第2章 第2節(jié) 第1課時(shí) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng).docx

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1、第2節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞工程 第1課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 1 .簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程、條件及應(yīng)用。 2 .掌握干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用。 學(xué)習(xí)目標(biāo) 素養(yǎng)要求 1 .科學(xué)思維：構(gòu)建動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程圖。 2 .科學(xué)探究：分析討論動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件。 3 .科學(xué)責(zé)任：了解干細(xì)胞培養(yǎng)的進(jìn)展、應(yīng)用前景及平安 問(wèn)題，認(rèn)同干細(xì)胞培養(yǎng)在疾病治療方面的應(yīng)用價(jià)值。 一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件和過(guò)程 r梳理教材知識(shí)-夯實(shí)基礎(chǔ)」i.動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞核移植等,其中動(dòng)物 細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。 2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)⑴概念：從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞,

2、然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓 這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)。 ⑵培養(yǎng)條件'無(wú)機(jī)物：無(wú)機(jī)鹽 ①營(yíng)養(yǎng)條件V有機(jī)物：糖類(lèi)、氨基酸、維生素等、天然成分：血清等 將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按種類(lèi)和所需量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基，稱(chēng)為合成培養(yǎng)基。培養(yǎng)動(dòng)物 細(xì)胞一般使用液體培養(yǎng)基,也稱(chēng)為培養(yǎng)液。 ②無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：需要對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理以及在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行操 作。培養(yǎng)液還需要定期更換，以便清除代謝物,防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。 '溫度：哺乳動(dòng)物細(xì)胞多以36.5±0.5 ℃為宜③溫度、pH和滲透壓| pH：多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞適宜pH為2122rz4 、滲透壓④氣體環(huán)境 ④氣體環(huán)境

3、02：細(xì)胞代謝所必需的 C02：維持培養(yǎng)液的pH 動(dòng)物胚胎 或幼齡動(dòng) 物組織 懸浮分裂 生長(zhǎng)前［分瓶 貼壁接畋「培養(yǎng) 生長(zhǎng)耐 在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,并將它們置于含有95%空氣和5%CO2 的混合氣體的C02培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。 (3)培養(yǎng)過(guò)程 機(jī)械 方法或―單個(gè)加培養(yǎng)班細(xì)胞胰蛋白酶、‘細(xì)胞"懸液 膠原蛋白梅等解析 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，其中通常含有糖類(lèi)、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維 生素和血清等，植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，其中通常含有蔗糖、氨基酸、無(wú) 機(jī)鹽和植物激素等，A正確；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)均需要滅菌處理，并且需要在無(wú) 菌

4、條件下進(jìn)行，B錯(cuò)誤；動(dòng)、植物細(xì)胞都可以傳代培養(yǎng)，C錯(cuò)誤；植物細(xì)胞可以培養(yǎng)成植株, 也能培養(yǎng)成大量細(xì)胞，D錯(cuò)誤。 13.實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程如下圖。以下表達(dá)錯(cuò)誤的選項(xiàng)是（）實(shí)驗(yàn)小鼠—皮膚組織4f皮膚細(xì)胞懸液q細(xì)胞群體1二細(xì)胞群體2 A.甲過(guò)程需要對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒B.乙過(guò)程需要用胰蛋白酶等處理皮膚組織，使細(xì)胞分散開(kāi) C.丙過(guò)程表示原代培養(yǎng)，該過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D. 丁過(guò)程表示傳代培養(yǎng)，此過(guò)程中的細(xì)胞分瓶后能無(wú)限增殖 答案D解析 離體動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，甲過(guò)程表示從實(shí)驗(yàn)小鼠身上取下皮膚組織， 該過(guò)程需要對(duì)小鼠進(jìn)行消毒，A正確；皮膚細(xì)胞培養(yǎng)前需用胰蛋白酶等處理皮

5、膚組織使細(xì)胞 分散開(kāi)，并制成細(xì)胞懸液，B正確；丙過(guò)程表示原代培養(yǎng)，該過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象， C正確；丁過(guò)程表示傳代培養(yǎng)，但分瓶后，細(xì)胞并非都能無(wú)限增殖，D錯(cuò)誤。 14.以下關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的表達(dá)，錯(cuò)誤的選項(xiàng)是（）A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染 B.可用機(jī)械的方法處理動(dòng)物組織，使其分散成單個(gè)細(xì)胞C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境是95%。2和5%CO2 D.進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集答案c 解析 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境是95%空氣和5%CO2, C錯(cuò)誤。 15 .干細(xì)胞移植現(xiàn)已成為治療糖尿病的一種臨床新技術(shù)。自體骨髓干細(xì)胞植入胰腺組織后可

6、分化為胰島樣細(xì)胞，以替代損傷的胰島P細(xì)胞，到達(dá)治療糖尿病的目的。以下表達(dá)正確的選項(xiàng)是 （不定項(xiàng)）（ ）A.骨髓干細(xì)胞與胰島樣細(xì)胞的基因組成不同，基因表達(dá)產(chǎn)物不同 B.骨髓干細(xì)胞與胰島樣細(xì)胞的基因組成相同，基因表達(dá)存在差異C.骨髓干細(xì)胞分化成胰島樣細(xì)胞是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果 D.胰腺組織微環(huán)境對(duì)骨髓干細(xì)胞分化無(wú)影響，分化是由基因決定的答案BC 解析骨髓干細(xì)胞和胰島樣細(xì)胞都是由同一個(gè)受精卵經(jīng)有絲分裂而形成的體細(xì)胞。在有絲分 裂過(guò)程中，遺傳物質(zhì)精確復(fù)制后平均分配到子細(xì)胞中，故骨髓干細(xì)胞和胰島樣細(xì)胞基因組成 相同。機(jī)體的不同細(xì)胞是細(xì)胞分化的結(jié)果，細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因選擇性表達(dá)，表達(dá)的產(chǎn)物 存在差

7、異，故A項(xiàng)錯(cuò)誤、B項(xiàng)正確；骨髓干細(xì)胞是分化程度較低的干細(xì)胞，其能分化成胰島 樣細(xì)胞是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果，C項(xiàng)正確；細(xì)胞分化是遺傳物質(zhì)和外界環(huán)境條件共同作用 的結(jié)果，D項(xiàng)錯(cuò)誤。 16 .科學(xué)家將人體皮膚細(xì)胞改造成了多能干細(xì)胞—— “iPS細(xì)胞”，人類(lèi)“iPS細(xì)胞”可以形 成神經(jīng)元等人體多種組織細(xì)胞。以下有關(guān)“iPS細(xì)胞”的說(shuō)法，正確的選項(xiàng)是（不定項(xiàng)）（） A. “iPS細(xì)胞”分化為神經(jīng)細(xì)胞的過(guò)程表達(dá)了細(xì)胞的全能性“iPS細(xì)胞”有細(xì)胞周期，它分化形成的神經(jīng)細(xì)胞一般不具有細(xì)胞周期 B. “iPS細(xì)胞”可分化形成多種組織細(xì)胞，是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果“iPS細(xì)胞”分化成人體多種組織細(xì)胞，是因?yàn)樗?/p>

8、有不同于其他細(xì)胞的特定基因 答案BC解析 全能性是指體細(xì)胞發(fā)育為完整個(gè)體或其他各種細(xì)胞的能力，“iPS細(xì)胞”分化為神經(jīng) 細(xì)胞的過(guò)程不能表達(dá)細(xì)胞的全能性；細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果；由題意知，“iPS 細(xì)胞”同人體細(xì)胞一樣，具有人體生長(zhǎng)發(fā)育的全套遺傳物質(zhì)。 17 .某生物興趣小組對(duì)一種抗癌新藥進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，以動(dòng)物肝癌細(xì)胞為材料，測(cè)定抗癌藥物對(duì) 體外培養(yǎng)細(xì)胞增殖的影響。請(qǐng)回答以下有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問(wèn)題： ⑴在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類(lèi)和所需量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱(chēng)為 培養(yǎng)基。通常在培養(yǎng)基中還需要加入適量等一些天然成分。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，C02的作

9、用是 o另外，還應(yīng)該保證被 培養(yǎng)的細(xì)胞處于、的環(huán)境。 ⑵在細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中，當(dāng)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)到一定程度時(shí)，其生長(zhǎng)會(huì)受到抑制，這種現(xiàn)象稱(chēng)為⑶請(qǐng)你幫助興趣小組的同學(xué)分析本實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)的自變量是，實(shí)驗(yàn) 組和對(duì)照組除了自變量不同外，其他處理均應(yīng)該相同，這是為了遵循實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的 原那么。 答案（1）合成血清維持培養(yǎng)液的pH無(wú)菌無(wú)毒（2）接觸抑制（3）是否加入抗癌藥物單一變量 解析（1）將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類(lèi)和所需量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基，稱(chēng)為合成培養(yǎng) 基。由于對(duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)尚未全部研究清楚，因此，在使用合成培養(yǎng)基時(shí)，還要加入 一些血清等天然成分。細(xì)胞培養(yǎng)所需的氣體中有C02,作用是維持培養(yǎng)液的

10、pH。被培養(yǎng)的細(xì) 胞必須處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境中，才能保證細(xì)胞正常地生長(zhǎng)增殖。（2）動(dòng)物細(xì)胞在生長(zhǎng)增殖過(guò) 程中有接觸抑制的現(xiàn)象。（3）實(shí)驗(yàn)的目的是要測(cè)定抗癌藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞增殖的影響，故實(shí) 驗(yàn)的自變量為抗癌藥物的有無(wú)，其他無(wú)關(guān)變量應(yīng)該相同，否那么會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，這種設(shè)計(jì)遵 循的是實(shí)驗(yàn)的單一變量原那么。 18 .肺臟是人體的呼吸器官，對(duì)氣體交換和抵御病原體入侵至關(guān)重要。肺臟一旦受損，人體 正常生命活動(dòng)也將受到影響。中國(guó)科學(xué)院生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所周斌、季紅斌研究團(tuán) 隊(duì)和廣州生物醫(yī)藥與健康研究院彭廣敦研究團(tuán)隊(duì)合作證實(shí)在人體中存在一種參與肺臟再生的 肺多能干細(xì)胞，它可以“按需分化”，完成肺臟內(nèi)

11、部的“跨界維修”。請(qǐng)回答以下問(wèn)題： ⑴在人體內(nèi)，肺多能干細(xì)胞“按需分化”是人體細(xì)胞中基因 的結(jié)果。 ⑵在體外培養(yǎng)肺多能干細(xì)胞時(shí)，除提供無(wú)菌、無(wú)毒、營(yíng)養(yǎng)齊全等的條件，還需要 作為氣體環(huán)境。此外還需定期更換培養(yǎng)液，其目的是⑶肺多能干細(xì)胞能在體外培養(yǎng)成功，在醫(yī)學(xué)上的意義是（答出一點(diǎn)即可）。 答案（1）選擇性表達(dá)（2）95%的空氣和5%的C02防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危 害（3）修復(fù)損傷的肺細(xì)胞、治療肺部疾病、再生肺 (4)相關(guān)概念①細(xì)胞貼壁：懸液中分散的細(xì)胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上。 ②接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到外表相互接觸時(shí),細(xì)胞停止分裂增殖的現(xiàn)象。 ③原代培養(yǎng)：指動(dòng)物組織經(jīng)處

12、理后的初次培養(yǎng)。 ④傳代培養(yǎng)：分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)。 「辨析易錯(cuò)易混?練前清障」⑴動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)表達(dá)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性() ⑵培養(yǎng)保存接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞()⑶懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集，貼壁細(xì)胞需要用胰蛋白酶等處理后再用離心法收集 () ⑷動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，02是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH() 答案(1)X (2)X (3) J (4)7r思考延伸拓展?強(qiáng)化素養(yǎng)」 1 .動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖。 2 .幼齡動(dòng)物的細(xì)胞與老齡動(dòng)物的細(xì)胞比擬，分化程度低的細(xì)胞與分化程度高的細(xì)胞比擬，哪 些細(xì)胞更易于培養(yǎng)？為什么？ 提示 幼齡動(dòng)物的細(xì)胞和

13、分化程度低的細(xì)胞更易培養(yǎng)，原因是這些細(xì)胞分裂能力強(qiáng)。 3 .動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，除了添加糖類(lèi)、氨基酸等必要的營(yíng)養(yǎng)成分外，往往還需添加血清等一些 天然成分，原因是人們對(duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)尚未全部研究清楚,血清等一些天然成分的營(yíng) 養(yǎng)成分比擬齊全，可以彌補(bǔ)人工培養(yǎng)基的缺乏。 4 .進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)用胰蛋白酶分散細(xì)胞，說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。用胃蛋 白酶可以嗎？為什么？ 提示 不可以。多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞生存的適宜pH為7.2?7.4,胃蛋白酶(適宜pH為1.5左右)在 此環(huán)境中沒(méi)有活性，而胰蛋白酶在此環(huán)境中活性較高，因此胰蛋白酶適用于細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的處 理。 二、干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用 \梳理教材

14、知識(shí)-夯實(shí)基礎(chǔ)」.來(lái)源：早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中。 1 .類(lèi)型：胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等。 2 .胚胎干細(xì)胞⑴概念：存在于早期胚胎中,具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類(lèi)型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形 成機(jī)體的所有組織和器官甚至個(gè)體的潛能。 ⑵局限：胚胎干細(xì)胞必須從胚胎中獲取，這涉及倫理問(wèn)題，因而限制了它在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。 3 .成體干細(xì)胞⑴概念：成體組織或器官內(nèi)的干細(xì)胞。 ,骨髓中的造血干細(xì)胞(2)類(lèi)型V 神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)干細(xì)胞 .睪丸中的精原干細(xì)胞⑶特點(diǎn)：具有組織特異性,只能分化成特定的細(xì)胞或組織，不具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力。 ⑷作用：有著自我更新能力及分化潛能的干細(xì)胞,與

15、組織、器官的發(fā)育、再生和修復(fù)等密切 相關(guān)。 (5)應(yīng)用①造血干細(xì)胞：治療白血病、一些惡性腫瘤放療或化療后引起的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能障 礙等疾病。 ②神經(jīng)干細(xì)胞：治療神經(jīng)組織損傷和神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病(如帕金森病、阿爾茨海默病等)。 4 .誘導(dǎo)多能干細(xì)胞⑴概念：通過(guò)體外誘導(dǎo)成紅維等細(xì)胞，獲得類(lèi)似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞，被稱(chēng)為誘導(dǎo)多能干 細(xì)胞(簡(jiǎn)稱(chēng)iPS細(xì)胞)。 (2)應(yīng)用治療小鼠的鐮狀細(xì)胞貧血；現(xiàn)在用iPS細(xì)胞治療阿爾茨海默病、心血管疾病等領(lǐng)域的研究也 取得了新進(jìn)展。 ⑶優(yōu)點(diǎn)：無(wú)需破壞胚胎；iPS細(xì)胞可以來(lái)源于病人自身的體細(xì)胞，將它移植回病人體內(nèi)后， 理論上可以防止免疫排斥反響。 「辨

16、析易錯(cuò)易混練前清障」⑴干細(xì)胞都是來(lái)源于早期胚胎() ⑵造血干細(xì)胞是發(fā)現(xiàn)最早、研究最多、應(yīng)用也最為成熟的一類(lèi)成體干細(xì)胞，主要存在于成體 的骨髓、外周血和臍帶血中()⑶不同類(lèi)型的干細(xì)胞，它們的分化潛能完全相同() (4)干細(xì)胞將在再生醫(yī)學(xué)、藥物平安性與有效性檢測(cè)等領(lǐng)域發(fā)揮大作用()答案(1)X (2)V (3)X (4) J r思考延伸拓展?強(qiáng)化素養(yǎng)」i.胚胎干細(xì)胞用于治療人類(lèi)的某些頑癥的原理是胚胎干細(xì)胞具有全能拄，可以被誘導(dǎo)分化形 成新的組織細(xì)胞、器官甚至個(gè)體，經(jīng)移植可使壞死或退化部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能。 2 .胚胎干細(xì)胞為什么可以解決供體器官缺乏和器官移植后免疫排斥的問(wèn)題？其應(yīng)用

17、有什么限 制因素？ 提示通過(guò)胚胎干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化，可以培育出人造組織器官，從而解決供體器官缺乏問(wèn) 題，另一方面，由于是自身細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化形成的，所以無(wú)免疫排斥反響。胚胎干細(xì)胞必須從胚胎中獲取，這涉及倫理問(wèn)題，因而限制了應(yīng)用。 3 .為什么科學(xué)家認(rèn)為iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞？ 提示iPS細(xì)胞的誘導(dǎo)過(guò)程無(wú)需破壞胚胎，而且iPS細(xì)胞可以來(lái)源于病人自身的體細(xì)胞，將 它移植回病人體內(nèi)后，理論上可以防止免疫排斥反響。 梳理網(wǎng)絡(luò)要語(yǔ)必備胚胎干細(xì)胞- 成體干細(xì)胞- 誘導(dǎo)多能干細(xì)胞- 應(yīng)用- 胚胎干細(xì)胞- 成體干細(xì)胞- 誘導(dǎo)多能干細(xì)胞- 應(yīng)用- 念理程件 M-原a-條 ----

18、 (物仁養(yǎng)一 一動(dòng)向培」 一細(xì)培正應(yīng)， 干胞養(yǎng)其用. 適宜的營(yíng)養(yǎng) 無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境 適宜的溫度、pH和 滲透壓 適宜的氣體環(huán)境 L動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：動(dòng)物組織胰蛋白酶機(jī)器黑酶等處理■單個(gè)細(xì)胞3細(xì)胞懸液一原 代培養(yǎng)一傳代培養(yǎng)。 2 .動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般選用胚胎或幼齡動(dòng)物的組織，細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁（生長(zhǎng)） 和接觸抑制現(xiàn)象。 3 .體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞可以分為兩大類(lèi)：一類(lèi)細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)增殖；另一類(lèi)那么 需要貼附于某些基質(zhì)外表才能生長(zhǎng)增殖，大多數(shù)細(xì)胞屬于這種類(lèi)型。 4 .干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì) 胞等。

19、5 .誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞。 隨堂演練知識(shí)落實(shí). 1.在將動(dòng)物組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞時(shí)，可以使用胰蛋白酶。由此判斷以下推測(cè)不合理的是 （）A.動(dòng)物細(xì)胞之間可能依靠蛋白質(zhì)相互聯(lián)系 B.處理時(shí)一定要注意處理時(shí)間、加酶量C.胰蛋白酶一定不會(huì)對(duì)動(dòng)物細(xì)胞造成損傷 D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的pH應(yīng)與胰蛋白酶作用的適宜pH基本一致答案C 解析 胰蛋白酶可使蛋白質(zhì)分解，由胰蛋白酶可破壞動(dòng)物細(xì)胞之間的聯(lián)系，可推測(cè)動(dòng)物細(xì)胞 之間可能依靠蛋白質(zhì)相互聯(lián)系；細(xì)胞膜中含有蛋白質(zhì)成分，所以一定要注意處理的時(shí)間和酶 的用量，以防止對(duì)動(dòng)物細(xì)胞造成損傷；酶促反響需要適宜的pH,所以培養(yǎng)液的pH應(yīng)

20、與胰蛋 白酶作用的適宜pH基本一致。 2 .以下有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的表達(dá)，正確的選項(xiàng)是（）A.培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶等處理，使細(xì)胞從瓶壁上脫離，制成細(xì)胞懸液 B.將所取的組織先用胃蛋白酶等進(jìn)行處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞C.用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自成年動(dòng)物的器官或組織 D.動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)稱(chēng)為傳代培養(yǎng)答案A 解析正常動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)存在貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制現(xiàn)象，因此培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶 等處理，使細(xì)胞從瓶壁上脫離，制成細(xì)胞懸液，A正確；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2?7.4, 這樣的環(huán)境會(huì)使胃蛋白酶變性失活，因此動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，應(yīng)將所取的組織先用胰蛋白 酶等進(jìn)行處理，使其分散成

21、單個(gè)細(xì)胞，B錯(cuò)誤；用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動(dòng)物的 器官或組織，因?yàn)榕咛セ蛴g動(dòng)物的器官或組織分裂能力強(qiáng)，C錯(cuò)誤。 3 .以下有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物組織培養(yǎng)的表述中正確的選項(xiàng)是（）A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中，含20%CO2的恒溫培養(yǎng)箱的作用是調(diào)控pH和溫度 B.在進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)可直接用離心法收集細(xì)胞C.原代培養(yǎng)的細(xì)胞因具有最接近于體內(nèi)細(xì)胞的生長(zhǎng)特性，常用于藥物測(cè)試研究 D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞要經(jīng)過(guò)脫分化形成愈傷組織答案c 解析 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中，應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，作用是維持培養(yǎng)液的pH, A項(xiàng)錯(cuò)誤；在進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)，貼壁細(xì)胞需要重新用胰蛋白酶處理，使之分散成單個(gè)細(xì)

22、胞， 然后再用離心法收集，B項(xiàng)錯(cuò)誤；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖，因此不需要脫分化，D 項(xiàng)錯(cuò)誤。 4 .以下關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用的表達(dá)，錯(cuò)誤的選項(xiàng)是（）A.可用于檢測(cè)某種物質(zhì)的毒性 B.可通過(guò)培養(yǎng)各種病變細(xì)胞，用于藥理等方面的研究C.可通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)來(lái)生產(chǎn)病毒疫苗、干擾素等 D.經(jīng)過(guò)脫分化、再分化，可構(gòu)建人造皮膚答案D 解析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)沒(méi)有脫分化與再分化過(guò)程。 5 . 一名嬰兒在出生后醫(yī)院為他保存了臍帶血，在他以后生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中如果出現(xiàn)了某種難以 治療的疾病，就可以利用血液中的干細(xì)胞進(jìn)行治療，以下關(guān)于這個(gè)實(shí)例的說(shuō)法正確的選項(xiàng)是（） A.用干細(xì)胞培育出人體需要的組織或器官

23、用來(lái)移植治病，需要激發(fā)細(xì)胞的全能性B.用臍帶血中的干細(xì)胞能夠治療這個(gè)孩子所有的疾病 C.如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，需要用到細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)D.如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，應(yīng)該長(zhǎng)期給他使用免疫抑制藥物 答案C 解析 臍帶血中含有大量未成熟的造血干細(xì)胞，將臍帶血細(xì)胞移植，對(duì)白血病、再生障礙性 貧血等惡性血液病的治療具有很好的效果；而用干細(xì)胞培育出人體需要的器官用來(lái)移植治療， 只要誘導(dǎo)細(xì)胞分化成該組織、器官即可，不需激發(fā)其全能性；用干細(xì)胞培育出的器官移植屬 于自體移植，基本不會(huì)發(fā)生免疫排斥反響，不需長(zhǎng)期給他使用免疫抑制藥物。 6 .某研究小組進(jìn)行藥物試驗(yàn)時(shí)，以動(dòng)物肝細(xì)胞為材料，測(cè)

24、定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性。供 培養(yǎng)的細(xì)胞有甲、乙兩種，甲細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞，乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。請(qǐng)回答以下有關(guān)動(dòng) 物細(xì)胞培養(yǎng)的問(wèn)題： ⑴將數(shù)量相等的甲細(xì)胞和乙細(xì)胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其他培養(yǎng)條件均相同。一 段時(shí)間后，觀察到甲細(xì)胞數(shù)量比乙細(xì)胞數(shù)量O⑵在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清，其原因是 O 為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素。 ⑶癌細(xì)胞X基因過(guò)量表達(dá)與肝腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，要試驗(yàn)一種抗腫瘤藥物Y對(duì)甲細(xì) 胞生長(zhǎng)的影響，可將甲細(xì)胞分為A、B兩組，A組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入, B組細(xì)胞培 養(yǎng)液中加入無(wú)菌生理鹽水，經(jīng)培養(yǎng)后，從A、B兩組收集等量

25、細(xì)胞，通過(guò)分別檢測(cè)X基因在 A、B兩組細(xì)胞中的 或 合成水平的差異，確定Y的藥效。 答案（1）多（2）血清可以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)（3）Y mRNA蛋白質(zhì)解析（1）甲細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞，乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞為能無(wú)限增殖的細(xì)胞，細(xì)胞 周期短。在相同條件下，培養(yǎng)相同的時(shí)間，甲細(xì)胞的數(shù)量多于乙細(xì)胞。（3）設(shè)計(jì)一組加入抗腫 瘤藥物的實(shí)驗(yàn)組，一組不加抗腫瘤藥物的對(duì)照組，通過(guò)檢測(cè)藥物影響X基因的表達(dá)過(guò)程，即 轉(zhuǎn)錄形成mRNA的量、翻譯形成蛋白質(zhì)的量來(lái)檢驗(yàn)藥效。 課時(shí)對(duì)點(diǎn)練 IA組基礎(chǔ)對(duì)點(diǎn)練】題組一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件 1 . 一般來(lái)說(shuō)，動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿(mǎn)足的條件有（）①無(wú)毒的環(huán)境②無(wú)

26、菌的環(huán)境③培養(yǎng)液中需加血清等一些天然成分④溫度與動(dòng)物體溫相 近 ⑤需要。2⑥加C02維持培養(yǎng)液的pH A.①②③④⑤⑥B.①②③④C.①③④⑤⑥D(zhuǎn).①②③④⑥ 答案A解析 動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)要求環(huán)境無(wú)菌、無(wú)毒；在細(xì)胞培養(yǎng)液中需添加血清等一些天然成分; 培養(yǎng)溫度一般與動(dòng)物體溫相近；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)還需要。2和C02,。2是細(xì)胞代謝所必需的， C02可維持培養(yǎng)液的pHo 2 .以下有關(guān)植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的表達(dá)正確的選項(xiàng)是（）A.兩者培養(yǎng)都能得到完整個(gè)體 B.兩者培養(yǎng)基中必須都添加激素C.兩者培養(yǎng)過(guò)程中都需要適宜的溫度、pH和一定的營(yíng)養(yǎng)條件 D.兩者培養(yǎng)過(guò)程中都需用酶處理答案c 解析

27、植物組織培養(yǎng)能得到完整個(gè)體，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)得到的是細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物，A錯(cuò)誤；動(dòng) 物細(xì)胞培養(yǎng)不需要加入激素，B錯(cuò)誤；植物組織培養(yǎng)過(guò)程中不需要用酶處理，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶等處理，D錯(cuò)誤。 3. （2020?黑龍江哈爾濱三中高二月考）以下關(guān)于植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的表達(dá)，正確的 是（）A.都需要無(wú)菌的條件 B.都從單個(gè)細(xì)胞開(kāi)始C.都使用液體培養(yǎng)基 D.都能實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的全能性答案A 解析 植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)都需要防止雜菌污染，即都需要無(wú)菌的條件，A正確； 植物細(xì)胞培養(yǎng)從外植體，即離體的植物器官、組織或細(xì)胞等開(kāi)始，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)從單個(gè)細(xì)胞 開(kāi)始，B錯(cuò)誤；植物組織培養(yǎng)使用固

28、體培養(yǎng)基，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)使用液體培養(yǎng)基，C錯(cuò)誤；植 物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖，D錯(cuò)誤。 題組二動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程的順序是（） ①原代培養(yǎng) ②傳代培養(yǎng) ③胰蛋白酶處理組織，形成分散的細(xì)胞A.①②③B.①③② C.②①③D.③①②答案D 解析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：首先用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織并制成細(xì)胞懸液，然后進(jìn)行原代 培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。 4 .以下關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的表達(dá)中，正確的選項(xiàng)是（）A.傳代培養(yǎng)時(shí)只能用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞 B.在進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集C.所有細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中都會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象 D.

29、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般需耍使用02培養(yǎng)箱答案B 5 .以下有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的表達(dá)，正確的選項(xiàng)是（）A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，可用胃蛋白酶處理使細(xì)胞分散開(kāi) B.通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)獲得大量細(xì)胞，可表達(dá)動(dòng)物細(xì)胞的全能性C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ) D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)選用的培養(yǎng)材料大多是動(dòng)物的受精卵答案C 解析 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH是7.2?7.4,該pH下胃蛋白酶會(huì)失活，所以動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò) 程中，應(yīng)用胰蛋白酶或膠原蛋白酶等處理使細(xì)胞分散并獲得單個(gè)細(xì)胞，A錯(cuò)誤；通過(guò)動(dòng)物細(xì) 胞培養(yǎng)獲得大量細(xì)胞，應(yīng)用了細(xì)胞增殖的原理，但不能表達(dá)動(dòng)物細(xì)胞具有全能性，B錯(cuò)誤； 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)選用的材料大多是動(dòng)

30、物早期胚胎組織或幼齡動(dòng)物的組織器官，D錯(cuò)誤。 6 .以下關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的表達(dá)，不正確的選項(xiàng)是（）A.通常將動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)稱(chēng)為原代培養(yǎng) 7 .培養(yǎng)環(huán)境中需要。2，不需要C02C.發(fā)生接觸抑制時(shí)需要再次使用胰蛋白酶處理細(xì)胞 D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)要求培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)外表光滑答案B 題組三干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用.干細(xì)胞存在的部位不包括（） A.早期胚胎B.骨髓C.成纖維細(xì)胞D.臍帶血 答案C成體干細(xì)胞不包括以下哪種細(xì)胞（） A.骨髓中的造血干細(xì)胞B.神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)干細(xì)胞 C.睪丸中的精原干細(xì)胞D.由成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)而成的iPS細(xì)胞 答案D.以下圖是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)程序圖，請(qǐng)據(jù)圖回

31、答以下問(wèn)題： ①取動(dòng)物組織塊 I②處理動(dòng)物組織，制成 I③轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng) I ④處理貼壁細(xì)胞.制成 I 一 ⑤轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)⑴過(guò)程②和④用 處理動(dòng)物組織或貼壁細(xì)胞使其分散成單個(gè)細(xì)胞，這樣做的 目的是⑵過(guò)程②和④都要把分散的細(xì)胞制成 O ⑶過(guò)程③進(jìn)行的細(xì)胞培養(yǎng)是,大多數(shù)細(xì)胞適于 生長(zhǎng)增殖。 （4）過(guò)程⑤進(jìn)行的細(xì)胞培養(yǎng)是 o過(guò)程③和⑤都要放在中進(jìn)行培養(yǎng)。 答案（1）胰蛋白酶或膠原蛋白酶 解除由于接觸對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的抑制（2）細(xì)胞懸液 ⑶原代培養(yǎng)貼壁（4）傳代培養(yǎng)含95%空氣和5%CO2的混合氣體的C02培養(yǎng)箱【B組綜合強(qiáng)化練】 8 .動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)，通常要在培

32、養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對(duì)正常 細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，不能從該圖獲得的結(jié)論是（）t細(xì)胞數(shù)/癌細(xì)胞（有血清） 癌細(xì)胞（無(wú)血清）// //正常細(xì)胞（有血清）乙正常細(xì)胞（無(wú)血清） °培養(yǎng)時(shí)間A.正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同 B.有無(wú)血清對(duì)正常細(xì)胞培養(yǎng)的影響較大C.培養(yǎng)基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng) D.培養(yǎng)基中是否補(bǔ)充血清對(duì)癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大答案A 解析 分析圖中曲線可知，對(duì)癌細(xì)胞來(lái)說(shuō)，相同培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，培養(yǎng)基中有無(wú)血清，其細(xì)胞數(shù) 目相差不大，說(shuō)明培養(yǎng)基中有無(wú)血清對(duì)癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大；對(duì)正常細(xì)胞來(lái)說(shuō)，在相同的 培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，有血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)目遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于沒(méi)有血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù) 目，說(shuō)明有無(wú)血清對(duì)正常細(xì)胞的培養(yǎng)影響較大；在相同條件和相同的培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，癌細(xì)胞和 正常細(xì)胞的數(shù)目差距較大，增殖速率不相同，正常細(xì)胞到達(dá)一定的數(shù)目后不再增加，而癌細(xì) 胞卻能不斷增加。 9 . （2019?江西南昌七校高二下期中聯(lián)考）以下屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)主要區(qū)別的 是（）A.培養(yǎng)基成分不同 B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行C.動(dòng)物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能 D.動(dòng)物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株答案A