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1、玻璃器皿、培養(yǎng)基的滅菌技術 概念消毒：殺死物體上病原微生物的方法,并不一定 能殺死含芽胞的細菌或非病原微生物。滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。 無菌：不存在活菌的意思。 防腐：防止或抑制體外細菌生長繁殖的方法。 一、消毒與滅菌的方法物理的方法：加熱、過濾、輻射化學的方法：用化學試劑抑制或殺滅微生物。主要破壞細菌代謝機能。如重金屬離子，磺胺類藥物及抗生素等。 物理方法干熱滅菌又稱熱空氣滅菌，是利用高溫使微生物細胞內的蛋白質凝固變性的原理。濕熱滅菌法是指用飽和水蒸氣、沸水或流通蒸汽進行滅菌的方法，由于蒸汽潛熱大，穿透力強，容易使蛋白質變性或凝固，所以該法的滅菌效率比干熱滅菌法高。 物理方法輻射：
2、利用輻射進行滅菌消毒，可以避免高溫滅菌或化學藥劑消毒的缺點，所以應用越來越廣。 物理方法 1）紫外線：波長200300m的紫外線具有殺菌作用。 殺菌機理：干擾DNA的復制與轉錄。 特點：穿透力不大。距照射物1.2m為宜。 應用范圍：空氣消毒。例如，手術室、傳染病房、細菌實驗室不耐熱物品的表面消毒。 注意事項：對眼睛和皮膚有刺激作用。 物理方法 2）電離輻射：包括高速電子、X射線和 射線殺菌機理：產生游離基,破壞DNA。 應用范圍：一次性醫(yī)用塑料制品的消毒食品的消毒不破壞其營養(yǎng)成分 物理方法過濾：采用機械方法，設計一種濾孔比細菌還小的篩子，做成各種過濾器。通過過濾，只讓液體培養(yǎng)基從篩子中流下，而
3、把各種微生物菌體留在篩子上面，從而達到除菌的目的。這種滅菌方法適用于一些對熱不穩(wěn)定的體積小的液體培養(yǎng)基的滅菌以及氣體的滅菌。它的最大優(yōu)點是不破壞培養(yǎng)基中各種物質的化學成分。但是比細菌還小的病毒仍然能留在液體培養(yǎng)基內，有時會給實驗帶來一定的麻煩。 過濾注意事項：1、壓力適當； 2、無菌條件下進行； 3、防止?jié)B透現(xiàn)象。 一般化學藥劑無法殺死所有的微生物，而只能殺死其中的病原微生物，所以是起消毒劑的作用，而不是滅菌劑。化學方法 各種消毒劑的種類類別作用機制常用種類酚類蛋白變性，細胞膜損傷石炭酸醇類蛋白變性乙醇氧化劑氧化、蛋白沉淀高錳酸甲重金屬鹽氧化、蛋白酶變性紅汞、硫柳汞氧化劑氧化、蛋白沉淀過氧乙酸
4、、碘酒表面活性劑蛋白變性，細胞膜損傷新潔而滅染料干擾氧化、抑制繁殖龍膽紫 各種消毒劑的應用種類使用濃度用途石炭酸3%5%地面、器具表面、皮膚消毒乙醇3%5%皮膚、體溫計消毒高錳酸甲3%5%皮膚、尿道、蔬菜、水果消毒紅汞3%5%皮膚、粘膜、小創(chuàng)傷消毒硫柳汞3%5%皮膚消毒、手術部位消毒過氧乙酸3%5%塑料、玻璃器材消毒碘酒3%5%皮膚消毒新潔而滅3%5%手術洗手、浸泡手術器械 干熱滅菌l適用范圍： 用于高溫下不損壞、不變質、不蒸發(fā)物品的滅菌；用于不耐濕熱的器械的滅菌；用于蒸汽或氣體不能穿透物品的滅菌，如玻璃、油脂、粉劑（遇水結塊）和金屬等制品的消毒。 干熱滅菌l干熱滅菌法又分為燒灼和焚燒、干烤、
5、紅外線、微波等幾種方法。 干熱滅菌l（1）燒灼和焚燒：燒灼是直接用火焰殺死微生物，適用于實驗室的金屬器械（鑷、剪、接種環(huán)、接種針等）、玻璃試管口和瓶口等不怕熱的器材滅菌。l焚燒是徹底的消毒方法，但只限于處理廢棄的污染物品，如無用的衣物、紙張、垃圾等。焚燒應在專用的焚燒爐內進行。 干熱滅菌l（2）干烤：在干烤箱內進行，加熱至160170維持2小時，可殺滅包括芽胞在內的所有微生物。l此方法適用于耐高溫的玻璃器皿、瓷器、玻質注射器等。 干熱滅菌l（3）紅外線：是波長為770nm1000m的電磁波，以1m10m波長的熱效應最強。亦被認為一種干熱滅菌。紅外線由紅外線燈泡產生,不需要經空氣傳導，所以加熱速
6、度快，但熱效應只能在照射到的表面產生，因此不能使一個物體的前后左右均勻加熱。紅外線的殺菌作用與干熱相似，利用紅外線烤箱滅菌的所需溫度和時間亦同于干烤。多用于醫(yī)療器械的滅菌。 干熱滅菌l紅外線滅菌注意事項：l人受紅外線照射較長會感覺眼睛疲勞及頭疼；長期照射會造成眼內損傷。因此，工作人至少應戴能防紅外線傷害的防護鏡。 干熱滅菌l（4）微波：波長為1mm1000mm的電磁波統(tǒng)稱為微波，可穿透玻璃、塑料薄膜與陶瓷等物質，但不能穿透金屬表面。微波能使介質內雜亂無章的極性分子在微波場的作用下，按波的頻率往返運動，互相沖撞和磨擦而產生熱，介質的溫度可隨之升高，因而在較低的溫度下能起到消毒作用。 干熱滅菌l一
7、般認為其殺菌機理除熱效應以外，還有電磁共振效應，磁場致力效應等的作用。消毒中常用的微波有2450MHZ與915MHZ兩種。微波照射多用于食品加工。在醫(yī)院中可用于檢驗室用品、非金屬器械、無菌病室的食品食具、藥杯及其它用品的消毒。 干熱滅菌l微波長期照射可引起眼睛的晶狀混濁、睪丸損傷和神經功能紊亂等全身性反應，因此必須關好門后再開始操作。 干熱滅菌l干熱滅菌的注意事項：l待滅菌的物品在干熱滅菌前應先洗凈，防止造成滅菌失敗或污物炭化；l玻璃器皿滅菌前應洗凈并干燥；l滅菌時勿與烤箱底部及四壁接觸，滅菌后要待溫度降到40以下再開箱，以防止爆裂； l物品包裝不能過大，不超過10厘米10厘米20厘米，物品不
8、能超過烤箱的高度的2/3，物品間應留有充分的空間（可放入一只手）；油劑、粉劑的厚度不得超過0.6厘米；凡士林布條厚度不得超過1.3厘米。l溫度高于170時，有機物會炭化，故有機物品滅菌時，溫度不可過高。 干熱滅菌l電熱恒溫干燥箱（俗稱“烤箱”）的使用l 1.裝料：將帶滅菌的物品包扎好放入電熱恒溫干燥箱。l注意物品不能擺得太擠，以免影響熱空氣流通。用紙包扎的物品不能接觸內壁。l 2.升溫：接通電源，打開排氣孔，排除箱內濕空氣；旋動恒溫調節(jié)器，讓溫度逐漸上升。當溫度升至100攝氏度，關閉排氣孔。 干熱滅菌l 3.恒溫：當溫度升到160攝氏度時，利用恒溫調節(jié)器的自動控制，保持溫度1h。滅菌物品用紙包
9、扎或帶有棉塞時溫度不能超過170攝氏度。l 4.降溫：達到規(guī)定的時間后，切斷電源，自然降溫。l 5.取料：待箱內溫度降到60攝氏度，打開箱門，取出滅菌物品。箱內溫度未降到70攝氏度，切勿打開箱門，以免驟然降溫導致玻璃器皿破裂。 濕熱滅菌 濕熱滅菌l適用范圍： 用于耐高溫、耐高濕的醫(yī)療器械和物品的滅菌。 濕熱滅菌l濕熱滅菌法分為煮沸法、流通蒸汽滅菌法、間隙滅菌法、巴氏消毒法、高壓蒸汽滅菌法等幾種滅菌方法。 濕熱滅菌l（1）煮沸法：煮沸100，5分鐘，能殺死一般細菌的繁殖體。許多芽胞需經煮潮56小時才死亡。水中加入2%碳酸鈉，可提高其沸點達105。既可促進芽胞的殺滅，又能防止金屬器皿生銹。煮沸法可
10、用于飲水和一般器械（刀剪、注射器等）的消毒。 濕熱滅菌l（2）流通蒸汽滅菌法：利用100左右的水蒸汽進行消毒，一般采用流通蒸汽滅菌器（其原理相當于我國的蒸籠），加熱15到39分鐘，可殺死細菌繁殖體。消毒物品的包裝不宜過大、過緊，這樣以利于蒸汽穿透。l凡不耐高溫的物質，如糖類、明膠、血清、牛乳及雞蛋等可用此方法滅菌。 濕熱滅菌l（3）間歇滅菌法：又稱分段滅菌法。適用于不耐熱培養(yǎng)基的滅菌。l方法是：將待滅菌的培養(yǎng)基在100下蒸煮30-60min，以殺死其中所有微生物的營養(yǎng)細胞，然后置室溫或20-30下保溫過夜，誘導殘留的芽胞萌發(fā)，第二天再以同法蒸煮和保溫過夜，如此連續(xù)重復3天，即可在較低溫度下達到
11、徹底滅菌的效果。例如，培養(yǎng)硫細菌的含硫培養(yǎng)基就是應用間歇滅菌法滅菌，因為其中的元素硫經常規(guī)的高壓滅菌(12l )后會發(fā)生熔化，而在100的溫度下則呈結晶狀。 l間歇滅菌法的注意事項：l使用間歇法滅菌時必須在滅菌物里外都達到100后開始計算滅菌時間。l間歇法滅菌時應在每次加熱后，迅速降溫，然后在室溫放置24h，再第二次加熱。如果降溫慢，往往使未殺死的雜菌大量滋長，反面導致滅菌物變質，特別是包裝過大時，靠近中心部分更易發(fā)生這種情況。 濕熱滅菌l（4）巴氏消毒法（Pasteurization）：有些食物會因高溫破壞營養(yǎng)成分或影響質量，如牛奶、醬油、啤酒等，所以只能用較低的溫度來殺死其中的病原微生物，
12、這樣既保持食物的營養(yǎng)和風味，又進行了消毒，保證了食品衛(wèi)生。該法一般在62C，30分鐘既可達到消毒目的。此法為法國微生物學家巴斯德首創(chuàng)，故名為巴氏消毒法。 l巴氏消毒法是一種低溫消毒法，具體的處理溫度和時間各有不同，一般在60-85下處理15-30min。具體的方法可分兩類，第一類是較老式的，稱為低溫維持法，例如在63下保持30min可進行牛奶消毒；另一類是較新式的，稱為高溫快速法，用于牛奶消毒時只要在85下保持5min即可。但是巴氏消毒法不能殺滅引起Q熱的病原體-伯氏考克斯氏體(一種立克次氏體)。 濕熱滅菌l（5）高壓蒸汽滅菌法：壓力蒸汽滅菌是在專門的壓力蒸汽滅菌器中進行的，是熱力滅菌中使用最
13、普遍、效果最可靠的一種方法。其優(yōu)點是穿透力強，滅菌效果可靠，能殺滅所有微生物。 濕熱滅菌l壓力蒸汽滅菌器分類：l根據(jù)排放冷空氣的方式和程度不同，分為下排氣壓力蒸汽滅菌器和預真空壓力蒸汽滅菌器。 干熱和濕熱兩者比較l在同樣的溫度下，溫熱的殺菌效果比干熱好，其原因有：l蛋白質凝固所需的溫度與其含水量有關，含水量愈大，發(fā)生凝固所需的溫度愈低。濕熱滅菌的菌體蛋白質吸收水分，因較同一溫度的干熱空氣中易于凝固。 兩者比較l溫熱滅菌過程中蒸氣放出大量潛熱，加速提高濕度。因而濕熱滅菌比干熱所要溫度低，如在同一溫度下，則濕熱滅菌所需時間比干熱短。濕熱的穿透力比干熱大，使深部也能達到滅菌溫度，故濕熱比干熱收效好。
14、 高壓蒸汽滅菌器的基本構造 1.外鍋 或稱“套層”，供貯存蒸汽用，連有用電加熱的蒸汽發(fā)生器，并有水位玻管以標志盛水量。外鍋的外側一般包有石棉或玻璃棉絕緣層以防止散熱。如直接使用由鍋爐接入的高壓蒸汽，則外鍋在使用時充滿蒸汽，作為內鍋保溫。 2.內鍋 或稱滅菌室，是放置滅菌物的空間可配制鐵蓖架以分放滅菌物。 l 3.壓力表 內外鍋各裝一只，老式的壓力表上標明三種單位：公斤壓力單位(kg/cm2)，英制壓力單位(1b/in2)和溫度單位( )，便于滅菌時參照?，F(xiàn)在的壓力表用MPa表示。l 4.溫度計 可分為兩種，一種是直接插入式的水銀溫度計，裝在密閉的銅管內，焊插在內鍋中另一種是感應式儀表溫度計，其
15、感應部分安裝在內鍋的排氣管內，儀表安裝于鍋外頂部便于觀察。 l 5.排氣閥 一般外鍋、內鍋各一個，用于排除空氣。新型的滅菌器多在排氣閥外裝有汽液分離器(或稱疏水閥)內有由膨脹盒控制的活塞。利用空氣、冷凝水與蒸汽之間的溫差控制開關，在滅菌過程中，可不斷地自動排出空氣和冷凝水。l 6.安全閥 或稱保險閥利用可調彈簧控制活塞，超過額定壓力即自動放氣減壓。通常調在額定壓力之下，略高于使用壓力。安全閥只供超壓時安全報警之用，不可在保溫時用作自動減壓裝置。 l 7.熱源 除直接引入鍋爐蒸汽滅菌外，都具有加熱裝置。近年來的產品以電熱為主，即底部裝有調控電熱管，使用比較方便。有些產品無電熱裝置，則附有打氣煤油
16、爐等。手提式滅菌器也可用煤炭爐作為熱源。 第二節(jié) 實驗內容 一、實驗目的l了解濕熱滅菌的原理，學習并掌握蒸汽滅菌的操作方法與注意事項。 二、實驗原理l高壓蒸汽滅菌是微生物學實驗、發(fā)酵工業(yè)生產、以及外科手術器械等方面常用的一種滅菌方法，屬于濕熱滅菌。l一般培養(yǎng)基、玻璃器皿、無菌水、無菌緩沖液、金屬用具、接種室的實驗服及傳染性標本都可采用此法滅菌。 l將待滅菌的物體放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內。把鍋內的水加熱煮沸，并把其中原有的冷空氣徹底驅盡后將鍋密閉。再繼續(xù)加熱就會使鍋內的蒸汽壓逐漸上升，從而溫度也隨之上升到100以上。為達到良好的滅菌效果，一般要求溫度應達到121(壓力為0.1MPa)，
17、時間維持15-30min。也可采用在較低的溫度(115，即0.075MPa)下維持35min的方法。 l高壓蒸汽滅菌是依據(jù)水的沸點隨水蒸汽壓的增加而上升，加壓是為了提高水蒸汽的溫度。 高壓蒸汽滅菌時常用的滅菌壓力、溫度與時間蒸 汽 壓 力蒸汽溫度(C)滅菌時間（min）MPa Kgf/cm2 Lbf/in20.055 0.56 8.00 112.6 300.069 0.70 10.00 115.2 200.103 1.00 15.00 121.0 20 l高壓蒸汽滅菌器是一個能耐壓、同時可以密閉的金屬鍋，有立式、臥式、手提式三種。熱源可以用蒸汽、煤氣或電源。滅菌器上裝有表示鍋內溫度和壓力的溫度
18、計、壓力表。滅菌鍋還有排氣口、安全活塞。如壓力超過一定限度，活塞的閥門便自動打開，放出過多的蒸汽。 l高壓蒸汽滅菌技術關鍵是在壓力上升之前需將鍋內冷空氣排盡。若鍋內未排除的冷空氣滯留在鍋中，壓力表雖指示0.1MPa，但鍋內溫度實際只有100攝氏度，高壓結束會造成滅菌不徹底。 空氣排除程度與溫度關系壓力表讀數(shù)MPa滅菌器內溫度/C未排除空 氣排 除1/3空氣排 除1/2空氣排 除2/3空氣完全排除空氣0.034 72 90 94 100 1090.069 90 100 105 109 1150.103 100 109 112 115 1210.138 109 115 118 121 1260.1
19、72 115 121 124 126 1300.206 121 126 128 130 135 影響滅菌的因素l a.不同的微生物或同種微生物的不同菌齡對高溫的敏感性不同。多數(shù)微生物的營養(yǎng)體和病毒在5065C，10分鐘就會被殺死；但各種孢子、特別是芽孢最能抗熱，其中抗熱性最強的是嗜熱脂肪芽孢桿菌，要在121C，12分鐘才被殺死。對同種微生物來講，幼齡菌比老齡菌對熱更敏感； 影響滅菌的因素b.微生物的數(shù)量多少顯然會影響滅菌的效果，數(shù)量越多，熱死時間越長；c.培養(yǎng)基的成分與組成也會影響滅菌效果。一般地講，蛋白質、糖或脂肪存在，則提高抗熱性，pH在7附近，抗熱性最強，偏向兩極，則抗熱能力下降，而不同
20、的鹽類可能對滅菌產生不同的影響；固體培養(yǎng)基要比液體培養(yǎng)基滅菌時間長。 l滅菌時的過高溫度常對培養(yǎng)基造成的主要不良影響如下：l（1）出現(xiàn)混濁、沉淀(天然培養(yǎng)基成分加熱可以沉淀出大分子多聚合物；培養(yǎng)基中Ca、Mg、Fe、Zn等陽性離子與培養(yǎng)基中的可溶性磷酸鹽共熱沉淀)。 l（2）營養(yǎng)成分破壞或改變（酸度較高時淀粉、蔗糖、乳糖或瓊脂滅菌過程易水解；pH7.5、0.1MPa滅菌20min，葡萄糖破壞20%、麥芽糖破壞50%，若培養(yǎng)基中有磷酸鹽共存，葡萄糖轉變成酮糖類物質，培養(yǎng)液由淡黃色變?yōu)榧t褐色，破壞更為嚴重）。 l（3）pH7.2時培養(yǎng)基中的葡萄糖、蛋白胨、磷酸鹽在0.1MPa滅菌15min以上可產
21、生對微生物生長的某種抑制物。l（4）高壓蒸汽滅菌后培養(yǎng)基pH下降0.1-0.2。 l（5）高壓蒸汽滅菌過程會增加冷凝水，降低培養(yǎng)基成分濃度。對于前三種不良影響，可采用低壓滅菌（如在0.056MPa、30min滅菌葡萄糖溶液），或將培養(yǎng)基幾種成分分別滅菌，臨用前無菌混合（如磷酸鹽與Ca、Mg、Zn、Cu等陽性離子溶液）的方法，特殊情況時可采用間歇滅菌、過濾除菌（如維生素溶液）。工業(yè)發(fā)酵生產中常采用連續(xù)加壓滅菌法（135-140 C ，5-15秒）和連續(xù)蒸煮法。 三、實驗材料l高壓滅菌器l待滅菌的培養(yǎng)基、無菌水、已包好的培養(yǎng)皿、移液管、玻璃涂抹棒等及待滅菌空試管、錐形瓶等玻璃器皿。 四、實驗內容l
22、（一）滅菌操作l 1.向鍋內加水l打開滅菌鍋蓋，向鍋內加適量水。水量不足，滅菌鍋易蒸干。l 2.放入待滅菌物品l將帶滅菌物品放入滅菌桶內，物品不要放得太緊和緊靠鍋壁，以免影響蒸汽流通和冷凝水順壁流入滅菌物品。 l 3.蓋好鍋蓋l將蓋上的軟管插入滅菌桶的槽內，有利于罐內冷空氣自下而上排出，然后加蓋，上下螺栓口對齊，采用對角方式均勻旋緊螺栓，使鍋密閉。 l 4.排放鍋內冷空氣及升溫滅菌l打開放氣閥，加熱，自鍋內開始產生蒸汽后3min再關緊放氣閥（或噴出氣體不形成水霧），此時蒸汽已將鍋內的冷空氣由排氣孔排盡，控制熱源，維持所需壓力和溫度，并開始計時，一般培養(yǎng)基控制在0.1MPa滅菌20min；含糖等
23、成分培養(yǎng)基控制在0.056MPa滅菌30min或0.07MPa滅菌20min，然后關閉熱源，停止加熱，壓力隨之逐漸降低。 5.滅菌完畢降溫及后處理l待壓力降至0時，慢慢打開放氣閥，開蓋，立即取出滅菌物品，但在壓力未完全降至0處前，不能打開鍋蓋，以免培養(yǎng)基沸騰將棉塞沖出；也不可用冷水沖淋滅菌鍋迫使溫度迅速下降。所滅物品開蓋后立即取出，以免凝結在鍋蓋和容器上的水滴弄濕包裝紙或落到被滅菌物品上，增加染菌率。斜面培養(yǎng)基自鍋內取出后要趁熱擺成斜面，滅菌后的空培養(yǎng)皿、試管、移液管等需烘干或晾干。若連續(xù)使用高壓鍋，每次需補足水分，滅菌完畢，除去鍋內剩余水分，保持滅菌鍋干燥。 6、注意事項l 6.1滅菌前 清
24、洗：將物品徹底清洗干凈，物品洗滌后，應干燥并及時包裝。包裝：包裝材料應允許物品內部空氣的排出和蒸汽的透入。 物品捆扎不宜過緊，外用化學指示膠帶貼封，滅菌包每大包內和難消毒部位的包內放置化學指示物。 裝載 ：下排氣滅菌器的裝載量不得超過柜室內容量的80%；預真空滅菌器的裝載量不得超過柜室容積90%。應盡量將同類物品放在一起滅菌，若必須將不同類物品裝放在一起，則以最難達到滅菌物品所需的溫度和時間為準。物品裝放時，上下左右相互間均應間隔一定距離以利蒸汽置換空氣。 金屬包應平放，盤、碟、碗應處于豎立的位置；纖維織物應使折疊的方向與水平面成垂直狀態(tài)；玻璃瓶等應開口向下或側放以利蒸汽進入和空氣排出。難于滅
25、菌的大包放在上層，較易滅菌的小包放在下層；金屬物品放在下層，織物包放在上層，物品裝放不能貼靠門和四壁，以防吸入較多的冷凝水。 l 6.2滅菌后 檢查包裝的完整性，若有破損不可作為無菌包使用。濕包和有明顯水漬的包不作為無菌包使用。開包使用前應檢查包內指示卡是否達到已滅菌的色澤或狀態(tài)，未達到或有疑點者，不作為無菌包使用。 l滅菌包落地，或誤放不潔之處，或占有水液，均應視為受到污染，不可作為無菌包使用。l運送無菌物品的工具應每日清洗并保持清潔、干燥；當懷疑或發(fā)現(xiàn)有污染可能時，應立即進行清洗消毒；物品順序擺放，并加防塵罩，以防再污染。l已滅菌的物品，不得與未滅菌的物品混放。 每批滅菌處理完成后，應按流
26、水號登冊，記錄滅菌物品包的種類、數(shù)量、滅菌溫度、作用時間和滅菌日期與操作者等等。滅菌物品應放于離地高20-25厘米，離天花板50厘米，離墻遠于5厘米處的載物架上，順序排放，分類放置，并加蓋防塵罩。對于棉布包裝材料和開啟式容器，一般建議，溫度25以下10-14天，潮濕多雨季節(jié)應縮短天數(shù)。 （二）無菌試驗l可抽取少數(shù)滅過菌的培養(yǎng)基置37攝氏度恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，若無菌生長，即視為滅菌徹底，可保存?zhèn)溆谩?五、實驗報告l說明高壓蒸汽滅菌原理、適用范圍。用簡練方法表示操作過程及操作關鍵。 六、思考題l 1.高壓蒸汽滅菌的關鍵為什么是高溫而不時高壓？高壓蒸汽滅菌前為什么要將滅菌鍋內的冷空氣排盡？滅菌時為什么人不能離開工作現(xiàn)場？滅菌完畢后什么情況下才可以打開鍋蓋取出滅菌物品？ l 2.染菌或接種有微生物的培養(yǎng)基或培養(yǎng)皿為什么不能直接洗滌而需先經過高壓蒸汽滅菌？培養(yǎng)皿或錐形瓶內含固體培養(yǎng)基滅菌后如何處理？ l 3.對含糖（如葡萄糖或乳糖等）培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌時，應采用多大壓力，多長時間滅菌為宜？l 4.對血清、噬菌體濃縮液、氨基酸溶液、維生素溶液能否進行高壓蒸汽滅菌？應采用何種方法除菌為宜？ 謝謝！
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