2019-2020年高三生物第一輪復習 單元評估檢測 新人教版選修1.doc

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2019-2020年高三生物第一輪復習 單元評估檢測 新人教版選修11.(12分)在我國，民間利用酵母菌發(fā)酵釀酒歷史悠久。下圖是農(nóng)村家庭利用酵母菌發(fā)酵釀酒生產(chǎn)制作過程用到的一組裝置，該裝置構(gòu)思巧妙，使用方便。請回答下列問題：(1)利用大米釀制米酒，該過程發(fā)揮作用的酵母菌從細胞結(jié)構(gòu)看是生物，利用酵母菌釀酒的原理是。(2)利用酵母菌發(fā)酵釀酒過程中，水和酒的產(chǎn)生總是同時進行的嗎？(填“是”或“不是”)；待發(fā)酵產(chǎn)生大量酒精后，還要將米酒與酒糟分離，從分離原理看，該裝置是一個裝置，鐵鍋1在該裝置中起的作用是。(3)橘皮精油一般不用該方法進行提取，原因是，適宜采用法提取?！窘忸}指南】(1)圖中關鍵信息：圖示裝置為蒸餾裝置。(2)關鍵知識：酒精發(fā)酵的原理。植物有效成分的提取方法的適用條件?！窘馕觥?1)大米釀制米酒的菌種為酵母菌，酵母菌屬于真菌，為真核生物。酵母菌釀酒的原理是在無氧條件下，酵母菌通過無氧呼吸將葡萄糖分解為CO2和酒精。(2)在釀酒的過程中，開始階段酵母菌通過有氧呼吸分解葡萄糖，產(chǎn)生CO2和水，耗盡O2后，酵母菌通過無氧呼吸產(chǎn)生酒精，因此水和酒的產(chǎn)生是不同步的。圖中發(fā)酵后混合物加熱蒸發(fā)，經(jīng)鐵鍋1冷凝后形成酒水混合物，通過刻有凹槽的葉狀木板收集后流出，因此該裝置就是一個蒸餾裝置。(3)橘皮精油的提取通常采用壓榨法，而不用蒸餾法，原因是橘皮精油在水蒸氣蒸餾時會發(fā)生部分水解，利用水中蒸餾法又會發(fā)生原料的焦糊現(xiàn)象。答案：(1)真核無氧條件下酵母菌將葡萄糖分解為CO2和酒精(2)不是蒸餾冷凝(3)原料易焦糊或橘皮精油被分解壓榨2.(12分)(xx大連模擬)(1)育種工作者常采用花藥離體培養(yǎng)的方法，使花粉粒發(fā)育為單倍體植株。下列過程是采用水稻的花藥進行培養(yǎng)的步驟，請據(jù)此回答下列問題：選取發(fā)育至期的水稻花藥培養(yǎng)成功率最高。確定花粉發(fā)育時期最常用的方法有法，某些植物的花粉不易著色，需采用法。通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體植株一般有兩種途徑：一種是花粉通過階段發(fā)育為植株，另一種是在誘導培養(yǎng)基上先形成，再將其誘導分化成植株。影響植物組織培養(yǎng)的因素很多，其中最關鍵的激素有和。請解釋細胞不離體便不能長成完整植株的根本原因。(2)天然香料的主要來源是動物和植物，因此人們常從植物中提取。請回答下列問題：根據(jù)植物原料和有效成分的不同，各種物質(zhì)有具體的提取方法。玫瑰精油易揮發(fā)，可采用法提取，提取橘皮精油一般采用法。鑒定胡蘿卜素粗品時，可用法，點樣應該，才會形成細小的圓點。分析結(jié)果時，判斷標準樣品點與萃取樣品點的依據(jù)是?！窘馕觥?1)選取在單核期的水稻花藥，培養(yǎng)成功率最高。確定花粉發(fā)育時期最常用的方法有醋酸洋紅法，某些植物的花粉不易著色，需采用焙花青-鉻礬法。通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體植株一般有兩種途徑：一種是花粉通過胚狀體階段發(fā)育為植株，另一種是在誘導培養(yǎng)基上先形成愈傷組織，再將其誘導分化成植株，影響植物組織培養(yǎng)的因素很多，其中最關鍵的激素有生長素和細胞分裂素。細胞不離體便不能長成完整植株的根本原因是遺傳信息的執(zhí)行情況不同(或基因的選擇性表達)。(2)玫瑰精油易揮發(fā)，可采用蒸餾法提取；提取橘皮精油，為防止原料焦糊一般采用壓榨法。鑒定胡蘿卜素粗品時，用紙層析法，點樣快速細致才會形成細小的圓點。分析結(jié)果時，根據(jù)層析后的色帶點數(shù)判斷標準樣品與萃取樣品。答案：(1)單核醋酸洋紅焙花青-鉻礬胚狀體愈傷組織生長素細胞分裂素(兩空順序可以顛倒)遺傳信息的執(zhí)行情況不同(或基因的選擇性表達)(2)蒸餾壓榨紙層析快速細致層析后的色帶點數(shù)3.(15分)某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物A。研究人員用有機化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解有機化合物A的細菌(目的菌)。實驗的主要步驟如下圖所示。請分析回答下列問題：(1)培養(yǎng)基中加入有機化合物A可以為“目的菌”生長提供所需，這種培養(yǎng)基屬于性培養(yǎng)基。(2)實驗需要振蕩培養(yǎng)，由此推測“目的菌”的異化作用類型為型。(3)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時，常采用平板劃線法進行接種，此過程中所用的接種工具是，操作時采用的方法滅菌。(4)某同學計劃統(tǒng)計污水池中“目的菌”的總數(shù)，他選用10-4、10-5、10-6稀釋液進行平板劃線，每種稀釋液都設置了3個培養(yǎng)皿。從設計實驗的角度看，還應設置的一組對照實驗是，設計此對照實驗的目的是證明過程中是否被雜菌污染?！窘忸}指南】(1)關鍵信息：研究人員用有機化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解有機化合物A的細菌(目的菌)。(2)隱含信息：有機化合物A含有碳元素和氮元素。(3)必備知識：振蕩培養(yǎng)既可以使微生物充分利用培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)，又能增加培養(yǎng)基中的溶解氧?！窘馕觥?1)由題中關鍵信息可以確定有機化合物A中含有碳元素和氮元素，可以為“目的菌”生長提供所需碳源和氮源，這種培養(yǎng)基稱為選擇性培養(yǎng)基。(2)由于振蕩培養(yǎng)既可以使微生物充分利用培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)，又能增加培養(yǎng)基中的溶解氧，因此可以推測培養(yǎng)的微生物異化作用類型為需氧型。(3)平板劃線法接種的工具是接種環(huán)，可采用火焰灼燒的方法滅菌。(4)微生物計數(shù)時既要設置重復，又要設置對照，設置對照的目的是防止培養(yǎng)基制備不合格，方法是不接種或接種無菌水。答案：(1)碳源和氮源選擇(2)需氧(3)接種環(huán)灼燒(4)不接種的空白培養(yǎng)基(或接種無菌水的培養(yǎng)基)培養(yǎng)基制備【易錯提醒】第(1)小題錯答為“碳源”或“氮源”。錯因是不能根據(jù)題中關鍵信息“研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物A的細菌(目的菌)”推出隱含信息：“化合物A可以提供碳源和氮源”。4.(12分)(xx四川高考改編)有機農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長期使用會污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機制的實驗過程如圖甲、乙所示。(1)微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、四類，該實驗所用的選擇性培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是。(2)與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長素和，這些植物激素一般需要事先單獨配制成保存?zhèn)溆谩?3)劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有。(4)為探究苯磺隆的降解機制，將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心，取上清液做圖乙所示實驗。該實驗的假設是，該實驗設計是否合理？為什么？?！窘忸}指南】(1)圖示信息：利用選擇性培養(yǎng)基分離降解苯磺隆的菌株，取菌株產(chǎn)生的蛋白酶分解苯磺隆。(2)關鍵知識：微生物的培養(yǎng)基成分、植物組織培養(yǎng)、微生物的接種、對照原則?！窘馕觥勘绢}考查微生物的培養(yǎng)及對照實驗的設計原則。(1)微生物的培養(yǎng)基主要含有水、碳源、氮源和無機鹽四類營養(yǎng)物質(zhì)；選擇性培養(yǎng)基只允許特定種類的微生物生長，又要抑制或阻止其他種類微生物生長，因而必須以苯磺隆為唯一碳源，只讓目的菌株生長繁殖。(2)植物組織培養(yǎng)中啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素是生長素和細胞分裂素，為了避免每次配制時都要稱量，可將植物激素先配成母液。(3)接種環(huán)在平板內(nèi)的第二次劃線起，都要先灼燒滅菌冷卻后劃線，而且要從上一次劃線末端而非空白處劃線，不冷卻會燙死上一次劃線末端的菌株，從空白處劃線會無菌株。(4)從圖乙上清液中加入蛋白酶溶液可知，蛋白酶是用于水解上清液中的某蛋白質(zhì)的，由此可判定實驗假設是目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)，但是還需設計不加入蛋白酶的對照組。答案：(1)氮源和無機鹽只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長繁殖(2)細胞分裂素母液(3)接種環(huán)灼燒后未冷卻；劃線未從第一區(qū)域末端開始劃線(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)不合理，缺少空白對照5.(14分)菊花是一種良好的觀賞植物，并具有一定的藥用價值?？蒲腥藛T通過組織培養(yǎng)技術可實現(xiàn)某些珍稀菊花品種的快速繁殖。(1)進行組織培養(yǎng)所依據(jù)的原理是。配制MS固體培養(yǎng)基的母液時，無機物中的大量元素應濃縮倍。配制好的培養(yǎng)基在分裝后需進行處理。(2)接種前，外植體的消毒一般要用體積分數(shù)為70%的酒精和兩種藥劑。由外植體形成愈傷組織的過程，稱為植物細胞的，由愈傷組織形成叢芽的過程稱為。(3)在研究植物生長調(diào)節(jié)劑對叢芽增殖的影響時，研究人員設計了相關實驗，實驗結(jié)果如下表(6-BA屬于細胞分裂素類似物、NAA屬于生長素類似物)。組別123456789106-BA(mg/L)0.10.10.50.51.01.02.02.03.03.0NAA(mg/L)2.01.02.01.00.50.10.50.10.50.1叢芽增殖倍數(shù)1.62.12.42.52.62.72.74.42.52.7據(jù)實驗結(jié)果分析，6-BA的濃度在mg/L時，叢芽的增殖倍數(shù)隨之相應增加；當6-BA濃度一定時，NAA濃度越(填“低”或“高”)，叢芽的增殖效果越明顯。若要進一步誘導叢芽生根，新配制的培養(yǎng)基與誘導叢芽增殖的培養(yǎng)基相比，在成分上的主要區(qū)別是和?！窘馕觥?1)植物組織培養(yǎng)所依據(jù)的原理是植物細胞的全能性。配制MS固體培養(yǎng)基的母液時，無機物中的大量元素應濃縮10倍，微量元素濃縮100倍。配制好的培養(yǎng)基在分裝后需進行滅菌處理。(2)接種前，外植體的消毒一般要用體積分數(shù)為70%的酒精和質(zhì)量分數(shù)為0.1%的氯化汞溶液兩種藥劑。由外植體形成愈傷組織的過程，稱為植物細胞的脫分化，由愈傷組織形成叢芽的過程稱為再分化。(3)由表中數(shù)據(jù)可知，6-BA的濃度在0.12.0 mg/L時，叢芽的增殖倍數(shù)隨之相應增加，當6-BA的濃度大于2.0 mg/L時，叢芽增殖倍數(shù)減少；比較表中6-BA濃度相同的兩組實驗，均為低濃度的NAA時叢芽增殖倍數(shù)較大，說明6-BA濃度一定時，NAA濃度越低，叢芽的增殖效果越明顯。誘導生根的培養(yǎng)基與誘導叢芽增殖的培養(yǎng)基相比，在成分上的主要區(qū)別是MS培養(yǎng)基各成分用量減半并增加了NAA的用量。答案：(1)植物細胞的全能性10滅菌(2)體積分數(shù)為0.1%的氯化汞溶液脫分化再分化(3)0.12.0低MS培養(yǎng)基各成分用量減半NAA用量增加【方法技巧】3種培養(yǎng)基中的植物激素(1)誘導愈傷組織培養(yǎng)基：細胞分裂素與生長素用量適中。(2)誘導生芽培養(yǎng)基：細胞分裂素與生長素的用量比例較高。(3)誘導生根培養(yǎng)基：細胞分裂素與生長素的用量比例較低或只加生長素。6.(12分)(xx益陽模擬)楊梅是浙江省的特色水果，為對其進行深加工，某廠進行了楊梅酒和楊梅醋的研制，基本工藝流程如下：請回答問題：(1)在制備楊梅酒過程中，為了提高楊梅的出汁率，在壓榨前可加入一定濃度的纖維素酶和酶。甲罐頂上彎管中加水的主要目的是。發(fā)酵一定時間后，觀察到發(fā)酵罐內(nèi)液面不再有，說明發(fā)酵基本完畢。(2)甲罐中的主要微生物是，屬于生態(tài)系統(tǒng)成分中的。若要檢測是否產(chǎn)生了酒精可用(試劑)進行檢測。(3)在制備楊梅醋過程中，乙罐內(nèi)先填充經(jīng)處理的木材刨花，然后加入含菌的培養(yǎng)液，使該菌附著在刨花上，再讓甲罐中發(fā)酵完畢的楊梅酒流入乙罐進行楊梅醋發(fā)酵，楊梅醋的pH可通過控制楊梅酒的來調(diào)節(jié)。(4)若甲罐中的楊梅酒全部流經(jīng)乙罐制成楊梅醋，則乙罐中CO2的產(chǎn)生量是。A.甲罐的兩倍B.與甲罐的相等C.甲罐的一半D.幾乎為零(5)在楊梅酒和楊梅醋發(fā)酵的整個過程中，某物質(zhì)濃度隨時間變化的示意圖如上圖，該物質(zhì)是。【解題指南】(1)圖示信息：甲罐流出楊梅酒，為酒精發(fā)酵罐。乙罐流出楊梅醋，為醋酸發(fā)酵罐。乙罐內(nèi)加入刨花，起到固定細胞的作用。(2)關鍵知識：固定化細胞反應的程度由反應液的流速決定?！窘馕觥?1)在制作楊梅酒之前首先要將楊梅進行榨汁，楊梅的細胞壁會影響出汁率，而楊梅細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，因此榨汁前可加入一定濃度的纖維素酶和果膠酶，以提高楊梅的出汁率。甲罐頂上彎管內(nèi)加入水可以防止空氣進入。發(fā)酵罐內(nèi)的氣泡是酒精發(fā)酵產(chǎn)生的CO2，當發(fā)酵罐內(nèi)液面不再有氣泡冒出時，說明發(fā)酵基本完畢。(2)酒精發(fā)酵的主要微生物是酵母菌，主要營腐生生活，因此屬于生態(tài)系統(tǒng)成分中的分解者。若要檢測是否產(chǎn)生了酒精可用酸性重鉻酸鉀溶液進行檢測。(3)由圖可知，在制備楊梅醋過程中，刨花起到固定醋酸菌細胞的作用。在填充木材刨花前，需要對其進行滅菌處理，以防止雜菌污染，加入刨花后才能加入含醋酸菌的培養(yǎng)液，使醋酸菌附著在刨花上。楊梅醋的pH主要取決于發(fā)酵液中醋酸的含量，因此可通過控制楊梅酒的流速來調(diào)節(jié)醋酸發(fā)酵產(chǎn)生的醋酸量，達到調(diào)節(jié)楊梅醋pH的目的。(4)醋酸發(fā)酵的過程中無CO2的生成。(5)圖中物質(zhì)先增加后穩(wěn)定最后減少，分析酒精發(fā)酵和醋酸發(fā)酵過程可知，酒精是酒精發(fā)酵的產(chǎn)物，在醋酸發(fā)酵過程中被消耗，符合圖中變化規(guī)律。答案：(1)果膠防止空氣進入氣泡冒出(2)酵母菌分解者(酸性)重鉻酸鉀溶液(3)滅菌醋酸流速(4)D(5)酒精【加固訓練】生物技術已在生產(chǎn)、生活中得到廣泛應用，給人們帶來了很好的經(jīng)濟效益，大大提高了人們的生活水平。請回答下列問題：(1)從生物體內(nèi)提取出來的酶，將其分離提純的最簡便方法是。其原理是利用蛋白質(zhì)分子的大小、形狀和的不同，產(chǎn)生不同的遷移速度來進行分離。(2)從自然界中獲得的微生物必須經(jīng)過才能應用于工業(yè)生產(chǎn)。果汁生產(chǎn)中常用的果膠酶廣泛存在于植物果實和微生物中，工業(yè)上通常采用等微生物發(fā)酵來生產(chǎn)果膠酶。(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素，常用作為溶劑，原因是。【解題指南】(1)關鍵詞：“蛋白質(zhì)分子的大小、形狀”。(2)隱含信息：酶的化學本質(zhì)是蛋白質(zhì)。(3)必備知識：電泳法和凝膠色譜法均能提純蛋白質(zhì)，但是原理不同?！窘馕觥?1)酶的化學本質(zhì)是蛋白質(zhì)，因此分離提純酶可以采用電泳法或凝膠色譜法，由于凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理只能根據(jù)蛋白質(zhì)分子的大小和形狀，而無其他因素，因此本題中只能選擇電泳法，分離蛋白質(zhì)時影響蛋白質(zhì)分子遷移速度的因素除蛋白質(zhì)分子的大小、形狀外還包括蛋白質(zhì)分子的電荷(帶電性質(zhì))。(2)生產(chǎn)利用的微生物必須經(jīng)過純化培養(yǎng)，否則可能導致雜菌污染。能夠產(chǎn)生果膠酶的微生物常見的是霉菌等。(3)提取胡蘿卜素常用的有機溶劑為水不溶性有機溶劑，原因是胡蘿卜素是脂溶性物質(zhì)，不溶于水，如果用水溶性有機溶劑，則原料中的少量水分會進入萃取液，除去水分就比較困難。答案：(1)電泳電荷(2)分離和純化培養(yǎng)霉菌(3)水不溶性有機溶劑(或石油醚或有機溶劑)胡蘿卜素是脂溶性物質(zhì)，不溶于水7.(11分)(xx江蘇高考)為了獲得-胡蘿卜素產(chǎn)品，某小組開展了產(chǎn)-胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實驗。請回答下列問題：(1)實驗用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是；為了減少滅菌后器皿被污染，滅菌前應該。(2)為了篩選出酵母菌，培養(yǎng)基中添加了青霉素，其目的是。(3)下圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖，圖中甲、乙、丙指示的依次是。(填序號)安全閥、放氣閥、壓力表放氣閥、安全閥、壓力表安全閥、放氣閥、溫度表放氣閥、安全閥、溫度表(4)為了將分離到的菌株純化，挑取了菌落在3塊相同平板上劃線，結(jié)果其中一塊平板的各劃線區(qū)均未見菌生長，最可能的原因是。(5)為增加-胡蘿卜素提取量，在研磨酵母細胞時，添加石英砂的目的是；研磨時(填“需要”或“不需要”)添加CaCO3，理由是?！窘忸}指南】(1)圖示信息：滅菌鍋及其局部剖面示意圖，從而推斷甲、乙、丙指示的結(jié)構(gòu)名稱。(2)關鍵知識：微生物的培養(yǎng)與分離純化、色素的提取?！窘馕觥勘绢}考查微生物培養(yǎng)中的滅菌、接種技術、滅菌鍋的構(gòu)造、色素提取的操作。(1)滅菌常用方法有高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌等，培養(yǎng)皿常用高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌。將培養(yǎng)皿放入滅菌鍋之前通常用牛皮紙或報紙包扎避免滅菌后的再次污染。(2)青霉素能破壞細菌的細胞壁并在細菌的繁殖期起殺菌作用，因此添加青霉素可抑制細菌的生長。(3)乙連接軟管，為排(放)氣閥，甲為安全閥，丙是壓力表。(4)3塊平板有兩塊平板長有菌落，說明含有菌株并可在培養(yǎng)基上生長；而其中一塊未見菌落，說明菌株死亡，最可能的原因是接種過程中接種環(huán)灼燒后未冷卻或未足夠冷卻，使菌株因溫度過高被殺死。(5)石英砂有助于研磨充分。CaCO3用于中和酸性物質(zhì)，-胡蘿卜素較耐酸，因此不需添加CaCO3。答案：(1)干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)用牛皮紙(報紙)包扎器皿(2)抑制細菌(放線菌)生長(3)(4)接種環(huán)溫度過高，菌被殺死(5)有助于研磨充分不需要-胡蘿卜素較耐酸8.(12分)(xx山東高考)玉米是重要的糧食作物，經(jīng)深加工可生產(chǎn)酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：(1)玉米秸稈中的纖維素經(jīng)充分水解后的產(chǎn)物可被酵母菌利用發(fā)酵生產(chǎn)酒精。培養(yǎng)酵母菌時，該水解產(chǎn)物為酵母菌的生長提供。發(fā)酵過程中檢測酵母菌數(shù)量可采用法或稀釋涂布平板法計數(shù)。(2)玉米胚芽油不易揮發(fā)，宜選用法或法從玉米胚芽中提取。(3)玉米淀粉經(jīng)酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖異構(gòu)酶的作用下轉(zhuǎn)化成果糖。利用技術可使葡萄糖異構(gòu)酶重復利用，從而降低生產(chǎn)成本。(4)利用PCR技術擴增葡萄糖異構(gòu)酶基因時，需用耐高溫的催化。PCR一般要經(jīng)歷三十次以上的循環(huán)，每次循環(huán)包括變性、和三步。【解題指南】(1)題干關鍵詞：“玉米秸稈”“玉米胚芽”和“玉米淀粉”。(2)關鍵知識：所有微生物生長繁殖均需要培養(yǎng)基，其含有碳源、氮源、無機鹽、水等；PCR技術與細胞內(nèi)DNA復制的最大區(qū)別是需要耐高溫的DNA聚合酶?！窘馕觥勘绢}主要考查微生物的培養(yǎng)和PCR技術。(1)玉米秸稈中的纖維素經(jīng)水解后的產(chǎn)物為葡萄糖，葡萄糖可為酵母菌的生長提供碳源。酵母菌可用顯微鏡直接計數(shù)法或稀釋涂布平板法計數(shù)。(2)玉米胚芽油不易揮發(fā)，因此不宜選用蒸餾法提取，可用壓榨法或萃取法提取。(3)利用固定化酶技術可使酶重復利用，從而降低生產(chǎn)成本。(4)PCR技術中應選用耐高溫的TaqDNA聚合酶催化，PCR的每次循環(huán)包括變性、復性和延伸三步。答案：(1)碳源顯微鏡直接計數(shù)(2)壓榨萃取(注：兩空可顛倒)(3)固定化酶(4)(Taq)DNA聚合酶(低溫)復性(或退火)(中溫)延伸