人教版教學(xué)課件名校聯(lián)盟吉林省扶余一中高二生物《動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)》課件

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1、植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞工程：動(dòng)物細(xì)胞工程： 植物細(xì)胞工程：植物細(xì)胞工程：1.1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)3.3.動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合4.4.單克隆抗體單克隆抗體5.5.胚胎移植胚胎移植2.2.動(dòng)物細(xì)胞核移植動(dòng)物細(xì)胞核移植動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體技術(shù)單克隆抗體技術(shù)核移植核移植動(dòng)物動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞工程工程常用常用技術(shù)技術(shù)一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 1.1.發(fā)展歷史發(fā)展歷史: : 20 20世紀(jì)初，人們不知道世紀(jì)初，人們不知道神經(jīng)纖維神經(jīng)纖維是由神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)是由神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)向外突出形成的，還是由神經(jīng)細(xì)胞周?chē)钠渌?xì)胞質(zhì)

2、向外突出形成的，還是由神經(jīng)細(xì)胞周?chē)钠渌?xì)胞融合而成的。生物學(xué)家們就這個(gè)問(wèn)題展開(kāi)了激烈的胞融合而成的。生物學(xué)家們就這個(gè)問(wèn)題展開(kāi)了激烈的爭(zhēng)論。爭(zhēng)論。19071907年，美國(guó)生物學(xué)家哈里森年，美國(guó)生物學(xué)家哈里森(Harrison)(Harrison)從蝌從蝌蚪的蚪的脊索脊索中分離出神經(jīng)組織，把它放在青蛙的凝固的中分離出神經(jīng)組織，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培養(yǎng)。蝌蚪的神經(jīng)組織存活了好幾周，并且淋巴液中培養(yǎng)。蝌蚪的神經(jīng)組織存活了好幾周，并且從神經(jīng)細(xì)胞中長(zhǎng)出了神經(jīng)纖維。哈里森的實(shí)驗(yàn)不僅解從神經(jīng)細(xì)胞中長(zhǎng)出了神經(jīng)纖維。哈里森的實(shí)驗(yàn)不僅解決了神經(jīng)纖維的起源問(wèn)題，而且開(kāi)創(chuàng)了動(dòng)物組織培養(yǎng)決了神經(jīng)纖維的起源問(wèn)題，

3、而且開(kāi)創(chuàng)了動(dòng)物組織培養(yǎng)的先河。此后，在許多科學(xué)家的不懈努力下，動(dòng)物組的先河。此后，在許多科學(xué)家的不懈努力下，動(dòng)物組織培養(yǎng)不斷改進(jìn)并逐漸發(fā)展成為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)?？椗囵B(yǎng)不斷改進(jìn)并逐漸發(fā)展成為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用和概念：、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用和概念： 動(dòng)物細(xì)胞培動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物有養(yǎng)就是從動(dòng)物有機(jī)體中取出相關(guān)機(jī)體中取出相關(guān)的組織的組織,將它分散將它分散成單個(gè)細(xì)胞成單個(gè)細(xì)胞,然后然后,放在適宜的培養(yǎng)放在適宜的培養(yǎng)基中基中,讓這些細(xì)胞讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖生長(zhǎng)和增殖.1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液液的主要成分：的主要成分：葡萄糖葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、微量元素、促生長(zhǎng)因子、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽

4、、微量元素、促生長(zhǎng)因子和和動(dòng)物動(dòng)物血清血清等。等。與植物培養(yǎng)基相比其特點(diǎn)是：與植物培養(yǎng)基相比其特點(diǎn)是：（1 1）液體培養(yǎng)基）液體培養(yǎng)基（2 2）含有動(dòng)物血清）含有動(dòng)物血清動(dòng)物體細(xì)胞大都生動(dòng)物體細(xì)胞大都生活在活在液體液體的環(huán)境的環(huán)境 幼齡動(dòng)物取動(dòng)物器官和組織剪碎組織胰蛋白酶處理細(xì)胞培養(yǎng)養(yǎng)單個(gè)細(xì)胞3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官物的組織、器官細(xì)胞懸浮液細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶胰蛋白酶10代細(xì)胞代細(xì)胞原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)50代細(xì)胞代細(xì)胞傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞株無(wú)限傳代無(wú)限傳代細(xì)胞系細(xì)胞系單個(gè)細(xì)胞單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)未改變未改變遺傳

5、物質(zhì)遺傳物質(zhì)已改變已改變動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來(lái)形成具有一網(wǎng)絡(luò)起來(lái)形成具有一定彈性和韌性的組織定彈性和韌性的組織和器官。和器官。（分解彈性纖維）（分解彈性纖維）（剪（剪碎）碎） 原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)：用胰蛋白酶對(duì)剪碎的動(dòng)物組織進(jìn)行處用胰蛋白酶對(duì)剪碎的動(dòng)物組織進(jìn)行處理理,分散后培養(yǎng)分散后培養(yǎng),即為原代細(xì)胞。即為原代細(xì)胞。(培養(yǎng)的第培養(yǎng)的第1代細(xì)胞代細(xì)胞與傳與傳10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞稱(chēng)為原代細(xì)胞培養(yǎng)。代以?xún)?nèi)的細(xì)胞稱(chēng)為原代細(xì)胞培養(yǎng)。) 傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)：細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中出現(xiàn)接觸抑制細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中出現(xiàn)接觸抑制,用胰蛋用

6、胰蛋白酶使其從瓶壁上脫離下來(lái)白酶使其從瓶壁上脫離下來(lái),分散到多個(gè)培養(yǎng)瓶中分散到多個(gè)培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)繼續(xù)培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng)。即為傳代培養(yǎng)。細(xì)胞株：細(xì)胞株：原代細(xì)胞一般傳至原代細(xì)胞一般傳至10代左右細(xì)胞代左右細(xì)胞生長(zhǎng)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞存生長(zhǎng)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞存活到活到4050代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。 細(xì)胞系：細(xì)胞系：細(xì)胞株傳代至細(xì)胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細(xì)胞代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)停滯狀態(tài)，只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的生長(zhǎng)停滯狀態(tài)，只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無(wú)限制傳代，這改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無(wú)限制傳代，這種傳代細(xì)胞

7、為細(xì)胞系。種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。 細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別： 細(xì)胞系的遺傳細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變，具有癌細(xì)胞的特點(diǎn)，失去接觸抑制，物質(zhì)改變，具有癌細(xì)胞的特點(diǎn)，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。容易傳代培養(yǎng)。 思考討論：在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，為什思考討論：在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，為什么要用胰蛋白酶對(duì)取出的動(dòng)物組織進(jìn)行處么要用胰蛋白酶對(duì)取出的動(dòng)物組織進(jìn)行處理？理？ 胰蛋白酶處理動(dòng)物組織，可以使動(dòng)物組織細(xì)胞間的膠原纖維和細(xì)胞外的其他成分酶解，獲得單個(gè)細(xì)胞。 3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 的條件的條件1.無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境2.營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)3.溫度和溫度和pH4.氣體環(huán)境氣體環(huán)境 思考：思考：

8、2、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料？培養(yǎng)材料？1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處？有何獨(dú)特之處？3、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞？、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞？4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體？體？主要成分：葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、促生長(zhǎng)因子、微量元素和動(dòng)物血清等。主要成分：葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、促生長(zhǎng)因子、微量元素和動(dòng)物血清等。獨(dú)特

9、之處有：獨(dú)特之處有：1、液體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基 2、成分中有動(dòng)物血清等、成分中有動(dòng)物血清等因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng)因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng)成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng)成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng)不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體動(dòng)物個(gè)體比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理原理培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)目的培養(yǎng)目的細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖固體培養(yǎng)基

10、固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基蔗糖蔗糖 植物激素植物激素 葡萄糖葡萄糖 動(dòng)物血清動(dòng)物血清植物體植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系細(xì)胞株、細(xì)胞系快速繁殖、培育快速繁殖、培育無(wú)病毒植株無(wú)病毒植株獲得細(xì)胞或細(xì)獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白胞分泌蛋白4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用1.1.蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn) 如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體2.2.檢測(cè)有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性檢測(cè)有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性3.3.健康細(xì)胞培養(yǎng)健康細(xì)胞培養(yǎng) 培養(yǎng)健康細(xì)胞用于燒傷病人皮膚移植培養(yǎng)健康細(xì)胞用于燒傷病人皮膚移植4.4.細(xì)胞的生理、藥理、病理研究細(xì)胞的生理、藥理、

11、病理研究 二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物 動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核核,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中.使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體.用核移植的方法用核移植的方法得到的動(dòng)物稱(chēng)為克隆動(dòng)物得到的動(dòng)物稱(chēng)為克隆動(dòng)物.胚胎移植技術(shù)胚胎移植技術(shù)胚胎移植的基本程序如下（以牛胚胎移植為例）動(dòng)物的胚胎移植動(dòng)物的胚胎移植 解決某些妊解決某些妊娠時(shí)間長(zhǎng)、每胎娠時(shí)間長(zhǎng)、每胎產(chǎn)子數(shù)量少的優(yōu)產(chǎn)子數(shù)量少的優(yōu)良種畜的繁

12、殖速良種畜的繁殖速度問(wèn)題。度問(wèn)題。核移植核移植胚胎細(xì)胞核移植（易）體細(xì)胞核移植（難）原因是分化程度高卵細(xì)胞卵細(xì)胞母綿羊母綿羊母綿羊母綿羊乳腺細(xì)胞乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核細(xì)胞核移植細(xì)胞核移植早期胚胎早期胚胎卵裂卵裂C母綿羊子宮母綿羊子宮胚胎移植胚胎移植多莉羊多莉羊分娩分娩妊娠妊娠多莉羊的培育過(guò)程多莉羊的培育過(guò)程融合后的卵細(xì)胞融合后的卵細(xì)胞多莉與多莉與“母親母親”2.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景（1 1）加速家畜遺傳改）加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁殖；繁殖；（2) 2) 保護(hù)瀕危物種；保護(hù)瀕危物種；（3 3）生產(chǎn)醫(yī)用蛋白；）生產(chǎn)醫(yī)用蛋白；

13、（4 4） 作為異種移植的作為異種移植的供體；供體；（5 5） 用于組織器官移用于組織器官移植。植。3.體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題（1）成功率低；（2）克隆動(dòng)物存在健康問(wèn)題；（3）克隆動(dòng)物食品的安全性問(wèn)題存有爭(zhēng)議。一、動(dòng)物細(xì)胞融合一、動(dòng)物細(xì)胞融合 細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng)兩個(gè)細(xì)胞正在融合兩個(gè)細(xì)胞正在融合 受精作用受精作用1.概念：動(dòng)物細(xì)胞融合是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞融合是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞 結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程，也稱(chēng)細(xì)胞雜交。結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程，也稱(chēng)細(xì)胞雜交。2.原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性。3.3.誘導(dǎo)融合的方法：誘導(dǎo)融合的方法：（1 1）物理化學(xué)方法：與植物

14、體細(xì)胞雜交相同，如）物理化學(xué)方法：與植物體細(xì)胞雜交相同，如聚乙二醇、電激等。聚乙二醇、電激等。 （2 2）生物方法：滅活的病毒。）生物方法：滅活的病毒。4.4.過(guò)程過(guò)程細(xì)胞細(xì)胞A細(xì)胞細(xì)胞B雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞滅活的病毒滅活的病毒物理法物理法化學(xué)法化學(xué)法仙臺(tái)病毒仙臺(tái)病毒皰疹病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒新城雞瘟病毒過(guò)程：過(guò)程：病毒顆粒黏病毒顆粒黏附細(xì)胞表面附細(xì)胞表面病毒顆粒穿病毒顆粒穿透細(xì)胞膜透細(xì)胞膜細(xì)胞膜連接細(xì)胞膜連接細(xì)胞融合細(xì)胞融合5 5，意義：，意義：（1 1）突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)）突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。緣雜交成為可能。（2 2）制造單克隆抗體。）制造單克隆抗體。比較項(xiàng)目比

15、較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合的方法細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)方法用途用途細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性去除細(xì)胞壁后誘去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合導(dǎo)原生質(zhì)體融合使細(xì)胞分散后使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)細(xì)胞融合物理（離心、振蕩、物理（離心、振蕩、電刺激）電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）化學(xué)（聚乙二醇）物理、化學(xué)方物理、化學(xué)方法（同左）法（同左）滅活的病毒滅活的病毒獲得雜種植株獲得雜種植株制備單克隆抗體制備單克隆抗體什么是抗體？什么是抗體？ 抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)

16、合的的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。具有免疫功能的球蛋白。B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體。淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體。 通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)獲得的雜交瘤細(xì)通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)獲得的雜交瘤細(xì)胞群產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的胞群產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱(chēng)為單克隆抗體?？贵w稱(chēng)為單克隆抗體。 特點(diǎn)：特點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高特異性強(qiáng)、靈敏度高 B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后，可以淋巴細(xì)胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體。產(chǎn)生抗體。 2每一個(gè)淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗每一個(gè)淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體。體。 3動(dòng)物體內(nèi)的動(dòng)物體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生百萬(wàn)種以上的抗體，每種抗體對(duì)特定的抗百萬(wàn)種以上的抗體，每種抗

17、體對(duì)特定的抗原具有特異性免疫作用。原具有特異性免疫作用。 利用淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能利用淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能 利用腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖的特性利用腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖的特性 利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞融利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得具有淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞特合獲得具有淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞特性的雜交瘤細(xì)胞性的雜交瘤細(xì)胞 利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞交瘤細(xì)胞 單克隆抗體制備過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程 注射抗原注射抗原B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生足夠

18、數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔單克隆抗體單克隆抗體思考：思考：1、本過(guò)程利用了哪些原理？、本過(guò)程利用了哪些原理？免疫原理，細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理免疫原理，細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理2、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合？細(xì)胞融合？這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞的這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有遺傳物質(zhì)，不僅具有B B細(xì)胞分泌抗體的能力，而細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還有無(wú)限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單且還有無(wú)限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體克隆抗體單克隆

19、抗體的應(yīng)用單克隆抗體的應(yīng)用與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體產(chǎn)量高，特異性強(qiáng)，產(chǎn)量高，特異性強(qiáng)，靈敏度高，靈敏度高，優(yōu)越性十分明顯優(yōu)越性十分明顯。應(yīng)用主要有：應(yīng)用主要有：1、臨床診斷、臨床診斷2、作為載體，運(yùn)載抗癌藥物，形成、作為載體，運(yùn)載抗癌藥物，形成“生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈”治療腫治療腫瘤瘤資料：目前世界各國(guó)已經(jīng)研制出數(shù)以百計(jì)的單資料：目前世界各國(guó)已經(jīng)研制出數(shù)以百計(jì)的單克隆抗體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免疫克隆抗體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免疫性疾病、血液病、內(nèi)分泌疾病和遺傳病，用單克隆性疾病、血液病、內(nèi)分泌疾病和遺傳病，用單克隆抗體作為診斷手段，是一個(gè)必然趨勢(shì)。另

20、外，用單抗體作為診斷手段，是一個(gè)必然趨勢(shì)。另外，用單克隆抗體做體內(nèi)診斷，借以鑒別和定位體內(nèi)克隆抗體做體內(nèi)診斷，借以鑒別和定位體內(nèi)“病灶病灶”也引起人們的注意，目前，主要用于腫瘤追蹤及心也引起人們的注意，目前，主要用于腫瘤追蹤及心肌梗塞的診斷。肌梗塞的診斷。小結(jié)小結(jié)兩個(gè)過(guò)程兩個(gè)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程三個(gè)三個(gè)“一一”一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法 滅活病毒滅活病毒一個(gè)新細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞一個(gè)新細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞一個(gè)優(yōu)勢(shì)單克隆抗體特異性一個(gè)優(yōu)勢(shì)單克隆抗體特異性 強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢(shì)強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢(shì)1.動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是：（）動(dòng)物細(xì)胞工

21、程技術(shù)的基礎(chǔ)是：（）A動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合B胚胎移植胚胎移植C動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)D核移植核移植練習(xí)在動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正在動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（）確的是（）A結(jié)果是相同的結(jié)果是相同的B雜種細(xì)胞的形成過(guò)程基本相同雜種細(xì)胞的形成過(guò)程基本相同C操作過(guò)程中酶的作用相同操作過(guò)程中酶的作用相同D誘導(dǎo)融合的手段相同誘導(dǎo)融合的手段相同. 單克隆抗體制備過(guò)程中，骨髓瘤細(xì)胞和單克隆抗體制備過(guò)程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是（在這種培養(yǎng)

22、基上不能存活增殖的細(xì)胞是（ ） 淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞A BC D C 練習(xí)，下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的，下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案2、該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？為什么？、該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？為什么？4、圖中、圖中B為為_(kāi)過(guò)程，常用過(guò)程，常用_作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承承_的遺傳特性，既能的遺傳特性，既能_,又能又能_。1、該實(shí)驗(yàn)方案的目的是、該實(shí)驗(yàn)方案的目的是_3、A是從小鼠的脾臟中取得是從小鼠的脾臟中取得_,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生該細(xì)胞能夠產(chǎn)生_5、C過(guò)程指細(xì)胞培養(yǎng)，該過(guò)程包括過(guò)程指細(xì)胞培養(yǎng)，該過(guò)程包括_培養(yǎng)和培養(yǎng)和_培養(yǎng)兩個(gè)階段，其培養(yǎng)兩個(gè)階段，其中中_代以?xún)?nèi)的的細(xì)胞屬于細(xì)胞株。代以?xún)?nèi)的的細(xì)胞屬于細(xì)胞株。制備單克隆抗體制備單克隆抗體B細(xì)胞細(xì)胞抗體抗體細(xì)胞融合細(xì)胞融合滅活病毒滅活病毒雙親細(xì)胞雙親細(xì)胞分泌抗體分泌抗體無(wú)限增殖無(wú)限增殖原代原代傳代傳代50B體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔AC