（浙江專用）2020版高考生物大一輪復(fù)習(xí) 第十一部分 現(xiàn)代生物科技專題 36 克隆技術(shù)課件.ppt

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1、第36講克隆技術(shù),教材梳理,題型探究,真題演練,植物的克隆 1.植物細(xì)胞的全能性和植物組織培養(yǎng) (1)全能性:植物體的每個(gè)生活細(xì)胞都具有上的全能性,因而都具有發(fā)育成的潛能。 (2)植物細(xì)胞全能性表達(dá)的條件 離體、。 一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如水、無(wú)機(jī)鹽、蔗糖、維生素等。 。 (3)植物組織培養(yǎng)程序 配制培養(yǎng)基:配制含有適當(dāng)和 的半固體培養(yǎng)基 切取的組織塊,遺傳,完整植株,無(wú)菌,植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,消毒,教材梳理,題型探究,真題演練,獲得愈傷組織:由相對(duì)沒(méi)有分化的活的薄壁細(xì)胞團(tuán)組成的新生組織,教材梳理,題型探究,真題演練,2.細(xì)胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng) (1)方法:主要是通過(guò)平衡的配比進(jìn)行

2、調(diào)控,以實(shí)現(xiàn)器官的發(fā)生和形態(tài)建成。 適量的和配比,可誘導(dǎo)芽的分化。 適量的及適當(dāng)減除其他某些激素,可誘導(dǎo)生根。 (2)意義 可以在實(shí)驗(yàn)室、試管等器皿中進(jìn)行植物過(guò)程和自受精卵進(jìn)行的植物過(guò)程,以及調(diào)節(jié)控制這些過(guò)程的環(huán)境因素、遺傳基礎(chǔ)和分子及生理生化機(jī)理研究。 可以進(jìn)行的操作,完成與植物 有關(guān)的重要基因或影響因素的研究。 可以方便地通過(guò)培育植物新品種。,植物激素,生長(zhǎng)素,細(xì)胞分裂素,吲哚乙酸,受精,胚胎發(fā)育,遺傳工程,生長(zhǎng)發(fā)育,實(shí)驗(yàn)手段,教材梳理,題型探究,真題演練,3.原生質(zhì)體培養(yǎng)與植物細(xì)胞工程 (1)原生質(zhì)體培養(yǎng),原生質(zhì)體吸水脹破,甘露醇,果膠酶,教材梳理,題型探究,真題演練,(2)植物細(xì)胞工程

3、的操作過(guò)程,教材梳理,題型探究,真題演練,4.多途徑的植物克隆實(shí)踐 (1)培育抗逆、高產(chǎn)及優(yōu)質(zhì)的。 (2)通過(guò)培養(yǎng)特定細(xì)胞系,實(shí)現(xiàn)能產(chǎn)生重要的細(xì)胞的大量克隆和產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn)。 (3)育種。 (4)誘發(fā)、篩選突變體。,轉(zhuǎn)基因植株,次生代謝產(chǎn)物,單倍體,教材梳理,題型探究,真題演練,(1)圖中基因工程的載體是,目的基因是。甲乙過(guò)程需要的工具酶是。 (2)基因工程的核心是。 A.乙的構(gòu)建B.丙的形成 C.丁的篩選D.戊的培育,考向一植物細(xì)胞全能性和組織培養(yǎng)方法 【典例1-1】 利用生物工程培育抗蟲(chóng)植物的過(guò)程如圖所示。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。,教材梳理,題型探究,真題演練,(3)丁戊過(guò)程說(shuō)明植物細(xì)胞具有

4、。在這個(gè)過(guò)程中,丁細(xì)胞在特定的刺激下發(fā)生成為具有分裂能力的細(xì)胞,并且不斷地分裂增殖形成愈傷組織。通過(guò)調(diào)節(jié)營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的配比,從愈傷組織誘導(dǎo)出,并由此再生出新植株。 (4)丁戊過(guò)程中形成的愈傷組織,可通過(guò)液體懸浮培養(yǎng)分散成單細(xì)胞。下列特征中,這種細(xì)胞不具有的是。 A.細(xì)胞質(zhì)豐富B.液泡大 C.可發(fā)育成胚狀體D.細(xì)胞核大,教材梳理,題型探究,真題演練,答案:(1)Ti質(zhì)粒(甲)抗蟲(chóng)基因限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶(2)A(3)全能性脫分化芽和根(4)B 解析:(1)圖示為轉(zhuǎn)基因植物的培育過(guò)程,在圖示中,基因工程的載體是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒,目的基因是抗蟲(chóng)基因。甲到乙表示形成重組DNA分子的過(guò)程,

5、需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。(2)基因工程的核心是構(gòu)建重組DNA分子,分析圖示,乙表示重組DNA分子的構(gòu)建。(3)丁到戊表示植物細(xì)胞發(fā)育成完整植株的過(guò)程,體現(xiàn)了植物細(xì)胞具有全能性。由植物細(xì)胞發(fā)育成完整植株,一般會(huì)經(jīng)歷脫分化形成愈傷組織,然后愈傷組織再分化形成芽和根,最終發(fā)育成植株的過(guò)程。(4)愈傷組織細(xì)胞具有細(xì)胞核大,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富,液泡小等特征,并保留發(fā)育成胚狀體的能力。,教材梳理,題型探究,真題演練,歸類(lèi)提升植物克隆有關(guān)的幾種技術(shù)的比較,教材梳理,題型探究,真題演練,教材梳理,題型探究,真題演練,(1)據(jù)此煙草葉片原生質(zhì)體分離和培養(yǎng)的流程圖,下列分析錯(cuò)誤的是() A.可用紅墨水染

6、色的方法檢測(cè)原生質(zhì)體有無(wú)活性 B.過(guò)程需在一定濃度的甘露醇溶液中用纖維素酶和果膠酶處理 C.過(guò)程要求生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例合適 D.上述過(guò)程中可發(fā)生染色體畸變、基因突變和基因重組,考向二原生質(zhì)體培養(yǎng)與植物細(xì)胞工程 【典例1-2】 下面是煙草葉片原生質(zhì)體分離和培養(yǎng)的流程圖,請(qǐng)回答下列問(wèn)題。,教材梳理,題型探究,真題演練,(2)將原生質(zhì)體制成懸浮液培養(yǎng)分散的單細(xì)胞,這種單細(xì)胞具有細(xì)胞的特性,在適宜的培養(yǎng)基中,可以發(fā)育成,繼續(xù)培養(yǎng)發(fā)育可以形成植株。 (3)若要用顯微鏡觀察并計(jì)數(shù)懸浮液培養(yǎng)分散的單細(xì)胞,則需要把懸浮液滴加在上,假如還要判定原生質(zhì)體是否已形成細(xì)胞壁,可用方法鑒別。 (4)欲通過(guò)原生質(zhì)體

7、培養(yǎng)得到愈傷組織,從培養(yǎng)基的成分考慮,配制培養(yǎng)基時(shí)需要注意的主要方面有的適當(dāng)配比和的適當(dāng)配比。,教材梳理,題型探究,真題演練,(5)下列有關(guān)高等植物原生質(zhì)體制備和培養(yǎng)的敘述,正確的是() A.由于植物細(xì)胞壁的存在,植物的組織培養(yǎng)和克隆有一定的難度 B.加入0.6 mol/L甘露醇的目的是保護(hù)纖維素酶和果膠酶 C.從不同植物組織分離得到的原生質(zhì)體亞顯微結(jié)構(gòu)相同 D.原生質(zhì)體是除細(xì)胞膜以外的細(xì)胞中有代謝活性的原生質(zhì)部分,答案:(1)D(2)胚性胚狀體(3)血細(xì)胞計(jì)數(shù)板質(zhì)壁分離(4)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑(5)A,教材梳理,題型探究,真題演練,解析:(1)活細(xì)胞的細(xì)胞膜有選擇透性,紅墨水不能進(jìn)入細(xì)胞

8、內(nèi);死細(xì)胞的細(xì)胞膜失去選擇透性,紅墨水可以進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),所以可用紅墨水染色的方法檢測(cè)原生質(zhì)體有無(wú)活性,A項(xiàng)正確。表示獲得原生質(zhì)體,需要在較高濃度的甘露醇溶液中,用纖維素酶和果膠酶混合液處理,B項(xiàng)正確。獲得愈傷組織的過(guò)程需要生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例合適,C項(xiàng)正確。基因重組發(fā)生在有性生殖過(guò)程中,圖示過(guò)程中不會(huì)發(fā)生基因重組,D項(xiàng)錯(cuò)誤。(2)將原生質(zhì)體制成懸浮液培養(yǎng)分散的單細(xì)胞,這種單細(xì)胞具有胚性細(xì)胞的特性,液泡小而細(xì)胞核大,在適宜的培養(yǎng)基中可以發(fā)育成胚狀體,繼續(xù)培養(yǎng)發(fā)育可以形成植株。(3)可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。要判定原生質(zhì)體是否已形成細(xì)胞壁,可用質(zhì)壁分離的方法鑒別。,教材梳理,題型探究,真題

9、演練,(4)欲通過(guò)原生質(zhì)體培養(yǎng)得到愈傷組織,從培養(yǎng)基的成分考慮,配制培養(yǎng)基時(shí)需要注意的主要方面是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的適當(dāng)配比。(5)由于植物細(xì)胞壁的存在,使植物組織培養(yǎng)和克隆有一定的難度,A項(xiàng)正確。制備原生質(zhì)體時(shí),加入0.6 mol/L甘露醇的目的是防止原生質(zhì)體吸水脹破,B項(xiàng)錯(cuò)誤。不同植物組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能不同,故從不同植物組織分離得到的原生質(zhì)體亞顯微結(jié)構(gòu)可能不同,C項(xiàng)錯(cuò)誤。原生質(zhì)體是指植物細(xì)胞去掉細(xì)胞壁后剩下的部分,包括細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核,D項(xiàng)錯(cuò)誤。,教材梳理,題型探究,真題演練,考向三植物克隆的綜合應(yīng)用 【典例1-3】 (2018浙江寧波九校期末聯(lián)考)苦蕎富含黃酮類(lèi)化合物等

10、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),在降血糖、降血脂等方面功效顯著。查爾酮合成酶(CHS)是黃酮類(lèi)化合物合成的關(guān)鍵酶,如圖為將CHS基因?qū)肟嗍w,培育高產(chǎn)黃酮苦蕎品系示意圖。據(jù)圖回答下列問(wèn)題。,教材梳理,題型探究,真題演練,(1)基因工程的核心是。 (2)可利用、方法獲取CHS基因。 (3)過(guò)程中切開(kāi)質(zhì)粒的酶是。它能在質(zhì)粒特定的部位切割的原因是。 (4)過(guò)程分別是?？嗍w細(xì)胞能培養(yǎng)成植株的根本原因是。 (5)為培育轉(zhuǎn)基因苦蕎植物,還可將該植物幼葉消毒后,用酶混合液處理,獲得原生質(zhì)體。酶混合液中含有適宜濃度的甘露醇,其作用是。將目的基因?qū)氲皆|(zhì)體,經(jīng)培養(yǎng)形成愈傷組織,再通過(guò)得到分散的胚性細(xì)胞,發(fā)育成,生長(zhǎng)發(fā)育后獲得該轉(zhuǎn)

11、基因植株。,教材梳理,題型探究,真題演練,(6)愈傷組織繼代次數(shù)過(guò)多會(huì)喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)能力,下列原因錯(cuò)誤的是。 A.愈傷組織發(fā)生遺傳變異 B.愈傷組織不能分散成單細(xì)胞 C.愈傷組織中激素平衡發(fā)生改變 D.愈傷組織對(duì)外源激素敏感性發(fā)生改變,答案:(1)構(gòu)建重組DNA分子(2)從基因文庫(kù)中獲取化學(xué)方法合成或PCR擴(kuò)增(3)限制性核酸內(nèi)切酶能識(shí)別特定的核苷酸序列并在特定的位點(diǎn)切割DNA分子(4)脫分化、再分化植物細(xì)胞的全能性(或細(xì)胞中含有發(fā)育成完整個(gè)體所必需的全部基因)(5)纖維素酶和果膠(寫(xiě)全才可)維持滲透壓液體懸浮培養(yǎng)胚狀體(6)B,教材梳理,題型探究,真題演練,解析:(1)基因工程的核心是

12、構(gòu)建重組DNA分子。(2)CHS基因?yàn)槟康幕?其獲取方法有從基因文庫(kù)中獲取、化學(xué)方法合成或PCR擴(kuò)增。(3)質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì)是DNA,切開(kāi)質(zhì)粒的酶是限制性核酸內(nèi)切酶;由于限制性核酸內(nèi)切酶能識(shí)別特定的核苷酸序列并在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子,所以它能在質(zhì)粒特定的部位切割。(4)過(guò)程為植物的組織培養(yǎng)過(guò)程,分別是脫分化、再分化;由于植物細(xì)胞具有全能性,所以苦蕎細(xì)胞能培養(yǎng)成植株。(5)植物細(xì)胞用纖維素酶和果膠酶處理,去除細(xì)胞壁,獲得原生質(zhì)體;制備原生質(zhì)體時(shí),酶混合液中含有適宜濃度的甘露醇,有利于維持滲透壓;將目的基因?qū)氲皆|(zhì)體,經(jīng)培養(yǎng)形成愈傷組織,再通過(guò)液體懸浮培養(yǎng)得到分散的胚性細(xì)胞,發(fā)育成胚狀體

13、,生長(zhǎng)發(fā)育后獲得該轉(zhuǎn)基因植株。(6)愈傷組織繼代次數(shù)過(guò)多會(huì)發(fā)生遺傳變異、激素平衡的改變、對(duì)外源激素敏感性的改變,使得愈傷組織喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)能力。,教材梳理,題型探究,真題演練,(2018浙江4月選考,32節(jié)選)回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問(wèn)題。 (1)將含某抗蟲(chóng)基因的載體和含卡那霉素抗性基因的載體pBI121均用限制性核酸內(nèi)切酶EcoR酶切,在切口處形成。選取含抗蟲(chóng)基因的DNA片段與切割后的pBI121用DNA連接酶連接,在兩個(gè)片段相鄰處形成,獲得重組質(zhì)粒。 (2)已知用CaCl2處理細(xì)菌,會(huì)改變其某些生理狀態(tài)。取CaCl2處理過(guò)的農(nóng)桿菌與重組質(zhì)粒在離心管內(nèi)進(jìn)行混合等操作,使重組質(zhì)粒進(jìn)

14、入農(nóng)桿菌,完成實(shí)驗(yàn)。在離心管中加入液體培養(yǎng)基,置于搖床慢速培養(yǎng)一段時(shí)間,其目的是,從而表達(dá)卡那霉素抗性基因,并大量增殖。,教材梳理,題型探究,真題演練,(3)取田間不同品種水稻的幼胚,先進(jìn)行,然后接種到培養(yǎng)基中培養(yǎng),幼胚發(fā)生形成愈傷組織,并進(jìn)行繼代培養(yǎng)。用含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染愈傷組織,再培養(yǎng)愈傷組織,以便獲得抗蟲(chóng)的轉(zhuǎn)基因水稻。影響愈傷組織能否成功再生出植株的因素有:培養(yǎng)條件如光溫、培養(yǎng)基配方如植物激素配比、以及 (答出2點(diǎn)即可)。,答案:(1)粘性末端磷酸二酯鍵(2)轉(zhuǎn)化使CaCl2處理過(guò)的農(nóng)桿菌恢復(fù)細(xì)胞的正常狀態(tài)(3)消毒脫分化水稻的基因型、愈傷組織繼代的次數(shù),教材梳理,題型探究,真題演練

15、,解析:(1)構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)限制性核酸內(nèi)切酶剪切得到的是粘性末端,DNA連接酶連接兩個(gè)DNA片段之間形成的是磷酸二酯鍵。(2)目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。Ca2+處理方法增加細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性,讓其處于感受態(tài)細(xì)胞,以利于重組質(zhì)粒導(dǎo)入。故細(xì)胞要正常表達(dá)相關(guān)基因,應(yīng)讓其恢復(fù)為正常狀態(tài)。(3)因不同種類(lèi)植物或同種植物的不同基因型個(gè)體之間遺傳的差異,細(xì)胞全能性的表達(dá)程度大小不同,小麥水稻等作物在多次繼代培養(yǎng)后,會(huì)喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)能力。,教材梳理,題型探究,動(dòng)物的克隆 1.動(dòng)物細(xì)胞、組織培養(yǎng) (1)動(dòng)物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)是。 (2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)包括、及 三個(gè)階段。分散組織細(xì)

16、胞常用的方法有 和。 (3)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng) 原代培養(yǎng):從取出后立即進(jìn)行的細(xì)胞、組織培養(yǎng)的過(guò)程。 傳代培養(yǎng):將分成若干份,接種到若干份培養(yǎng)基中,使其繼續(xù)生長(zhǎng)、增殖。,動(dòng)物的細(xì)胞和組織培養(yǎng),組織塊的切取,組織細(xì)胞的分散,細(xì)胞培養(yǎng),機(jī)械消化,胰酶消化,機(jī)體,原代培養(yǎng)細(xì)胞,教材梳理,題型探究,2.細(xì)胞系和細(xì)胞株,(2)細(xì)胞株:通過(guò)一定的選擇或純化方法,從 中獲得的具有的細(xì)胞,可分為細(xì)胞株和 細(xì)胞株。,連續(xù),異體致瘤性,接觸抑制,二倍體細(xì)胞,原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系,特殊性質(zhì),連續(xù),有限,教材梳理,題型探究,3.動(dòng)物的克隆培養(yǎng)法 (1)概念:把一個(gè)單細(xì)胞從群體中分離出來(lái)培養(yǎng),使之繁衍成一個(gè)的技術(shù)叫做克隆

17、培養(yǎng)法或細(xì)胞克隆。 (2)基本要求:必須保證分離出來(lái)的細(xì)胞是而不是多個(gè),即必須肯定所建成的克隆來(lái)源于細(xì)胞。 (3)克隆對(duì)象的選擇:選擇對(duì)培養(yǎng)環(huán)境具有較大和具有較強(qiáng)的細(xì)胞。單細(xì)胞通常不如 細(xì)胞;細(xì)胞和細(xì)胞系通常不如無(wú)限細(xì)胞系、轉(zhuǎn)化或細(xì)胞。,單獨(dú),新的細(xì)胞群體,一個(gè),單個(gè),適應(yīng)范圍,獨(dú)立生存能力,群體,原代,有限,腫瘤,教材梳理,題型探究,(5)細(xì)胞克隆的最主要用途:細(xì)胞克隆的最主要用途之一,就是從 細(xì)胞系中分離出的突變細(xì)胞系。例如,研究缺少某種特殊蛋白的細(xì)胞,可以發(fā)現(xiàn)正常細(xì)胞中這種蛋白質(zhì)的功能。,血清,滋養(yǎng)細(xì)胞,普通,缺乏特殊基因,教材梳理,題型探究,4.動(dòng)物的細(xì)胞融合技術(shù)及其應(yīng)用 (1)細(xì)胞融

18、合 概念:細(xì)胞融合是指?jìng)€(gè)或個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞的現(xiàn)象。 原理:細(xì)胞膜的。 誘導(dǎo)融合的方法:聚乙二醇、病毒、電融合技術(shù)等。 應(yīng)用:基因在染色體上的;制備抗體。 (2)單克隆抗體的制備 原理:B淋巴細(xì)胞可以合成,但壽命有限,它與具有無(wú)限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合后產(chǎn)生的雜種細(xì)胞,既能產(chǎn)生特殊的,又能在組織培養(yǎng)條件下進(jìn)行。,兩,多,流動(dòng)性,滅活的仙臺(tái),定位,單克隆,抗體,抗體,無(wú)限繁殖,教材梳理,題型探究,過(guò)程,免疫,雜交瘤,腹腔,體外,教材梳理,題型探究,兩次篩選的比較,優(yōu)點(diǎn):、,可大量制備。 用途:用于治療疾病;作為特異,研究相應(yīng) 的結(jié)構(gòu)、細(xì)胞學(xué)分布及其。,雜交,雜交瘤,抗體,特異性強(qiáng),靈敏度

19、高,探針,抗原蛋白,功能,教材梳理,題型探究,5.動(dòng)物的克隆繁殖 (1)動(dòng)物難以克隆的根本原因 在動(dòng)物的個(gè)體發(fā)育過(guò)程中,分化的結(jié)果使得細(xì)胞在形態(tài)和功能上,這是由于細(xì)胞內(nèi)伴隨著它們?cè)诎l(fā)育過(guò)程中時(shí)間、空間的變化,的調(diào)控使得細(xì)胞中合成了專一的。 (2)核移植 核移植:利用一個(gè)細(xì)胞的來(lái)取代另一細(xì)胞中的細(xì)胞核,形成一個(gè)重建的“”。 動(dòng)物的克隆繁殖,高度特化,基因表達(dá),蛋白質(zhì),細(xì)胞核(供體核),合子,卵細(xì)胞,重組細(xì)胞,克隆動(dòng)物,教材梳理,題型探究,考向一動(dòng)物細(xì)胞和組織培養(yǎng) 【典例2-1】 下圖為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程示意圖,請(qǐng)回答下列問(wèn)題。,(1)容器A中放入的一般是幼齡動(dòng)物的器官或組織,原因是其細(xì)胞、易

20、于培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)先要剪碎,然后用分散細(xì)胞,制成B瓶中的細(xì)胞懸液。將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入C瓶中進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱為。,教材梳理,題型探究,(3)為保證無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境,B、C、D瓶中的培養(yǎng)基中需要添加一定量的;還需要提供O2和CO2等氣體環(huán)境,CO2的作用主要是。 (4)動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí),通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。下圖表示血清對(duì)正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 據(jù)圖可知,培養(yǎng)細(xì)胞一定需要添加血清。,教材梳理,題型探究,答案:(1)分裂能力強(qiáng)胰蛋白酶原代培養(yǎng)(2)連續(xù)細(xì)胞系異倍體(3)抗生素維持培養(yǎng)液的pH(4)正常 解析:(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是利用細(xì)胞增殖能力以獲取大量動(dòng)物細(xì)胞的技術(shù)。幼

21、齡動(dòng)物的器官或組織中的細(xì)胞分裂能力強(qiáng),適宜培養(yǎng);胰蛋白酶處理可去除細(xì)胞粘連蛋白,使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái);從機(jī)體中取出的細(xì)胞經(jīng)分散處理后立即進(jìn)行的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。(2)能夠連續(xù)培養(yǎng)下去的細(xì)胞系稱為連續(xù)細(xì)胞系,題中明確說(shuō)明這些細(xì)胞可無(wú)限增殖,故屬于連續(xù)細(xì)胞系;連續(xù)細(xì)胞系被認(rèn)為是發(fā)生了轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系,大多具有異倍體核型。(3)加入一定量的抗生素可殺滅病菌,防止對(duì)動(dòng)物細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖造成影響;CO2的作用主要是維持動(dòng)物細(xì)胞正常生長(zhǎng)所需的pH。(4)據(jù)圖中實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,是否添加血清對(duì)癌細(xì)胞的數(shù)量影響不大,但明顯影響正常細(xì)胞的數(shù)量,故正常細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程一定要添加血清。,教材梳理,題型探究,易混辨析比較動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核

22、移植與動(dòng)物細(xì)胞融合,教材梳理,題型探究,教材梳理,題型探究,考向二動(dòng)物細(xì)胞融合及單克隆抗體制備 【典例2-2】 請(qǐng)回答雜交瘤技術(shù)和單克隆抗體制備的有關(guān)問(wèn)題。 (1)雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體時(shí),利用一定的物質(zhì),如生物誘導(dǎo)劑作介導(dǎo),使經(jīng)免疫的小鼠B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,篩選出融合的細(xì)胞再進(jìn)行細(xì)胞的培養(yǎng),獲得純系細(xì)胞,同時(shí)還要進(jìn)行檢驗(yàn),以保證獲得的是所需的特定雜交瘤細(xì)胞。 (2)獲得雜交瘤細(xì)胞后,在體外培養(yǎng)時(shí)需要特別加入的天然成分是。,教材梳理,題型探究,(3)有關(guān)雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)的敘述,正確的是。 A.用固體培養(yǎng)基培養(yǎng) B.用滋養(yǎng)層細(xì)胞支持生長(zhǎng) C.能進(jìn)行傳代培養(yǎng) D.需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行研磨破碎

23、獲得產(chǎn)物 (4)現(xiàn)在欲利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)單克隆抗體,科研小組將與抗體形成有關(guān)的關(guān)鍵基因通過(guò)噬菌體導(dǎo)入到受體細(xì)胞,該技術(shù)的核心步驟是,噬菌體是這些關(guān)鍵基因的。,答案:(1)滅活的(仙臺(tái))病毒克隆化抗體(2)動(dòng)物血清(3)C(4)構(gòu)建重組DNA分子載體,教材梳理,題型探究,解析:(1)雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體時(shí),利用一定的物質(zhì),如生物誘導(dǎo)劑滅活的(仙臺(tái))病毒作介導(dǎo),使經(jīng)免疫的小鼠B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,篩選出融合的細(xì)胞再進(jìn)行細(xì)胞的克隆化培養(yǎng),獲得純系細(xì)胞,同時(shí)還要進(jìn)行抗體檢驗(yàn),以保證獲得的是所需的特定雜交瘤細(xì)胞。(2)獲得雜交瘤細(xì)胞后,在體外培養(yǎng)時(shí)需要特別加入的天然成分是動(dòng)物血清。(3)雜交

24、瘤細(xì)胞體外用液體培養(yǎng)基培養(yǎng),A項(xiàng)錯(cuò)誤;用滋養(yǎng)細(xì)胞支持生長(zhǎng),不是用滋養(yǎng)層細(xì)胞支持生長(zhǎng),B項(xiàng)錯(cuò)誤;雜交瘤細(xì)胞能進(jìn)行傳代培養(yǎng),C項(xiàng)正確;抗體為分泌蛋白,不需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行研磨破碎獲得產(chǎn)物,D項(xiàng)錯(cuò)誤。(4)現(xiàn)在欲利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)單克隆抗體,科研小組將與抗體形成有關(guān)的關(guān)鍵基因通過(guò)噬菌體導(dǎo)入受體細(xì)胞,該技術(shù)的核心步驟是形成重組DNA分子,噬菌體是這些關(guān)鍵基因的載體。,教材梳理,題型探究,易錯(cuò)提醒(1)細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是細(xì)胞核融合成一個(gè)核。 (2)雜交瘤細(xì)胞的特性是既能無(wú)限增殖,又能產(chǎn)生大量特異抗體。 (3)獲取單克隆抗體的兩個(gè)場(chǎng)所:若在培養(yǎng)基中進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng),則從培養(yǎng)液中提取;若在小鼠或其他動(dòng)物腹

25、腔中培養(yǎng),則從腹水中提取。 (4)在單克隆抗體制備過(guò)程中,一般認(rèn)為有兩次篩選過(guò)程,第一次是篩選出雜交瘤細(xì)胞(用選擇培養(yǎng)基),第二次是進(jìn)一步篩選出能產(chǎn)生人們所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。 (5)用特定的選擇培養(yǎng)基篩選:未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞)都會(huì)死亡,只有融合的雜交瘤細(xì)胞(“B瘤”細(xì)胞)才能生長(zhǎng)。 (6)單克隆抗體優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高,可大量制備。,教材梳理,題型探究,考向三動(dòng)物的克隆繁殖 【典例2-3】 人的血清白蛋白在臨床上需求量很大,通常從人血中提取。由于艾滋病病毒(HIV)等人類(lèi)感染性病原體造成的威脅與日俱增,使人們對(duì)血液制品顧慮重重。如果將人的血

26、清白蛋白基因?qū)肽膛＜?xì)胞中,那么利用牛的乳汁來(lái)生產(chǎn)血清白蛋白就成為可能。大致過(guò)程如下: a.將人的血清白蛋白基因?qū)氪菩阅膛Ｅ咛ゼ?xì)胞,形成重組細(xì)胞; b.取出重組細(xì)胞的細(xì)胞核,注入牛去核卵細(xì)胞中形成重組細(xì)胞; c.電脈沖刺激重組細(xì)胞,促使其形成早期胚胎; d.將胚胎移植到母牛的子宮中,最終發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小牛。,教材梳理,題型探究,教材梳理,題型探究,請(qǐng)回答下列問(wèn)題。 (1)重組細(xì)胞的獲得是利用了技術(shù),它實(shí)現(xiàn)了奶牛胚胎細(xì)胞中的DNA與的重組。 (2)重組細(xì)胞的獲得是利用了克隆技術(shù)中的技術(shù),使重組細(xì)胞的細(xì)胞核與牛的融合。 (3)由圖可知,動(dòng)物克隆技術(shù)的基礎(chǔ)是。 A.動(dòng)物細(xì)胞融合B.動(dòng)物細(xì)胞的全能性

27、C.動(dòng)物細(xì)胞和組織培養(yǎng)D.核移植 (4)利用轉(zhuǎn)基因牛乳汁提取藥物工藝簡(jiǎn)單,甚至可直接飲用治病。如果將藥物蛋白基因移到動(dòng)物(如牛)的膀胱上皮細(xì)胞中,利用轉(zhuǎn)基因牛的尿液生產(chǎn)提取藥物比乳汁提取藥物的更大優(yōu)越性是:、。,教材梳理,題型探究,(5)重組細(xì)胞培養(yǎng)成早期胚胎利用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。下列與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)無(wú)密切關(guān)系的是。 A.細(xì)胞全能性的揭示 B.噬菌體的研究 C.細(xì)胞周期調(diào)節(jié)控制機(jī)理的分析 D.對(duì)癌變機(jī)理和衰老原因的研究,答案:(1)基因工程人的血清白蛋白基因(2)核移植去核卵細(xì)胞(3)C(4)處于不同發(fā)育時(shí)期的動(dòng)物都可生產(chǎn)雌性和雄性動(dòng)物都可生產(chǎn)(5)B,教材梳理,題型探究,解析:(1)基因

28、工程可將目的基因人的血清白蛋白基因與受體細(xì)胞牛胚胎細(xì)胞的DNA進(jìn)行重組。(2)克隆技術(shù)中的細(xì)胞核移植技術(shù)可將去核的牛卵細(xì)胞與含有目的基因的供體細(xì)胞核融合構(gòu)建重組細(xì)胞。(4)建立膀胱生物反應(yīng)器的好處是可以不分動(dòng)物的性別及不同生長(zhǎng)發(fā)育期,均可產(chǎn)生所需藥物。(5)噬菌體是細(xì)菌病毒,無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu),A、C、D項(xiàng)所述的內(nèi)容都與細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)密不可分。,教材梳理,題型探究,易錯(cuò)提醒(1)動(dòng)物難以克隆的根本原因:分化了的動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的調(diào)節(jié)蛋白,關(guān)閉了細(xì)胞核中與個(gè)體發(fā)育有關(guān)的基因。 (2)重組卵發(fā)育成一個(gè)新個(gè)體,體現(xiàn)了細(xì)胞核的全能性而非動(dòng)物細(xì)胞的全能性。 (3)重建合子的細(xì)胞質(zhì)必須來(lái)自卵細(xì)胞的原因:卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中沒(méi)有與關(guān)閉個(gè)體發(fā)育有關(guān)基因的調(diào)節(jié)蛋白。 (4)動(dòng)物克隆屬于無(wú)性繁殖,產(chǎn)生新個(gè)體的性別、絕大多數(shù)性狀與供核親本一致。 (5)通過(guò)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)獲得的克隆動(dòng)物,其遺傳物質(zhì)和供核細(xì)胞的遺傳物質(zhì)不完全一樣。細(xì)胞核遺傳物質(zhì)一樣,但細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)和提供去核卵細(xì)胞的個(gè)體幾乎完全一樣(分析遺傳物質(zhì)來(lái)源時(shí),一定要注意細(xì)胞核遺傳物質(zhì)和細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)的區(qū)別)。,