2019年高考生物一輪復(fù)習(xí) 生物技術(shù)實(shí)踐 第2講 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課時(shí)作業(yè) 新人教版選修1.doc
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2019年高考生物一輪復(fù)習(xí) 生物技術(shù)實(shí)踐 第2講 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課時(shí)作業(yè) 新人教版選修1一、選擇題(每小題6分,共30分)1(xx江蘇卷,19)做“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí),下列敘述正確的是()A高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí),打開放氣閥使壓力表指針回到零后,開啟鍋蓋B倒平板時(shí),應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊,以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí),應(yīng)標(biāo)記在皿底上答案D解析高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí),需先切斷電源,讓滅菌鍋內(nèi)溫度降至100以下,壓力表的指針回到零時(shí),再打開鍋蓋,A錯(cuò)誤;倒平板時(shí),應(yīng)將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,而不能將培養(yǎng)皿蓋完全打開,以防污染,B錯(cuò)誤;接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后需待冷卻后挑取菌落,C錯(cuò)誤。2選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某一種或某一類微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或?qū)σ恍┪锢?、化學(xué)抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。利用這種培養(yǎng)基可以將所需要的微生物從混雜的微生物中分離出來。為選擇酵母菌和硝化細(xì)菌,應(yīng)選用的培養(yǎng)基分別為()A伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基、含青霉素培養(yǎng)基B含青霉素培養(yǎng)基、含氨的無機(jī)培養(yǎng)基C含氨的無機(jī)培養(yǎng)基、含青霉素培養(yǎng)基D含青霉素培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基答案B解析酵母菌是真菌,通常可以用含青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng),因?yàn)榍嗝顾匾种萍?xì)菌生長(zhǎng),但不能抑制真菌生長(zhǎng)。硝化細(xì)菌為自養(yǎng)型生物,能夠利用氨轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯跛岷拖跛崴尫诺哪芰堪褵o機(jī)物轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C(jī)物以維持自身生命活動(dòng),利用含氨的無機(jī)培養(yǎng)基可進(jìn)行選擇培養(yǎng)。3(xx濟(jì)南質(zhì)檢)下面從土壤中篩選纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)步驟,正確的是()土壤取樣稱取10 g土壤加入盛有90 mL無菌水的錐形瓶中吸取01 mL進(jìn)行平板涂布依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107稀釋度A BC D答案C解析在分離土壤中某細(xì)菌時(shí),應(yīng)先選取土樣(10 g),然后加無菌水獲得土壤浸出液,并進(jìn)行不同倍數(shù)稀釋,最后將稀釋液涂布到培養(yǎng)基表面進(jìn)行培養(yǎng),并分離和計(jì)數(shù)。4下圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖,據(jù)圖分析不正確的是 ()A獲得圖A效果的接種方法是稀釋涂布平板法B獲得圖B效果的接種方法是平板劃線法C若在純化土壤細(xì)菌時(shí)菌液濃度過高,培養(yǎng)基上的菌落可能會(huì)連成一片D在接種前要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行消毒處理答案D解析從平板中菌落的分布來看,A圖和B圖的接種方法分別是稀釋涂布平板法和平板劃線法。如果菌液的稀釋度太低,在培養(yǎng)基上的菌落會(huì)連成一片。在接種前要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理。5(xx太原質(zhì)檢)下列關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述中,不正確的是()A用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,經(jīng)高壓蒸汽滅菌后倒平板B取104、105、106倍土壤稀釋液和無菌水各01 mL涂布不同平板C將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置,37恒溫培養(yǎng)2448小時(shí)D確定對(duì)照組無菌后,選擇菌落數(shù)在300以上的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)答案D解析制備培養(yǎng)基時(shí),需要將培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌,A正確;接種方法為稀釋涂布平板法,即需要制備不同的土壤稀釋液后才能倒平板,B正確;對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組需要放置在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),C正確;一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),D錯(cuò)誤。二、非選擇題(共70分)6(12分)(xx新課標(biāo)卷,39)已知微生物A可以產(chǎn)生油脂,微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?;卮鹩嘘P(guān)問題:(1)顯微觀察時(shí),微生物A菌體中的油脂通??捎胈染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā),可選用_(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。(2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落,可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣,并應(yīng)選用以_為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。(3)若要測(cè)定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù),可在顯微鏡下用_直接計(jì)數(shù);若要測(cè)定其活菌數(shù)量,可選用_法進(jìn)行計(jì)數(shù)。(4)為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度,某同學(xué)測(cè)得相同時(shí)間內(nèi),在35、40、45溫度下降解10g油脂所需酶量依次為4mg、1mg、6mg,則上述三個(gè)溫度中,_條件下該酶活力最小。為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度,應(yīng)圍繞_設(shè)計(jì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)。答案(1)蘇丹(或蘇丹)萃取法(2)油脂(3)血細(xì)胞計(jì)數(shù)板稀釋涂布平板(4)4540解析(1)油脂可被蘇丹染液或者蘇丹染液染成橘黃色或紅色。由于不易揮發(fā),故采用萃取法。(2)產(chǎn)生脂肪酶的微生物B可以分解脂肪,故可以以脂肪為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),不產(chǎn)生脂肪酶的微生物無法生存。(3)微生物B的菌體數(shù),可在顯微鏡下用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù),活菌用稀釋涂布平板法。(4)45降解10g油脂所需酶量最大,故酶活性最??;40溫度下降解10g油脂所需酶量最小,故酶活性最大,圍繞40溫度進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。7(12分)(xx江蘇卷,31)人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動(dòng)物的胃,可用來發(fā)酵處理秸稈,提高秸稈的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。為了增強(qiáng)發(fā)酵效果,研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株,并對(duì)其降解纖維素能力進(jìn)行了研究。請(qǐng)回答下列問題:(1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中,下列選項(xiàng)不需要的是_(填序號(hào))。酒精燈培養(yǎng)皿顯微鏡無菌水(2)在涂布平板時(shí),滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是_。(3)向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時(shí),若試管口粘附有培養(yǎng)基,需要用酒精棉球擦凈的原因是_。(4)剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上,篩到了幾株有透明降解圈的菌落(見右上圖)。圖中降解圈大小與纖維素酶的_有關(guān)。圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是_(填圖中序號(hào))。(5)研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和J4,在不同溫度和pH條件下進(jìn)行發(fā)酵,測(cè)得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見下圖,推測(cè)菌株_更適合用于人工瘤胃發(fā)酵,理由是_。答案(1)(2)培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液,導(dǎo)致菌體堆積,影響分離效果 (3)避免培養(yǎng)基污染棉塞 (4)量與活性 (5)J4發(fā)酵過程會(huì)產(chǎn)熱和產(chǎn)酸,J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高 解析(1)纖維素酶高產(chǎn)菌株的篩選,需要經(jīng)過分離、提純培養(yǎng)。用選擇培養(yǎng)基篩選菌株后,再利用涂布平板法或劃線培養(yǎng)法進(jìn)行菌株的分離提純,最終通過菌落特征分離提純菌株進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),該過程中不需要用顯微鏡,因?yàn)榫涮卣魅庋劭梢姟?2)菌液量過多,會(huì)導(dǎo)致接種的菌種過量,使菌體堆積而使培養(yǎng)后的菌落界限不明確,難以分離。(3)用棉球擦凈試管口的培養(yǎng)基,是防止培養(yǎng)基污染棉塞,進(jìn)而污染管內(nèi)的培養(yǎng)物。(4)培養(yǎng)基上透明圈的大小,表示被降解纖維素的多少,它取決于纖維素酶的含量和酶活性的大小,酶含量越大,活性越高,透明圈越大。(5)牛的瘤胃是一個(gè)強(qiáng)酸性環(huán)境,由pH對(duì)酶活性的影響圖可見,J4菌株產(chǎn)生的酶,在低pH時(shí),活性更高,由溫度對(duì)酶活性影響圖可見,J4菌株的酶更適應(yīng)于溫度相對(duì)較高的牛體胃內(nèi)環(huán)境。8(12分)(xx吉林質(zhì)檢)同學(xué)們?yōu)榱颂骄客寥乐械奈⑸飳?duì)尿素是否有分解作用,設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn),并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如下表所示,實(shí)驗(yàn)步驟如下圖所示。請(qǐng)分析回答問題:KH2PO414 gNa2HPO421 gMgSO47H2O02 g葡萄糖1 g尿素10 g瓊脂15 g將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容到1 000 mL(1)簡(jiǎn)述土壤中可分解尿素的細(xì)菌的鑒定方法及原理:在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_指示劑,細(xì)菌合成的_將尿素分解為_,pH升高,使指示劑變?yōu)榧t色。(2)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選目的菌, 這種培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(3)“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的_和_,實(shí)驗(yàn)中需要振蕩培養(yǎng),原因是_。(4)如圖是利用_法進(jìn)行微生物接種,把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。(5)關(guān)于如圖的操作方法和結(jié)果,敘述正確的是_。A操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B劃線操作須在火焰上進(jìn)行C在5區(qū)域中才可以提到所需菌落D在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌答案(1)酚紅脲酶氨 (2)選擇(3)尿素葡萄糖為目的菌提供氧氣(4)平板劃線(5)D解析(1)目的菌之所以能利用尿素,是因?yàn)轶w內(nèi)的脲酶能將尿素分解成氨,氨可以作為細(xì)菌的氮源,同時(shí)會(huì)使培養(yǎng)基的pH升高,升高的pH會(huì)使酚紅指示劑變?yōu)榧t色,因此可以通過檢測(cè)培養(yǎng)基pH的變化來判斷尿素是否被分解。(2)按功能不同,培養(yǎng)基可分成兩類,鑒別培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中不加其它氮素,只把尿素作為唯一氮源,其目的是想從眾多微生物中選出能分解尿素的目的菌。(3)“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別有含氮元素的尿素和含碳元素的葡萄糖提供。生活在土壤中的目的菌是好氧微生物,試驗(yàn)中要振蕩培養(yǎng),以便為目的菌提供充足的氧氣。(4)為進(jìn)一步分離和純化目的菌,尚需進(jìn)行涂布平板(劃線)的方法轉(zhuǎn)入固體培養(yǎng)基,以便于獲得單個(gè)菌落繼續(xù)培養(yǎng)。(5)在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌主要是稀釋作用。9(12分)(xx大連模擬)纖維素是地球上年產(chǎn)量巨大,但未能得到充分利用的物質(zhì),尤其以農(nóng)作物秸稈為甚,我國(guó)年產(chǎn)約6億噸。對(duì)其研究利用的報(bào)道較多,能降解纖維素的微生物種類很多,目前的研究以絲狀真菌為主。請(qǐng)回答下列問題:(1)食草動(dòng)物能夠消化食物的關(guān)鍵是體內(nèi)存在_酶,能夠降解纖維素,該酶是一種復(fù)合酶,它至少包括_。(2)目前,研究者多利用以_為唯一碳源的培養(yǎng)基從土壤中分離纖維素分解菌。為檢測(cè)纖維素分解菌的存在與否還應(yīng)加入_染料,形成_色復(fù)合物,若產(chǎn)生_,則證明有纖維素分解菌存在。(3)下圖是工業(yè)上利用微生物由纖維素生產(chǎn)乙醇的基本工藝流程:上述工藝流程中環(huán)節(jié)需要的微生物大多分布在_的環(huán)境中。過程要注意對(duì)接種器材進(jìn)行_。答案(1)纖維素C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶(2)纖維素剛果紅紅透明圈(3)富含纖維素(答案合理即可)滅菌解析(1)纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。正是在這三種酶的協(xié)同作用下,纖維素最終被水解成葡萄糖,為微生物的生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng),同樣,也可以為人類所利用。(2)一般利用添加了纖維素的選擇培養(yǎng)基分離纖維素分解菌,利用剛果紅染色法篩選纖維素分解菌,這種方法能夠通過在培養(yǎng)基中加入剛果紅,看是否產(chǎn)生透明圈直接對(duì)微生物進(jìn)行篩選。(3)能產(chǎn)纖維素酶的微生物應(yīng)多分布于富含纖維素的環(huán)境中,接種前要對(duì)接種器材進(jìn)行滅菌處理。10(11分)(原創(chuàng)題)中國(guó)家電研究院的洗衣機(jī)專家指出,洗衣機(jī)內(nèi)部的環(huán)境非常潮濕,洗衣機(jī)使用時(shí)間越長(zhǎng),內(nèi)部滋生微生物的機(jī)會(huì)就越大。看似干凈的洗衣機(jī),其內(nèi)部隱藏著一個(gè)健康的隱形殺手。某生物興趣小組的同學(xué),利用內(nèi)桶背面的污垢進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)。(1)培養(yǎng)洗衣機(jī)內(nèi)部微生物的培養(yǎng)基中一般含有_。(2)鑒定洗衣機(jī)污垢中是否有菌落時(shí)要制備固體培養(yǎng)基,在制備完畢后要進(jìn)行倒平板操作,將平板倒置。這樣做的目的是_。(3)有三種材料或用具需要消毒或滅菌:培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿;玻棒、試管、燒瓶和吸管;實(shí)驗(yàn)操作者的雙手。其中需要消毒的是_,需要滅菌的是_。(4)檢驗(yàn)污垢中是否含微生物時(shí),要將污垢制成水樣稀釋,然后將稀釋水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),這種方法稱為_。下圖所示的四種菌落分布情況中,不可能由該方法得到的是_。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是否需要對(duì)照組?_。為什么?_。(5)判斷污垢中微生物的種類可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征進(jìn)行初步的_。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理才能倒掉,此目的是_。答案(1)水、碳源、氮源和無機(jī)鹽(2)防止皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染,還可使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)(3) (4)稀釋涂布平板法D需要因?yàn)樾枰袛嗯囵B(yǎng)基是否被雜菌污染(培養(yǎng)基滅菌是否合格)(5)鑒定(或分類)防止造成環(huán)境污染解析(1)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽。 (2)倒置平板的目的是防止皿蓋上凝有的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染,同時(shí)還可使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)。(3)實(shí)驗(yàn)者的雙手需要進(jìn)行消毒處理,培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基及其他實(shí)驗(yàn)器材等需要進(jìn)行滅菌處理。(4)本題中將污垢水樣接種在培養(yǎng)基上的方法為稀釋涂布平板法。D屬于利用平板劃線法得到的菌落分布。利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)時(shí)需要設(shè)置對(duì)照組,將一個(gè)未接種污垢水樣的培養(yǎng)基放在相同條件下培養(yǎng),以此判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染。(5)污垢中的微生物種類可以根據(jù)菌落的形狀、大小等進(jìn)行初步分類。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,為防止污染環(huán)境,應(yīng)對(duì)用過的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理后、再倒掉。 11(11分)(xx新課標(biāo)卷,39)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量,并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?;卮鹣铝袉栴}:(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間,這樣做的目的是_;然后,將1 mL水樣稀釋100倍,在3個(gè)平板上用涂布法分別接入01 mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí),接種環(huán)通過_滅菌,在第二次及以后的劃線時(shí),總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是_。(3)示意圖A和B中,_表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng),另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中_的含量,同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高_(dá)的利用率。答案(1)檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格38107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落(3)B(4)溶解氧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)解析(1)滅菌不徹底會(huì)影響細(xì)菌培養(yǎng)的結(jié)果,在培養(yǎng)之前可先對(duì)空白平板進(jìn)行培養(yǎng),看看是否有雜菌生長(zhǎng);3個(gè)平板上的菌落數(shù)平均為38,則1升水樣中的活菌數(shù)為3810100100038107(個(gè))。(2)接種細(xì)菌時(shí),接種環(huán)要進(jìn)行燃燒滅菌;平板劃線法幾次劃線要首尾相連,原因是在線的開始部分,微生物往往連在一起生長(zhǎng),隨著線的延伸,菌種數(shù)逐漸減少,最后可能形成單個(gè)菌落,達(dá)到稀釋目的。(3)稀釋涂布平板法是將待測(cè)樣品制成均勻的系列稀釋液,盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開,使成單個(gè)細(xì)胞存在(否則一個(gè)菌落就不只是代表一個(gè)細(xì)胞),再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中,使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。經(jīng)培養(yǎng)后,由單個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖形成菌落,且菌落均勻分布,B圖符合這一特點(diǎn)。(4)液體培養(yǎng)基振蕩時(shí),氧氣會(huì)充分混入到液體中,增加溶解氧的含量,同時(shí)使細(xì)菌分布更加均勻,有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用。- 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