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1、 現(xiàn)代生物科技專題選修三
專題一 基因工程
1.(2010·蘇州模擬)下圖為DNA分子在不同酶的作用下所發(fā)生的變化,圖中依次表示限制性內(nèi)切酶、DNA聚合酶、DNA連接酶、解旋酶作用的正確順序是( )
A.①②③④ B.①②④③
C.①④②③ D.①④③②
解析:①是將一個DNA切成互補的兩個黏性末端,由限制性內(nèi)切酶發(fā)揮作用;DNA聚合酶是在DNA復制時發(fā)揮作用的(④是DNA復制); DNA連接酶是將兩個DNA片段連接在一起(②);解旋酶是將DNA分子雙鏈解成兩條互補的單鏈(③)。
答案:C
2.(2010·福州模擬)下圖是獲得抗蟲
2、棉的技術(shù)流程示意圖??敲顾乜剐曰?(kanr)常作為標記基因,只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。下列敘述正確的是( )
A.構(gòu)建重組質(zhì)粒過程中需要限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶
B.愈傷組織的分化產(chǎn)生了不同基因型的植株
C.卡那霉素抗性基因(kanr)中有該過程所利用的限制性內(nèi)切酶的識別位點
D.抗蟲棉有性生殖后代能保持抗蟲性狀的穩(wěn)定遺傳
解析:質(zhì)粒與目的基因結(jié)合時需要用同一種限制性內(nèi)切酶切割,用DNA連接酶連接;愈傷組織由相同細胞分裂形成,分化后產(chǎn)生相同基因型的植株;卡那霉素抗性基因作為標記基因不能有限制性內(nèi)切酶的切割位點;抗蟲棉有性生殖后代可能會發(fā)生性
3、狀分離,抗蟲性狀不一定能穩(wěn)定遺傳。
答案:A
3.(2010·汕頭模擬)蛋白質(zhì)工程與基因工程相比,其突出特點是 ( )
A.基因工程原則上能生產(chǎn)任何蛋白質(zhì)
B.蛋白質(zhì)工程能對現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì)
C.蛋白質(zhì)工程可以不通過轉(zhuǎn)錄和翻譯來實現(xiàn)
D.蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎上,延伸出來的第三代基因工程
解析:蛋白質(zhì)工程通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類生產(chǎn)和生活的需求,是延伸出來的第二代基因工程。
答案:B
4.(2010·上海高考)人體細胞內(nèi)含有抑制癌癥發(fā)生的p53基因,生物技術(shù)可對此類基因的變化進行檢測。
4、
(1)目的基因的獲取方法通常包括________和________。
(2)上圖表示從正常人和患者體內(nèi)獲取的p53基因的部分區(qū)域。與正常人相比,患者在該區(qū)域的堿基會發(fā)生改變,在上圖中用方框圈出發(fā)生改變的堿基對;這種變異被稱為________。
(3)已知限制酶E識別序列為CCGG,若用限制酶E分別完全切割正常人和患者的p53基因部分區(qū)域(見上圖),那么正常人的會被切成________個片段;而患者的則被切割成長度為________對堿基和________對堿基的兩種片段。
(4)如果某人的p53基因部分區(qū)域經(jīng)限制酶E完全切割后,共出現(xiàn)170、220、290和460堿基對的四種片段,那
5、么該人的基因型是________(以P+表示正常基因,P-表示異?;颉?
解析:(1)目的基因通常用從細胞中直接分離和通過化學方法人工合成的方法獲得。(2)對比正常人和患者p53基因部分區(qū)域的堿基對序列可知:正常基因中的C—G堿基對被T—A堿基對替換而成為異?;颉?3)由圖示知:正常人的p53基因部分區(qū)域有2個限制酶切割位點,用限制酶E對正常人的該基因區(qū)域進行切割,將得到長度分別為290對堿基、170對堿基和220對堿基3個片段。異?;蛞驂A基替換而失去一個限制酶E的切割位點,故用限制酶E切割患者的p53基因部分區(qū)域,只能得到長度為460對堿基和220對堿基的2種片段。(4)若某人的該基
6、因區(qū)域用限制酶E完全切割后,共出現(xiàn)170、220、290和460堿基對4種片段。說明該人既有正常基因,又有異?;?,故該人基因型為P+P-。
答案:(1)從細胞中分離 通過化學方法人工合成
(2)見下圖
基因堿基對的替換(基因突變)
(3)3 460 220 (4)P+P-
5.下圖為某種質(zhì)粒表達載體簡圖,小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點,ampR為青霉素抗性基因,tetR為四環(huán)素抗性基因,P為啟動子,T為終止子,ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別包括有EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點。
據(jù)圖回答:
(1)將含有目的基因的DN
7、A與質(zhì)粒表達載體分別用EcoRI酶切,酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進行連接后,其中由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有________、________、________三種。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒,需要對這些連接產(chǎn)物進行________。
(2)用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉(zhuǎn)化實驗。之后將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中,能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是________;若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中,能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是__________________。
(3)目的基因表達時,RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點是________,其合成
8、的產(chǎn)物是________。
(4)在上述實驗中,為了防止目的基因和質(zhì)粒表達載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接,酶切時應選用的酶是__________________?!?
解析:在基因表達載體的構(gòu)建過程中用同種限制酶來切割目的基因和質(zhì)粒,使之產(chǎn)生相同的黏性末端,以利于DNA片段的連接。將切割后的目的基因和質(zhì)粒,用DNA連接酶進行連接,它們之間隨機連接,可有三種產(chǎn)物:目的基因—載體連接物、載體—載體連接物和目的基因—目的基因連接物。從圖中可以看出,目的基因的插入位點在抗四環(huán)素基因上,可推知:目的基因—載體連接物的抗四環(huán)素基因被破壞,喪失了抗四環(huán)素的能力,但保留了抗青霉素的能力;載體—載體連接物
9、既保留了抗四環(huán)素的能力也保留了抗青霉素的能力;目的基因—目的基因連接物既無抗青霉素基因也無抗四環(huán)素基因,不具備抗性。獲得DNA連接產(chǎn)物以后,必須通過篩選方能獲得所需的基因表達載體。導入宿主細胞后方能表達獲得基因產(chǎn)物。目的基因表達過程中,RNA聚合酶首先與啟動子結(jié)合,指導目的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA,mRNA再指導蛋白質(zhì)的合成。從圖中可看出抗四環(huán)素基因上有兩個不同的切割位點,所以在實際操作過程中,為避免使切割后的末端任意連接,可用EcoRI和BamHI同時對目的基因和質(zhì)粒進行切割,使同一切割產(chǎn)物的黏性末端不同。
答案:(1)目的基因—載體連接物 載體—載體連接物 目的基因—目的基因連接物 分離純化
10、(其他合理答案也即可)
(2)載體—載體連接物 目的基因—載體連接物、載體—載體連接物
(3)啟動子 mRNA (4)EcoRI和BamHI
6.通過DNA重組技術(shù)使原有基因得以改造的動物稱為轉(zhuǎn)基因動物。運用這一技術(shù)使羊奶中含有人體蛋白質(zhì),下圖表示了這一技術(shù)的基本過程,在該工程中所用的基因“剪刀”能識別的序列和切點是—G↓GATCC—,請回答:
(1)從羊染色體中“剪下”羊蛋白質(zhì)基因的酶是________,人體蛋白質(zhì)基因“插入”后連接在羊體細胞染色體中需要的酶是________。
(2)請畫出質(zhì)粒被切割形成黏性末端的過程圖。
解析:(1)考查在基因工程中,科學家所用的“剪刀”、“針線”。(2)按堿基互補原則,寫出所給片段的互補部分,再按切割位點,將其分開,即。
答案:(1)限制性內(nèi)切酶 DNA連接酶
(2)