng)，需將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)。 (2)因?yàn)槊看蝿澗€前后都需要滅菌，所以畫(huà)了5個(gè)區(qū)域需要6次灼燒接種環(huán)。平板劃線法用的是固體培養(yǎng)基。 (3)微生物的培養(yǎng)基的基本成分一般包括水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源。在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而遺漏菌落的數(shù)目，如果接種后一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如題圖所示，推測(cè)接種時(shí)可能的操作失誤是涂布不均勻。 答案：(1)高壓蒸氣滅菌　倒置　(2)6　固體　(3)氮源和無(wú)機(jī)鹽(答不全不得分)　培養(yǎng)時(shí)間不足　涂布不均勻 4．(2017贛州模擬)如圖是分離、純化及保存枯草芽孢桿菌菌株的過(guò)程示意圖：將土壤表層土稀釋液煮沸十五分鐘(枯草芽孢桿菌的芽孢不會(huì)失去活性)靜置5分鐘后獲得樣品，進(jìn)行如下操作： 請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)由題意可知，除用選擇培養(yǎng)基外，還有__________操作起到篩選作用。 (2)上圖的劃線操作中，培養(yǎng)基從物質(zhì)狀態(tài)分類(lèi)上屬于______________，接種環(huán)用________法進(jìn)行滅菌，劃線過(guò)程中第一區(qū)和最后一區(qū)的劃線________(能/不能)相連。 (3)用稀釋涂布平板法在5個(gè)培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為104的樣品液0.1 mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板長(zhǎng)出來(lái)的菌落數(shù)分別為13，160，532，175和187。每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)量為_(kāi)_______個(gè)。 (4)用上述方法統(tǒng)計(jì)出的菌落數(shù)往往比樣品中活菌的實(shí)際數(shù)目________，原因是___________________________________________ ______________________________________________________。 解析：(1)根據(jù)題干信息“將土壤表層土稀釋液煮沸十五分鐘(枯草芽孢桿菌的芽孢不會(huì)失去活性)”可知，除用選擇培養(yǎng)基外，還有煮沸操作起到篩選作用。 (2)上圖的劃線操作中，培養(yǎng)基從物質(zhì)狀態(tài)分類(lèi)上屬于固體培養(yǎng)基；接種環(huán)用灼燒滅菌(灼燒) 法進(jìn)行滅菌；劃線過(guò)程中第一區(qū)和最后一區(qū)的劃線不能相連。 (3)用稀釋涂布平板法在5個(gè)培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為104的樣品液0.1 mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板長(zhǎng)出來(lái)的菌落數(shù)分別為13，160，532，175和187。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，因此每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)量為＝104＝1.74107個(gè)。 (4)由于兩個(gè)或者多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此用上述方法統(tǒng)計(jì)出的菌落數(shù)往往比樣品中活菌的實(shí)際數(shù)目少。 答案：(1)煮沸　(2)固體培養(yǎng)基　灼燒滅菌(灼燒)　不能　(3)1.74107　(4)少　兩個(gè)或者多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 5．(2017銀川模擬)金黃色葡萄球菌具有高度耐鹽性，在血平板(培養(yǎng)基中添加適量血液)上生長(zhǎng)時(shí)，可破壞菌落周?chē)募t細(xì)胞，使其褪色。下面是某研究小組測(cè)定自來(lái)水中金黃色葡萄球菌濃度的實(shí)驗(yàn)操作。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)基為7.5%NaCl牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膽?yīng)選擇________(填“固體”“液體”)培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中加入7.5%NaCl的作用是_________________________________。 (2)在制作血平板時(shí)需等平板冷卻后，方可加入血液，以防止______________。血平板在使用前，需置于恒溫培養(yǎng)箱中適宜溫度下培養(yǎng)一段時(shí)間的目的是____________________________________。 (3)取10mL自來(lái)水樣，加入____________稀釋成10－1的自來(lái)水樣，依次操作，制作稀釋10－2、10－3、10－4的自來(lái)水樣。 (4)將0.1 mL 10－1～10－4的四個(gè)稀釋樣液，分別接種到4組(每組3個(gè))血平板上的方法是__________________。在血平板上，金黃色葡萄球菌菌落的周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)____________________。若在10－3組的3個(gè)血平板上，金黃色葡萄球菌菌落數(shù)分別為42、38和37，則每升自來(lái)水中的活菌數(shù)約為_(kāi)_____________個(gè)。 解析：(1)金黃色葡萄球菌在血平板(培養(yǎng)基中添加適量血液)上生長(zhǎng)時(shí)，可破壞菌落周?chē)募t細(xì)胞，使其褪色，據(jù)此原理可對(duì)金黃色葡萄球菌進(jìn)行篩選，因此應(yīng)選擇固體培養(yǎng)基。金黃色葡萄球菌具有高度耐鹽性，用7.5% NaCl牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)金黃色葡萄球菌時(shí)，培養(yǎng)基中加入的7.5% NaCl，不影響金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)，但同時(shí)可抑制其他菌的生長(zhǎng)，因此利于金黃色葡萄球菌的篩選。 (2)高溫會(huì)破壞血細(xì)胞，因此為了防止高溫破壞血細(xì)胞，在制作血平板時(shí)需等平板冷卻后，方可加入血液。血平板在使用前，需置于恒溫培養(yǎng)箱中適宜溫度下培養(yǎng)一段時(shí)間的目的是：檢測(cè)血平板是否符合無(wú)菌要求。 (3)取10 mL自來(lái)水樣，加入90 mL無(wú)菌水稀釋成10－1的自來(lái)水樣，依次操作，制作稀釋10－2、10－3、10－4的自來(lái)水樣。 (4)將稀釋的樣液接種到血平板上進(jìn)行微生物純化培養(yǎng)，所采用的接種方法是稀釋涂布平板法。金黃色葡萄球菌可破壞菌落周?chē)募t細(xì)胞，使其褪色，因此在血平板上，金黃色葡萄球菌菌落的周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)透明圈(溶血圈)。依題意：血平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)＝(42＋38＋37)3＝39個(gè)，則1 mL自來(lái)水中的活菌數(shù)約＝(390.1)1 000＝3.9105個(gè)，每升自來(lái)水中的活菌數(shù)為＝3.9105103＝3.9108個(gè)。 答案：(1)固體　利于金黃色葡萄球菌的篩選　(2)高溫破壞血細(xì)胞　檢測(cè)血平板是否符合無(wú)菌要求　(3)90 mL無(wú)菌水　(4)稀釋涂布平板法　透明圈(溶血圈)　3.9108 6．淀粉酶是用途最廣、產(chǎn)量最大的酶制劑之一，廣泛用于印染、釀造和醫(yī)藥行業(yè)。請(qǐng)回答： (1)配制篩選能分泌淀粉酶的微生物的培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)以______ 為唯一碳源。獲得的菌種長(zhǎng)期保存的方法是____________。 (2)從面粉加工廠附近的土壤中，取5g土壤倒入裝有45 mL蒸餾水并帶有玻璃珠的錐形瓶中振蕩，制成土壤懸液。將土壤懸液稀釋104倍后，用____________法分別將0.1 mL的菌液接種到3個(gè)平板上，培養(yǎng)一段時(shí)間，3個(gè)平板中的菌落數(shù)分別為53個(gè)、60個(gè)、73個(gè)，則土壤懸液中分泌淀粉酶的微生物有________個(gè)/mL。將接種后的平板置于恒溫培養(yǎng)箱中____________(填“正置”或“倒置”)培養(yǎng)。 (3)在培養(yǎng)基中加入碘化鉀后，出現(xiàn)透明圈的菌落能分泌淀粉酶，原理是____________________________。一般情況下，透明圈直徑(D)和菌落直徑(d)的比值(D/d)反映了淀粉酶的活性，它們的關(guān)系是______________。 (4)篩選獲得的微生物，經(jīng)鑒定是芽孢桿菌，芽孢桿菌除產(chǎn)生活性較強(qiáng)的淀粉酶外，還產(chǎn)生活性較強(qiáng)的蛋白酶和脂肪酶，因此，在動(dòng)物飼料中添加芽孢桿菌或其代謝產(chǎn)物可提高動(dòng)物________________的效率。 解析：(1)根據(jù)選擇培養(yǎng)基的配置原則，配制篩選能分泌淀粉酶的微生物的培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)以淀粉為唯一碳源。獲得的菌種長(zhǎng)期保存的方法是甘油管藏。 (2)對(duì)微生物計(jì)數(shù)一般采用稀釋涂布平板法；根據(jù)題干中所給數(shù)據(jù)，土壤懸液中分泌淀粉酶的微生物有(53＋60＋73)30.1104＝6.2106 個(gè)/mL；為了防止培養(yǎng)基中的冷凝水污染培養(yǎng)基，需要將接種后的平板置于恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)。 (3)淀粉遇碘化鉀變藍(lán)，淀粉酶分解淀粉后出現(xiàn)透明圈，因此在培養(yǎng)基中加入碘化鉀后，出現(xiàn)透明圈的菌落能分泌淀粉酶。一般情況下，透明圈直徑(D)和菌落直徑(d)的比值(D/d)反映了淀粉酶的活性，D/d值越大，淀粉酶活性越高。 (4)分析題意可知，芽孢桿菌除產(chǎn)生活性較強(qiáng)的淀粉酶外，還產(chǎn)生活性較強(qiáng)的蛋白酶和脂肪酶，因此在動(dòng)物飼料中添加芽孢桿菌或其代謝產(chǎn)物可提高動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的效率。 答案：(1)淀粉　甘油管藏　(2)稀釋涂布平板　6.2106　倒置　(3)淀粉遇碘化鉀變藍(lán)，淀粉酶分解淀粉后出現(xiàn)透明圈　D/d值越大，淀粉酶活性越高　(4)對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收 7．乙草胺是除草劑中常見(jiàn)的化學(xué)成分，在土壤和水體中存在時(shí)間長(zhǎng)，難以降解。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)實(shí)驗(yàn)小組欲從土壤中獲取乙草胺降解菌，需將土壤樣品置于以__________為唯一碳源的培養(yǎng)基中進(jìn)行富集培養(yǎng)。 (2)該實(shí)驗(yàn)小組選取乙草胺濃度為800 mg/L的富集液進(jìn)行系列稀釋?zhuān)謩e取103、104和105稀釋倍數(shù)的稀釋液0.1 mL涂布于培養(yǎng)基上，每個(gè)稀釋倍數(shù)涂布三個(gè)平板，結(jié)果各平板的菌落數(shù)分別為(286、298、297)，(35、32、31)，(36、7、2)。 ①不適合用于計(jì)數(shù)的為_(kāi)_________倍數(shù)的稀釋液，另外兩組稀釋倍數(shù)得到的細(xì)菌數(shù)不一致的原因可能是________________________ _____________________________________________________。 ②某同學(xué)認(rèn)為，要防止雜菌的污染，可在培養(yǎng)基中加入青霉素，你覺(jué)得該同學(xué)的說(shuō)法是否正確？_______，理由是_______________。 (3)實(shí)驗(yàn)小組從土壤中篩選出兩株乙草胺降解菌D1和D2，溫度對(duì)兩株降解菌的生長(zhǎng)的影響如下圖所示。對(duì)溫度適應(yīng)范圍更廣的是菌株__________，溫度會(huì)影響菌株的生長(zhǎng)狀況的原因是_______________。 解析：(1)欲從土壤中獲取乙草胺降解菌，需將土壤樣品置于以乙草胺為唯一碳源的培養(yǎng)基中進(jìn)行富集培養(yǎng)，在該培養(yǎng)基上，只有乙草胺降解菌能夠生長(zhǎng)。 (2)①不適合用于計(jì)數(shù)的為105倍數(shù)的稀釋液，因?yàn)樵撓♂尡稊?shù)下三個(gè)培養(yǎng)基中菌落數(shù)差別較大。用另外兩組稀釋倍數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)得到的細(xì)菌數(shù)不一致的原因可能是稀釋倍數(shù)為103時(shí)，更多的菌落連在一起最終形成單菌落，導(dǎo)致結(jié)果小于稀釋倍數(shù)為 104 組。 ②加入青霉素，不僅會(huì)抑制雜菌繁殖，也會(huì)抑制目的菌的繁殖。 (3)D1菌株在不同溫度下相對(duì)生長(zhǎng)速率變化不大，對(duì)溫度適應(yīng)范圍更廣，溫度會(huì)影響菌株的生長(zhǎng)狀況的原因是溫度會(huì)影響與菌株生長(zhǎng)代謝有關(guān)酶的活性。 答案：(1)乙草胺　(2)105　稀釋倍數(shù)為103時(shí)，更多的菌落連在一起最終形成單菌落，導(dǎo)致結(jié)果小于稀釋倍數(shù)為 104 組　不正確　青霉素抑制雜菌繁殖的同時(shí)，也會(huì)抑制目的菌的繁殖　(3)D1　溫度會(huì)影響與菌株生長(zhǎng)代謝有關(guān)酶的活性 8．苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中，對(duì)環(huán)境有嚴(yán)重危害。小明同學(xué)準(zhǔn)備依據(jù)如圖操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作為碳源的有_______________________________。 (2)將采集到的樣品接種培養(yǎng)，苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸________，以達(dá)到富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過(guò)于密集，應(yīng)進(jìn)一步________，以便于菌落計(jì)數(shù)與分離。制備平板培養(yǎng)基時(shí)除了需要水、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還必須添加________。 (3)如下圖為連續(xù)劃線法示意圖，在圖中________(填圖中序號(hào))區(qū)域更易獲得單菌落。 (4)采用比色測(cè)定法(使用苯酚顯色劑)檢測(cè)降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進(jìn)行顯色反應(yīng)，下表中1～5號(hào)比色管的苯酚濃度應(yīng)分別為_(kāi)_____________。 管號(hào) 1 2 3 4 5 6 苯酚濃度/(mg/L) 1 如果廢水為50 mg/L苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，則需將殘留液稀釋________(填序號(hào)：①5?、?0　③20)倍后，再進(jìn)行比色。 解析：(1)酚降解菌培養(yǎng)基中的蛋白胨和苯酚為酚降解菌生長(zhǎng)提供碳源。(2)轉(zhuǎn)接的目的之一是富集降解苯酚能力強(qiáng)的酚降解菌，隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增多，培養(yǎng)基中的苯酚含量應(yīng)逐漸增加。若平板中菌落過(guò)于密集，則需進(jìn)一步稀釋?zhuān)档途w密度后再涂布培養(yǎng)，以便于菌落分離與計(jì)數(shù)。制備平板培養(yǎng)基時(shí)，需添加瓊脂等凝固劑。(3)連續(xù)劃線時(shí)，在劃線的末端菌體密度最低，即在劃線的末端最易獲得單菌落。(4)1號(hào)比色管應(yīng)為空白對(duì)照組，由6號(hào)比色管中苯酚濃度知，1～5號(hào)比色管苯酚濃度應(yīng)為0.2 mg/L、0.4 mg/L、0.6 mg/L、0.8 mg/L。廢水為50 mg/L苯酚溶液，降解后殘留的苯酚濃度約為5021%＝10.5(mg/L)，則需對(duì)殘留液進(jìn)行20倍稀釋后[10.520＝0.525(mg/L)]，才可以進(jìn)行比色。 答案：(1)蛋白胨、苯酚　(2)增加　稀釋涂布　凝固劑　(3)③　(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8　③ 9．某研究小組研究了不同濃度的抗生素A對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下圖1?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問(wèn)題： 　　　　　　　　　 圖1　　　　圖2 (1)該培養(yǎng)基為大腸桿菌提供的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、無(wú)機(jī)鹽、________四類(lèi)，而配置該培養(yǎng)基時(shí)，通常加入________作為凝固劑。 (2)為了確保利用____________法接種大腸桿菌時(shí)，形成一層菌膜，則對(duì)菌種的稀釋倍數(shù)________。另外，在培養(yǎng)和接種大腸桿菌時(shí)要特別注意進(jìn)行________操作。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選出對(duì)大腸桿菌抑制作用最明顯的抗生素A濃度的依據(jù)是_________________________。 (3)為減少實(shí)驗(yàn)誤差，每一濃度的抗生素A還要制備________________。 (4)該研究小組運(yùn)用上述實(shí)驗(yàn)方法還研究了相同濃度的a、b、c三種不同抗生素對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)的影響。請(qǐng)?jiān)趫D2中用圖表示這一處理方案(可模仿圖1加以必要的注解)。 解析：(1)微生物生長(zhǎng)繁殖所需要的四類(lèi)主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是水、無(wú)機(jī)鹽、碳源和氮源。該實(shí)驗(yàn)所用的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，常用的凝固劑是瓊脂。 (2)圖中接種大腸桿菌時(shí)所使用的接種方法是稀釋涂布平板法，為了得到菌膜，稀釋倍數(shù)不能太大。接種和培養(yǎng)大腸桿菌的關(guān)鍵是無(wú)菌操作。據(jù)圖1分析，⑤號(hào)圓紙片的抑菌圈最大，說(shuō)明該濃度的抗生素A對(duì)大腸桿菌抑制作用最明顯。 (3)為減少實(shí)驗(yàn)誤差，每一濃度的抗生素A還要制備多個(gè)圓紙片進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)。 (4)該方案的自變量為相同濃度的a、b、c三種不同抗生素，還應(yīng)有空白對(duì)照，注意在圖中要標(biāo)記清楚，具體圖解見(jiàn)答案。 答案：(1)氮源　瓊脂　(2)稀釋涂布平板　不能太大　無(wú)菌　透明圈越大，抑制效果越明顯　(3)多個(gè)圓紙片　(4)圖示見(jiàn)下圖所示