高考生物二輪復習 第1部分 專題講練突破 專題9 生物技術實踐 第18講 生物技術實踐

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專題九 生物技術實踐 第18講　生物技術實踐 [考綱熱度]1.微生物的分離和培養(yǎng)(5年17考)　　　　　 2.培養(yǎng)基對微生物的選擇作用(5年10考) 3．利用微生物進行發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及運用發(fā)酵加工食品的基本方法(5年18考) 4．植物的組織培養(yǎng)(5年13考) 5.從生物材料中提取某些特定的成分(5年11考) [診斷知識盲點] 1．消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細胞的傷害。(√) 2．在配制培養(yǎng)基時，除滿足營養(yǎng)需求外，還應考慮pH、O2及特殊營養(yǎng)物質(zhì)的需求。(√) 3．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。(√) 4．在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變藍，則說明篩選到分解尿素的細菌。() 5．條件適宜時醋酸菌可將葡萄汁中的糖分解成醋酸。(√) 6．在果酒發(fā)酵后期，打開瓶蓋的間隔時間可延長。(√) 7．在家庭中用鮮葡萄制作果酒時，向發(fā)酵裝置通入空氣。() 8．果醋發(fā)酵包括無氧發(fā)酵和有氧發(fā)酵。() 9．將長滿毛霉的豆腐裝瓶腌制時，底層和近瓶口處需加大用鹽量。() 10．果酒、果醋和腐乳的制作中，腐乳制作所需要的適宜溫度最高。() 11．在果酒自然發(fā)酵中，需人工添加酵母菌種。() 12．紅葡萄酒中的紅色是紅葡萄皮中的色素進入發(fā)酵液產(chǎn)生的。(√) 13．變酸的酒的表面的菌膜是酵母菌大量繁殖形成的。() 14．在葡萄酒制作中，采摘的葡萄應反復沖洗，且要先除枝梗再沖洗。() 15．制作腐乳的菌種只有毛霉。() 16．在腐乳制作過程中加入香辛料既能調(diào)節(jié)風味，還具有防腐殺菌作用。(√) 17．在腐乳制作過程中，鹽的用量要適宜，酒的含量一般控制在12%左右。(√) 18．泡菜制作的菌種主要是醋酸菌。() 19．泡菜制作的前期通氧，后期應嚴格厭氧。() 20．配制鹽水時，鹽與水的質(zhì)量比為4∶1。() 21．愈傷組織是一團有特定結(jié)構和功能的薄壁細胞。() 22．用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子。() 23．植物組織培養(yǎng)所需的外植體，可以來自于植物的任何細胞。() 24．植物組織培養(yǎng)應在無菌條件下進行。(√) 25．二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株。() 26．以花粉作為外植體可得到單倍體植株。(√) 27．不同階段的培養(yǎng)基中細胞分裂素和生長素的比例不同。(√) 28．在剝離花藥時，不要損傷花藥，否則接種后不能脫分化形成愈傷組織。() 29．月季花藥培養(yǎng)時得到的都是單倍體植株。() 30．蒸餾法的實驗原理是利用水將芳香油溶解下來，再把水蒸發(fā)掉，剩余的就是芳香油。() 31．原料易焦糊和有效成分易水解的植物芳香油的提取，不宜采用水中蒸餾法，宜采用壓榨法或萃取法。(√) 32．提煉玫瑰精油的玫瑰花應在花開的初期采取，因為此階段的花含玫瑰精油最多。() 33．油水混合物中加入無水硫酸鈉，有利于分離油層。() 34．乙醇和丙酮能夠用于胡蘿卜素的萃取。() 35．萃取的效率主要取決于萃取時的溫度和時間。() 36．新鮮的胡蘿卜含水量高，干燥時可采用高溫以節(jié)省時間。() 　> > > > > > > > > > > > > > > > > > > > > > > > > > 考點一　微生物的培養(yǎng)和利用 [高考領航] 1．(2016高考全國乙卷)空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實驗步驟如下： ①配制培養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)； ②制作無菌平板； ③設置空白對照組和若干實驗組，進行相關操作； ④將各組平板置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù)。 回答下列問題： (1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于________。若要完成步驟②，該培養(yǎng)基中的成分X通常是________。 (2)步驟③中，實驗組的操作是________。 (3)若在某次調(diào)查中，某一實驗組平板上菌落平均數(shù)為36個/平板，而空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落，這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了________現(xiàn)象。若將30(即36－6)個/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法________(填“正確”或“不正確”)。 解析：(1)牛肉膏和蛋白胨中均含有氮元素，因此微生物所需的氮來源于牛肉膏和蛋白胨。若要完成步驟②，需要進行倒平板操作，用到的是固體培養(yǎng)基，所以培養(yǎng)基中要有瓊脂。(2)該實驗的空白對照組為不進行處理的無菌平板，實驗組的操作為將各無菌平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露相同時間。(3)若空白對照組的平板上出現(xiàn)了菌落，說明實驗過程中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象。空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落，導致實驗變量不唯一，不能確定實驗組平板上的菌落是否僅由教室內(nèi)不同高度空氣中的微生物形成，因此不能求出實驗組的菌落平均數(shù)。 答案：(1)牛肉膏、蛋白胨　瓊脂　(2)將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時間　(3)污染　不正確 2．(2014高考新課標全國卷Ⅱ)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作。回答下列問題： (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是________________________；然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為________。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌，操作時，接種環(huán)通過________滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。 (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高________的利用率。 解析：(1)在涂布接種前，隨機選取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間，目的是檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，不能留有雜菌。1 mL水稀釋100倍之后的0.1 mL中3個平板菌落的平均數(shù)為38，1 L等于1 000 mL，則1 L水中含有38101001 000＝3.8107。(2)用平板劃線法分離水樣中的細菌，操作時，接種環(huán)通過灼燒滅菌，在第二次及以后的劃線時，從上一次劃線末端開始劃線，目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落。(3)稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果應為圖B。(4)振蕩可以使細菌分散，更有利于細菌利用培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物質(zhì)，并且可以使培養(yǎng)液中的溶解氧增多。 答案：(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　3.8107 (2)灼燒　將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落 (3)B　(4)溶解氧　營養(yǎng)物質(zhì) 3．(2014高考新課標全國卷Ⅰ)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}： (1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復合酶，其中的葡萄糖苷酶可將________分解成________。 (2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時，CR可與纖維素形成______________色復合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的________。 (3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學設計了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表)： 酵母膏 無機鹽 淀粉 纖維素粉 瓊脂 CR溶液 水 培養(yǎng)基甲 ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ 培養(yǎng)基乙 ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ 注：“＋”表示有，“－”表示無。 據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是_____________________________________________________________________；培養(yǎng)基乙________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析：(1)纖維素酶是一種復合酶，一般認為它至少包括三種組分：C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，葡萄糖苷酶將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)剛果紅可與纖維素形成紅色復合物，但并不與水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應。用含有剛果紅的纖維素培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，由于纖維素被分解，紅色復合物無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌菌落為中心的透明圈。(3)培養(yǎng)基甲未使用瓊脂，為液體培養(yǎng)基，不能用于分離單菌落。含有纖維素和剛果紅(CR)的固體培養(yǎng)基可分離和鑒別纖維素分解菌。 答案：(1)纖維二糖　葡萄糖　(2)紅　透明圈　(3)不能　液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落　不能　培養(yǎng)基中沒有纖維素，不會形成CR—纖維素紅色復合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌 [核心探究] 1．培養(yǎng)基中主要營養(yǎng)物質(zhì) 碳源、氮源、水、無機鹽和特殊營養(yǎng)物質(zhì)。 2．無菌技術包括消毒和滅菌 (1)無菌技術的選擇原則：考慮效果和被操作對象的承受能力。 (2)實驗操作要在酒精燈火焰附近進行。 3．選擇微生物接種方法的原則 (1)純化微生物：平板劃線法和稀釋涂布平板法均可。 (2)計數(shù)微生物：只能選擇稀釋涂布平板法。 4．選擇培養(yǎng)基 對微生物具有選擇作用的培養(yǎng)基。 5．微生物的鑒定需要配制鑒別培養(yǎng)基 (1)分解尿素的細菌可使添加酚紅指示劑的培養(yǎng)基變紅。 (2)纖維素分解菌可在含有剛果紅的培養(yǎng)基上長出周圍存在透明圈的菌落。 [題點突破] 1．微生物培養(yǎng)與分離技術是生物學中重要的實驗技術。根據(jù)有關微生物的知識，分析回答問題： (1)培養(yǎng)基的制備需經(jīng)過計算、稱量、溶化和B：________、A：________等過程，上述過程中需要在超凈工作臺上操作的是________。 (2)純化菌種時為得到單菌落，常采用的接種方法是平板劃線法和D：____________，其中需用接種環(huán)進行操作的是____________。 (3)為達到篩選土壤中分解尿素細菌的目的，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應以尿素作為唯一的________，培養(yǎng)基中加入________指示劑培養(yǎng)后，若變紅則其中含有所需細菌。若篩選纖維素分解菌，在選擇培養(yǎng)后須進行E：________和F：________過程，一般通過觀察________的有無挑選出所需菌種。 解析：(1)培養(yǎng)基的制備需經(jīng)過計算、稱量、溶化、[B]滅菌、[A]倒平板等過程，其中倒平板需要在超凈工作臺上操作。(2)常采用的微生物接種方法是平板劃線法和[D]稀釋涂布平板法。其中平板劃線法需用接種環(huán)進行操作。(3)欲篩選土壤中分解尿素的細菌，培養(yǎng)基中應以尿素作為唯一的氮源，需要在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑進行鑒定。若篩選纖維素分解菌，在選擇培養(yǎng)后須進行[E]梯度稀釋→[F]涂布平板→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落等過程。 答案：(1)滅菌　倒平板　倒平板 (2)稀釋涂布平板法　平板劃線法 (3)氮源　酚紅　梯度稀釋　涂布平板　透明圈 2．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，經(jīng)微生物分解后能更好地被植物利用。某生物興趣小組試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設計實驗并成功篩選到能高效分解尿素的細菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如下表所示。將表中物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到100 mL。實驗過程如圖所示： KH2PO4 1.4 g Na2HPO4 2.1 g MgSO47H2O 0.2 g 葡萄糖 10 g 尿素 1 g 瓊脂 15 g 回答下列問題： (1)該培養(yǎng)基能篩選出目的菌的原因是______________________。 (2)圖中將細菌轉(zhuǎn)到固體培養(yǎng)基上接種時，可采用的方法是_____________。初步篩選出來的菌種還需要進一步的鑒定：在培養(yǎng)基中加入________指示劑，接種并培養(yǎng)初步篩選的菌種，若指示劑變成________色，則可說明該菌種能夠分解尿素。 (3)在實驗中，下列材料或用具需要滅菌的是________，需要消毒的是________(填序號)。 ①培養(yǎng)細菌的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿 ②玻棒、試管、錐形瓶和吸管 ③實驗操作者的雙手 (4)在進行分離分解尿素的細菌實驗時，A同學從培養(yǎng)基上篩選出大約50個菌落，而其他同學只選擇出大約20個菌落。A同學的實驗結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有________(填序號)。 ①所取土樣不同　　　　 ②培養(yǎng)基被污染 ③接種操作錯誤　　　　 ④沒有設置對照實驗 (5)實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應該進行________處理后，才能倒掉。 解析：(1)分析該培養(yǎng)基的成分表可知，尿素為該培養(yǎng)基中的唯一氮源，只有能利用尿素的微生物才能在該培養(yǎng)基中生長。(2)接種微生物時，常采用平板劃線法或稀釋涂布平板法。能分解尿素的細菌合成的脲酶將尿素分解成氨，會導致培養(yǎng)基的pH升高，使酚紅指示劑變紅。所以，欲鑒定初步篩選出來的菌種，可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，接種并培養(yǎng)初步篩選的菌種，若指示劑變成紅色，說明該菌種能夠分解尿素。(3)在實驗過程中，為了防止雜菌污染，需要對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、玻棒、試管、錐形瓶、吸管等進行滅菌處理，即需要對①和②滅菌；需要對實驗操作者的雙手進行消毒，即對③進行消毒。(4)在實驗時，如果取樣不同、培養(yǎng)基污染、操作失誤即①②③等都會導致分離篩選的菌落數(shù)多。(5)為了防止造成環(huán)境污染，實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應該進行滅菌處理后，才能倒掉。 答案：(1)尿素是唯一的氮源，只有能利用尿素的微生物才能生長 (2)平板劃線法或稀釋涂布平板法　酚紅　紅 (3)①和②?、? (4)①②③ (5)滅菌 考點二　傳統(tǒng)發(fā)酵技術的應用 [高考領航] 1．(2016高考全國甲卷)蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的?；卮鹣铝袉栴}： (1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程①和②是蘋果醋生產(chǎn)的第一階段，在酵母菌細胞的________中進行，其產(chǎn)物乙醇與________試劑反應呈現(xiàn)灰綠色，這一反應可用于乙醇的檢驗；過程③在酵母菌細胞的________中進行。與無氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增殖速度________。 (2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程，根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型，該過程需要在________條件下才能完成。 (3)在生產(chǎn)過程中，第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同，第一階段的溫度________(填“低于”或“高于”)第二階段的。 (4)醋酸桿菌屬于____核生物，其細胞結(jié)構中_____(填“含有”或“不含有”)線粒體。 解析：(1)圖中過程①和②是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生乙醇的過程，無氧呼吸的場所是細胞質(zhì)基質(zhì)。乙醇可用酸性重鉻酸鉀試劑檢測，顏色由橙色變?yōu)榛揖G色。過程③為有氧呼吸的第二和第三階段，場所為線粒體。在有氧條件下酵母菌進行有氧呼吸，產(chǎn)生更多的能量供酵母菌繁殖利用，故有氧條件下酵母菌的繁殖速度更快。(2)醋酸桿菌是好氧型細菌，因此，在醋酸桿菌作用下，將乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程需要在有氧條件下才能完成。(3)在生產(chǎn)過程中，第一階段酵母菌產(chǎn)生乙醇的適宜溫度為18～25 ℃，第二階段醋酸桿菌產(chǎn)生醋酸的適宜溫度為30～35 ℃，第一階段的溫度低于第二階段的。(4)醋酸桿菌屬于原核生物，原核細胞中的細胞器只有核糖體一種，不含線粒體。 答案：(1)細胞質(zhì)基質(zhì)　重鉻酸鉀　線粒體　快　(2)有氧　(3)低于　(4)原　不含有 2．(2015高考廣東卷)泡菜是我國的傳統(tǒng)食品之一，但制作過程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽對人體健康有潛在危害，某興趣小組準備參加“科技創(chuàng)新大賽”，查閱資料得到下圖。 (1)制作泡菜時，泡菜壇一般用水密封，目的是________。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物有________。 (2)據(jù)上圖，與第3天相比，第8天后的泡菜更適于食用，因為后者________；pH呈下降趨勢，原因是________________。 (3)該小組得到一株“優(yōu)選”乳酸菌(亞硝酸鹽還原酶活力比普通乳酸菌高5倍)，擬參照資料的實驗方案和食鹽濃度(4%～10%)，探究與普通乳酸菌相比用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜過程中亞硝酸鹽含量的高低，并確定其最適條件。請你設計一個實驗結(jié)果記錄表，并推測實驗結(jié)論。 解析：(1)制作泡菜時，泡菜壇要選擇密封性好的容器，一般用水密封，以創(chuàng)造無氧環(huán)境，有利于乳酸菌發(fā)酵，防止蔬菜腐爛。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物有丙酮酸、[H]和少量ATP。(2)第3天時，泡菜中亞硝酸鹽含量達到最高，在第8天后的泡菜中，亞硝酸鹽含量降到最低，故第8天后的泡菜更適于食用。乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)生的乳酸會導致pH下降。(3)設計的記錄表中要包含乳酸菌類型、食鹽濃度和發(fā)酵時間等自變量，因變量為亞硝酸鹽的含量。通過相互對照確定用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜過程中亞硝酸鹽含量的高低，并確定最適發(fā)酵條件。 答案：(1)創(chuàng)造無氧環(huán)境，有利于乳酸菌發(fā)酵　丙酮酸、[H](少量ATP)　(2)亞硝酸鹽含量低　乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)生了乳酸　 (3)兩種乳酸菌在泡菜腌制過程中亞硝酸鹽含量變化表 推測實驗結(jié)論：與普通乳酸菌相比，“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜時，相同條件下產(chǎn)生的亞硝酸鹽含量低。 3．(2016高考全國丙卷)某同學用新鮮的泡菜濾液為實驗材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?；卮鹣铝袉栴}： (1)分離純化乳酸菌時，首先需要用________對泡菜濾液進行梯度稀釋，進行梯度稀釋的理由是______________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有________和________。分離純化時應挑選出________的菌落作為候選菌。 (3)乳酸菌在－20 ℃長期保存時，菌液中常需要加入一定量的________(填“蒸餾水”、“甘油”或“碳酸鈣”)。 解析：(1)分離純化乳酸菌時，首先需要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀釋，這樣既可避免雜菌污染，又可將乳酸菌分散成單個細胞，以便在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。(2)乳酸的積累影響乳酸菌的增殖，加入碳酸鈣可以中和乳酸菌代謝(無氧呼吸)過程中產(chǎn)生的乳酸，另外，乳酸和碳酸鈣反應，進而導致碳酸鈣分解形成透明圈，有利于乳酸菌的鑒別和分離。(3)對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。在3 mL的甘油瓶中，裝入1 mL甘油后滅菌。將1 mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在－20 ℃的冷凍箱中保存。 答案：(1)無菌水　泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落　(2)鑒別乳酸菌　中和產(chǎn)生的乳酸(或酸)　具有透明圈　(3)甘油 [核心探究] 1．傳統(tǒng)發(fā)酵食品的發(fā)酵類型 (1)果酒制作和泡菜制作：無氧發(fā)酵，應控制無氧條件。 (2)果醋制作和腐乳制作：有氧發(fā)酵；腐乳制作后期為無氧發(fā)酵。 2．發(fā)酵菌種類型 (1)果酒制作和腐乳制作的發(fā)酵菌種：真菌。(真菌，細菌) (2)果醋制作和泡菜制作的發(fā)酵菌種：細菌。(真菌，細菌) 3．腐乳發(fā)酵的原理 毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶和脂肪酶將蛋白質(zhì)和脂肪分解為小分子有機物。 4．控制雜菌 包括發(fā)酵條件、鹽、酒和香辛料(調(diào)味料)等因素。 [題點突破] 1．根據(jù)相關知識，回答關于果酒、果醋和腐乳制作的相關問題： (1)當________時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。 (2)在________條件下，重鉻酸鉀與酒精發(fā)生反應呈現(xiàn)________色。 (3)下圖為腐乳制作的實驗流程示意圖，據(jù)圖回答下列問題： ①圖中A代表________，其主要目的是_____________，同時還能________________。 ②在配制鹵湯中酒的含量一般控制在____________左右，酒精含量過高腐乳成熟時間將會________；酒精含量過低，________，可能導致豆腐腐敗。 解析：在氧氣、糖源都充足的條件下，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精發(fā)生反應呈現(xiàn)灰綠色。在腐乳制作過程中，在豆腐上長出毛霉后需加鹽腌制，鹽的作用是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，還能抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。鹵湯中加酒需適量，酒精含量過高使腐乳成熟時間延長，酒精含量低，不足以抑制微生物的生長。 答案：(1)氧氣、糖源都充足 (2)酸性　灰綠 (3)①加鹽腌制　析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬　抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)　②12%　延長　不足以抑制微生物的生長 2．回答下列有關泡菜制作的問題： (1)制作泡菜時，所用鹽水需煮沸，其目的是____________。為了縮短制作時間，有人還會在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液，加入陳泡菜液的作用是________________。 (2)泡菜制作過程中，乳酸發(fā)酵的過程即為乳酸菌進行________________的過程，該過程發(fā)生在乳酸菌細胞的________中。 (3)泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有________、________和________等。 (4)從開始制作到泡菜品質(zhì)最佳這段時間內(nèi)，泡菜液逐漸變酸。這段時間內(nèi)泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長規(guī)律是__________________，原因是__________________。 解析：(1)細菌分布廣泛，制作泡菜時，需要利用乳酸菌進行發(fā)酵，為防止雜菌污染，所用鹽水需要煮沸；加入陳泡菜液，可以增加乳酸菌數(shù)量，加速乳酸產(chǎn)生。(2)乳酸菌為原核生物，可進行無氧呼吸將葡萄糖分解為乳酸，其無氧呼吸的過程發(fā)生在乳酸菌的細胞質(zhì)中。(3)在泡菜制作過程中，要注意控制腌制的時間、溫度和食鹽的用量等。(4)由于乳酸菌比雜菌更為耐酸，所以在酸性環(huán)境中，乳酸菌能夠正常地增殖，而其他雜菌繁殖將受到抑制，所以在此過程中，乳酸菌數(shù)量增多，雜菌數(shù)量減少。 答案：(1)殺滅雜菌　增加乳酸菌數(shù)量 (2)無氧呼吸　細胞質(zhì) (3)溫度　腌制時間　食鹽用量 (4)乳酸菌數(shù)量增多，雜菌數(shù)量減少　乳酸菌比雜菌更為耐酸 考點三　植物組織培養(yǎng) [高考領航] (2014高考江蘇卷)為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物，先用植物外植體獲得愈傷組織，然后在液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。請回答下列問題： (1)外植體經(jīng)誘導后形成愈傷組織的過程稱為________。 (2)在愈傷組織懸浮培養(yǎng)時，細胞干重、蔗糖濃度和pH的變化如下圖所示。細胞干重在12 d后下降的原因有__________________；培養(yǎng)液中蔗糖的作用是________、________。 (3)多倍體愈傷組織細胞產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細胞經(jīng)________處理，會產(chǎn)生染色體加倍的細胞。為檢測愈傷組織細胞染色體數(shù)目，壓片前常用纖維素酶和________酶解離愈傷組織。若愈傷組織細胞(2n)經(jīng)誘導處理后，觀察到染色體數(shù)為8n的細胞，合理的解釋是______________________、________________。 (4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物，生產(chǎn)中采用植物細胞的固定化技術，其原理與酵母細胞固定化類似。下列說法正確的有________(填序號)。 ①選取旺盛生長的愈傷組織細胞包埋?、诒仨氃诠庹諚l件下培養(yǎng)　③培養(yǎng)過程中需通空氣?、芄潭ɑ笾参锛毎L會變慢 解析：本題考查植物組織培養(yǎng)、誘導染色體加倍、有絲分裂、細胞的固定化技術。(1)外植體在人工、無菌條件下，經(jīng)脫分化可形成愈傷組織。(2)由圖蔗糖濃度下降可知，外植體離體培養(yǎng)過程中需要消耗蔗糖，12天后蔗糖濃度較低；pH下降會影響酶的活性，愈傷組織細胞對物質(zhì)的合成少于分解，細胞干重下降。植物組織培養(yǎng)過程中，蔗糖既能維持一定的滲透壓，又能提供植物細胞生命活動必需的營養(yǎng)物質(zhì)(能量)。(3)一定濃度的秋水仙素或低溫都可抑制紡錘體的形成，使子染色體不能移向兩極，從而使細胞中染色體數(shù)目加倍。植物細胞壁的成分主要是纖維素和果膠，可通過纖維素酶、果膠酶破壞細胞壁，從而使愈傷組織細胞分離。在用秋水仙素或低溫處理后，會出現(xiàn)染色體為2n、4n、8n等的細胞，4n的細胞在有絲分裂后期著絲點分裂，染色體數(shù)目加倍至8n；8n的細胞在有絲分裂中期能清晰看出8n條染色體。(4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物，應選用生長旺盛的愈傷組織細胞。愈傷組織不能進行光合作用，因此要通入無菌空氣確保其正常的生命活動。細胞的固定化通常使用包埋法，由于包埋材料的影響，營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的擴散都受到一定的限制，所以固定化細胞生長速度會變慢。 答案：(1)脫分化 (2)蔗糖濃度下降，pH降低　提供能源　調(diào)節(jié)滲透壓 (3)秋水仙素(低溫)　果膠　經(jīng)加倍到4n的細胞處于有絲分裂后期　經(jīng)加倍到8n的細胞處于有絲分裂中期 (4)①③④ [核心探究] 1．MS培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)包括 大量元素、微量元素和有機物，其主要營養(yǎng)物質(zhì)為無機鹽。 2．植物組織培養(yǎng)的關鍵環(huán)節(jié) 脫分化和再分化。 3．生長素和細胞分裂素 是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素。 (1)生長素與細胞分裂素的使用順序不同，培養(yǎng)物的發(fā)育方向不同。 (2)生長素與細胞分裂素的用量比例影響培養(yǎng)物的發(fā)育方向。 4．植物組織培養(yǎng)過程需要無菌技術 (1)培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌。 (2)外植體需要利用酒精和HgCl2消毒。 (3)接種要在酒精燈火焰附近進行。 5．產(chǎn)生花粉植株的途徑 可通過愈傷組織或胚狀體兩種途徑。 6．鑒定花粉發(fā)育期的方法 醋酸洋紅法和焙花青—鉻礬法。 [題點突破] 1．用多倍體育種的方法培育三倍體無子西瓜，每年都要制種，很麻煩。某活動小組同學們，想到了利用植物組織培養(yǎng)的方法來解決此難題。請回答與此實驗相關的問題。 (1)離體的組織和細胞，對營養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相對特殊，需要配制適宜的培養(yǎng)基。常用的一種培養(yǎng)基是________，其主要成分包括：大量元素、微量元素、有機物，還常常需要添加________；對培養(yǎng)基要進行________滅菌。 (2)選取合適的外植體作為實驗材料，接種前還要對其進行________處理。為提高組織培養(yǎng)成功率，常選擇________的材料做外植體。 (3)如果外植體選取的材料為莖段，插入培養(yǎng)基時應注意________。培養(yǎng)一段時間后，會通過________形成愈傷組織，愈傷組織的特點是________________________。 解析：(1)植物組織培養(yǎng)的基本培養(yǎng)基為MS固體培養(yǎng)基，其主要成分包括大量元素、微量元素、有機物和植物激素。為了防止雜菌污染，配制好的培養(yǎng)基要采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。(2)為了防止外植體上的雜菌污染，接種前要對其進行消毒處理。由于材料的年齡影響培養(yǎng)的成功率，因此通常選擇幼嫩的材料做外植體。(3)利用莖段做外植體，插入培養(yǎng)基時要注意不要倒插，否則不易形成愈傷組織。愈傷組織是外植體通過脫分化形成的，其特點是排列疏松、高度液泡化的薄壁細胞。 答案：(1)MS固體培養(yǎng)基　植物激素　高壓蒸汽 (2)消毒　幼嫩(或答分裂能力強，分化程度低) (3)不能倒插　脫分化　排列疏松、高度液泡化的薄壁細胞 2．如圖是花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑，回答下列相關問題： (1)通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株有兩種途徑，一種是花粉通過A________階段發(fā)育成植株，另一種是花粉在誘導培養(yǎng)基上先形成B，再將其誘導分化成植株。這兩種途徑并沒有絕對的界限，主要取決于培養(yǎng)基中________________________________。 (2)誘導花粉植株能否成功及誘導成功率的高低，受多種因素影響，其中主要的影響因素是________與________。提高誘導成功率的另一個重要因素是____________________。 (3)材料消毒過程中用到的試劑有________、0.1%的氯化汞溶液、無菌水。 (4)滅菌后的花蕾，要在________條件下接種到培養(yǎng)基上。培養(yǎng)過程中不需要光照，同時要控制好溫度。 (5)在花藥培養(yǎng)中，常常會出現(xiàn)____________的變化，因此需要對培養(yǎng)出來的植株做進一步的________。 解析：(1)圖中A通過分化形成叢芽，則A應為胚狀體。形成花粉植株兩條途徑的不同主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類和濃度的配比。(2)誘導花粉植株能否成功及誘導成功率的高低的主要影響因素是材料的選擇和培養(yǎng)基的組成。另外，選擇合適的花粉發(fā)育時期也是影響誘導成功率的另一個重要因素。(3)材料消毒用的試劑主要是70%的酒精、0.1%的氯化汞溶液和無菌水等。(4)植物組織培養(yǎng)的有關操作均需要在無菌條件下進行。(5)在花藥培養(yǎng)中，常常會出現(xiàn)染色體倍性的變化，因此需要對培養(yǎng)出的植株做進一步的鑒定和篩選。 答案：(1)胚狀體　激素的種類和濃度的配比 (2)材料的選擇　培養(yǎng)基的組成　選擇合適的花粉發(fā)育時期 (3)70%的酒精 (4)無菌 (5)染色體倍性　鑒定和篩選 考點四　植物芳香油的提取 [高考領航] 1．(2015高考全國卷Ⅰ節(jié)選)已知微生物A可以產(chǎn)生油脂，微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?；卮鹩嘘P問題： (1)顯微觀察時，微生物A菌體中的油脂通常可用________染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用________(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。 解析：(1)油脂可被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色，被蘇丹Ⅳ染液染成紅色，因此油脂通常用蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染色。不易揮發(fā)的物質(zhì)大多采用萃取法進行提取，水蒸氣蒸餾法一般用來提取易揮發(fā)的物質(zhì)。 答案：(1)蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)　萃取法 2．(2015高考全國卷Ⅱ)回答與胡蘿卜素有關的問題： (1)胡蘿卜含有的胡蘿卜素中，最主要的是________(填“α胡蘿卜素”、“β胡蘿卜素”或“γ胡蘿卜素”)，該胡蘿卜素在人體內(nèi)可以轉(zhuǎn)變成兩分子________，后者缺乏會引起人在弱光下視物不清的病癥，該疾病稱為________，胡蘿卜素是________(填“揮發(fā)性”或“非揮發(fā)性”)物質(zhì)。 (2)工業(yè)生產(chǎn)上，用養(yǎng)殖的巖藻作為原料提取胡蘿卜素時，________(填“需要”或“不需要”)將新鮮的巖藻干燥。 (3)現(xiàn)有乙醇和乙酸乙酯兩種溶劑，應選用其中的______作為胡蘿卜素的萃取劑，不選用另外一種的理由是________________。 解析：(1)胡蘿卜含有的胡蘿卜素有三類，其中最主要的是β胡蘿卜素，β胡蘿卜素在人體內(nèi)可以轉(zhuǎn)變成維生素A，維生素A缺乏會導致夜盲癥。胡蘿卜素是非揮發(fā)性物質(zhì)。(2)胡蘿卜素的提取一般采用萃取法，萃取前需要對材料進行干燥處理，以提高萃取的效率。(3)萃取胡蘿卜素的有機溶劑應該具有很高的沸點，能夠充分溶解胡蘿卜素，并且不與水混溶，如乙酸乙酯。乙醇是水溶性有機溶劑，因萃取過程中能與水混溶而影響萃取效果，所以不用它作萃取劑。 答案：(1)β胡蘿卜素　維生素A　夜盲癥　非揮發(fā)性 (2)需要 (3)乙酸乙酯　萃取胡蘿卜素的有機溶劑應不與水混溶，而乙醇為水溶性有機溶劑 [核心探究] 1．依據(jù)植物有效成分的特性選擇提取方法 (1)提取揮發(fā)性強的植物芳香油：蒸餾法。 (2)提取易溶于有機溶劑的植物有效成分：萃取法。 (3)提取原料中含量高的植物有效成分：壓榨法。 2．物質(zhì)分離的方法 (1)分離油水混合物可以采用分液的方法。 (2)除去壓榨液中的固體物和殘渣通常采用過濾的方法。 (3)除去液體中質(zhì)量較小的固體殘留物通常采用離心的方法。 (4)除去芳香油中的殘留水分常采用加入無水硫酸鈉后過濾的方法。 (5)除去不易揮發(fā)的植物有效成分中的有機溶劑常采用蒸餾法。 [題點突破] 1．生物組織中存在多種有機物，不同的有機物其提取與鑒定方法不盡相同。根據(jù)所學知識，請回答下列問題。 (1)采用蒸餾法提取玫瑰精油時，向初步提取的乳化液中加入________________，作用是______________________。 (2)采用壓榨法提取橘皮精油時，提取之前需用________浸泡，以提高出油率。為了使橘皮油易與水分離，還要分別加入相當于橘皮質(zhì)量0.25%的________和5%的________，并調(diào)節(jié)pH至7～8。 (3)采用萃取法從胡蘿卜中提取胡蘿卜素的主要步驟為粉碎、干燥、萃取、________、________。干燥時，要注意控制________，否則會引起胡蘿卜素的分解；萃取的效率主要取決于萃取劑的________，同時還受原料顆粒的大小、含水量等條件的影響；在對提取的胡蘿卜素粗品通過紙層析法進行鑒定時，應與____________作對照。 解析：(1)用蒸餾法提取玫瑰精油時，獲得的乳化液是油水混合物，需要加入NaCl以增加鹽的濃度，促進油水分層。(2)采用壓榨法提取橘皮精油時，提取之前需用石灰水浸泡，以除去果膠、果蠟，提高出油率。為了使橘皮油易與水分離，還要分別加入相當于橘皮質(zhì)量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4，并調(diào)節(jié)pH至7～8。(3)采用萃取法從胡蘿卜中提取胡蘿卜素的主要步驟為粉碎、干燥、萃取、過濾、濃縮。干燥時，由于溫度過高會導致胡蘿卜素的分解，因此要注意控制溫度和時間。萃取的效率主要取決于萃取劑的性質(zhì)和使用量，同時還受原料顆粒的大小、含水量等條件的影響；在對提取的胡蘿卜素粗品通過紙層析法進行鑒定時，應與標準樣品作對照。 答案：(1)NaCl　增加鹽的濃度，有利于油水分層 (2)石灰水　NaHCO3　Na2SO4 (3)過濾　濃縮　溫度和時間　性質(zhì)和使用量　標準樣品 2．下列是與芳香油提取相關的問題，請回答： (1)玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取，其理由是玫瑰精油具有___________的性質(zhì)。蒸餾時收集的蒸餾液________(填“是”或“不是”)純的玫瑰精油，原因是______________ ________________________________________________________________________。 (2)當蒸餾瓶中的水和原料量一定時，蒸餾過程中，影響精油提取量的主要因素有蒸餾時間和________。 (3)如果蒸餾過程中不進行冷卻，則精油提取量會________，原因是______________。 (4)密封不嚴的瓶裝玫瑰精油保存時最好存放在溫度________的地方，目的是_______。 解析：(1)易揮發(fā)的植物精油能與水蒸氣一起蒸餾，不溶于水的植物精油易與水分離，化學性質(zhì)穩(wěn)定的精油才能在蒸餾時不會被分解，因此只有易揮發(fā)、難溶于水且化學性質(zhì)穩(wěn)定的植物精油才適合用蒸餾法提取。蒸餾時收集的蒸餾液是油水混合物，而不是純的玫瑰精油。(2)當蒸餾瓶中的水和原料量一定時，蒸餾時間和蒸餾溫度是影響精油提取量的主要因素。(3)如果蒸餾過程中不進行冷卻，則部分精油會揮發(fā)掉，從而使提取量下降。(4)由于溫度越高，玫瑰精油的揮發(fā)速度越快，因此密封不嚴的瓶裝玫瑰精油保存時最好存放在溫度較低的地方以減少揮發(fā)。 答案：(1)易揮發(fā)、難溶于水、化學性質(zhì)穩(wěn)定　不是　玫瑰精油隨水蒸氣一起蒸餾出來，所得到的是油水混合物 (2)蒸餾溫度 (3)下降　部分精油會隨水蒸氣揮發(fā)而流失 (4)較低　減少揮發(fā) 限時規(guī)范訓練 (建議用時：40分鐘) 1．如圖是植物組織培養(yǎng)過程示意圖，請回答有關問題： 外植體愈傷組織長出叢芽生根移栽成活 (1)外植體若是菊花莖段組織，則在配制MS固體培養(yǎng)基時，________(填“必需”或“不必”)添加植物激素。 (2)外植體若是月季的花藥，則圖中的①過程________(填“需要”或“不需要”)光照，而經(jīng)②③④過程培養(yǎng)出的植物一般稱為________植株。該植株產(chǎn)生的途徑除了圖中所示外，還可以是花粉通過________階段發(fā)育而來。 (3)外植體若是菊花的根尖組織，則在正常環(huán)境下培養(yǎng)成的新菊花植株葉片的顏色是________，該過程體現(xiàn)了植物細胞具有________。 (4)植物激素中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂和分化的關鍵性激素，在植物組織培養(yǎng)過程中：①若先使用細胞分裂素，后使用生長素，實驗結(jié)果是細胞__________。②當同時使用這兩種激素時，生長素用量比細胞分裂素用量的比值________(填“高”、“低”或“適中”)時，促進愈傷組織的形成。 解析：(1)由于菊花莖段的組織培養(yǎng)比較容易，因此在配制MS固體培養(yǎng)基時，不必添加植物激素。(2)圖中的①過程表示脫分化，花藥培養(yǎng)的脫分化過程中不需要光照。通過花藥離體培養(yǎng)獲得的是單倍體植株。該植株產(chǎn)生的途徑除了圖中所示外，還可以是花粉通過胚狀體階段發(fā)育而來。(3)外植體若是菊花的根尖組織，由于植物細胞具有全能性，根尖細胞具有全套的遺傳物質(zhì)，則在正常環(huán)境下培養(yǎng)成的新菊花植株葉片的顏色是綠色。(4)①植物中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素。在生長素存在的情況下，細胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強的趨勢，分化頻率高。在植物組織培養(yǎng)過程中，若先使用細胞分裂素，后使用生長素，實驗結(jié)果是細胞既分裂也分化。②生長素用量與細胞分裂素用量，比值高時，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時，有利于芽的分化，抑制根的形成；比例適中時，促進愈傷組織的形成。 答案：(1)不必　(2)不需要　單倍體(花粉)　胚狀體　(3)綠色　全能性　(4)①既分裂也分化　②適中 2．辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領域。辣椒素的獲得途徑如圖： (1)圖中①和②分別表示辣椒組織培養(yǎng)中細胞的________和________過程。 (2)圖中培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基中常用的凝固劑是________。培養(yǎng)基中的生長素和細胞分裂素用量的比值________(填“高”或“低”)時，有利于芽的分化。對培養(yǎng)基徹底滅菌時，應采取的滅菌方法是____________。 (3)圖中外植體的消毒所需酒精的體積分數(shù)是________。用酶解法將愈傷組織分離成單細胞時，常用的酶是________和纖維素酶。 (4)提取辣椒素過程中，萃取加熱時需安裝冷凝回流裝置，其目的是_____________。 解析：(1)將外植體培養(yǎng)成愈傷組織，屬于脫分化過程，再生根、芽為再分化過程。(2)固體培養(yǎng)基的凝固劑多為瓊脂。利于芽分化的激素比例為生長素低于細胞分裂素，高壓蒸汽滅菌可以殺死環(huán)境中的一切細胞、芽孢、孢子。(3)體積分數(shù)為70%的酒精可以殺死外植體表面的微生物。植物細胞間質(zhì)為果膠和纖維素，可以用果膠酶和纖維素酶使愈傷組織分散為單個細胞。(4)冷凝可以防止有機溶劑的揮發(fā)。 答案：(1)脫分化(或去分化)　再分化 (2)瓊脂　低　高壓蒸汽滅菌 (3)70%　果膠酶　(4)防止有機溶劑的揮發(fā) 3．如圖表示金花茶莖段的離體培養(yǎng)過程。請回答下列問題： (1)金花茶組織培養(yǎng)利用的原理是____________，常用的一種培養(yǎng)基是________。在該培養(yǎng)基配制好后，常需要添加________。 (2)在接種前需要對金花茶莖段進行________。為確定培養(yǎng)基是否滅菌徹底，檢測的方法是將未接種的培養(yǎng)基________。若用金花茶的花藥進行離體培養(yǎng)，從花粉粒的選擇上看，應選擇________期的花粉粒為宜。 (3)某人在探究植物激素對細胞脫分化和再分化的影響實驗時，得到如下實驗結(jié)果：①只有細胞分裂素時，組織塊產(chǎn)生愈傷組織；②細胞分裂素＝生長素時，愈傷組織不分化；③細胞分裂素>生長素時，愈傷組織分化出芽；④細胞分裂素<生長素時，愈傷組織分化出根。 由實驗結(jié)果，你能得出的結(jié)論是______________________________________。 解析：(1)植物組織培養(yǎng)利用的原理是植物細胞的全能性，其常用的一種培養(yǎng)基是MS固體培養(yǎng)基。在配制好的培養(yǎng)基中，常常需要添加植物激素，其中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素。(2)接種前，需要對莖段(外植體)進行消毒處理。為確定培養(yǎng)基是否滅菌徹底，可將未接種的培養(yǎng)基在適宜環(huán)境中放置一段時間，并觀察培養(yǎng)基上是否有菌落出現(xiàn)，若有則證明培養(yǎng)基滅菌不徹底。一般來說，在單核期，細胞核由中央移向細胞一側(cè)，花粉培養(yǎng)成功率最高。單核期以前的花藥質(zhì)地幼嫩，極易破碎；單核期以后的花藥所在植株的花瓣已有些松動，材料不易消毒。(3)根據(jù)結(jié)果①，可知細胞分裂素可調(diào)節(jié)組織塊產(chǎn)生愈傷組織；根據(jù)結(jié)果②③④，可知細胞分裂素和生長素含量不同，調(diào)節(jié)愈傷組織的分化方向不同。 答案：(1)植物細胞的全能性　MS固體培養(yǎng)基 　植物激素　(2)消毒　在37 ℃恒溫箱中放置24小時(或在適宜溫度下放置一段時間)后，觀察是否有菌落出現(xiàn)　單核　(3)植物激素的種類和含量不同，對愈傷組織的形成和分化的影響不同 4．請回答下列與實驗室提取芳香油有關的問題： (1)提取植物芳香油時可采用的方法有萃取法、________和________。 (2)玫瑰油被稱為“液體黃金”，是世界香料工業(yè)中不可取代的原料，多用于制造高級香水等化妝品。下圖表示提取玫瑰油的流程，其中A表示________；B表示________，其中加入NaCl的作用是__________________________。 (3)植物芳香油溶解性的特點是不溶于________，易溶于________，因此可用其作為提取劑來提取植物芳香油。 (4)檸檬油是一種廣譜性的殺蟲劑，通常以檸檬花與檸檬果皮為原料進行提取，但方法不同，其中以檸檬果皮為原料時常采用________法提取檸檬油。 解析：(1)提取植物芳香油時可采用的方法有壓榨法、蒸餾法、萃取法。(2)因為水和芳香油沸點不同，可利用水蒸氣將揮發(fā)性較強的植物芳香油攜帶出來，形成油水混合物，冷卻后，混合物又會重新分出油層和水層，因此，一般采用的提取玫瑰油的方法是水蒸氣蒸餾法。A表示水蒸氣蒸餾，B表示無水硫酸鈉，加入NaCl會增加鹽的濃度，使油和水出現(xiàn)明顯的分層。(3)植物芳香油不溶于水，易溶于有機溶劑。(4)以檸檬果皮為原料時常采用壓榨法。 答案：(1)蒸餾法　壓榨法(兩空答案順序可顛倒)　(2)水蒸氣蒸餾　無水硫酸鈉　增加鹽的濃度，使油和水出現(xiàn)明顯的分層　(3)水　有機溶劑　(4)壓榨 5．回答下列有關從生物材料中提取某些特定成分的問題： (1)薄荷油和玫瑰精油的化學性質(zhì)相似，因此適合選用________法來提取。用此方法收集到的液體________(是/不是)純的薄荷油，原因是_________________。在此過程中，影響薄荷油提取量的主要因素有________和________。 (2)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是________法。用這種方法提取胡蘿卜素的主要步驟是：粉碎、干燥、萃取、________、________。 (3)如圖是某同學對萃取的胡蘿卜素樣品所做的鑒定實驗的結(jié)果。圖中實驗組是________，實驗得出的結(jié)論是________。 解析：(1)薄荷油和玫瑰精油都是芳香油，易揮發(fā)、難溶于水、化學性質(zhì)穩(wěn)定，因此可用水蒸氣蒸餾法進行提取。由于薄荷油隨水蒸氣一起蒸餾出來，所得到的是油水混合物，不是純的薄荷油。蒸餾溫度太高、時間太短，產(chǎn)品品質(zhì)就比較差。(2)胡蘿卜素易溶于有機溶劑，可用有機溶劑進行萃取，步驟是：粉碎→干燥→萃取→過濾→濃縮。(3)胡蘿卜素萃取后溶于有機溶劑，圖中實驗組是B、C，對照組是A、D。 答案：(1)水蒸氣蒸餾　不是　薄荷油隨水蒸氣一起蒸餾出來，所得到的是油水混合物　蒸餾時間　蒸餾溫度 (2)萃取　過濾　濃縮 (3)B、C　萃取樣品中不含β胡蘿卜素 6．將植物中的有效成分提取出來，有很多用途，可顯著提高其利用價值。請結(jié)合所學知識回答： (1)許多植物芳香油的提取在原理和程序上具有相似性，某同學結(jié)合玫瑰精油的提取，設計提取茉莉油的實驗流程如下： 茉莉花＋水→A→油水混合物→B→加C→D→茉莉油 流程圖中的A表示______過程，B過程常需要用到的儀器是______，C物質(zhì)是______，加C的目的是____________________________。茉莉油的提取能否采用這一流程進行生產(chǎn)，應該考慮茉莉油是否像玫瑰油一樣具有較強的________，還應考慮茉莉花在水中蒸餾是否會出現(xiàn)________________________等問題。 (2)辣椒素的提取與胡蘿卜素的提取有類似之處?？刹捎幂腿》ㄟM行提取。提取時若需要加熱，應采用水浴加熱的方法，原因是______________________________；加熱時，還要在瓶口安裝冷凝回流裝置，其目的是____________________。 解析：(1)玫瑰精油的提取方法為水蒸氣蒸餾法。流程圖中的A過程為水蒸氣蒸餾過程。蒸餾獲得的油水混合物需借助分液漏斗分離油層和水層。油水分層后需用無水Na2SO4除水。水蒸氣蒸餾法提取植物芳香油的原理是利用了植物芳香油所具有的揮發(fā)性，隨水蒸氣一起蒸餾，但是對原料易焦糊和有效成分易水解的植物芳香油則不能用該方法提取。(2)用有機溶劑萃取時，由于有機溶劑易揮發(fā)，且易燃易爆，因此不能直接使用明火加熱，應采用水浴加熱的方法，否則容易引起燃燒、爆炸。萃取時冷凝回流裝置的作用是防止有機溶劑的揮發(fā)。 答案：(1)水蒸氣蒸餾　分液漏斗　無水Na2SO4　除水　揮發(fā)性　原料焦糊和有效成分水解　(2)有機溶劑都是易燃物，直接使用明火加熱容易引起燃燒、爆炸　防止有機溶劑的揮發(fā) 7．自印度科學家培養(yǎng)曼陀羅花藥獲得單倍體植株后，花藥離體培養(yǎng)技術迅速發(fā)展，據(jù)記載，現(xiàn)在已經(jīng)有250多種高等植物的花藥培養(yǎng)成功。 (1)細胞分裂素和生長素的使用順序和用量會影響到植物細胞的發(fā)育方向。如為了有利于細胞分裂而不分化，兩種激素的使用順序為： ________________________________________________________________________。 花粉植株產(chǎn)生的途徑有兩種：一種是花粉脫分化形成愈傷組織，另一種是形成___。 (2)進行月季花藥離體培養(yǎng)一般選擇在五月初到五月中旬。對于花粉而言，要采用____期的花粉，為了鑒定該時期的花粉，常采用醋酸洋紅法進行染色鑒定。若是某些植物花粉細胞不易著色，常采用________法染色，能將花粉的細胞核染成________色。 (3)消毒后的花蕾，在無菌條件下除去萼片與花瓣，剝離花藥時，盡量不