2014-2015學(xué)年人教版選修1專題5課題1DNA的粗提取和鑒定 課件(共30張PPT)

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1、課題課題 DNA的的粗粗提取與鑒定提取與鑒定染色體成分染色體成分蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)RNA(少量少量)DNA提取DNA的基本思路：利用利用DNADNA與與RNARNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異，提取性質(zhì)方面的差異，提取DNADNA，去除其他成分。，去除其他成分。1DNADNADNADNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定 1 1原理、方法和目的原理、方法和目的基本原理基本原理基本原理基本原理方法方法方法方法目的目的目的目的DNADNADNADNA在不同在不同在不同在不同濃濃濃濃度的度的度的度的NaClNaClNaClNaCl溶液中的溶解

2、度不同，溶液中的溶解度不同，溶液中的溶解度不同，溶液中的溶解度不同，在在在在0.14 mol/L0.14 mol/L0.14 mol/L0.14 mol/L的的的的NaClNaClNaClNaCl溶液中的溶解度最低溶液中的溶解度最低溶液中的溶解度最低溶液中的溶解度最低溶于溶于溶于溶于NaClNaClNaClNaCl溶液中并溶液中并溶液中并溶液中并稀稀稀稀釋釋釋釋NaClNaClNaClNaCl溶液溶液溶液溶液為為為為2 mol/L2 mol/L2 mol/L2 mol/L時時時時，DNADNADNADNA溶解，而部溶解，而部溶解，而部溶解，而部分蛋白分蛋白分蛋白分蛋白質(zhì)發(fā)質(zhì)發(fā)質(zhì)發(fā)質(zhì)發(fā)生生生生鹽

3、鹽鹽鹽析生成沉淀，通析生成沉淀，通析生成沉淀，通析生成沉淀，通過過濾過過濾過過濾過過濾可可可可除去部分蛋白除去部分蛋白除去部分蛋白除去部分蛋白質(zhì)質(zhì)質(zhì)質(zhì)及不溶于及不溶于及不溶于及不溶于NaClNaClNaClNaCl溶液的溶液的溶液的溶液的雜質(zhì)雜質(zhì)雜質(zhì)雜質(zhì)當(dāng)當(dāng)當(dāng)當(dāng)NaClNaClNaClNaCl溶液稀溶液稀溶液稀溶液稀釋釋釋釋至至至至0.14 mol/L0.14 mol/L0.14 mol/L0.14 mol/L時時時時，DNADNADNADNA析析析析出，出，出，出，過濾過濾過濾過濾可除去溶于可除去溶于可除去溶于可除去溶于NaClNaClNaClNaCl溶液的部分蛋白溶液的部分蛋白溶液的部分蛋

4、白溶液的部分蛋白質(zhì)質(zhì)質(zhì)質(zhì)和其他和其他和其他和其他雜質(zhì)雜質(zhì)雜質(zhì)雜質(zhì)DNADNADNADNA不被蛋白不被蛋白不被蛋白不被蛋白酶酶酶酶所水解所水解所水解所水解加入嫩肉粉加入嫩肉粉加入嫩肉粉加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白嫩肉粉中含木瓜蛋白嫩肉粉中含木瓜蛋白嫩肉粉中含木瓜蛋白酶酶酶酶，水解蛋白，水解蛋白，水解蛋白，水解蛋白質(zhì)質(zhì)質(zhì)質(zhì)（酶的專一性）酶的專一性）DNADNADNADNA不溶于酒精溶液不溶于酒精溶液不溶于酒精溶液不溶于酒精溶液加入冷卻酒加入冷卻酒加入冷卻酒加入冷卻酒精精精精(95%)(95%)(95%)(95%)DNADNADNADNA析出，除去溶于酒精的蛋白析出，除去溶于酒精的蛋白析出，除去溶于

5、酒精的蛋白析出，除去溶于酒精的蛋白質(zhì)質(zhì)質(zhì)質(zhì)DNADNADNADNA可被二苯胺染成可被二苯胺染成可被二苯胺染成可被二苯胺染成藍(lán)藍(lán)藍(lán)藍(lán)色色色色加入二苯胺，加入二苯胺，加入二苯胺，加入二苯胺，并沸水浴并沸水浴并沸水浴并沸水浴鑒鑒鑒鑒定定定定DNADNADNADNA高溫高溫DNADNA耐高溫耐高溫DNADNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性不同：蛋白質(zhì)、和蛋白質(zhì)對高溫耐受性不同：蛋白質(zhì)、DNADNA熱穩(wěn)定性不同。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受熱穩(wěn)定性不同。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60608080的高溫，而的高溫，而DNADNA在在8080以上才會變性。以上才會變性。DNADNA對洗滌劑耐受性對洗滌劑耐受性 洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜

6、，但對洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對DNADNA沒有影響。沒有影響。加入加入加入加入洗滌劑洗滌劑21 1）不同濃度）不同濃度NaClNaCl中中DNADNA溶解度不同。溶解度不同。2 2）DNADNA與其他細(xì)胞成分在酒精中溶解度不同，與其他細(xì)胞成分在酒精中溶解度不同，DNADNA不溶于酒精，細(xì)不溶于酒精，細(xì)胞中某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。胞中某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。3 3）DNADNA和蛋白質(zhì)對酶耐受性不同：酶的專一性和蛋白質(zhì)對酶耐受性不同：酶的專一性蛋白酶水解蛋蛋白酶水解蛋白質(zhì)。但是對白質(zhì)。但是對DNADNA沒有影響。沒有影響。4 4）DNADNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性不同：蛋白質(zhì)、和蛋白質(zhì)對高溫耐受性不

7、同：蛋白質(zhì)、DNADNA熱穩(wěn)定性不同。熱穩(wěn)定性不同。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60608080的高溫，而的高溫，而DNADNA在在8080以上才會變以上才會變性。性。5 5）DNADNA和蛋白質(zhì)對洗滌劑耐受性不同：洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，和蛋白質(zhì)對洗滌劑耐受性不同：洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對但對DNADNA沒有影響。沒有影響。提取提取DNA的原理包括的原理包括DNA的的 兩個方面兩個方面 溶解性和耐受性溶解性和耐受性1.DNA的粗提取的粗提取實驗原理實驗原理32.2.2.2.實驗材料實驗材料實驗材料實驗材料動物動物動物動物雞血細(xì)胞液的優(yōu)點雞血細(xì)胞液的優(yōu)點雞血細(xì)胞液的優(yōu)點雞血細(xì)胞液的

8、優(yōu)點提醒：提醒：提醒：提醒：人和哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中不含細(xì)胞核，也沒有人和哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中不含細(xì)胞核，也沒有人和哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中不含細(xì)胞核，也沒有人和哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中不含細(xì)胞核，也沒有DNADNADNADNA，不適于作為，不適于作為，不適于作為，不適于作為DNADNADNADNA提取的材料，但卻是提取血紅蛋白的提取的材料，但卻是提取血紅蛋白的提取的材料，但卻是提取血紅蛋白的提取的材料，但卻是提取血紅蛋白的理想材料。理想材料。理想材料。理想材料。雞血紅細(xì)胞、白細(xì)胞中都有細(xì)胞雞血紅細(xì)胞、白細(xì)胞中都有細(xì)胞核，含大量的核，含大量的DNA,DNA,既經(jīng)濟又易取既經(jīng)濟又易取 植物：新鮮

9、菜花、蒜黃、菠菜等。植物：新鮮菜花、蒜黃、菠菜等。43 3、方法與過程、方法與過程 1).1).制雞血細(xì)胞液制雞血細(xì)胞液0.1g/mL檸檬酸檬酸鈉100mL活活雞鮮血雞鮮血180mL500mL燒杯中，玻棒燒杯中，玻棒攪拌攪拌，離心或靜置沉淀。離心或靜置沉淀。離心或靜置后去掉上清液離心或靜置后去掉上清液血漿血漿血細(xì)胞血細(xì)胞5關(guān)于關(guān)于DNA粗提取的實驗材料的選擇，也經(jīng)過了多次實驗結(jié)果的比較，粗提取的實驗材料的選擇，也經(jīng)過了多次實驗結(jié)果的比較，最終選擇雞血做實驗材料的原因是什么？請回答下列問題：最終選擇雞血做實驗材料的原因是什么？請回答下列問題：（1）雞血中紅細(xì)胞）雞血中紅細(xì)胞 ，家雞屬于鳥類，家雞

10、屬于鳥類，新陳代謝旺盛，因而血液中新陳代謝旺盛，因而血液中 細(xì)胞數(shù)目較多，可以提供豐富的細(xì)胞數(shù)目較多，可以提供豐富的 （2）實驗前由老師制備雞血細(xì)胞液供同學(xué)們做實驗材料，而不用）實驗前由老師制備雞血細(xì)胞液供同學(xué)們做實驗材料，而不用雞全血，主要原因是雞全血，主要原因是（3）生活在牧區(qū)的人們，采集羊、牛和馬血比較方便，若他們按）生活在牧區(qū)的人們，采集羊、牛和馬血比較方便，若他們按實驗要求完成實驗步驟后，結(jié)果是實驗要求完成實驗步驟后，結(jié)果是 ，這是因為這是因為 ，但若改用動物肝臟做實驗材料，實驗可以順利進行，這是因為但若改用動物肝臟做實驗材料，實驗可以順利進行，這是因為 。（4）若選用動物肝臟做實驗

11、材料，在提取之前，最好增加）若選用動物肝臟做實驗材料，在提取之前，最好增加 程程序，使組織細(xì)胞更易分離。序，使組織細(xì)胞更易分離。含有完整的、成形的細(xì)胞核含有完整的、成形的細(xì)胞核紅紅DNA量，所以一般采用雞血量，所以一般采用雞血 雞的全血包括血漿和血細(xì)胞，血漿中無雞的全血包括血漿和血細(xì)胞，血漿中無DNA，全血中除掉血漿后就是濃縮的血細(xì)胞液，全血中除掉血漿后就是濃縮的血細(xì)胞液，DNA的相對含量提高了。的相對含量提高了。在實驗中很難提取到在實驗中很難提取到DNA哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中無細(xì)胞核，反靠白細(xì)胞哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中無細(xì)胞核，反靠白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞中的少量和淋巴細(xì)胞中的少量DNA，在實驗中很難

12、提取到，在實驗中很難提取到肝細(xì)胞中含有細(xì)胞核，并且肝組織容易被破壞，有利于肝細(xì)胞中含有細(xì)胞核，并且肝組織容易被破壞，有利于DNADNA的提取的提取若使肝組織易分離，將肝細(xì)胞剪碎、研磨是一種簡便易行的方法。若使肝組織易分離，將肝細(xì)胞剪碎、研磨是一種簡便易行的方法。6提取細(xì)胞核物質(zhì)：提取細(xì)胞核物質(zhì)：溶解核內(nèi)溶解核內(nèi)DNA：在濾液中加在濾液中加2mol/Lmol/L的的NaClNaCl溶液并攪拌，使染色質(zhì)中溶液并攪拌，使染色質(zhì)中DNADNA 與蛋白質(zhì)分離，與蛋白質(zhì)分離，DNADNA充分溶解，充分溶解，過濾過濾過濾過濾(除雜質(zhì)除雜質(zhì)除雜質(zhì)除雜質(zhì))析出析出DNA：DNA黏稠物再溶解：黏稠物再溶解：在燒杯

13、中用在燒杯中用2mol/Lmol/L的的NaClNaCl溶液溶解溶液溶解DNADNA。提取較純凈的提取較純凈的DNA：DNA的鑒定：的鑒定：取取兩試管兩試管各加各加2mol/L的的NaClNaCl溶液，溶液，將將DNA充分溶解于其充分溶解于其 中一試管，然后向兩試管中一試管，然后向兩試管加入加入二苯胺試劑二苯胺試劑，混勻沸水中加熱，混勻沸水中加熱 5min5min后后冷卻冷卻，可發(fā)現(xiàn)，可發(fā)現(xiàn)DNADNA與試劑反應(yīng)使溶液呈與試劑反應(yīng)使溶液呈現(xiàn)藍(lán)色現(xiàn)藍(lán)色。濾取濾取DNA黏稠物：黏稠物：過濾含過濾含DNA的的NaClNaCl溶液溶液：用兩層紗布過濾。用兩層紗布過濾。2)實驗方法步驟：實驗方法步驟：在

14、上述溶液中緩緩在上述溶液中緩緩加入蒸餾水，加入蒸餾水，并沿一個方向并沿一個方向輕輕攪拌輕輕攪拌，出現(xiàn)絲狀物；出現(xiàn)絲狀物；當(dāng)絲狀物不在增加時，停止加水當(dāng)絲狀物不在增加時，停止加水（此時（此時NaCl溶液的濃度相當(dāng)于溶液的濃度相當(dāng)于0.14mol/L）。）。用多層紗布用多層紗布過濾過濾，含，含DNA的粘稠物留在紗布上。的粘稠物留在紗布上。濾液中含有濾液中含有DNA。所得的濾液體積分?jǐn)?shù)為所得的濾液體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻酒精的冷卻酒精50mL，用玻棒沿一，用玻棒沿一個方向個方向輕緩攪拌輕緩攪拌，溶液中（，溶液中（析出析出）出現(xiàn)乳白色絲狀物，用）出現(xiàn)乳白色絲狀物，用玻玻棒棒將將絲狀物絲狀物卷起，并用濾紙

15、吸取上面的水分。卷起，并用濾紙吸取上面的水分。利用細(xì)胞吸水破裂，細(xì)胞核內(nèi)物質(zhì)釋放出來，后用利用細(xì)胞吸水破裂，細(xì)胞核內(nèi)物質(zhì)釋放出來，后用紗布紗布過濾取其濾液。過濾取其濾液。血細(xì)胞在蒸餾水中易吸水而導(dǎo)致血細(xì)胞在蒸餾水中易吸水而導(dǎo)致細(xì)胞膜和核膜細(xì)胞膜和核膜的破裂，據(jù)此可得出含核的破裂，據(jù)此可得出含核DNADNA的溶液。的溶液。7 鑒定鑒定鑒定鑒定不變藍(lán)不變藍(lán)對照組對照組溶液逐漸溶液逐漸變藍(lán)變藍(lán)絲狀絲狀物物 (DNA)(DNA)實驗組實驗組圖示圖示結(jié)果結(jié)果加入物質(zhì)加入物質(zhì)比較比較均加入：均加入：4 4 mLmL二苯胺二苯胺試劑試劑2mol/LNaCl2mol/LNaCl溶液溶液5 5 mLmL鑒定時藍(lán)

16、色的深淺與溶液中鑒定時藍(lán)色的深淺與溶液中DNA的含量多少有關(guān)。的含量多少有關(guān)。自變量你能采用其他方法對你能采用其他方法對DNADNA進行鑒定嗎？進行鑒定嗎？洋蔥的鱗片葉表皮細(xì)胞洋蔥的鱗片葉表皮細(xì)胞取少許絲狀物，置玻片中央，取少許絲狀物，置玻片中央，取少許絲狀物，置玻片中央，取少許絲狀物，置玻片中央，加加加加1 1 1 1滴滴滴滴甲基綠甲基綠甲基綠甲基綠溶液，絲狀物變成溶液，絲狀物變成溶液，絲狀物變成溶液，絲狀物變成綠色。綠色。綠色。綠色。鑒定所用的試劑是鑒定所用的試劑是二苯胺二苯胺或或甲基綠甲基綠。用用二苯胺二苯胺須加熱。用須加熱。用甲基綠不用水浴甲基綠不用水浴加熱。加熱。89 注注注注 意意

17、意意 事事事事 項項項項制備雞血細(xì)胞液時，要在取雞血的同時加入檸檬酸鈉，靜置后上制備雞血細(xì)胞液時，要在取雞血的同時加入檸檬酸鈉，靜置后上制備雞血細(xì)胞液時，要在取雞血的同時加入檸檬酸鈉，靜置后上制備雞血細(xì)胞液時，要在取雞血的同時加入檸檬酸鈉，靜置后上層是血清，下層為所需要的血細(xì)胞。層是血清，下層為所需要的血細(xì)胞。層是血清，下層為所需要的血細(xì)胞。層是血清，下層為所需要的血細(xì)胞。整個實驗中整個實驗中加入加入“兩次蒸餾水，兩次蒸餾水，三次三次NaClNaCl溶液溶液，一次酒精，一次酒精”兩次加蒸餾水的目的不同，一是漲破細(xì)胞，二是稀釋溶液。兩次加蒸餾水的目的不同，一是漲破細(xì)胞，二是稀釋溶液。兩次加蒸餾水

18、的目的不同，一是漲破細(xì)胞，二是稀釋溶液。兩次加蒸餾水的目的不同，一是漲破細(xì)胞，二是稀釋溶液。酒精最好用酒精最好用95%95%的冷酒精的冷酒精;加蒸餾水或加入酒精用玻棒攪拌時加蒸餾水或加入酒精用玻棒攪拌時,動作要動作要輕緩且朝一個方向輕緩且朝一個方向。保證保證DNADNA分子的完整性。分子的完整性。使用時注意玻璃棒不要碰到燒杯底。使用時注意玻璃棒不要碰到燒杯底。使用時注意玻璃棒不要碰到燒杯底。使用時注意玻璃棒不要碰到燒杯底。鑒定鑒定鑒定鑒定DNADNADNADNA時需沸水浴加熱。時需沸水浴加熱。時需沸水浴加熱。時需沸水浴加熱。二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用二苯胺試劑

19、要現(xiàn)配現(xiàn)用,否則會影響鑒定的效果否則會影響鑒定的效果否則會影響鑒定的效果否則會影響鑒定的效果.二苯胺是一種有二苯胺是一種有二苯胺是一種有二苯胺是一種有毒性的試劑毒性的試劑毒性的試劑毒性的試劑,使用時注意不要讓藥液接觸到皮膚或身體的其他部位使用時注意不要讓藥液接觸到皮膚或身體的其他部位使用時注意不要讓藥液接觸到皮膚或身體的其他部位使用時注意不要讓藥液接觸到皮膚或身體的其他部位.盛放雞血細(xì)胞的容器盛放雞血細(xì)胞的容器盛放雞血細(xì)胞的容器盛放雞血細(xì)胞的容器最好是塑料容器最好是塑料容器最好是塑料容器最好是塑料容器（雞血細(xì)胞破碎后釋放的（雞血細(xì)胞破碎后釋放的（雞血細(xì)胞破碎后釋放的（雞血細(xì)胞破碎后釋放的DNA

20、DNADNADNA，容易被玻璃容器吸附，造成提取過程中，容易被玻璃容器吸附，造成提取過程中，容易被玻璃容器吸附，造成提取過程中，容易被玻璃容器吸附，造成提取過程中DNADNADNADNA的損失）的損失）的損失）的損失）10 DNADNA的直徑約為的直徑約為20201010-10-10 m m，實驗中出現(xiàn)的絲狀物實驗中出現(xiàn)的絲狀物的粗細(xì)是否表示的粗細(xì)是否表示1 1個個DNADNA分子直徑的大??？分子直徑的大小？答：答：DNADNA分子直徑只有分子直徑只有2 nm2 nm。絲狀物是多個絲狀物是多個DNADNA聚在一起形成的。聚在一起形成的。11下圖為下圖為“DNADNA粗提取和鑒定粗提取和鑒定”實

21、驗的相關(guān)操作。這些操作目的正確實驗的相關(guān)操作。這些操作目的正確的是的是（）A.A.是洗滌血細(xì)胞，去除血細(xì)胞表面的雜質(zhì)是洗滌血細(xì)胞，去除血細(xì)胞表面的雜質(zhì)B.B.是溶解是溶解DNADNA，去除不溶于酒精的雜質(zhì)，去除不溶于酒精的雜質(zhì)C.C.是溶解是溶解DNADNA，去除不溶于，去除不溶于2 mol/L 2 mol/L NaClNaCl溶液的雜質(zhì)溶液的雜質(zhì)D.D.是稀釋是稀釋NaClNaCl溶液，去除不溶于低濃度溶液，去除不溶于低濃度NaClNaCl溶液的雜質(zhì)溶液的雜質(zhì) 是釋放核物質(zhì)是釋放核物質(zhì)是提純是提純DNADNA，去除溶于酒，去除溶于酒精的雜質(zhì)，精的雜質(zhì)，稀釋稀釋NaClNaCl溶液，析出溶液，

22、析出DNADNA。C12甲、乙兩圖為甲、乙兩圖為“DNADNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定”實驗中涉及的兩個操作裝實驗中涉及的兩個操作裝置圖。相關(guān)敘述正確的是置圖。相關(guān)敘述正確的是 甲甲 乙乙A A圖甲的燒杯和圖乙的試管中所用溶劑都為圖甲的燒杯和圖乙的試管中所用溶劑都為NaClNaCl溶液，但兩者溶液，但兩者濃度不同濃度不同B B圖乙試管經(jīng)少許加熱后即可觀察到一支試管中的溶液明顯變圖乙試管經(jīng)少許加熱后即可觀察到一支試管中的溶液明顯變藍(lán)，另一支試管中的溶液不變藍(lán)藍(lán)，另一支試管中的溶液不變藍(lán)C C圖甲操作需用玻棒迅速攪拌以使圖甲操作需用玻棒迅速攪拌以使DNADNA成為絮狀沉淀并纏繞在成為絮狀沉淀并

23、纏繞在玻棒上玻棒上D D圖乙操作中所用的二苯胺需現(xiàn)配現(xiàn)用以達(dá)到較好的鑒定效果圖乙操作中所用的二苯胺需現(xiàn)配現(xiàn)用以達(dá)到較好的鑒定效果D13小結(jié)小結(jié):生物體內(nèi)有機物與化學(xué)試劑的特定顏色反應(yīng)生物體內(nèi)有機物與化學(xué)試劑的特定顏色反應(yīng)試劑名稱試劑名稱鑒定物質(zhì)鑒定物質(zhì)顏色反應(yīng)顏色反應(yīng)溫度條件溫度條件還原性糖還原性糖如葡萄糖如葡萄糖脂脂 肪肪蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)DNADNA淀淀 粉粉 磚紅色沉淀磚紅色沉淀藍(lán)色藍(lán)色橘黃色橘黃色紅色紅色紫色紫色藍(lán)紫色藍(lán)紫色加熱加熱加熱加熱斐林試劑斐林試劑班氏試劑班氏試劑蘇丹蘇丹IIIIII蘇丹蘇丹IVIV雙縮脲試劑雙縮脲試劑二苯胺試劑二苯胺試劑碘液碘液14植物細(xì)胞植物細(xì)胞需要先用需要先用洗

24、滌劑洗滌劑（洗發(fā)香波、沐浴液、洗潔（洗發(fā)香波、沐浴液、洗潔精等）精等）溶解細(xì)胞膜。溶解細(xì)胞膜。洗滌劑可以瓦解細(xì)胞膜洗滌劑可以瓦解細(xì)胞膜的原因是：的原因是：洗滌液中含有十二烷基硫酸鈉和洗滌液中含有十二烷基硫酸鈉和堿，堿，它們可使細(xì)胞膜破裂，蛋白它們可使細(xì)胞膜破裂，蛋白質(zhì)變性，使蛋白質(zhì)與質(zhì)變性，使蛋白質(zhì)與DNADNA分離開來。分離開來。利于利于利于利于DNADNADNADNA的釋放。的釋放。的釋放。的釋放。動物細(xì)胞膜是不用試劑（動物細(xì)胞膜是不用試劑（洗滌劑）洗滌劑）破壞的，破壞的，因為動物細(xì)胞膜外面沒因為動物細(xì)胞膜外面沒有細(xì)胞壁的保護有細(xì)胞壁的保護，放在清水中自，放在清水中自然的就會吸水而脹破，釋

25、放出其然的就會吸水而脹破，釋放出其中的中的DNADNA等物質(zhì)。等物質(zhì)。4 4、植物：新鮮菜花、蒜黃、菠菜等。植物：新鮮菜花、蒜黃、菠菜等。15方法步驟方法步驟1 1、將、將30g30g香蕉或菜花切碎，放入研缽中。向研香蕉或菜花切碎，放入研缽中。向研缽中加入缽中加入2g2g氯化鈉氯化鈉，研磨直至成半流體狀。，研磨直至成半流體狀。3 3、將混合液用兩層紗布過濾，向濾液中、將混合液用兩層紗布過濾，向濾液中加入加入預(yù)冷預(yù)冷的的10ml10ml乙醇乙醇溶液，靜置，可產(chǎn)生溶液，靜置，可產(chǎn)生絮狀的絮狀的DNADNA。4 4、取兩支試管，分別加入、取兩支試管，分別加入5ml5ml生生理鹽水，將理鹽水，將DNA

26、DNA挑至其中一支試挑至其中一支試管中，輕輕攪拌使其溶解。管中，輕輕攪拌使其溶解。有利于有利于有利于有利于DNADNA的溶解的溶解的溶解的溶解2 2、向研缽中加入、向研缽中加入10ml10ml蒸餾水或涼開水，攪蒸餾水或涼開水，攪拌。然后加入拌。然后加入10ml10ml洗滌劑洗滌劑，輕輕攪拌。，輕輕攪拌。能溶解細(xì)胞膜，有利于能溶解細(xì)胞膜，有利于能溶解細(xì)胞膜，有利于能溶解細(xì)胞膜，有利于DNADNA的釋放；的釋放；的釋放；的釋放；DNADNADNADNA析出，除去溶于酒精的蛋白質(zhì)析出，除去溶于酒精的蛋白質(zhì)析出，除去溶于酒精的蛋白質(zhì)析出，除去溶于酒精的蛋白質(zhì)1620072007年高考生物試題年高考生物

27、試題:在某些深海魚中發(fā)現(xiàn)的抗凍蛋白基因，該對提在某些深海魚中發(fā)現(xiàn)的抗凍蛋白基因，該對提高農(nóng)作物的抗寒能力有較好的應(yīng)用價值，該基高農(nóng)作物的抗寒能力有較好的應(yīng)用價值，該基因可以從這些魚的因可以從這些魚的DNADNA中擴增得到。中擴增得到。試述在提取試述在提取和純化和純化DNADNA時影響提純效果的因素及其依據(jù)。時影響提純效果的因素及其依據(jù)。（列舉兩點）列舉兩點）選擇選擇NaCl溶液的合適濃度，利用溶液的合適濃度，利用DNA和其它雜質(zhì)在和其它雜質(zhì)在不同不同NaCl溶液中溶解溶液中溶解 度不同的特性，達(dá)到分離目的；度不同的特性，達(dá)到分離目的；加人一定量酒精，使部分蛋白質(zhì)雜質(zhì)溶解于酒精，加人一定量酒精，

28、使部分蛋白質(zhì)雜質(zhì)溶解于酒精，與與DNA分離；分離；加人蛋白酶，除去蛋白質(zhì)雜質(zhì)的干擾；加人蛋白酶，除去蛋白質(zhì)雜質(zhì)的干擾；控制控制DNA提取的溫度，使大多數(shù)蛋白質(zhì)雜質(zhì)變性。提取的溫度，使大多數(shù)蛋白質(zhì)雜質(zhì)變性。171.如果用棉花植株作為實驗材料做如果用棉花植株作為實驗材料做DNA的粗提的粗提取與鑒定取與鑒定實驗，請你說出可能用到的二種化實驗，請你說出可能用到的二種化學(xué)試劑名稱，并說出這種試劑在該實驗中的用學(xué)試劑名稱，并說出這種試劑在該實驗中的用途。（途。（4分）分）氯化鈉溶液：氯化鈉溶液：不同濃度的不同濃度的NaCl溶液，能使溶液，能使DNA溶解或析溶解或析 出，從而起到提取出，從而起到提取DNA的

29、作用；的作用；95%乙醇：乙醇：DNA不溶于酒精，可以用于提取出含雜質(zhì)較不溶于酒精，可以用于提取出含雜質(zhì)較少的少的DNA；二苯胺二苯胺：作為鑒定：作為鑒定DNA的試劑；的試劑；洗滌劑：洗滌劑：能溶解細(xì)胞膜，有利于細(xì)胞內(nèi)能溶解細(xì)胞膜，有利于細(xì)胞內(nèi)DNA的釋放（答的釋放（答出每種試劑的名稱和用途得出每種試劑的名稱和用途得2分）。分）。182 2：下列圖示中能反映：下列圖示中能反映DNADNA溶解度溶解度與與NaClNaCl溶液溶液濃度濃度(mol/L)(mol/L)之間的關(guān)系的是（之間的關(guān)系的是（）C C0.140.14DNADNA溶溶解解度度0.140.140.140.140.140.14DNA

30、DNA溶溶解解度度DNADNA溶溶解解度度DNADNA溶溶解解度度A AB BC CD DNaClNaCl濃度濃度NaClNaCl濃度濃度NaClNaCl濃度濃度NaClNaCl濃度濃度19C0.14DNA析析出出量量0.140.140.14DNA析析出出量量DNA析析出出量量DNA析析出出量量ABDNaCl濃度濃度NaCl濃度濃度NaCl濃度濃度NaCl濃度濃度3：下列圖示中能反映：下列圖示中能反映DNA析出量與析出量與NaCl溶液濃度溶液濃度(mol/L)之間的關(guān)系的是之間的關(guān)系的是 （）B溶解度與析出量的關(guān)系是溶解度與析出量的關(guān)系是相反相反204.4.江蘇有一道涼菜江蘇有一道涼菜白斬雞，

31、雞肉嫩而不韌、味美鮮香。白斬雞，雞肉嫩而不韌、味美鮮香。其加工過程中添加了從木瓜中提取的酶制成的其加工過程中添加了從木瓜中提取的酶制成的“嫩肉粉。嫩肉粉?！毕铝杏嘘P(guān)嫩肉粉的敘述中，正確的是下列有關(guān)嫩肉粉的敘述中，正確的是()A A“嫩肉粉嫩肉粉”可能是通過催化細(xì)胞間的纖維素水解而實可能是通過催化細(xì)胞間的纖維素水解而實現(xiàn)現(xiàn)“嫩肉嫩肉”的的B B與高溫蒸煮相比，與高溫蒸煮相比，“嫩肉粉嫩肉粉”是通過降低反應(yīng)活化能是通過降低反應(yīng)活化能而實現(xiàn)而實現(xiàn)“嫩肉嫩肉”的的C C“嫩肉粉嫩肉粉”應(yīng)在蒸煮雞肉時加入，才能實現(xiàn)應(yīng)在蒸煮雞肉時加入，才能實現(xiàn)“嫩肉嫩肉”D D“嫩肉粉嫩肉粉”是一種化工產(chǎn)品，不利于人體健

32、康，實際是一種化工產(chǎn)品，不利于人體健康，實際應(yīng)用中能少則少、能無則無應(yīng)用中能少則少、能無則無B215.5.（0909江蘇四市）下列操作可以達(dá)到目的的選項是江蘇四市）下列操作可以達(dá)到目的的選項是選項選項 操作操作 目的目的A A溶解海藻酸鈉時用大火加熱溶解海藻酸鈉時用大火加熱 海藻酸鈉可以快速溶解海藻酸鈉可以快速溶解 B B將裝有蛋白質(zhì)粗制品的透析袋將裝有蛋白質(zhì)粗制品的透析袋（玻璃紙制成）放入透析液中（玻璃紙制成）放入透析液中 蛋白質(zhì)與其他小分子化蛋白質(zhì)與其他小分子化合物分離合物分離 C C在在DNADNA粗提取實驗中，雞血中加粗提取實驗中，雞血中加入蒸餾水入蒸餾水 稀釋血液，防止凝固稀釋血液，

33、防止凝固 D D洋蔥根尖解離后漂洗洋蔥根尖解離后漂洗 使細(xì)胞分散，利于觀察使細(xì)胞分散，利于觀察 B微火加熱并不斷攪拌，其目的是防止海藻酸鈉焦煳微火加熱并不斷攪拌，其目的是防止海藻酸鈉焦煳促使血細(xì)胞破裂促使血細(xì)胞破裂防止根尖過分解離，對染色造成影響。防止根尖過分解離，對染色造成影響。因玻璃紙是半透膜，所以將裝有蛋白質(zhì)粗制品的透析袋（玻璃紙制成）因玻璃紙是半透膜，所以將裝有蛋白質(zhì)粗制品的透析袋（玻璃紙制成）放入透析液中，可以將蛋白質(zhì)與其他小分子化合物分離。放入透析液中，可以將蛋白質(zhì)與其他小分子化合物分離。226.6.在在“DNADNA粗提取與鑒定粗提取與鑒定”實驗中，將含有一定雜質(zhì)的實驗中，將含有

34、一定雜質(zhì)的DNADNA絲狀物分別放入體積為絲狀物分別放入體積為2mL2mL的四種溶液中，經(jīng)攪拌后過濾，的四種溶液中，經(jīng)攪拌后過濾，獲得獲得4 4種濾液，含種濾液，含DNADNA較少的是較少的是A A濾液濾液E BE B濾液濾液F F C C濾液濾液G DG D濾液濾液H H 1 蒸餾水中蒸餾水中攪拌后過濾攪拌后過濾濾液濾液E 2 2molL的的NaCl溶液溶液攪拌后過濾攪拌后過濾濾液濾液F 3 O.14molL的的NaCl溶液中溶液中攪拌后過濾攪拌后過濾濾液濾液G 4 冷卻的冷卻的95的酒精溶液中的酒精溶液中攪拌后過濾攪拌后過濾濾液濾液HCD7 7、欲使溶有、欲使溶有DNADNA的的2mol/

35、L2mol/L的的NaClNaCl溶液中的溶液中的DNADNA析出，最有析出，最有效的辦法是效的辦法是A A 加蒸餾水加蒸餾水 B B 加礦泉水加礦泉水 C C 加清水加清水 D D 加生理鹽水加生理鹽水238、與析出、與析出DNA粘稠物有關(guān)的敘述，不正確的是（多選）粘稠物有關(guān)的敘述，不正確的是（多選）A 操作時緩慢滴加蒸餾水，降低操作時緩慢滴加蒸餾水，降低DNA的溶解度的溶解度B 操作時用玻棒輕緩攪拌以保證操作時用玻棒輕緩攪拌以保證DNA分子的完整分子的完整C 加蒸餾水可以同時降低加蒸餾水可以同時降低DNA和蛋白質(zhì)的溶解度和蛋白質(zhì)的溶解度D 當(dāng)絲狀粘稠物不再增加時，當(dāng)絲狀粘稠物不再增加時，N

36、aCl溶液的濃度可以認(rèn)為溶液的濃度可以認(rèn)為是是0.14mol/LE.改變改變NaCl溶液的濃度只能使溶液的濃度只能使DNA溶解而不能使其析出溶解而不能使其析出9、下列與、下列與DNA粗提取有關(guān)描述正確的是粗提取有關(guān)描述正確的是 （）A、DNA能夠溶解在一定濃度的能夠溶解在一定濃度的NaCl溶液中溶液中 B、DNA能夠溶解在質(zhì)量分?jǐn)?shù)能夠溶解在質(zhì)量分?jǐn)?shù)95%冷酒精中冷酒精中C、DNA在在0.14mol/L的的NaCl溶液中溶解度最高溶液中溶解度最高 D、DNA只能溶解在只能溶解在2mol/L的的NaCl溶液中溶液中A2410.10.下列操作中，對下列操作中，對DNADNA的提取量影響較小的是的提取

37、量影響較小的是 A.A.使雞血細(xì)胞在蒸餾水中充分破裂，放出使雞血細(xì)胞在蒸餾水中充分破裂，放出DNADNA等核物質(zhì)等核物質(zhì)B.B.攪拌時，要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪動攪拌時，要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪動C.C.在析出在析出DNADNA黏稠物時，要緩緩加蒸餾水，直至溶液中黏黏稠物時，要緩緩加蒸餾水，直至溶液中黏稠物不再增多稠物不再增多D.D.在用酒精沉淀在用酒精沉淀DNADNA時，要使用冷酒精，甚至再將混合液時，要使用冷酒精，甚至再將混合液放入冰箱中冷卻放入冰箱中冷卻解析：在解析：在B所述的操作中，可以保證所述的操作中，可以保證DNA分子的完整性，分子的完整性，但不影響提取量。除了但不影響提取量。

38、除了A、C、D 及在及在DNA的溶解和再溶的溶解和再溶解時，要充分?jǐn)嚢栌绊懡鈺r，要充分?jǐn)嚢栌绊慏NA的提取量外，使用塑料器皿的提取量外，使用塑料器皿也可以減少也可以減少DNA在操作中的損失。因為塑料制品的性質(zhì)在操作中的損失。因為塑料制品的性質(zhì)相對比較溫和相對比較溫和,所以比金屬等其他的制品好一些所以比金屬等其他的制品好一些.對對DNA的損傷也就小一些因為的損傷也就小一些因為DNA容易與玻璃制品粘連容易與玻璃制品粘連 答案：答案：B 2511.11.（多選）（多選）下下表是關(guān)于表是關(guān)于DNADNA粗提取與鑒定實驗中所使用粗提取與鑒定實驗中所使用的材料、操作及其作用的表述。正確的是（的材料、操作及

39、其作用的表述。正確的是（）試劑試劑操作操作作用作用A A檸檬酸鈉溶液檸檬酸鈉溶液與雞血混合與雞血混合防止血液凝固防止血液凝固B B蒸餾水蒸餾水與雞血細(xì)胞混合與雞血細(xì)胞混合保持細(xì)胞形狀保持細(xì)胞形狀C C蒸餾水蒸餾水加入到溶解有加入到溶解有DNADNA的的NaClNaCl中中析出析出DNADNA絲狀物絲狀物D D冷卻的酒精冷卻的酒精加入到過濾后加入到過濾后DNADNA的的NaClNaCl中中產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)AC2612.12.下列關(guān)于下列關(guān)于DNADNA粗提取與鑒定的說法正確的是粗提取與鑒定的說法正確的是()A A、氯化鈉的濃度越低，對、氯化鈉的濃度越低，對DNADNA的溶解度

40、越大的溶解度越大B B、人血也可代替雞血進行實驗、人血也可代替雞血進行實驗C C、檸檬酸鈉的主要作用是加速血細(xì)胞破裂、檸檬酸鈉的主要作用是加速血細(xì)胞破裂D D、DNADNA不能溶于酒精尤其是冷酒精不能溶于酒精尤其是冷酒精D防止凝血防止凝血13.蛙的紅細(xì)胞、雞的紅細(xì)胞都有細(xì)胞核和各種細(xì)蛙的紅細(xì)胞、雞的紅細(xì)胞都有細(xì)胞核和各種細(xì)胞器，哺乳動物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和各胞器，哺乳動物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和各種細(xì)胞器，它們的呼吸方式是什么種細(xì)胞器，它們的呼吸方式是什么?蛙的紅細(xì)胞、雞的紅細(xì)胞都是正常的細(xì)胞蛙的紅細(xì)胞、雞的紅細(xì)胞都是正常的細(xì)胞,進行的是進行的是有氧呼吸有氧呼吸.哺乳動物成熟的紅細(xì)胞哺乳動

41、物成熟的紅細(xì)胞是進行無氧呼吸的。是進行無氧呼吸的。2716.16.實驗中實驗中NaClNaCl的物質(zhì)的量濃度為的物質(zhì)的量濃度為2 mol2 molL L和和0.14 mol0.14 molL L對對DNADNA有何影響有何影響?15.15.在在DNADNA的粗提取實驗過程中，兩次向燒杯的粗提取實驗過程中，兩次向燒杯中加入蒸餾水的作用是中加入蒸餾水的作用是()()。A.A.稀釋血液、沖洗樣品稀釋血液、沖洗樣品B.B.使血細(xì)胞破裂、降低使血細(xì)胞破裂、降低NaClNaCl濃度使?jié)舛仁笵NADNA析出析出C.C.使血細(xì)胞破裂、增大使血細(xì)胞破裂、增大DNADNA溶解量溶解量 D.D.使血細(xì)胞破裂、提取含

42、雜質(zhì)較少的使血細(xì)胞破裂、提取含雜質(zhì)較少的DNADNAB答：前者是答：前者是溶解溶解DNADNA，后者是使后者是使DNADNA析出析出17.DNA17.DNA遇二苯胺遇二苯胺(沸水浴沸水浴)會染成會染成()()A.A.磚紅色磚紅色 B.B.橘黃色橘黃色 C.C.紫色紫色 D.D.藍(lán)色藍(lán)色D28 18.18.DNADNA在在 NaClNaCl溶溶液液中中的的溶溶解解度度有有兩兩重重性性，隨隨著著 NaClNaCl溶液濃度的變化而變化。溶液濃度的變化而變化。(1)(1)請請在在下下列列濃濃度度的的 NaClNaCl溶溶液液中中，選選出出能能使使DNADNA析析出出最最徹徹底的一種和溶解度最高的一種底

43、的一種和溶解度最高的一種_。A A0.14 mol/L0.14 mol/LB B2 mol/L2 mol/L C C0.15 mol/L 0.15 mol/L D D0.3 mol/L0.3 mol/L(2)(2)DNADNA不不溶溶于于酒酒精精，但但細(xì)細(xì)胞胞中中的的某某些些物物質(zhì)質(zhì)卻卻可可以以溶溶于于酒酒精精溶溶液液，利利用用這這一一原原理理可可以以_，可可以以推推測測溶溶于酒精中的可能有于酒精中的可能有_ 。A A、B B去除雜質(zhì)去除雜質(zhì)某些鹽類、蛋白質(zhì)、糖類或某些鹽類、蛋白質(zhì)、糖類或其他大分子物質(zhì)其他大分子物質(zhì)291919(2011(2011(2011(2011江蘇卷，江蘇卷，江蘇卷，江

44、蘇卷，19)19)19)19)在利用雞血進行在利用雞血進行在利用雞血進行在利用雞血進行“DNADNADNADNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定”的實驗中，相關(guān)敘述正確的是的實驗中，相關(guān)敘述正確的是的實驗中，相關(guān)敘述正確的是的實驗中，相關(guān)敘述正確的是 ()A A A A用蒸餾水將用蒸餾水將用蒸餾水將用蒸餾水將NaClNaClNaClNaCl溶液濃度調(diào)至溶液濃度調(diào)至溶液濃度調(diào)至溶液濃度調(diào)至0.14 mol/L0.14 mol/L0.14 mol/L0.14 mol/L，濾去析出物，濾去析出物，濾去析出物，濾去析出物B B B B調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)NaClNaClNaClNa

45、Cl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質(zhì)溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質(zhì)溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質(zhì)溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質(zhì)C C C C將絲狀物溶解在將絲狀物溶解在將絲狀物溶解在將絲狀物溶解在2 mol/L 2 mol/L 2 mol/L 2 mol/L NaClNaClNaClNaCl溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色D D D D用菜花替代雞血作為實驗材料，其實驗操作步驟相同用菜花替代雞血作為實驗材料，其實驗操作步驟相同用菜花替代雞血作為實驗材料，

46、其實驗操作步驟相同用菜花替代雞血作為實驗材料，其實驗操作步驟相同解析解析解析解析用蒸餾水將用蒸餾水將用蒸餾水將用蒸餾水將NaClNaClNaClNaCl溶液濃度調(diào)至溶液濃度調(diào)至溶液濃度調(diào)至溶液濃度調(diào)至0.14 mol/L0.14 mol/L0.14 mol/L0.14 mol/L時，濾取時，濾取時，濾取時，濾取析出物；將絲狀物溶解在析出物；將絲狀物溶解在析出物；將絲狀物溶解在析出物；將絲狀物溶解在2 mol/L2 mol/L2 mol/L2 mol/L的的的的NaClNaClNaClNaCl溶液中，加入二溶液中，加入二溶液中，加入二溶液中，加入二苯胺試劑，需沸水浴加熱幾分鐘，才呈藍(lán)色；用菜花替

47、代苯胺試劑，需沸水浴加熱幾分鐘，才呈藍(lán)色；用菜花替代苯胺試劑，需沸水浴加熱幾分鐘，才呈藍(lán)色；用菜花替代苯胺試劑，需沸水浴加熱幾分鐘，才呈藍(lán)色；用菜花替代雞血為實驗材料，需要對材料的細(xì)胞壁進行處理。調(diào)節(jié)雞血為實驗材料，需要對材料的細(xì)胞壁進行處理。調(diào)節(jié)雞血為實驗材料，需要對材料的細(xì)胞壁進行處理。調(diào)節(jié)雞血為實驗材料，需要對材料的細(xì)胞壁進行處理。調(diào)節(jié)NaClNaClNaClNaCl溶液濃度改變不同物質(zhì)在其中的溶解度，加入木瓜蛋溶液濃度改變不同物質(zhì)在其中的溶解度，加入木瓜蛋溶液濃度改變不同物質(zhì)在其中的溶解度，加入木瓜蛋溶液濃度改變不同物質(zhì)在其中的溶解度，加入木瓜蛋白酶分解蛋白質(zhì)都可以去除部分雜質(zhì)，故白酶分解蛋白質(zhì)都可以去除部分雜質(zhì)，故白酶分解蛋白質(zhì)都可以去除部分雜質(zhì)，故白酶分解蛋白質(zhì)都可以去除部分雜質(zhì)，故B B B B正確。正確。正確。正確。B30