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1、 一、動物細胞培養(yǎng)續(xù)表 【例1】動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的主要區(qū)別是() A動物細胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與植物的不同 B動物細胞培養(yǎng)是培養(yǎng)單個細胞,植物組織培養(yǎng)是培養(yǎng)組織 C動物細胞培養(yǎng)可以傳代培養(yǎng),而植物組織培養(yǎng)不能傳代培養(yǎng) D動物細胞培養(yǎng)過程中可發(fā)生遺傳物質(zhì)的改變,而植物組織培養(yǎng)不能A 【解析】動物細胞培養(yǎng)通常用液體培養(yǎng)基,成分中糖類用葡萄糖,還必須含有動物血清;植物組織培養(yǎng)通常用固體培養(yǎng)基,成分中含有蔗糖及植物激素等物質(zhì)。 二、動物細胞融合續(xù)表 【友情提醒】(1)在細胞融合時,可出現(xiàn)多種雜種細胞,如B細胞B細胞,骨髓瘤細胞骨髓瘤細胞,B細胞骨髓瘤細胞。 (2)各項技術(shù)在使用中一般要借
2、助于其他某種技術(shù)的協(xié)助,如動物細胞融合、單克隆抗體的制備、胚胎移植、核移植等,其中動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。續(xù)表 【例2】(雙選)下列關(guān)于單克隆抗體制備過程的敘述,正確的是() A制備過程中需要動物細胞培養(yǎng)技術(shù) B雜交瘤細胞具有漿細胞與癌細胞的所有特點 C經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細胞即可用于單克隆抗體的生產(chǎn) D單克隆抗體最廣泛的用途是用作體外診斷試劑AD 【解析】單克隆抗體的制備是將骨髓瘤細胞與漿細胞結(jié)合,經(jīng)過選擇培養(yǎng)基的篩選得到雜交瘤細胞并經(jīng)單一抗體檢測后,培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞即可得單克隆抗體,雜交瘤細胞能無限繁殖但不具有癌細胞的轉(zhuǎn)移能力。 三、動物體細胞核移植與
3、克隆動物 1原理 動物細胞核的全能性。動物細胞核移植是將動物的一個細胞的細胞核,移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中,使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。 2供核細胞 一般選優(yōu)良動物的傳代10代以內(nèi)的細胞。 3受體細胞 去核的M期卵母細胞。 4過程 【例3】在克隆多利羊的過程中,下列哪項技術(shù)沒有運用到() A細胞培養(yǎng)技術(shù) B細胞核移植 C胚胎移植技術(shù) D基因工程技術(shù)【解析】克隆技術(shù)需利用核移植以產(chǎn)生重組細胞,重組細胞經(jīng)細胞培養(yǎng)形成早期胚胎后,需移植到母體子宮發(fā)育成個體。 D制備單克隆抗體過程中的兩次篩選的不同點第一次篩選是將未融合的
4、B淋巴細胞、骨髓瘤細胞以及BB融合、瘤瘤融合的細胞通過選擇培養(yǎng)基淘汰,篩選出B瘤融合的雜交細胞。第二次篩選是將產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞通過細胞培養(yǎng)用相應(yīng)抗原檢測的辦法篩選出來。因為從體內(nèi)獲取的免疫過的B淋巴細胞有很多種,形成的雜交瘤細胞也有很多種,所以需要篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。 1.(2010四川)某實驗室做了下圖所示的實驗研究,下列相關(guān)敘述,正確的是( ) A與纖維母細胞相比,過程形成的誘導(dǎo)干細胞的全能性較低 B過程是誘導(dǎo)干細胞的結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程 C每個Y細胞只產(chǎn)生一種抗體,故過程不需要選擇性培養(yǎng)基進行篩選 D過程產(chǎn)生的單抗,不需細胞膜上載體蛋白的協(xié)助就能釋放到
5、細胞外D 【解析】本題考查細胞分化及細胞工程相關(guān)知識,考查學(xué)生的綜合應(yīng)用能力。過程形成的誘導(dǎo)干細胞全能性高,A錯。過程是細胞的分化過程,分化時遺傳物質(zhì)不會發(fā)生變化,B錯。過程要用選擇培養(yǎng)基才能選出雜交瘤細胞,C錯。過程分泌抗體蛋白,是胞吐過程,不需載體蛋白協(xié)助。 2.(2010浙江)下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述,正確的是( ) A培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞 B克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細胞的基因型會發(fā)生改變 C二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的 D惡性細胞系的細胞可進行傳代培養(yǎng)D 【解析】本題主要考查細胞工程的有關(guān)知識,動物細胞培養(yǎng)可以分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng),原代培養(yǎng)到一定
6、程度后要進行傳代,因為細胞有接觸抑制現(xiàn)象,當(dāng)細胞接觸時就會停止分裂(在細胞培養(yǎng)過程中進行的是有絲分裂,所以培養(yǎng)出來的多數(shù)細胞基因型相同),但是細胞在培養(yǎng)過程中,傳代次數(shù)也是有限的,一般為50次就會死亡,留下來的細胞就是發(fā)生了癌變的細胞,遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,具有不死性,但是細胞膜表面糖蛋白減少,細胞易轉(zhuǎn)移,可以無限增殖,即可以進行傳代培養(yǎng),這個也就是人體中癌細胞會轉(zhuǎn)移的原因。3.(2011浙江)為了探究某物質(zhì)(X)的作用,研究者提出了以下實驗思路:(1)實驗分組:甲組:培養(yǎng)液Y細胞3HTdR(3H標記的胸腺嘧啶脫氧核苷)生理鹽水乙組:培養(yǎng)液Y細胞3HTdRX(用生理鹽水配制)每組設(shè)置若干個重復(fù)樣品
7、。(2)分別測定兩組的CRD(細胞內(nèi)的放射性強度),求每組的平均值。(3)將各樣品在適宜條件下培養(yǎng)合適時間后,測定CRD,求每組平均值并進行統(tǒng)計分析。(要求與說明:答題時用X、CRD、3HTdR表示相關(guān)名詞;Y細胞是能增殖的高等動物體細胞)請回答:(1)實驗?zāi)康模?。(2)預(yù)測實驗結(jié)果及結(jié)論: 。(3)實驗中采用3HTdR的原因是: 。探究X對Y細胞增殖(DNA合成)的影響如果乙組CRD明顯高于甲組,說明X對Y細胞增殖(DNA合成)有促進作用;如果乙組CRD與甲組基本相同,說明X對Y細胞增殖(DNA合成)無影響;如果乙組CRD明顯低于甲組,說明X對Y細胞增殖(DNA合成)有抑制作用3HTdR是
8、DNA合成的原料之一,可根據(jù)CRD變化來判斷細胞增殖(DNA合成)情況4.以H1N1病毒核衣殼蛋白為抗原,采用細胞工程制備單克隆抗體,下列敘述正確的是( )A用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi),產(chǎn)生的血清為單克隆抗體B體外培養(yǎng)單個漿細胞可以獲得大量針對H1N1病毒的單克隆抗體C將等量漿細胞和骨髓瘤細胞混合,經(jīng)誘導(dǎo)融合后的細胞均為雜交瘤細胞D利用該單克隆抗體與H1N1病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可以診斷該病毒感染體D【解析】單克隆抗體是相應(yīng)的雜交瘤細胞產(chǎn)生的,單個漿細胞的培養(yǎng)不能獲得單克隆抗體;用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi),血清中的抗體不是單一抗體,還含有體內(nèi)已存在的其他抗原的抗體;
9、等量漿細胞和骨髓瘤細胞混合,只考慮兩個細胞融合,可以形成三種雜交細胞,但只有漿細胞和骨髓瘤細胞融合而成的細胞稱為雜交瘤細胞。5.英國科學(xué)家威爾穆特首次用羊的體細胞、乳腺細胞成功地培育出一只小母羊,取名為“多利”,這種方法被稱之為“克隆”。以下四項中與此方法在本質(zhì)上最相近的是( )A將兔的早期胚胎分割后,分別植入兩只母兔的子宮內(nèi),并最終孕育成兩只一樣的兔B將人的抗病毒基因嫁接到煙草的DNA分子上,培育出了具有抗病毒能力的煙草新品種C將鼠骨髓瘤細胞與經(jīng)過免疫的脾細胞融合成雜交瘤細胞D將人的精、卵在體外受精,待受精卵發(fā)育到囊胚期時,再植入女性子宮內(nèi)發(fā)育成“試管嬰兒” A6.(雙選)單克隆抗體(單抗)
10、實質(zhì)上是單個效應(yīng)B細胞通過克隆形成的細胞群產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的免疫球蛋白。下列有關(guān)敘述中,錯誤的是( )A單抗作為生物導(dǎo)彈能定向殺死癌細胞 B單抗制備的過程要用到動物細胞培養(yǎng)和細胞融合技術(shù)C在單抗制備的過程中必須經(jīng)過至少兩次細胞篩選D只有用物理或化學(xué)方法誘導(dǎo),才能促使B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞 AD【解析】單抗只能定向到達癌細胞所在部位,殺死癌細胞的是導(dǎo)彈中的藥物。誘導(dǎo)B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞的融合有三種方法:滅活病毒處理、物理方法、化學(xué)方法。7.(雙選)請據(jù)圖判斷,下列說法不正確的是( )BC A若a,b分別對應(yīng)為骨髓瘤細胞和效應(yīng)B細胞,則d能產(chǎn)生單克隆抗體是b的遺傳物質(zhì)選擇性表達的結(jié)果B若d形成有性雜交后代,則a和b融合形成d的過程叫體細胞雜交C若d形成無性雜種植株,則采用了細胞工程中的核移植技術(shù)D若d形成無性雜種植株,由于雜種細胞具雙親葉綠體,則可能培育出比有性雜交品種光合作用性能更好的植株【解析】雜交瘤細胞產(chǎn)生單克隆抗體是細胞內(nèi)基因選擇性表達的結(jié)果;有性雜交是通過受精作用實現(xiàn)的;采用細胞工程中的植物體細胞雜交可以獲得無性雜種植株;此生物細胞內(nèi)具有雙親的葉綠體,可能比有性雜交品種的光合作用性能更好。