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1、第三節(jié) 遺傳信息的傳遞
學習目標
重點難點
1.能記住DNA復制的概念。
2.能說出DNA復制的過程。
3.會用堿基互補配對原則分析DNA復制的特點。
重點:DNA復制的過程。
難點:DNA半保留復制的理解。
一、探究DNA的復制過程
1.材料:大腸桿菌。
2.方法:放射性同位素示蹤法、離心技術(shù)。
3.結(jié)論:DNA復制是以半保留方式進行的。
二、DNA的復制
1.概念:產(chǎn)生兩個跟親代DNA完全相同的新DNA分子的過程。
2.時間:有絲分裂間期和減數(shù)第一次分裂前的間期。
3.DNA復制的過程
(1)解旋:在解旋酶作用下,DNA分子兩條鏈的配對堿基之間的
2、氫鍵斷裂,堿基暴露出來,形成兩條“模板鏈”(母鏈)。
(2)合成子鏈:以每一條母鏈為模板,在DNA聚合酶作用下,利用游離的4種脫氧核苷酸為原料,按照堿基互補配對原則,合成與母鏈互補的子鏈。
(3)形成子代DNA:延伸子鏈,母子鏈盤繞成雙螺旋結(jié)構(gòu)。結(jié)果,一個DNA分子形成兩個完全相同的子代DNA分子。
4.復制的條件
模板:親代DNA解旋產(chǎn)生的兩條母鏈。
原料:游離的四種脫氧核苷酸。
酶:DNA解旋酶、DNA聚合酶。
能量:ATP。
5.復制的特點:半保留復制,即子代DNA雙鏈=一條母鏈+一條新子鏈。
6.意義:將遺傳信息從親代傳給子代,保持了遺傳信息的連續(xù)性。
7.DNA準
3、確復制的原因
(1)DNA具有獨特的雙螺旋結(jié)構(gòu),能為DNA復制提供精確的模板。
(2)堿基互補配對原則保證了復制的準確進行。
預習交流
在DNA復制過程中,保證復制準確無誤進行的關(guān)鍵步驟是( ?。?
A.解旋酶破壞氫鍵并使DNA雙鏈解開
B.游離的脫氧核苷酸與母鏈堿基互補配對
C.與模板鏈配對的脫氧核苷酸連接成子鏈
D.子鏈與模板鏈盤繞成雙螺旋結(jié)構(gòu)
答案:B
解析:在DNA復制過程中,有解旋、合成子鏈和螺旋化等過程,但是能保證復制得到的兩個DNA分子相同的機制是在復制過程中,嚴格按照堿基互補配對原則合成子鏈。
一、探究DNA的復制過程
1.探究DNA的復制用
4、什么方法?具體探究過程怎樣?
答案:同位素示蹤法。
具體探究過程是:
①用放射性同位素15N標記大腸桿菌的DNA。
②將被標記的大腸桿菌轉(zhuǎn)入以14NH4Cl為唯一氮源的培養(yǎng)液中培養(yǎng)。
③分別取完成一次細胞分裂和完成兩次細胞分裂的大腸桿菌,并將大腸桿菌中的DNA分子分離出來,進行密度梯度超速離心和分析。
2.用15N標記大腸桿菌的DNA,然后將標記15N的大腸桿菌轉(zhuǎn)移到含14N的培養(yǎng)基中培養(yǎng),子一代和子二代大腸桿菌的DNA中含15N的情況如何?
答案:子一代大腸桿菌的DNA中都含有15N,子二代大腸桿菌的DNA中一半含15N。結(jié)果如下圖:
在氮源為14N的培養(yǎng)基上生長的大
5、腸桿菌,其DNA分子均為14NDNA(對照);在氮源為15N的培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌,其DNA分子均為15NDNA(親代)。將親代大腸桿菌轉(zhuǎn)移到含14N的培養(yǎng)基上,再連續(xù)繁殖兩代(Ⅰ和Ⅱ),用某種離心方法分離得到的結(jié)果如下圖所示。
請分析:
(1)由實驗結(jié)果可推測第一代(Ⅰ)細菌DNA分子中一條鏈含________;另一條鏈含________。
(2)將第一代(Ⅰ)細菌轉(zhuǎn)移到含15N的培養(yǎng)基上繁殖一代,將所得到細菌的子DNA用同樣的方法分離,請參照圖甲,將DNA分子可能出現(xiàn)在試管中的位置在圖乙中標出。
(3)若將15NDNA(親代)的大腸桿菌在14N培養(yǎng)基上連續(xù)復制3次,則所產(chǎn)生的
6、DNA中全含15N(重DNA)、一條鏈含15N(中DNA)及兩鏈均不含15N(輕DNA)的比例為______,在這些子DNA中,含15N的鏈占全部子DNA鏈的比例為________。
答案:(1)15N 14N
(2)如下圖
(3)0∶2∶6 1/8
解析:將15N-DNA(親代)的大腸桿菌轉(zhuǎn)移到含14N的培養(yǎng)基上,根據(jù)半保留復制,第一代(Ⅰ)細菌DNA分子中一條鏈含15N,另一條鏈含14N。將第一代(Ⅰ)細菌轉(zhuǎn)移到含15N的培養(yǎng)基上繁殖一代,所得到細菌的子DNA中1/2是中帶,1/2是重帶。若將15NDNA(親代)的大腸桿菌在14N培養(yǎng)基上連續(xù)復制3次,則所產(chǎn)生的8個DNA中有
7、0個全含15N(重DNA),有2個DNA一條鏈含15N(中DNA)以及6個DNA的兩鏈均不含15N(輕DNA)。
DNA半保留復制的實驗——氯化銫密度梯度離心實驗
(1)氯化銫密度梯度離心
氯化銫超速離心時,鹽離子由于受到強大的離心力而被拉向離心管底部,同時溶液中存在的擴散作用與離心力相對抗,使Cs+與Cl-分散在整個溶液中,CsCl經(jīng)過離心后,溶液達到一種平衡狀態(tài),擴散和沉淀的兩種相對力量保持平衡,形成一個連續(xù)的CsCl濃度梯度,溶液的密度在離心管底部最大,頂部最小。如果DNA分子溶解在CsCl中,它們會逐漸集中在一條狹窄的帶上,則DNA分子的密度恰好與那一點的CsCl密度相等。若
8、用同位素標記DNA分子,則使DNA的密度不同,然后利用DNA能吸收紫外線的特點,用光源照射,則在照相底版上就出現(xiàn)了DNA的不同位置。
(2)過程
(3)結(jié)果
注意:分裂多次的結(jié)果中其實還有兩條DNA單鏈為14N標記的,但因分裂多次,在整個DNA中含量很少,可以忽略。
二、DNA的復制
1.DNA復制發(fā)生在什么時候?
答案:DNA復制發(fā)生在有絲分裂間期或減數(shù)第一次分裂前的間期。
2.DNA復制的方式是什么?
答案:DNA復制的方式是半保留方式,即子代DNA的兩條鏈有一條鏈來自親代DNA。
3.DNA復制遵循什么原則?
答案:堿基互補配對原則。
4.DNA復制的原
9、料是什么?
答案:四種脫氧核苷酸,即腺嘌呤脫氧核苷酸、鳥嘌呤脫氧核苷酸、胞嘧啶脫氧核苷酸和胸腺嘧啶脫氧核苷酸。
5.DNA復制的模板來自哪里?
答案:DNA復制的模板是親代DNA的兩條鏈。
6.DNA復制需要哪些酶直接參與?
答案:①解旋酶:斷裂DNA兩條鏈之間的氫鍵。
②DNA聚合酶:連接單個脫氧核苷酸成為長鏈。
7.DNA復制是個耗能的過程,能量由什么直接提供?
答案:ATP。
下圖所示為DNA分子復制的片段,圖中a、b、c、d表示各條脫氧核苷酸鏈。一般的說,下列各項正確的是( ?。?。
A.a(chǎn)和c的堿基序列互補
B.b和c的堿基序列相同
C.a(chǎn)鏈中(A+T)
10、/(G+C)的比值與b鏈中同項比值不同
D.a(chǎn)鏈中(A+T)/(G+C)的比值與c鏈中同項比值相同
答案:D
解析:本題考查DNA分子復制的特點,即半保留復制。在a、b、c、d四條脫氧核苷酸鏈中,其中a和b、d的堿基互補,d和a、c的堿基互補,b和d、a和c的堿基序列相同。在雙鏈DNA分子中A=T、G=C,則一條鏈中的(A+T)或(G+C)與互補鏈中的(A+T)或(G+C)相同,則a鏈中(A+T)/(G+C)的比值與b鏈中同項比值相同,與c鏈中同項比值也相同。
1.DNA復制的計算
DNA在自我復制過程中,最鮮明的特點就是半保留復制。一個DNA分子無論復制多少代,這個DNA的兩條
11、鏈不變,一直作為模板,分別進入兩個子代DNA分子中。關(guān)于這方面的計算,可按下表進行。
已知某全部N原子被15N標記的DNA分子(0代),轉(zhuǎn)移到含14N的培養(yǎng)基中培養(yǎng)(復制)若干代,其結(jié)果分析如下表:
世代
DNA分子的特點
DNA分子中脫氧核苷酸鏈的特點
分子總數(shù)
細胞中的DNA分子在離心管中的位置
不同DNA分子占全部DNA分子之比
鏈總數(shù)
不同脫氧核苷酸鏈占全部鏈的比例
只含15N的分子
含14N15N的分子
只含14N的分子
含15N的鏈
含14N的鏈
0
1
全在下部
1
0
0
2
1
0
1
2
全在中部
0
1
0
4
12、
2
4
中部,上部
0
8
3
8
中部,上部
0
16
n
2n
中部,1-上部
0
或
1-
2n+1
1-
2.DNA分子復制前后某種堿基數(shù)量的計算
若某DNA分子含某堿基x個,則該DNA分子進行n次復制,需含該堿基的脫氧核苷酸分子數(shù)=互補的堿基的脫氧核苷酸分子數(shù)=(2n-1)x。若計算第n次需該堿基多少個,其公式應為(2n-1)x個。
1.下列關(guān)于DNA復制的敘述,正確的是( ?。?。
A.在細胞有絲分裂間期,發(fā)生DNA復制
B.DNA通過一次復制后產(chǎn)生四個DNA分子
C.DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)全部
13、解鏈后,開始DNA的復制
D.單個脫氧核苷酸在DNA水解酶的作用下連接合成新的子鏈
答案:A
解析:DNA分子的復制發(fā)生在細胞有絲分裂的間期和減數(shù)第一次分裂前的間期,是以親代DNA的兩條鏈為模板,合成兩個子代DNA分子的過程。DNA復制過程需要解旋酶和DNA聚合酶,不需要DNA水解酶。DNA是邊解旋邊復制,而不是雙螺旋全部解鏈后才開始DNA的復制。
2.某DNA分子中含有1 000個堿基對(P元素只含32P)。若將DNA分子放在只含31P的脫氧核苷酸的培養(yǎng)液中讓其復制3次,則子代DNA的相對分子質(zhì)量平均比親代DNA減少( )。
A.1 000 B.1 500 C.1 7
14、50 D.無法確定
答案:C
解析:1個DNA分子復制3次則生成8個DNA分子。其中6個DNA分子全為31P,另2個DNA分子一條鏈含31P,另一條鏈含32P,所以相對分子質(zhì)量平均比親代減少=1 750。
3.先用同位素14C標記一個DNA分子,然后加入含有12C的游離的脫氧核苷酸,在適宜的條件下經(jīng)過n次復制后,所得DNA分子中含有12C的脫氧核苷酸單鏈數(shù)與含14C的脫氧核苷酸單鏈數(shù)之比是( )。
A.2n∶1 B.(2n-2)∶n
C.(2n-1)∶2 D.(2n-1)∶1
答案:D
解析:1個DNA分子復制n次后,形成2n個DNA分子。其中2n-
15、2個DNA全部為12C。另2個DNA分子一條鏈含14C,另一條鏈含12C,故含12C的脫氧核苷酸鏈與含14C的脫氧核苷酸鏈數(shù)之比為(2n-1)∶1。
4.實驗室模擬生物體DNA復制必需的一組條件是( ?。?。
①酶?、谟坞x的脫氧核苷酸?、跘TP?、蹹NA分子?、輒RNA?、捱m宜的酸堿度 ⑦適宜溫度?、鄑RNA
A.①②③④⑤⑧ B.②③④⑤⑦⑧
C.②③④⑤⑥⑦ D.①②③④⑥⑦
答案:D
解析:DNA的復制過程是重要的生理過程,離不開酶和能量,還需要DNA作為模板、游離的脫氧核苷酸等基本條件,而酶的作用受溫度、酸堿度的影響。
5.某個DNA片段由500對堿基組
16、成,A+T占堿基總數(shù)的34%,若該DNA片段復制2次,共需游離的胞嘧啶脫氧核苷酸分子個數(shù)為( ?。?。
A.330 B.660
C.990 D.1 320
答案:C
解析:根據(jù)題干中的數(shù)據(jù),可以計算出胞嘧啶(C)為C=1 000×(1-34%)×=330個,該DNA分子復制2次需游離C為330×(22-1)=990個。
6.下圖是DNA復制圖解,請據(jù)圖回答問題。
(1)DNA復制的時期是________________________。
(2)DNA準確復制的結(jié)構(gòu)基礎是__________________和__________________。
(
17、3)一個有15N標記的DNA分子,放在沒有標記的環(huán)境中培養(yǎng),復制三次后標記的DNA分子占DNA分子總數(shù)的________,標記的鏈占全部DNA單鏈的________。
(4)一個DNA分子復制完畢后,新形成的DNA分子的子鏈________。
A.是DNA母鏈的片段
B.和DNA母鏈之一完全相同
C.和DNA母鏈相同,但T被U所取代
D.和DNA母鏈稍有不同
(5)由(4)題可見,DNA分子復制又稱為________復制。
答案:(1)有絲分裂的間期和減數(shù)第一次分裂前的間期
(2)獨特的雙螺旋結(jié)構(gòu) 堿基互補配對原則
(3)
(4)B
(5)半保留
6