高考生物二輪專題復(fù)習(xí) 專題13 生物技術(shù)實(shí)踐課件.ppt

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,專題13,生物技術(shù)實(shí)踐,,直擊考綱,1.酶在洗滌等方面的應(yīng)用(A)。2.制備和應(yīng)用固相化酶(A)。3.發(fā)酵食品加工的基本方法(A)。4.微生物的分離和培養(yǎng)(A)。5.實(shí)驗(yàn)：(1)探究酶在洗滌方面的應(yīng)用(b)；(2)酵母細(xì)胞的固定化技術(shù)(b)；(3)腐乳的制作(a)；(4)果酒和果醋的制作(b)；(5)微生物的分離與培養(yǎng)(b)；(6)DNA的粗提取與鑒定(b)。,,真題重溫,知能回歸,典題特訓(xùn),,,,微生物的利用,真題重溫,,1.判斷下列有關(guān)微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用的敘述(1)常用液體培養(yǎng)基分離獲得細(xì)菌單菌落(2012大綱全國(guó)，5B)()(2)用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板(2009安徽，6A)()(3)純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法(2011新課標(biāo)全國(guó)，39節(jié)選)(),,√,√,(4)測(cè)定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，可選用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)(2010山東，34節(jié)選)()(5)玉米秸稈中的纖維素經(jīng)充分水解后的產(chǎn)物可被酵母菌利用發(fā)酵生產(chǎn)酒精。培養(yǎng)酵母菌時(shí)，該水解產(chǎn)物為酵母菌的生長(zhǎng)提供碳源。發(fā)酵過(guò)程中檢測(cè)酵母菌數(shù)量可采用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法或稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)(2014山東，35節(jié)選)(),√,√,2.(2013新課標(biāo)全國(guó)Ⅱ，39)臨床使用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性。回答下列問(wèn)題：(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用_____________法或_________________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。,解析微生物純化的方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法。,劃線(平板劃線),稀釋涂布(或涂布),(2)取該單菌落適當(dāng)稀釋，用_____法接種于固體培養(yǎng)基表面，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使其均勻生長(zhǎng)，布滿平板。解析根據(jù)微生物的特點(diǎn)對(duì)其進(jìn)行一系列濃度梯度稀釋，然后用涂布法接種于固體培養(yǎng)基表面，再在適宜條件下培養(yǎng)。,涂布,(3)為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素A__________________；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素B__________________；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說(shuō)明__________________________________；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的__________________。,解析對(duì)某種抗生素越敏感的致病菌，在該抗生素存在的范圍內(nèi)越不易生存，形成的透明圈就越大。故含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明有抗生素A的地方該致病菌受到抑制；B的周圍沒有透明圈，說(shuō)明致病菌對(duì)抗生素B不敏感，通過(guò)含C的透明圈要比A的透明圈小，說(shuō)明該致病菌對(duì)C的敏感性比A的弱；D出現(xiàn)了透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)D敏感，但是在透明圈上出現(xiàn)一個(gè)菌落，又排除雜菌污染，判斷此菌落的微生物對(duì)抗生素D產(chǎn)生了耐藥性。答案敏感不敏感該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A的弱耐藥菌,(4)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素___。解析根據(jù)以上分析，為達(dá)到抗菌的目的，最好選擇抗生素A。,A,3.(2013四川，10節(jié)選)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人將地衣芽孢桿菌的α-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中，經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種(過(guò)程如圖甲所示)。,(1)圖甲中，過(guò)程①需要的酶有______________________________。為達(dá)到篩選目的，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以_____作為唯一碳源。②、③過(guò)程需重復(fù)幾次，目的是___________________________________________。解析圖甲中過(guò)程①為構(gòu)建基因表達(dá)載體，需要的酶有限制性核酸內(nèi)切酶及DNA連接酶；欲篩選可直接利用淀粉的菌種，宜制備以淀粉為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基；圖示②、③過(guò)程需重復(fù)幾次，其作用在于“純化”，從而進(jìn)一步篩選出分解淀粉能力更強(qiáng)的酵母菌。,限制性核酸內(nèi)切酶、DNA,連接酶,淀粉,進(jìn)一步篩,選純化獲得分解淀粉能力強(qiáng)的酵母菌,(2)某同學(xué)嘗試過(guò)程③的操作，其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示。該同學(xué)的接種方法是_______________；推測(cè)該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是____________。解析圖乙所示培養(yǎng)基平板中的菌落呈分散分布，應(yīng)為采用稀釋涂布平板法接種的結(jié)果，然而，該平板上菌落并非“均勻分布”而是相對(duì)集中于左側(cè)，這可能是由于制作平板時(shí)“涂布不均勻”所致。,稀釋涂布平板法,涂布不均勻,(3)以淀粉為原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵，接種________菌的發(fā)酵罐需要先排氣，其原因是_________________________________________________________________________。解析若以“淀粉”為原料，則相對(duì)于普通菌種，工程酵母菌因轉(zhuǎn)入了α-淀粉酶基因，其利用淀粉的能力將更強(qiáng)，故發(fā)酵產(chǎn)生CO2的能力更強(qiáng)，因此需要先排氣。,工程酵母,工程酵母菌分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力強(qiáng)，導(dǎo),致酒精發(fā)酵產(chǎn)生CO2的速率更快,1.微生物的培養(yǎng),,知能回歸,,,,(1)無(wú)菌技術(shù)：主要包括消毒和滅菌。①消毒方法：常用煮沸消毒法、巴氏消毒法。②常用滅菌方法：灼燒滅菌——接種環(huán)、接種針等金屬器具；干熱滅菌——主要針對(duì)玻璃器皿等；高壓蒸汽滅菌——主要針對(duì)培養(yǎng)基等。,(2)如圖為倒平板操作過(guò)程，操作時(shí)要待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)，在酒精燈火焰附近進(jìn)行。制備固體培養(yǎng)基最后要將平板倒置，其主要目的是防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠滴入培養(yǎng)基造成污染。,(3)平板劃線操作,(4)稀釋涂布平板法：先將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋后涂布平板，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。如圖所示：,2.某種微生物的分離與計(jì)數(shù)(1)分離——選擇培養(yǎng)基①培養(yǎng)基中加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。②培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌。③培養(yǎng)基中缺乏氮源時(shí)，可以分離得到固氮微生物。④當(dāng)培養(yǎng)基的某種營(yíng)養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時(shí)，也具有分離效果。⑤改變微生物的培養(yǎng)條件，也可以達(dá)到分離微生物的目的，如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。,(2)計(jì)數(shù)①土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)a.篩選菌株：利用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基篩選菌株。b.計(jì)數(shù)方法：活菌計(jì)數(shù)法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。前者為了增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力和準(zhǔn)確性，則需設(shè)置重復(fù)組，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。c.過(guò)程：土壤取樣→樣品的稀釋→微生物的培養(yǎng)與觀察。,②分解纖維素的微生物的分離a.實(shí)驗(yàn)原理,即：可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。b.流程：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布平板→挑選菌落。,,,,(3)鑒定方法,1.下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)室中微生物培養(yǎng)和分離的敘述，錯(cuò)誤的是()A.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵B.高溫滅菌的目的是殺死所有微生物C.劃線分離可在培養(yǎng)基上獲得均勻分布的單菌落D.稀釋涂布平板法可用于計(jì)數(shù)活菌數(shù)目,典題特訓(xùn),,,解析微生物培養(yǎng)過(guò)程中要進(jìn)行無(wú)菌操作，防止外來(lái)雜菌的入侵，A正確；高溫滅菌可殺死所有微生物，B正確；劃線分離可在培養(yǎng)基上獲得逐漸變稀分布的單菌落，C錯(cuò)誤；稀釋涂布平板法中根據(jù)菌落的數(shù)目可計(jì)數(shù)活菌數(shù)目，D正確。答案C,2.某學(xué)者欲研究被石油污染過(guò)的土壤中細(xì)菌數(shù)量，并從中篩選出能分解石油的細(xì)菌。下列操作錯(cuò)誤的是()A.利用平板劃線法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)B.以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選C.采用稀釋涂布平板法分離菌種D.稱取和稀釋土壤時(shí)應(yīng)在火焰旁,解析稀釋涂布平板法有利于將細(xì)菌分離形成單個(gè)菌落，利于計(jì)數(shù)，因此，如果是通過(guò)菌落數(shù)來(lái)估算細(xì)菌的數(shù)量，應(yīng)該采用稀釋涂布平板法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)；要篩選出能分解石油的細(xì)菌，應(yīng)該采用選擇培養(yǎng)基，即以石油作為唯一碳源進(jìn)行培養(yǎng)，在這種培養(yǎng)基上只有能分解石油的細(xì)菌才能生長(zhǎng)繁殖；操作時(shí)要無(wú)菌操作，稱取和稀釋土壤應(yīng)在火焰旁。答案A,3.下列關(guān)于微生物的營(yíng)養(yǎng)，說(shuō)法正確的是(多選)()A.對(duì)一些微生物來(lái)說(shuō)，同一種物質(zhì)既可作碳源又可作氮源B.凡是碳源都能提供能量C.除水以外的無(wú)機(jī)物僅提供無(wú)機(jī)鹽D.無(wú)機(jī)氮源也可能提供能量解析此題考查我們對(duì)微生物的營(yíng)養(yǎng)和能源的理解。對(duì)一些微生物來(lái)說(shuō)，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源。CO2是光能自養(yǎng)細(xì)菌的碳源，但不能提供能量。CO2和N2是無(wú)機(jī)物，也是微生物的碳源和氮源。硝化細(xì)菌所利用的氮源是無(wú)機(jī)氮源氨，同時(shí)氨也為硝化細(xì)菌提供用以化能合成作用的能源。,AD,4.下列對(duì)無(wú)菌操作轉(zhuǎn)接培養(yǎng)物的操作順序的敘述，正確的是()①接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌②在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開棉塞③打開棉塞的試管口通過(guò)火焰④將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液，沾取一環(huán)菌液轉(zhuǎn)移到一裝有無(wú)菌培養(yǎng)基的試管中⑤將試管口塞上棉塞⑥接種環(huán)再次灼燒滅菌A.①②④⑤⑥B.①②③④⑤C.①②③④⑤⑥D(zhuǎn).①②③④,C,5.(2014新課標(biāo)全國(guó)Ⅱ，39)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是____________________；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為____________。,解析為了檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，隨機(jī)取滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間。0.1mL稀釋液中平均有(39＋38＋37)/3＝38個(gè)活菌，則每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為38/0.1＝380，則稀釋前每毫升水樣中活菌數(shù)目為380100＝3.8104，則每升水樣中活菌數(shù)目為3.81041000＝3.8107。,答案檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8107,(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)_____滅菌，在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是_______________________________________。,解析接種環(huán)、接種針等金屬用具可直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，以達(dá)到迅速?gòu)氐诇缇哪康摹Ｔ诘诙渭耙院蟮膭澗€時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落。,灼燒,將聚集的菌體,逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落,(3)示意圖A和圖B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。,解析比較圖A和圖B可以看出：A培養(yǎng)基中細(xì)菌的分布呈線性，是用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果；B培養(yǎng)基中細(xì)菌均勻分布，是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。,B,(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中__________的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)___________的利用率。解析振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率，因此振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。,溶解氧,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),6.(2014四川，10)有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖甲、圖乙所示。,(1)微生物生長(zhǎng)繁殖所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、_____________四類，該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是_________________________________________。解析微生物生長(zhǎng)繁殖需要的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽四類。根據(jù)題意可知，土壤中某些微生物有降解苯磺隆的能力，該實(shí)驗(yàn)的目的是探索其降解機(jī)制，因此，需要分離出有降解苯磺隆能力的土壤中的某些微生物，故選擇培養(yǎng)時(shí)為了排除其他碳源的干擾，培養(yǎng)基中唯一碳源只能是苯磺隆。,氮源和無(wú)機(jī)鹽,只有能利用苯磺隆的微生物能,正常生長(zhǎng)繁殖,(2)與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長(zhǎng)素和___________，這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配制成_____保存?zhèn)溆?。解析與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基需要添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，用于調(diào)節(jié)植物細(xì)胞再分化；這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配制成母液保存?zhèn)溆谩?細(xì)胞分裂素,母液,(3)純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是________。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無(wú)菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤有____________________________________。,解析純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是無(wú)菌接種環(huán)。劃線的平板培養(yǎng)后，發(fā)現(xiàn)第一劃線區(qū)域的劃線上不間斷地長(zhǎng)滿了菌，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無(wú)菌落，而其他劃線上有菌落。造成此現(xiàn)象的原因可能有兩個(gè)：一是接種環(huán)灼燒后未冷卻，菌種接觸到高溫的接種環(huán)而死亡；二是劃第二劃線區(qū)域第一條線時(shí)未從第一區(qū)域末端開始。答案接種環(huán)①接種環(huán)灼燒后未冷卻；②劃線未從第一區(qū)域末端開始,(4)為探究苯磺隆的降解機(jī)制，將該菌種的培養(yǎng)液過(guò)濾離心，取上清液做圖乙所示實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是___________________________________，該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理？為什么？________________________。,解析根據(jù)圖乙所示實(shí)驗(yàn)中的上清液加入蛋白酶溶液推測(cè)，實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖翘骄磕康木晔欠衲芊置诮到獗交锹〉牡鞍踪|(zhì)，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)不合理之處是缺少不加蛋白酶溶液、其他條件同圖乙的空白對(duì)照。,泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì),不合理，缺少空白對(duì)照,目的菌株能分,7.研究被石油污染過(guò)的土壤中細(xì)菌數(shù)量，并從中篩選出能分解石油的細(xì)菌。為了分離和純化高效分解石油的細(xì)菌，科研人員利用被石油污染過(guò)的土壤進(jìn)行如圖A所示的實(shí)驗(yàn)。,(1)配制好的培養(yǎng)基通?？梢允褂胈_______________法滅菌。與步驟②中培養(yǎng)基成分相比，步驟③中培養(yǎng)基成分的最大區(qū)別是_______________。,解析培養(yǎng)基滅菌用高壓蒸汽滅菌，為篩選出能分解石油的細(xì)菌，所以石油是唯一碳源。,高壓蒸汽滅菌,石油是唯一碳源,(2)接種細(xì)菌常用的方法有___________________________。若經(jīng)過(guò)④過(guò)程后獲得的結(jié)果為圖B所示，則所操作方法如圖____所示。,解析接種細(xì)菌常用的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。圖B為平板劃線法，如圖甲所示。,平板劃線法和稀釋涂布平板法,甲,(3)步驟⑤后取樣測(cè)定石油含量的目的是______________________________。對(duì)步驟⑤某瓶中細(xì)菌計(jì)數(shù)的方法有兩種，一種方法是_______________，其菌落數(shù)可代表活菌數(shù)；另一種方法是____________________________________，該方法需要借助一塊特殊的載玻片，其名稱為________________________。解析步驟⑤進(jìn)一步操作是為篩選出分解石油能力最好的細(xì)菌，微生物計(jì)數(shù)可用稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)法(血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法)。,篩選出分解石油,能力最好的細(xì)菌,稀釋,涂布平板法,顯,微鏡直接計(jì)數(shù)(血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法),血細(xì)胞計(jì)數(shù)板(血球計(jì)數(shù)板),,真題重溫,知能回歸,典題特訓(xùn),,,,微生物在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的應(yīng)用,1.判斷下列有關(guān)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的敘述(1)在果酒發(fā)酵后期擰開瓶蓋的間隔時(shí)間可延長(zhǎng)(2012江蘇，21A)()(2)在家庭中用鮮葡萄制作果酒時(shí)，讓發(fā)酵裝置接受光照并放在45℃處(2010北京，1AD)()(3)在果酒和果醋制作過(guò)程中，果酒的制作過(guò)程是在缺氧條件下，而果醋整個(gè)制作過(guò)程一直處于有氧條件下(2010江蘇，7AC改編)(),√,,真題重溫,,,(4)與果醋、果酒制作相比，腐乳的制作所需要的適宜溫度最高，所用菌種為乳酸菌(2011江蘇，3AC改編)()(5)在腐乳制作過(guò)程中必須有能產(chǎn)生蛋白酶的微生物參與，所用豆腐的含水量為70%左右，水分過(guò)多腐乳不易成形(2008江蘇，17AB改編)(),√,,2.(2013江蘇，14)某研究性學(xué)習(xí)小組以櫻桃番茄為材料進(jìn)行果酒、果醋發(fā)酵實(shí)驗(yàn)。下列相關(guān)敘述正確的是()A.酵母菌是嗜溫菌，所以果酒發(fā)酵所需的最適溫度較高B.先供氧進(jìn)行果醋發(fā)酵，然后隔絕空氣進(jìn)行果酒發(fā)酵C.與人工接種的發(fā)酵相比，自然發(fā)酵獲得的產(chǎn)品品質(zhì)更好D.適當(dāng)加大接種量可以提高發(fā)酵速率、抑制雜菌生長(zhǎng)繁殖,解析醋酸菌是嗜熱菌，果醋發(fā)酵所需的最適溫度較高，A錯(cuò)誤；進(jìn)行果酒、果醋發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，要先隔絕空氣進(jìn)行果酒發(fā)酵，再供氧進(jìn)行果醋發(fā)酵，B錯(cuò)誤；人工接種的菌種品質(zhì)更好，且不容易存在雜菌污染，故比自然發(fā)酵獲得的產(chǎn)品品質(zhì)更好，C錯(cuò)誤；適當(dāng)加大接種量，讓菌體快速形成優(yōu)勢(shì)菌群，可以抑制雜菌生長(zhǎng)，提高發(fā)酵速率，D正確。答案D,微生物在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的應(yīng)用,知能回歸,,,1.下列有關(guān)傳統(tǒng)果酒、果醋發(fā)酵和腐乳制作的比較不正確的是(多選)()A.果酒、腐乳發(fā)酵的主要微生物屬于真核生物，果醋發(fā)酵菌種屬于原核生物B.果酒制成后只需將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高的環(huán)境中即可制作果醋C.果酒和果醋發(fā)酵在無(wú)氧環(huán)境下進(jìn)行，腐乳發(fā)酵在有氧條件下進(jìn)行D.果酒、果醋和腐乳制作過(guò)程利用的都是微生物胞內(nèi)酶,典題特訓(xùn),,,解析果酒發(fā)酵的微生物是酵母菌，為真核生物，腐乳發(fā)酵的微生物是毛霉，為真核生物，果醋發(fā)酵的微生物為醋酸菌，為原核生物，故A正確；果酒制成后轉(zhuǎn)移至較高溫度的環(huán)境中，還需要通入氧氣，才可以制作果醋，故B錯(cuò)誤；果酒發(fā)酵在無(wú)氧條件下進(jìn)行，而果醋和腐乳發(fā)酵都需要有氧條件，故C錯(cuò)誤；制作果酒、果醋利用的是微生物的胞內(nèi)酶，腐乳利用的是微生物的胞外酶(主要是毛霉分泌的蛋白酶和脂肪酶)，故D錯(cuò)誤。答案BCD,2.利用如圖裝置制作果酒和果醋，下列敘述正確的是(多選)(),A.制作果酒時(shí)應(yīng)關(guān)閉閥b，適時(shí)打開閥a幾秒鐘B.制作果酒時(shí)如果關(guān)閉閥a，打開閥b，會(huì)導(dǎo)致爆瓶C.制作果醋時(shí)需打開閥a通氣，打開閥b排氣D.制作果醋時(shí)把發(fā)酵裝置放到30～35℃環(huán)境中比較適宜,解析圖示裝置中，閥a控制排氣，閥b控制進(jìn)氣，所以制作果酒時(shí)應(yīng)關(guān)閉閥b，適時(shí)打開閥a幾秒鐘以排出產(chǎn)生的氣體；如果關(guān)閉閥a，打開b，產(chǎn)生的氣體不能排出，會(huì)使發(fā)酵液從右側(cè)導(dǎo)管排出，不會(huì)導(dǎo)致爆瓶；制作果醋時(shí)，打開閥a是為了排氣，打開閥b是為了通氣；制作果醋時(shí)發(fā)酵裝置應(yīng)放到30～35℃環(huán)境中比較適宜。答案AD,3.下列關(guān)于腐乳制作的敘述中，錯(cuò)誤的是()A.毛霉可利用蛋白酶將蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸B.豆腐胚表面有毛霉、青霉、曲霉等微生物，它們之間存在競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系C.腐乳的前期制作溫度應(yīng)控制在15～18℃環(huán)境條件下D.加入較多的香辛料既能調(diào)味又能縮短腐乳成熟的時(shí)間,解析制作腐乳主要是利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶和脂肪酶將豆腐內(nèi)的蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸，脂肪分解成甘油和脂肪酸，從而改變豆腐的成分和口味；豆腐胚表面長(zhǎng)有毛霉、青霉、曲霉等微生物，它們都利用豆腐內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)來(lái)維持生命活動(dòng)，因而存在競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系；毛霉生長(zhǎng)的適宜溫度是15～18℃；加入較多的香辛料能調(diào)味，殺菌防腐，酒精含量越高，對(duì)蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長(zhǎng)。答案D,4.用酵母菌使葡萄汁產(chǎn)生葡萄酒，當(dāng)酒精含量達(dá)到12%～16%時(shí)，發(fā)酵就停止了。有關(guān)敘述不正確的是()A.酒精對(duì)酵母菌有毒害作用，后期細(xì)胞生命活動(dòng)減弱B.產(chǎn)生酒精的同時(shí)也有CO2生成，所以發(fā)酵過(guò)程中需擰松瓶蓋放氣C.產(chǎn)物積累使pH值下降，同時(shí)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)減少，種群數(shù)量下降D.氧氣過(guò)少導(dǎo)致其無(wú)法呼吸，細(xì)胞中即無(wú)法合成ATP,解析酒精具有消毒的作用，對(duì)酵母菌同樣有毒害作用，A正確；產(chǎn)生酒精的同時(shí)也有CO2生成，所以發(fā)酵過(guò)程中需擰松瓶蓋放氣，B正確；酒精發(fā)酵過(guò)程中，產(chǎn)物積累使pH值發(fā)生改變，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)減少，種群數(shù)量下降，C正確；酒精發(fā)酵是在無(wú)氧條件下，不需要氧氣，D錯(cuò)誤。答案D,5.某生物興趣小組的同學(xué)利用新鮮蘋果榨取果汁并制作果酒，簡(jiǎn)要流程如下：→發(fā)酵→果酒(1)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，有同學(xué)發(fā)現(xiàn)榨取的果汁非常渾濁，解決的方法是______________。(2)分離酵母菌應(yīng)使用________培養(yǎng)基，固定化酵母細(xì)胞常采用________法。,新鮮蘋果→清洗干凈→去掉果核→榨汁機(jī)榨汁→果汁,從成品果酒中分離酵母菌→擴(kuò)大培養(yǎng)→固定化酵母細(xì)胞,,解析(1)果膠是植物細(xì)胞壁以及胞間層的主要組成成分之一，若發(fā)現(xiàn)榨取的果汁非常渾濁，用果膠酶處理，可使果汁變得澄清。(2)分離酵母菌應(yīng)使用選擇培養(yǎng)基，因?yàn)榧?xì)胞比酶分子大，故制備固定化細(xì)胞時(shí)常采用包埋法。答案(1)用果膠酶處理(2)選擇包埋,(3)酵母菌的酒精發(fā)酵過(guò)程一般控制在_________溫度范圍最適合酵母菌繁殖，請(qǐng)簡(jiǎn)要說(shuō)明理由______________________________________。(4)在酸性條件下，可用_________來(lái)檢測(cè)發(fā)酵產(chǎn)物中是否有酒精產(chǎn)生。若想進(jìn)一步檢測(cè)所得果酒中酵母菌的密度，可采用_____________法。解析(3)酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵的適宜溫度是18～25℃，(4)果汁發(fā)酵后，可以用重鉻酸鉀來(lái)檢驗(yàn)是否有酒精生成，在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈灰綠色，稀釋涂布平板法能用于酵母菌的計(jì)數(shù)。,18～25℃,在此溫度下，酶的活性最,強(qiáng)，代謝最旺盛,重鉻酸鉀,稀釋涂布平板,(5)果汁為酵母菌的生長(zhǎng)和繁殖提供的營(yíng)養(yǎng)成分是___________________________________。(6)發(fā)酵完成后，生物興趣小組同學(xué)制作的果酒品質(zhì)非常好。為了方便后續(xù)年級(jí)使用，可將菌液________________________________________________________保存。解析(5)微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子等，故果汁為酵母菌的生長(zhǎng)和繁殖提供的營(yíng)養(yǎng)成分是碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子等。(6)長(zhǎng)期保存菌種應(yīng)將菌種轉(zhuǎn)移到甘油中，與甘油充分混合后，放在－20℃的冷藏箱中。,碳源、氮源、,水、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子等,轉(zhuǎn)移到甘油中，與甘油充分,混合后，放在－20℃的冷藏箱中,6.葡萄糖經(jīng)酒精發(fā)酵可以產(chǎn)生葡萄酒，進(jìn)一步經(jīng)醋酸發(fā)酵可以產(chǎn)生葡萄醋，請(qǐng)利用相關(guān)的知識(shí)回答問(wèn)題：(1)從將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶到酒精發(fā)酵完畢的過(guò)程中，酵母菌進(jìn)行的細(xì)胞呼吸方式是__________________。解析利用葡萄汁制作葡萄酒，裝入發(fā)酵瓶后，一開始酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，迅速增加數(shù)量，隨著氧氣消耗，后期進(jìn)行無(wú)氧呼吸，產(chǎn)生酒精。,有氧呼吸、無(wú)氧呼吸,(2)甲、乙兩位同學(xué)將葡萄榨成汁后分別裝入相應(yīng)的發(fā)酵瓶中，在溫度等適宜的條件下進(jìn)行發(fā)酵，如下圖所示。,①在排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接，其目的是___________________________。②請(qǐng)找出圖中實(shí)驗(yàn)操作的錯(cuò)誤：甲圖中的錯(cuò)誤是__________，乙圖中的錯(cuò)誤是________________。,解析為防止空氣中的微生物污染發(fā)酵瓶，在排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接。甲圖中未夾住發(fā)酵瓶的進(jìn)氣管，這樣酵母菌會(huì)一直進(jìn)行有氧呼吸，不能產(chǎn)生酒精；乙圖中瓶中發(fā)酵液過(guò)多，淹沒了排氣管在瓶?jī)?nèi)的管口，這樣不能排出氣體，可能會(huì)排出發(fā)酵液。,答案①防止空氣中的微生物污染發(fā)酵瓶②甲：未夾住發(fā)酵瓶的進(jìn)氣管乙：瓶中發(fā)酵液過(guò)多，淹沒了排氣管在瓶?jī)?nèi)的管口,(3)為了提高果酒的品質(zhì)，更好地抑制其他微生物的生長(zhǎng)，常常加入人工培養(yǎng)的酵母菌。為了分離純化酵母菌，最簡(jiǎn)便的接種方法是____________。(4)若果汁中混雜有醋酸菌，在果酒發(fā)酵旺盛時(shí)，醋酸菌________(能/不能)將果汁中的糖發(fā)酵形成醋酸，其原因是______________________________________________________________________。,解析(3)分離純化酵母菌，常用的接種方法是平板劃線法。(4)醋酸菌進(jìn)行有氧呼吸，若果汁中混雜有醋酸菌，在果酒發(fā)酵旺盛時(shí)，果酒發(fā)酵時(shí)的缺氧環(huán)境能抑制醋酸菌生長(zhǎng)，同時(shí)果酒發(fā)酵的最適溫度也低于醋酸菌生長(zhǎng)的最適溫度，所以醋酸菌不能將果汁中的糖發(fā)酵形成醋酸。答案(3)平板劃線法(4)不能果酒發(fā)酵時(shí)的缺氧環(huán)境能抑制醋酸菌生長(zhǎng)，果酒發(fā)酵的最適溫度也低于醋酸菌生長(zhǎng)的最適溫度,7.腐乳是我國(guó)古代勞動(dòng)人民創(chuàng)造出的一種經(jīng)過(guò)微生物發(fā)酵的大豆食品。下面是腐乳制作的流程示意圖：讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制(1)現(xiàn)代科學(xué)研究表明，許多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，其中起主要作用的是毛霉，毛霉是一種_____狀真菌。,解析毛霉是一種絲狀真菌。,絲,(2)腐乳制作的原理是_________________________________________________________________________________________________________。,,解析腐乳的制作原理是毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶能將脂肪水解成甘油和脂肪酸。,毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶能將脂肪水解成甘油和脂肪酸,(3)傳統(tǒng)的制作過(guò)程中，豆腐塊上生長(zhǎng)的毛霉來(lái)自_________________。而現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下，將優(yōu)良的毛霉菌種接種在豆腐上，這樣可以____________________________________。,解析傳統(tǒng)的腐乳制作過(guò)程中，不接種微生物，只能來(lái)自空氣中的毛霉孢子；現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)在無(wú)菌條件下進(jìn)行操作，可以防止雜菌污染，保證產(chǎn)品質(zhì)量。,空氣中的毛,避免其他菌種的污,霉孢子,染，保證產(chǎn)品的質(zhì)量,(4)加鹽的作用是_____________________________和______________________________________。(5)鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的，加酒的作用是___________________和______________________。解析(4)制作腐乳的過(guò)程中，加鹽的作用有兩方面：析出豆腐中的水分，使豆腐變硬；抑制微生物的生長(zhǎng)，避免豆腐腐敗變質(zhì)。(5)鹵湯中加酒的作用有兩方面：抑制微生物的生長(zhǎng)和使腐乳具有獨(dú)特的風(fēng)味。,,析出豆腐中的水分，使豆腐變硬,抑制微生,物的生長(zhǎng)，避免豆腐腐敗變質(zhì),抑制微,生物的生長(zhǎng),使腐乳具有獨(dú)特的風(fēng)味,,真題重溫,知能回歸,典題特訓(xùn),,,,酶的應(yīng)用,判斷下列關(guān)于酶的敘述(1)玉米淀粉經(jīng)酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖異構(gòu)酶的作用下轉(zhuǎn)化成果糖。利用固定化技術(shù)可使葡萄糖異構(gòu)酶重復(fù)利用，從而降低生產(chǎn)成本(2014?山東，35改編)()(2)反應(yīng)產(chǎn)物對(duì)固定化酶的活性沒有影響(2013?江蘇，6B)()(3)相同pH時(shí)加酶洗衣粉洗滌效果好于普通洗衣粉(2012?江蘇，16C)(),真題重溫,,√,,,(4)利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行發(fā)酵，糖類的作用只是作為反應(yīng)底物(2009?江蘇，3D)()(5)剛?cè)芑暮Ｔ逅徕c應(yīng)迅速與活化的酵母菌混合制備混合液(2010?江蘇，25A)()(6)在酶的制備和應(yīng)用中，透析、電泳和酸解等方法常用于酶的分離與純化(2011?江蘇，15B)(),,,,1.加酶洗衣粉的洗滌原理,知能回歸,,,2.固定化酶和固定化細(xì)胞的比較,1.(2014江蘇，18)下列關(guān)于加酶洗衣粉的敘述，正確的是()A.高溫易使酶失活，因此冷水洗滌去污效果應(yīng)該比溫水好B.洗衣粉中表面活性劑對(duì)堿性蛋白酶活性有一定的促進(jìn)作用C.在pH低于7.0的自來(lái)水中，堿性蛋白酶依然能起作用D.洗衣粉中酶主要是通過(guò)快速分解溶在水里的污漬發(fā)揮作用,典題特訓(xùn),,解析A項(xiàng)，酶有最適溫度，加酶洗衣粉的酶在水溫為45～60C時(shí)能充分發(fā)揮洗滌效果。B項(xiàng)，如果將酶直接加入到洗衣粉中，洗衣粉中的表面活性劑能影響堿性蛋白酶的活性，甚至使酶失活。C項(xiàng)，加酶洗衣粉中的酶是經(jīng)過(guò)特殊處理的，能耐酸、耐堿，可忍受表面活性劑和較高的溫度。D項(xiàng)，加酶洗衣粉中的酶的作用是催化衣物上的污漬分解，使其容易從衣物上脫落下來(lái)。答案C,2.下列關(guān)于生物技術(shù)實(shí)踐的敘述，正確的是(多選)()A.在固定化酵母實(shí)驗(yàn)中，溶解海藻酸鈉時(shí)，最好采用小火或持續(xù)加熱的方法B.用加酶洗衣粉洗滌污漬時(shí)，浸泡時(shí)間不足會(huì)造成洗滌效果差C.利用DNA不溶于冷酒精的性質(zhì)除去溶于酒精的物質(zhì)，從而進(jìn)一步提純DNAD.腐乳制作過(guò)程中，添加料酒、香辛料和鹽，均可以抑制雜菌的生長(zhǎng),解析在固定化酵母細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，溶解海藻酸鈉時(shí)，最好采用小火或間斷加熱的方法，A錯(cuò)誤；酶與底物作用存在時(shí)間依賴性，B正確；利用DNA不溶于冷酒精而雜質(zhì)可溶的性質(zhì)，提純DNA，C正確；含鹽量高會(huì)使微生物細(xì)菌細(xì)胞不斷失水，導(dǎo)致細(xì)胞脫水致死，而起到防腐的作用，D正確。答案BCD,3.下面是制備固定化酵母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)步驟，請(qǐng)回答：酵母細(xì)胞的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸鈉溶液→海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合→固定化酵母細(xì)胞(1)在________狀態(tài)下，微生物處于休眠狀態(tài)?；罨褪亲屘幱谛菝郀顟B(tài)的微生物重新恢復(fù)_____________狀態(tài)?；罨皯?yīng)選擇足夠大的容器，因?yàn)榻湍讣?xì)胞活化時(shí)________。固定化細(xì)胞技術(shù)一般采用___________________法，而固定化酶常用________________法和______________法。,解析在缺水的狀態(tài)下，微生物處于休眠狀態(tài)。活化就是讓處于休眠狀態(tài)的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)?；罨皯?yīng)選擇足夠大的容器，因?yàn)榻湍讣?xì)胞活化時(shí)體積會(huì)增大，以免漲破容器或溢出。固定化細(xì)胞技術(shù)一般采用包埋法，固定化酶常用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。這是因?yàn)榧?xì)胞體積大，而酶分子很??；體積大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合，而體積小的酶容易從包埋材料中漏出。答案缺水正常的生活體積會(huì)增大包埋化學(xué)結(jié)合物理吸附,(2)影響實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵步驟是__________________。海藻酸鈉溶化過(guò)程的注意事項(xiàng)是______________________________________________。如果海藻酸鈉濃度過(guò)低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞數(shù)目_____。如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形，說(shuō)明___________________________。(3)該實(shí)驗(yàn)中CaCl2溶液的作用是____________________________。,解析(2)影響實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵是配制海藻酸鈉溶液，這是因?yàn)槿绻Ｔ逅徕c濃度過(guò)高，很難形成凝膠珠；如果濃度過(guò)低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞的數(shù)目少，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。(3)CaCl2溶液的作用是使膠體聚沉。,配制海藻酸鈉溶液,小火加熱(或間斷加熱或小火間斷加熱)，不斷攪拌,較少,(海藻酸鈉濃度偏高)制作失敗,使膠體聚沉(或形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)),4.某同學(xué)為探究加酶洗衣粉的洗滌效果，按下表的步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作：,(1)該實(shí)驗(yàn)的目的是___________________________________。(2)請(qǐng)分析該同學(xué)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中存在的問(wèn)題，并提出改進(jìn)措施。_____________________________________________________。(3)步驟3和步驟4能否調(diào)換？并說(shuō)明理由。___________________________________________________________________________________________________________。(4)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ號(hào)燒杯中加入的自來(lái)水、洗衣粉、含油漬的衣服及保溫時(shí)間、攪拌速度和時(shí)間均相同，這是為了___________，以便得出科學(xué)結(jié)論。,解析根據(jù)題干中的實(shí)驗(yàn)操作順序，可以判斷出該實(shí)驗(yàn)的自變量是溫度，即探究不同溫度對(duì)加酶洗衣粉的洗滌效果的影響。其他條件應(yīng)保持一致，如水量、水質(zhì)、洗衣粉的量、衣物的質(zhì)料、衣物的大小、污漬量、浸泡時(shí)間和洗滌時(shí)間等。在做實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)先讓每一個(gè)實(shí)驗(yàn)組處于所設(shè)置的溫度且恒溫，再加入洗衣粉，以保證酶發(fā)揮作用時(shí)的溫度，故步驟3與步驟4不能調(diào)換。,答案(1)探究不同溫度對(duì)加酶洗衣粉的洗滌效果的影響(2)應(yīng)選用大小相同的白布，分別滴加4滴同種的植物油，使油漬大小相同；選擇的水溫不合適，考慮洗滌成本，應(yīng)根據(jù)當(dāng)?shù)匾荒曛械膶?shí)際氣溫變化來(lái)確定水溫梯度，如選取5℃、15℃、25℃、35℃的水溫(3)不能調(diào)換，因?yàn)榧用赶匆路壑械拿冈诔貢r(shí)會(huì)分解部分油漬(4)避免因水量、水質(zhì)、洗衣粉的量、衣物的質(zhì)料、衣物的大小、污漬量及浸泡時(shí)間和洗滌時(shí)間不同給實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)誤差,5.在20世紀(jì)50年代，酶已經(jīng)大規(guī)模地應(yīng)用于各個(gè)生產(chǎn)領(lǐng)域，到了70年代又發(fā)明了固定化酶與固定化細(xì)胞技術(shù)。(1)在實(shí)際生產(chǎn)中，固定化酶技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是___________________________________________________________________。與固定化酶技術(shù)相比，固定化細(xì)胞技術(shù)固定的是___________________________。,酶既能與反應(yīng)物接觸，又容易與產(chǎn)物分離，且固定在載體上的酶能反復(fù)使用,多酶系統(tǒng)(一系列、多種酶),(2)制備固定化酵母細(xì)胞，常用的包埋材料是_________，使用了下圖中方法[]________(填出號(hào)碼及名稱)。,包埋法,海藻酸鈉,③,(3)制作固定化酵母細(xì)胞時(shí)，充分混合均勻的酵母細(xì)胞溶液可在飽和_______溶液中形成凝膠珠。部分同學(xué)實(shí)驗(yàn)制得的凝膠珠不是圓形或橢圓形，其主要原因是____________________________________________。,海藻酸鈉濃度過(guò)高(或針筒離液面過(guò)近，高度不夠),CaCl2,,真題重溫,知能回歸,典題特訓(xùn),,,,的粗提取與鑒定,DNA,1.判斷下列有關(guān)DNA技術(shù)的敘述(1)提取細(xì)胞中的DNA需用蒸餾水漲破細(xì)胞(2009江蘇，23A改編)()(2)用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)，其實(shí)驗(yàn)操作步驟相同(2011江蘇，19D改編)(),√,,真題重溫,,(3)用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì)(2009江蘇，23B)()(4)利用雞血進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)中，將絲狀物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色(2011江蘇，19C)(),√,,2.(2013江蘇，4)某同學(xué)用洋蔥進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)，下列操作錯(cuò)誤的是()A.加入洗滌劑后用力進(jìn)行快速、充分的研磨B.用蛋白酶純化過(guò)濾后的研磨液中的DNAC.加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌D.加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱解析本題可用排除法進(jìn)行解答。破碎植物細(xì)胞時(shí)，加入洗滌劑后，動(dòng)作要輕緩、柔和，否則容易產(chǎn)生大量的泡沫，不利于后續(xù)步驟的操作，A錯(cuò)誤。,A,1.實(shí)驗(yàn)原理(1)DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，其中在物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時(shí)最低。(2)DNA不溶于酒精，但是細(xì)胞中的一些有機(jī)物如某些蛋白質(zhì)則溶于酒精，因此可以用酒精提純。,知能回歸,,,(3)DNA遇二苯胺(沸水浴)會(huì)被染成藍(lán)色，因此，二苯胺可用來(lái)鑒定DNA分子。2.實(shí)驗(yàn)流程選取材料→破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液→去除濾液中的雜質(zhì)→DNA的析出與鑒定。,1.下面是某同學(xué)用動(dòng)物肝臟做“DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”的操作，正確的是()A.在燒杯中加入肝臟和蒸餾水并進(jìn)行攪拌，使細(xì)胞破裂釋放核物質(zhì)B.調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度至0.14mol/L，過(guò)濾后取濾液進(jìn)行后續(xù)步驟的操作C.在含DNA的濾液中加入嫩肉粉，使蛋白質(zhì)與DNA分開D.向溶有DNA的NaCl溶液中加入適量二苯胺試劑后溶液呈藍(lán)色,典題特訓(xùn),,,解析因肝臟細(xì)胞沒有分散開，在燒杯中加入肝臟和蒸餾水并進(jìn)行攪拌，不能使細(xì)胞破裂，應(yīng)研磨；DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度很低，過(guò)濾后DNA不在濾液中；嫩肉粉中有蛋白酶可使蛋白質(zhì)分解；向溶有DNA的NaCl溶液中加入適量二苯胺試劑后需沸水浴加熱溶液才能呈藍(lán)色。答案C,2.下列有關(guān)“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是()A.新鮮豬血、菜花等動(dòng)植物材料均可用于DNA的粗提取B.植物材料需先用洗滌劑破壞細(xì)胞壁再吸水漲破C.DNA不溶于95%的冷酒精而溶于2mol/L的NaCl溶液D.溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺試劑后即呈藍(lán)色,解析哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和細(xì)胞器，不含DNA，不能用于提取DNA，因此豬血不能用來(lái)作為提取DNA的材料，故A錯(cuò)誤；用植物材料提取DNA時(shí)，通過(guò)研磨法破壞細(xì)胞壁，用洗滌劑瓦解細(xì)胞膜，故B錯(cuò)誤；DNA不溶于95%的冷酒精，但溶于2mol/L的NaCl溶液，故C正確；溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺試劑后需要沸水浴加熱才能呈藍(lán)色，故D錯(cuò)誤。答案C,