高三生物人教版一輪教師用書:必修2 第6單元 素養(yǎng)加強(qiáng)課6 同位素標(biāo)記法及其應(yīng)用 Word版含解析
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1、 同位素標(biāo)記法在高中生物實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用歸納 (2016·全國(guó)卷Ⅰ)在有關(guān)DNA分子的研究中,常用32P來(lái)標(biāo)記DNA分子。用α、β和γ表示ATP或dATP(d表示脫氧)上三個(gè)磷酸基團(tuán)所處的位置(A—Pα~Pβ~Pγ或dA—Pα~Pβ~Pγ)?;卮鹣铝袉栴}: (1)某種酶可以催化ATP的一個(gè)磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到DNA末端上,同時(shí)產(chǎn)生ADP。若要用該酶把32P標(biāo)記到DNA末端上,那么帶有32P的磷酸基團(tuán)應(yīng)在ATP的________(填“α”“β”或“γ”)位上。 (2)若用帶有32P的dATP作為DNA生物合成的原料,將32P標(biāo)記到新合成的DNA分子上,則帶有32P的磷酸基團(tuán)應(yīng)在dA
2、TP的________(填“α”“β”或“γ”)位上。 (3)將一個(gè)某種噬菌體DNA分子的兩條鏈用32P進(jìn)行標(biāo)記,并使其感染大腸桿菌,在不含有32P的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時(shí)間。若得到的所有噬菌體雙鏈DNA分子都裝配成噬菌體(n個(gè))并釋放,則其中含有32P的噬菌體所占比例為2/n,原因是_________________________ _____________________________________________________。 [審題指導(dǎo)] (1)弄清ATP中帶有32P的磷酸基團(tuán)的三個(gè)位置A—Pα~Pβ~Pγ。(2)弄清兩個(gè)實(shí)驗(yàn)的目的,一個(gè)是讓某種酶催化ATP的一個(gè)磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)
3、移到DNA末端上,另一個(gè)是用帶有32P的dATP作為DNA合成的原料。(3)根據(jù)DNA分子半保留復(fù)制的特點(diǎn)解釋含有32P的噬菌體所占比例為2/n的原因。 [解析] (1)根據(jù)題干信息可知,該酶能將ATP水解成ADP和磷酸基團(tuán)(Pγ),同時(shí)將Pγ基團(tuán)轉(zhuǎn)移到DNA末端上。因此需將32P標(biāo)記到ATP的γ位上。(2)DNA生物合成的原料為脫氧核苷酸。將dATP兩個(gè)高能磷酸鍵都水解后的產(chǎn)物為dA—Pα(腺嘌呤脫氧核苷酸),該產(chǎn)物為合成DNA的原料。因此需將32P標(biāo)記到dATP的α位上。(3)一個(gè)含有32P標(biāo)記的噬菌體雙鏈DNA分子經(jīng)半保留復(fù)制后,標(biāo)記的兩條單鏈只能分配到兩個(gè)噬菌體的雙鏈DNA分子中,因
4、此在得到的n個(gè)噬菌體中只有2個(gè)帶有標(biāo)記。 [答案] (1)γ (2)α (3)一個(gè)含有32P標(biāo)記的噬菌體雙鏈DNA分子經(jīng)半保留復(fù)制后,標(biāo)記的兩條單鏈只能分配到兩個(gè)噬菌體的雙鏈DNA分子中,因此在得到的n個(gè)噬菌體中只有2個(gè)帶有標(biāo)記 1.同位素標(biāo)記法在高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用 (1)探究光合作用中元素(原子)的轉(zhuǎn)移:①美國(guó)科學(xué)家魯賓和卡門用18O分別標(biāo)記H2O和CO2,證明光合作用釋放的氧氣全部來(lái)自水。②卡爾文等用14C標(biāo)記的CO2供小球藻進(jìn)行光合作用,追蹤檢測(cè)其放射性,探明了CO2中的碳在光合作用中轉(zhuǎn)化成有機(jī)物中碳的途徑。 (2)證明DNA是遺傳物質(zhì):赫爾希和蔡斯分別用放射性同位素標(biāo)記
5、蛋白質(zhì)和DNA的特征元素,即用32P標(biāo)記噬菌體的DNA,用35S標(biāo)記噬菌體的蛋白質(zhì),證明DNA是噬菌體的遺傳物質(zhì)。 (3)研究分泌蛋白的合成和運(yùn)輸:用3H標(biāo)記亮氨酸,研究分泌蛋白在細(xì)胞中的合成、運(yùn)輸與分泌途徑,證明分泌蛋白在附著于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體中合成之后,按照內(nèi)質(zhì)網(wǎng)→高爾基體→細(xì)胞膜的方向運(yùn)輸,從而證明了細(xì)胞內(nèi)的各種生物膜在功能上是緊密聯(lián)系的。 (4)證明DNA分子進(jìn)行半保留復(fù)制:用含有15N標(biāo)記的NH4Cl培養(yǎng)液培養(yǎng)大腸桿菌,讓大腸桿菌繁殖幾代,再將大腸桿菌轉(zhuǎn)移到含14N的普通培養(yǎng)液中培養(yǎng),然后在不同時(shí)刻收集大腸桿菌并提取DNA,再通過密度梯度離心來(lái)區(qū)別親代與子代DNA,從而證明DNA
6、的復(fù)制是以半保留的方式進(jìn)行的。 (5)研究生長(zhǎng)素的極性運(yùn)輸:證明植物生長(zhǎng)素的極性運(yùn)輸時(shí),用同位素14C標(biāo)記莖形態(tài)學(xué)上端的生長(zhǎng)素(吲哚乙酸),可在莖的形態(tài)學(xué)下端檢測(cè)到放射性同位素14C,而標(biāo)記莖形態(tài)學(xué)下端的生長(zhǎng)素,在莖的形態(tài)學(xué)上端檢測(cè)不到放射性同位素14C,說(shuō)明植物生長(zhǎng)素只能從形態(tài)學(xué)上端運(yùn)輸?shù)叫螒B(tài)學(xué)下端。 2.與熒光標(biāo)記法的區(qū)別 (1)常用的熒光蛋白有綠色和紅色兩種 ①綠色熒光蛋白(GFP)常用的是來(lái)源于發(fā)光水母的一種功能獨(dú)特的蛋白質(zhì),藍(lán)光或近紫外光照射,發(fā)射綠色熒光。 ②紅色熒光蛋白來(lái)源于珊瑚蟲,是一種與綠色熒光蛋白同源的熒光蛋白,在紫外光的照射下可發(fā)射紅色熒光。 (2)人教版教材
7、中用到的熒光標(biāo)記法 ①《必修1》P67“細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)”:這一實(shí)驗(yàn)很有力地證明了細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是具有一定的流動(dòng)性。 ②《必修2》P30“基因在染色體上的實(shí)驗(yàn)證據(jù)”:通過現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù),運(yùn)用熒光標(biāo)記的手段,可以很直觀地觀察到某一基因在染色體上的位置。 1.(2016·全國(guó)卷Ⅲ)在前人進(jìn)行的下列研究中,采用的核心技術(shù)相同(或相似)的一組是( ) ①證明光合作用所釋放的氧氣來(lái)自水 ②用紫外線等處理青霉菌選育高產(chǎn)青霉素菌株 ③用T2噬菌體侵染大腸桿菌證明DNA是遺傳物質(zhì) ④用甲基綠和吡羅紅對(duì)細(xì)胞染色,觀察核酸的分布 A.①② B.①③ C.②④ D.③④
8、B [①③采用的是同位素標(biāo)記法,其中①是為兩組植物分別提供HO和CO2、H2O和C18O2檢測(cè)產(chǎn)生氧氣的標(biāo)記情況,③是分別用32P和35S標(biāo)記的噬菌體侵染大腸桿菌,檢測(cè)子代噬菌體的標(biāo)記情況;②采用的是誘變技術(shù),④采用的是混合染色技術(shù)。故采用的核心技術(shù)相同(或相似)的是①和③,B項(xiàng)符合題意。] 2.(2019·濰坊期中)物理學(xué)和化學(xué)方法可用于生物學(xué)的研究。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( ) A.沃森和克里克利用X射線衍射法研究并推算出了DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu) B.科學(xué)家通過熒光標(biāo)記的人、鼠細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)證明了細(xì)胞膜具有流動(dòng)性 C.赫爾希和蔡斯利用放射性同位素標(biāo)記和離心技術(shù)證明DNA是遺傳物質(zhì) D.
9、科學(xué)家運(yùn)用同位素示蹤和離心技術(shù)證實(shí)了DNA的半保留復(fù)制 A [在遺傳物質(zhì)的研究歷史上,沃森和克里克以威爾金斯和其同事富蘭克林提供的DNA衍射圖譜的有關(guān)數(shù)據(jù)為基礎(chǔ),推算出DNA分子呈螺旋結(jié)構(gòu)。] 3.(2019·成都市測(cè)試)同位素標(biāo)記法是生物科學(xué)研究中常用的方法。下列敘述錯(cuò)誤的是( ) A.用C標(biāo)記的CO2供給小球藻進(jìn)行光合作用可證明碳的轉(zhuǎn)化途徑 B.將3H標(biāo)記的亮氨酸注射到胰腺腺泡細(xì)胞中可證明生物膜間有聯(lián)系 C.用14C或18O標(biāo)記的噬菌體分別侵染細(xì)菌可證明DNA是遺傳物質(zhì) D.將被15N標(biāo)記的細(xì)菌轉(zhuǎn)移到含14N的培養(yǎng)液中可證明DNA的復(fù)制方式 C [用32P或35S標(biāo)記的噬菌
10、體分別侵染細(xì)菌可證明DNA是遺傳物質(zhì)。] 4.(2019·晉中調(diào)研)同位素標(biāo)記法在遺傳學(xué)的研究中發(fā)揮了重要作用。請(qǐng)根據(jù)所學(xué)知識(shí)回答下列問題: (1)現(xiàn)提供3H標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸、尿嘧啶核糖核苷酸以及亮氨酸,若要研究抗體的合成與轉(zhuǎn)運(yùn),應(yīng)選擇____________;若要驗(yàn)證抗體合成所需的直接模板,應(yīng)選擇____________________。 (2)為探究T2噬菌體的遺傳物質(zhì),用放射性同位素標(biāo)記的T2噬菌體侵染未被標(biāo)記的大腸桿菌,經(jīng)短時(shí)間保溫培養(yǎng)、攪拌離心,檢測(cè)到上清液中的放射性很低。此組實(shí)驗(yàn)標(biāo)記的元素是________,離心的目的是______________________
11、________________________ _____________________________________________________。 (3)科學(xué)家將15N標(biāo)記的DNA分子(15N15N-DNA)放到含14N的培養(yǎng)液中培養(yǎng),讓其復(fù)制3次。將親代DNA和每次復(fù)制產(chǎn)物置于試管進(jìn)行離心,結(jié)果如圖。其中代表復(fù)制2次后的分層結(jié)果是________(填字母),理由是____________________________________________ _____________________________________________________。 [解析] (
12、1)抗體的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),其基本組成單位是氨基酸,因此若要研究抗體的合成與轉(zhuǎn)運(yùn),應(yīng)選擇3H標(biāo)記的亮氨酸;抗體是蛋白質(zhì),其合成的直接模板是mRNA,若要驗(yàn)證抗體合成所需的直接模板,應(yīng)選擇3H標(biāo)記的尿嘧啶核糖核苷酸。(2)噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)分兩組,一組噬菌體用35S對(duì)其蛋白質(zhì)外殼進(jìn)行標(biāo)記,另一組用32P對(duì)噬菌體的核酸進(jìn)行標(biāo)記。噬菌體在侵染細(xì)菌時(shí),只是把遺傳物質(zhì)DNA注入細(xì)菌,因此如果標(biāo)記的是蛋白質(zhì),則上清液放射性高,沉淀物放射性很低;如果標(biāo)記的是DNA,則上清液放射性很低,沉淀物放射性高。綜上所述,此組實(shí)驗(yàn)中標(biāo)記的是DNA,即DNA中的P元素。此實(shí)驗(yàn)過程中,離心的目的是讓上清液中析出重量較輕的
13、T2噬菌體顆粒,沉淀物中留下被感染的大腸桿菌。(3)由于DNA分子的復(fù)制是半保留復(fù)制,一個(gè)用15N標(biāo)記的DNA在含14N的培養(yǎng)基上培養(yǎng),復(fù)制1次后,每個(gè)DNA分子的一條鏈含15N,一條鏈含14N,離心后對(duì)應(yīng)圖中的b,復(fù)制2次后,產(chǎn)生4個(gè)DNA分子,其中含15N和14N的DNA分子為2個(gè),只含14N的DNA分子為2個(gè),離心后對(duì)應(yīng)圖中的c。 [答案] (1)3H標(biāo)記的亮氨酸 3H標(biāo)記的尿嘧啶核糖核苷酸 (2)P 讓上清液中析出重量較輕的T2噬菌體顆粒,沉淀物中留下被感染的大腸桿菌 (3)c DNA復(fù)制方式為半保留復(fù)制,15N15N-DNA分子復(fù)制兩次后,子代中1/2為15N14N-DNA,1/2
14、為14N14N-DNA,離心結(jié)果與c相符 DNA半保留復(fù)制與細(xì)胞分裂綜合中的同位素標(biāo)記法 (2019·深圳模擬)不含放射性標(biāo)記的蠶豆根尖細(xì)胞在含3H標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸的培養(yǎng)基中完成一個(gè)細(xì)胞周期,然后在不含放射性標(biāo)記的培養(yǎng)基中繼續(xù)分裂至中期,其染色體的放射性標(biāo)記分布情況是 ( ) A.每條染色體中都只有一條單體被標(biāo)記 B.每條染色體的兩條單體都被標(biāo)記 C.只有半數(shù)的染色體中一條單體被標(biāo)記 D.每條染色體的兩條單體都不被標(biāo)記 [審題指導(dǎo)] (1)確定親代DNA分子標(biāo)記情況。根據(jù)題干信息和DNA半保留復(fù)制的特點(diǎn),可確定親代DNA分子(未被標(biāo)記)→放入含3H標(biāo)記的胸腺
15、嘧啶脫氧核苷酸的培養(yǎng)基中完成一個(gè)細(xì)胞周期,所得子代DNA分子均有一條鏈被標(biāo)記。 (2)確定原料的標(biāo)記情況:放入不含放射性標(biāo)記的培養(yǎng)基培養(yǎng)至中期,所得子代DNA分子一半未被標(biāo)記,一半只有一條鏈被標(biāo)記。 A [不含放射性標(biāo)記的根尖細(xì)胞在含3H標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸培養(yǎng)基上完成一個(gè)細(xì)胞周期后,子細(xì)胞中的核DNA分子都是一條鏈被3H標(biāo)記,另一條鏈未被標(biāo)記;然后子細(xì)胞在不含放射性標(biāo)記的培養(yǎng)基中繼續(xù)分裂至中期,每個(gè)核DNA分子復(fù)制形成的兩個(gè)DNA分子(其中一個(gè)被標(biāo)記,另一個(gè)未被標(biāo)記)分別位于一條染色體的兩條姐妹染色單體上,A正確。] 1.有絲分裂與DNA復(fù)制的關(guān)系 如果用15N標(biāo)記細(xì)胞中的核
16、DNA分子,然后將細(xì)胞放在正常環(huán)境(含14N)中培養(yǎng),讓其進(jìn)行兩次有絲分裂,結(jié)果染色體中的DNA標(biāo)記情況如圖所示: 這樣來(lái)看,最后形成的4個(gè)子細(xì)胞有3種情況:第1種情況是4個(gè)細(xì)胞都是;第2種情況是2個(gè)細(xì)胞是,1個(gè)細(xì)胞是,1個(gè)細(xì)胞是;第3種情況是2個(gè)細(xì)胞是,2個(gè)細(xì)胞是。 2.減數(shù)分裂與DNA復(fù)制的關(guān)系 如果用15N標(biāo)記細(xì)胞中的核DNA分子,然后將細(xì)胞放在正常環(huán)境(含14N)中培養(yǎng),讓其進(jìn)行減數(shù)分裂,結(jié)果染色體中的DNA標(biāo)記情況如圖所示: 由圖可以看出,減數(shù)分裂過程中細(xì)胞雖然連續(xù)分裂2次,但DNA只復(fù)制1次,所以4個(gè)子細(xì)胞均為,細(xì)胞中所有DNA分子均呈雜合狀態(tài)。 3.解題步驟
17、 第一步 畫出含一條染色體的細(xì)胞圖,下方畫出該條染色體上的1個(gè)DNA分子,用豎實(shí)線表示含同位素標(biāo)記 第二步 畫出復(fù)制一次,分裂一次的子細(xì)胞染色體圖,下方畫出染色體上的DNA鏈,未被標(biāo)記的新鏈用豎虛線表示 第三步 再畫出第二次復(fù)制(分裂)后的細(xì)胞的染色體組成和DNA鏈的情況 第四步 若繼續(xù)推測(cè)后期情況,可想象著絲點(diǎn)分裂,染色單體分開的局面,并進(jìn)而推測(cè)子細(xì)胞染色體的情況 1.用32P標(biāo)記玉米體細(xì)胞(含20條染色體)的DNA分子雙鏈,再將這些細(xì)胞轉(zhuǎn)入不含32P的培養(yǎng)基中培養(yǎng),讓其分裂1次……N次。若一個(gè)細(xì)胞中的染色體總條數(shù)和被32P標(biāo)記的染色體條數(shù)分別是40條和2條,則這至少是
18、第幾次分裂的分裂期( ) A.第1次 B.第2次 C.第3次 D.第4次 C [由染色體總條數(shù)為40條可知是分裂后期,若是第1次有絲分裂后期,被32P標(biāo)記的染色體條數(shù)應(yīng)為40條;若是第2次有絲分裂后期,被32P標(biāo)記的染色體條數(shù)應(yīng)為20條;若是第3次有絲分裂后期,被32P標(biāo)記的染色體條數(shù)應(yīng)為0~20條。] 2.(2019·合肥模擬)小鼠有20對(duì)染色體,若用3H-胸腺嘧啶脫氧核苷酸標(biāo)記小鼠精原細(xì)胞的染色體DNA分子,再在不含有標(biāo)記的培養(yǎng)液中連續(xù)分裂2代,下列判斷錯(cuò)誤的是( ) A.第一次分裂中期,含有3H的DNA單鏈有80條 B.在形成的第1代子細(xì)胞中,所有染色體均含有3
19、H C.第二次分裂后期,含有3H的染色體有40條 D.在形成的第2代子細(xì)胞中,所有染色體均含有3H D [DNA復(fù)制是以親代DNA分子為模板合成子代DNA分子的過程。DNA復(fù)制過程是邊解旋邊復(fù)制;DNA復(fù)制特點(diǎn)是半保留復(fù)制。第一次分裂的中期,細(xì)胞內(nèi)DNA單鏈有80條被3H標(biāo)記,A正確;在形成的第1代子細(xì)胞中,所有染色體的一條鏈被3H標(biāo)記,B正確;第二次分裂的后期,細(xì)胞內(nèi)有40條染色體被3H標(biāo)記,C正確;在形成的第2代子細(xì)胞中,有一半染色體的一條鏈被3H標(biāo)記,有一半染色體沒有被3H標(biāo)記,D錯(cuò)誤。] 3.(2019·大興期末測(cè)試)將果蠅精原細(xì)胞(2N=8)的DNA分子用15N標(biāo)記后,置于含
20、14N的培養(yǎng)基中培養(yǎng),經(jīng)過連續(xù)兩次分裂后,下列推斷正確的是( ) A.若進(jìn)行有絲分裂,則第二次分裂中期的細(xì)胞中有8條染色單體含14N B.若進(jìn)行有絲分裂,則兩次分裂結(jié)束后含15N的子細(xì)胞所占比例為1/2 C.若進(jìn)行減數(shù)分裂,則第二次分裂中期的細(xì)胞中有4條染色單體含14N D.若進(jìn)行減數(shù)分裂,則兩次分裂結(jié)束后所有子細(xì)胞的染色體均含有15N D [如果進(jìn)行有絲分裂,經(jīng)過一次細(xì)胞分裂后,形成的2個(gè)子細(xì)胞中的DNA分子都是15N-14N,再?gòu)?fù)制一次形成的2個(gè)DNA分子分別是15N-14N、14N-14N,中期時(shí)DNA存在于2條染色單體上,則第二次分裂中期含14N的染色單體有16條,A錯(cuò)誤;若進(jìn)行兩次有絲分裂,第一次分裂得到的子細(xì)胞中所有的染色體上DNA都是15N-14N,第二次分裂中期時(shí)單體上的DNA分子分別是15N-14N、14N-14N,得到的子細(xì)胞中一半有標(biāo)記或全部有標(biāo)記,或有標(biāo)記,B錯(cuò)誤;若進(jìn)行減數(shù)分裂,第一次分裂中期的染色體組成都是15N-14N,則第二次分裂中期的細(xì)胞中有4條染色體、8條姐妹染色單體,每條單體都含14N,C錯(cuò)誤;如果進(jìn)行減數(shù)分裂,形成的子細(xì)胞都有15N染色體,D正確。]
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