高考生物大一輪復習 第十單元 49 現(xiàn)代生物科技專題學案

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1、 第十單元 現(xiàn)代生物科技專題 學案49　基因工程 考綱要求　1.基因工程的誕生(Ⅰ)。2.基因工程的原理及技術(shù)(Ⅱ)。3.基因工程的應(yīng)用(Ⅱ)。4.蛋白質(zhì)工程(Ⅰ)。 一、基因工程的概念 基因工程：又叫做________技術(shù)或________技術(shù)，是按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來，加以________，然后放到另一種生物的細胞里，________地改造生物的遺傳性狀。 二、基因工程的操作工具 1．限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”，又稱為________。 特點：能夠識別DNA特定的______________，切開兩個________之間的_______

2、_____。 限制酶切割DNA產(chǎn)生的末端有兩種形式：__________和________。 2．DNA連接酶——“分子縫合針” 作用：將雙鏈________“縫合”起來，恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的____________。 3．基因進入受體細胞的載體——“分子運輸車” (1)常用載體：____。 (2)質(zhì)粒載體的特點：①能夠在細胞內(nèi)________并穩(wěn)定保存。②具有一個或多個________________，便于外源DNA片段插入其中。③具有特殊的________，供重組DNA的鑒定和選擇。 三、基因工程的基本操作程序 1．目的基因的獲取：(1)從__________

3、____中獲??；(2)利用____________擴增目的基因；(3)________合成。 2．____________的構(gòu)建(核心) (1)目的：使________基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。 3．將目的基因?qū)胧荏w細胞(轉(zhuǎn)化) (1)將目的基因?qū)胫参锛毎撼Ｓ梅椒ㄓ衉_________法、基因槍法和__________法。 (2)將目的基因?qū)雱游锛毎撼Ｓ梅椒ㄊ莀_______法。 (3)將目的基因?qū)胛⑸锛毎菏荏w細胞 4．目的基因的________與________。 探究點一　基因工程的概念及操作工

4、具 1．基因工程的概念是什么？ 　 　 2．完成理解基因工程的操作工具比較表： 項目 限制性核酸內(nèi)切酶(分子手術(shù)刀) DNA連接酶(分子縫合針) 運載體(分子運輸車) 特性或條件 識別特定的______序列，并在__________切割DNA分子 一般作用于兩條具有相同的______的DNA分子 能夠在宿主細胞中____并穩(wěn)定____；具有一個或____個限制酶切位點；具有____基因 作用 提取____基因，切割____ 構(gòu)建重組DNA分子 將________轉(zhuǎn)移到宿主細胞中并大量復制 結(jié)果 將DNA分子切成DNA片段，產(chǎn)生____末端 相同

5、的黏性末端之間形成________鍵 形成重組________ 思維拓展 1．對基因工程概念的理解 別名 基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù) 操作環(huán)境 生物體外 操作對象 基因 操作水平 DNA分子水平 基本過程 剪切→拼接→導入→表達 結(jié)果 人類需要的基因產(chǎn)物 與雜交育種相比 克服遠緣雜交不親和的障礙 與誘變育種相比 定向改造生物性狀 原理 基因重組 2.在切割目的基因和載體時要求用同一種限制酶，目的是產(chǎn)生相同的黏性末端。 3．將一個基因從DNA分子上切割下來，需要2個限制酶，同時產(chǎn)生4個黏性末端。 4．不同DNA分子用同一種限制酶切割產(chǎn)生的黏性末端

6、都相同，同一個DNA分子用不同的限制酶產(chǎn)生的黏性末端可能相同。 探究示例1　(2010·全國理綜Ⅱ，5)下列敘述符合基因工程概念的是(　　) A．B細胞與腫瘤細胞融合，雜交瘤細胞中含有B細胞中的抗體基因 B．將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株 C．用紫外線照射青霉菌，使其DNA發(fā)生改變，通過篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株 D．自然界中天然存在的噬菌體自行感染細菌后其DNA整合到細菌DNA上 聽課記錄：　 　 探究點二　基因工程的基本操作程序 1．完成基因工程的基本操作流程圖： 2．完成目的基因的檢測與鑒定表，并加以理解、掌握： 類型 步驟

7、 檢測內(nèi)容 方法 分 子 水 平 第一步 目的基因是否插入受體細胞染色體的DNA上 ________________(DNA和DNA之間) 第二步 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA ________雜交技術(shù)(DNA和mRNA之間) 第三步 目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)分子雜交(______________雜交法) ____水 平鑒定 ____法或____法 思維拓展 1．在整個工程中，只有第三步將目的基因?qū)胧荏w細胞過程中不發(fā)生堿基互補配對，其他步驟均發(fā)生配對。 2．切割質(zhì)粒和目的基因的限制酶必須是同一種酶，以獲得相同的黏性末端，利于基因表達載體的構(gòu)建。

8、 3．插入的目的基因只是結(jié)構(gòu)基因部分，其表達需要調(diào)控序列，因而用作載體的質(zhì)粒的插入部位前須有啟動子，后須有終止子。 4．PCR技術(shù)與DNA復制的比較 PCR技術(shù) DNA復制 相 同 點 原理 DNA雙鏈復制(堿基互補配對) 原料 四種游離的脫氧核苷酸 條件 模板、ATP、酶等 不 同 點 解旋 方式 DNA在高溫下變性解旋 解旋酶催化 場所 體外復制 主要在細胞核內(nèi) 酶 熱穩(wěn)定的DNA聚合酶(Taq酶) 細胞內(nèi)含有的DNA聚合酶 結(jié)果 在短時間內(nèi)形成大量的DNA片段 形成整個DNA分子 探究示例2　(2011·浙江卷，6)將ada

9、(腺苷酸脫氨酶基因)通過質(zhì)粒pET28b導入大腸桿菌并成功表達腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯誤的是(　　) A．每個大腸桿菌細胞至少含一個重組質(zhì)粒 B．每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點 C．每個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點至少插入一個ada D．每個插入的ada至少表達一個腺苷酸脫氨酶分子 聽課記錄：　 　 探究點三　基因工程的應(yīng)用 完成基因工程的應(yīng)用表格，了解應(yīng)用成果。 轉(zhuǎn)基因生物 目的基因 成果舉例 植 物 基 因 工 程 抗蟲轉(zhuǎn)基因植物 抗蟲基因：Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制劑基因、淀粉酶抑制劑基因、植物凝集素基因 抗蟲水稻、抗蟲棉、抗蟲

10、玉米 抗病轉(zhuǎn)基因植物 抗____基因：病毒外殼蛋白基因、病毒的復制酶基因；抗____基因：幾丁質(zhì)酶基因、抗毒素合成基因 抗病毒煙草、抗病毒小麥、抗病毒番茄、抗病毒甜椒 抗逆轉(zhuǎn)基因植物 抗逆轉(zhuǎn)基因：滲透壓調(diào)節(jié)基因、抗凍蛋白基因、抗除草劑基因 抗鹽堿和抗干旱的煙草、抗寒番茄、抗______的大豆和玉米 ________的 轉(zhuǎn)基因植物 優(yōu)良性狀基因：提高必需氨基酸含量的蛋白質(zhì)編碼基因、控制番茄成熟的基因、與花青素代謝有關(guān)的基因 高______玉米、耐儲存番茄、新花色矮牽牛 動 物 基 因 工 程 提高生長速度的 轉(zhuǎn)基因動物 ____________基因 轉(zhuǎn)基因

11、綿羊、轉(zhuǎn)基因鯉魚 生產(chǎn)藥物的 轉(zhuǎn)基因動物 藥用蛋白基因＋乳腺蛋白基因的啟動子 ____生物反應(yīng)器 改善畜產(chǎn)品品質(zhì)的 轉(zhuǎn)基因動物 ________基因 乳汁中含乳糖較少的轉(zhuǎn)基因牛 作器官移植供體的 轉(zhuǎn)基因動物 外源的抗原決定基因表達的____因子或除去供體的____決定基因 利用克隆技術(shù)培育沒有免疫排斥反應(yīng)的豬器官 基 因 治 療 體外基因治療 腺苷酸脫氨酶基因 治療______免疫缺陷癥 體內(nèi)基因治療 治療囊性纖維化病基因 治療______囊性纖維化病 思維拓展　基因治療是治療人類遺傳病的根本方法，但由于尚未全面了解基因調(diào)控機制和疾病的分子機理，基

12、因治療只處于初期的臨床試驗階段。 探究示例3　(2010·上海綜合能力測試)運用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培養(yǎng)的單細胞“工程硅藻”，可把光合作用合成的有機物以脂質(zhì)形式儲存起來?？茖W家計劃在海水中大量培養(yǎng)“工程硅藻”，捕撈后從中提煉“生物柴油”。與礦物柴油相比，使用這種“生物柴油”的優(yōu)點是(　　) ①可再生　②不顯著增加碳排放?、鄄慌欧藕驈U氣 ④不會對生態(tài)環(huán)境造成負面影響 A．①②③ B．①③④ C．①②④ D．②③④ 聽課記錄：　 　 探究點四　蛋白質(zhì)工程 1．蛋白質(zhì)工程的概念 蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合

13、成，對現(xiàn)有蛋 白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。 2．蛋白質(zhì)工程的過程填充 蛋白質(zhì)工程的過程：其基本途徑是從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預期的蛋白質(zhì)________→推測應(yīng)有的____________序列→找到相對應(yīng)的____________序列(____________)。其流程圖如下： 思維拓展 1．對蛋白質(zhì)工程概念應(yīng)從以下幾個方面理解 (1)蛋白質(zhì)工程的基礎(chǔ)：蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系；(2)蛋白質(zhì)工程的實質(zhì)：改造控制該蛋白質(zhì)合成的基因；(3)蛋白質(zhì)工程的產(chǎn)物：產(chǎn)生新的蛋白質(zhì)，是自然界所沒有的。 2．蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基

14、礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程。因為對現(xiàn)有蛋白質(zhì)的改造或制造新的蛋白質(zhì)，必須通過基因修飾或基因合成實現(xiàn)。 探究示例4　以下關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說法正確的是(　　) A．蛋白質(zhì)工程以基因工程為基礎(chǔ) B．蛋白質(zhì)工程就是酶工程的延伸 C．蛋白質(zhì)工程就是用蛋白酶對蛋白質(zhì)進行改造 D．蛋白質(zhì)工程只能生產(chǎn)天然的蛋白質(zhì) 聽課記錄：　 　 題組一　基因工程及基本操作 1．(2011·四川卷，5)北極比目魚中有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白具有11個氨基酸的重復序列，該序列重復次數(shù)越多，抗凍能力越強。下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖，有關(guān)敘述正確的是(　　) A．過程①獲

15、取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測序 B．將多個抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達的新基因，不能得到抗凍性增強的抗凍 蛋白 C．過程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進行篩選 D．應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達 2．下圖為DNA分子在不同酶的作用下所發(fā)生的變化，圖中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA連接酶、解旋酶作用的正確順序是(　　) A．①②③④ B．①②④③ C．①④②③ D．①④③② 3．下列關(guān)于基因工程的敘述，不正確的是(多選)(　　) A．基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因為目的基因 B．

16、細菌質(zhì)粒是基因工程常用的運載體 C．通常用一種限制性核酸內(nèi)切酶處理含目的基因的DNA，用另一種處理運載體DNA D．為培育成抗除草劑的作物新品種，導入抗除草劑基因時只能以受精卵為受體 題組二　基因工程應(yīng)用及蛋白質(zhì)工程 4．(2010·鎮(zhèn)江質(zhì)檢)科學家將β－干擾素基因進行定點突變導入大腸桿菌表達，使β－干擾素第十七位的半胱氨酸，改變成絲氨酸，結(jié)果大大提高了β－干擾素的抗病毒活性，并且提高了儲存穩(wěn)定性。該生物技術(shù)為(　　) A．蛋白質(zhì)工程 B．基因工程 C．基因突變 D．細胞工程 5．下列關(guān)于基因工程及其應(yīng)用的敘述正確的是(　　) A．若要生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因抗病水稻，可

17、先將目的基因?qū)氪竽c桿菌中，再轉(zhuǎn)入水稻細胞 B．用氨基酸序列推測合成的目的基因與原基因的編碼區(qū)中的外顯子一致 C．用DNA探針能檢測飲用水中重金屬物質(zhì)的含量 D．作為運載體要有多種限制酶的切點，但對一種限制酶而言，最好只有一個切點 6．(2011·南師大附中學情分析)蛋白質(zhì)工程中，直接需要進行操作的對象是(　　) A．氨基酸結(jié)構(gòu) B．蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu) C．肽鏈結(jié)構(gòu) D．基因結(jié)構(gòu) 7．科學家將動物體內(nèi)的能夠合成胰島素的基因與大腸桿菌的DNA分子重組，并且在大腸桿菌體內(nèi)表達成功。請據(jù)圖回答問題： (1)圖中①DNA是以________為模板，________形

18、成單鏈DNA，在酶的作用下合成雙鏈DNA，從而獲得了所需要的基因。 (2)圖中②代表的是____________，在它的作用下將質(zhì)粒(________DNA)切出________末端。 (3)圖中④表示將________________。⑤表示________DNA隨大腸桿菌的繁殖而進行________。 (4)采用蛋白質(zhì)工程可以對胰島素進行改造，使之起效時間縮短，保證餐后血糖高峰和血液中胰島素高峰一致。如果你是科研工作者，請寫出研制速效胰島素的思路。 (5)下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程說法不正確的是(　　) A．蛋白質(zhì)工程能將人抗體某些區(qū)段替代鼠單克隆抗體的區(qū)段，降低鼠單克隆

19、抗體免疫原性 B．蛋白質(zhì)工程可對酶的催化活性、底物專一性、抗氧化性、熱變性、堿變性等加以改變 C．理論上通過對關(guān)鍵氨基酸的置換與增刪是進行蛋白質(zhì)工程的唯一方法 D．蛋白質(zhì)工程的崛起主要是工業(yè)生產(chǎn)和基礎(chǔ)理論研究的需要 題組三　綜合題 8．(2011·安徽理綜，31Ⅱ)家蠶細胞具有高效表達外源基因的能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可提取干擾素用于制藥。 (1)進行轉(zhuǎn)基因操作前，需用________酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細胞。 (2)為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的____________和______

20、____之間。 (3)采用PCR技術(shù)可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導入家蠶細胞。該PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)包含：擴增緩沖液(含Mg2＋)、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、_________________和____________________________。 (4)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細胞時，貼壁生長的細胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以________________________增加培養(yǎng)的細胞數(shù)量，也有利于空氣交換。 9．干擾素是病毒侵入人體后由淋巴細胞產(chǎn)生的一種免疫活性物質(zhì)，它具有廣譜抗病毒的作用。利用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)干擾素的流程如下：

21、 (1)過程①產(chǎn)生的物質(zhì)A是______，cDNA文庫______(大于/小于)人的基因組文庫。 (2)過程④用到的工具酶是______________，過程⑤需先用____________________處理受體細胞，過程⑥通常采用________技術(shù)。 (3)過程⑧和⑨的關(guān)鍵技術(shù)分別是________、________。 (4)基因工程的核心步驟是圖中的________________(填標號)。 學案49　基因工程 課前準備區(qū) 一、基因拼接　DNA重組　修飾改造　定向 二、1.限制酶　核苷酸序列　核苷酸　磷酸二酯鍵　黏性末端　平末端 2．DNA片段　磷酸二酯鍵　3

22、.(1)質(zhì)?！?2)①自我復制?、谙拗泼盖懈钗稽c　③標記基因 三、1.(1)基因文庫　(2)PCR技術(shù)　(3)人工 2．基因表達載體　(1)目的　(2)標記　RNA聚合　終止　鑒別　篩選 3．(1)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化　花粉管通道　(2)顯微注射　(3)感受態(tài)　4.檢測　鑒定 課堂活動區(qū) 探究點一 1．按照人們的愿望，進行嚴格的設(shè)計，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型或生物產(chǎn)品，又叫DNA重組技術(shù)。 2．核苷酸　特定的位點　黏性末端　復制　保存　多　標記　目的　運載體　目的基因　黏性　磷酸二酯　DNA 探究示例1　B　[基因

23、工程是指按照人們的愿望，進行嚴格的設(shè)計，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，進而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。B細胞與腫瘤細胞融合，屬于細胞工程；用紫外線照射青霉菌，使其DNA發(fā)生改變，進而篩選出青霉素高產(chǎn)菌株，屬于人工誘變；自然界中天然存在的噬菌體自行感染細菌后其DNA整合到細菌DNA上，并沒有進行人為的加工，不屬于基因工程。] 探究點二 1．mRNA　PCR　基因組文庫　cDNA文庫　構(gòu)建基因表達載體　目的基因 2．DNA分子雜交技術(shù)　核酸分子　抗原—抗體　個體　侵染　感染 探究示例2　C　[大腸桿菌成功表達出腺苷酸脫氨酶，說明這些大腸桿

24、菌都至少含有一個重組質(zhì)粒，A項正確；作為載體的條件為至少含有一個或多個酶切位點，所以作為載體的質(zhì)粒至少含有一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點，B項正確；作為基因表達載體應(yīng)包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因四部分，但并不是每個酶切位點都至少插入一個ada，C項錯誤；由于這些目的基因成功表達，所以每個ada至少表達一個腺苷酸脫氨酶分子，D項正確。] 探究點三 病毒　真菌　除草劑　改良品質(zhì)　賴氨酸　外源生長激素　乳腺　腸乳糖酶　調(diào)節(jié)　抗原　復合型　遺傳性 探究示例3　A 探究點四 2．結(jié)構(gòu)　氨基酸　脫氧核苷酸　基因　轉(zhuǎn)錄　翻譯　氨基酸　分子設(shè)計 探究示例4　A　[蛋白質(zhì)工程以基因工程為

25、基礎(chǔ)，又稱為第二代基因工程。蛋白質(zhì)工程不僅能生產(chǎn)天然蛋白質(zhì)，還可以定向改造控制蛋白質(zhì)合成的相應(yīng)基因中的脫氧核苷酸序列或人工合成所需要的自然界原本不存在的基因片段，從而合成自然界中原本不存在的蛋白質(zhì)。] 構(gòu)建知識網(wǎng)絡(luò) DNA連接酶　基因表達載體　檢測　鑒定 課后練習區(qū) 1．B　[因為一種氨基酸可能對應(yīng)多種密碼子、真核生物體內(nèi)的基因含有內(nèi)含子等因素，導致逆轉(zhuǎn)錄合成的目的基因與原基因有較大的差異，所以人工合成的目的基因不能用于比目魚基因組測序，A選項錯誤；抗凍蛋白的11個氨基酸的重復序列重復次數(shù)越多，抗凍能力越強，并不是抗凍基因的編碼區(qū)重復次數(shù)越多抗凍能力越強，抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成

26、的新基因已不是原來的抗凍基因，因此不能得到抗凍性增強的抗凍蛋白，B選項正確；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胫参锛毎淖畛Ｓ梅椒ǎ皇菫榱撕Y選含有標記基因的質(zhì)粒，C選項錯誤；應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測轉(zhuǎn)基因植物中目的基因的存在，但不能完成對目的基因表達的檢測，D選項錯誤。] 2．C　[限制酶可在特定位點對DNA分子進行切割；DNA聚合酶在DNA分子復制時將脫氧核苷酸連接成脫氧核苷酸鏈；DNA連接酶可將限制酶切開的磷酸二酯鍵連接在一起；解旋酶的作用是將DNA雙鏈解開螺旋，為復制或轉(zhuǎn)錄提供模板。] 3．ACD　[基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因為標記基因；質(zhì)粒是基因工程常用的運載體；通常用同一種限制

27、酶切割目的基因和運載體，以獲得相同的黏性末端；受體細胞可以是受精卵，也可以是體細胞。] 4．A　[基因工程是通過對基因的操作，將符合人們需要的目的基因?qū)脒m宜的生物體，使其高效表達，從中提取所需的基因控制合成的蛋白質(zhì)，或表現(xiàn)某種性狀，蛋白質(zhì)產(chǎn)品仍然為天然存在蛋白質(zhì)，而蛋白質(zhì)工程卻是對控制蛋白質(zhì)合成的基因進行改造，從而實現(xiàn)對其編碼的蛋白質(zhì)的改變，所得到的已不是天然的蛋白質(zhì)。題目中的操作中涉及的基因顯然不再是原來的基因，其合成的β－干擾素也不是天然β－干擾素，而是經(jīng)過改造的，是具人類所需優(yōu)點的蛋白質(zhì)，因而整個過程利用的生物技術(shù)為蛋白質(zhì)工程。] 5．D　[轉(zhuǎn)基因植物的培育中轉(zhuǎn)入外源基因常用農(nóng)桿菌

28、轉(zhuǎn)化法、基因槍法等；由于每種氨基酸可由不同的密碼子決定，因此，用氨基酸序列推測合成的目的基因與原基因的編碼區(qū)中的外顯子不一定相同；DNA探針能檢測飲用水中的病毒，由于作用原理是DNA分子雜交，因此對重金屬無效；運載體有多種限制酶切點以便與外源基因結(jié)合，一種限制酶只有一個切點，才能確保結(jié)合的精確。] 6．D　[蛋白質(zhì)工程是通過基因定點誘變或重組DNA技術(shù)改造基因，以定向改造天然蛋白質(zhì)或創(chuàng)造新蛋白質(zhì)的過程。] 7．(1)原胰島素mRNA　逆轉(zhuǎn)錄　(2)特定的限制性核酸內(nèi)切酶　環(huán)狀　黏性　(3)目的基因?qū)胧荏w細胞　重組　擴增　(4)確定蛋白質(zhì)的功能→蛋白質(zhì)應(yīng)有的高級結(jié)構(gòu)→蛋白質(zhì)應(yīng)具備的折疊狀態(tài)

29、→應(yīng)有的氨基酸序列→應(yīng)有的堿基排列　(5)C 8．(1)胰蛋白(或膠原蛋白)　(2)啟動子　終止子 (3)對干擾素基因特異的DNA引物對　TaqDNA聚合酶 (4)擴大細胞貼壁生長的附著面積 解析　(1)為了將動物組織分散并得到單個細胞，可以用胰蛋白酶處理動物細胞。(2)在基因工程中，構(gòu)建表達載體時，需要將目的基因插入啟動子和終止子之間，以使目的基因得到高效表達。(3)PCR過程模擬的是細胞內(nèi)DNA分子的復制過程，需要模板、原料、能量、酶(DNA聚合酶)、適宜的溫度和酸堿度等，同時需要加入設(shè)計好的引物。(4)為了防止發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象而放入小玻璃珠可以增加細胞貼壁生長的附著面積，同時珠內(nèi)中空，有利于空氣交換。 9．(1)mRNA　小于　(2)限制酶和DNA連接酶　Ca2＋　顯微注射　(3)胚胎移植　細胞核移植　(4)④ 解析　(1)cDNA來自mRNA的逆轉(zhuǎn)錄或根據(jù)mRNA的堿基序列人工合成，cDNA文庫小于基因組文庫。(2)構(gòu)建基因表達載體用到限制酶和DNA連接酶。將目的基因?qū)氪竽c桿菌須用Ca2＋處理受體細胞；導入動物細胞用顯微注射法。(3)過程⑧的關(guān)鍵技術(shù)是胚胎移植，過程⑨的關(guān)鍵技術(shù)是細胞核移植。(4)基因工程的核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建，即④。 10