高中生物 專題2課題1 微生物的實驗室培養(yǎng)精講導學課件 新人教版選修1

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1、專題2微生物的培養(yǎng)與應用課題1微生物的實驗室培養(yǎng)一、培養(yǎng)基一、培養(yǎng)基1.1.概念概念: :人們按照微生物對人們按照微生物對_的不同需求的不同需求, ,配制出供其配制出供其_的營養(yǎng)物質(zhì)。的營養(yǎng)物質(zhì)。2.2.種類種類: :營養(yǎng)物質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì)生長繁殖生長繁殖液體液體瓊脂瓊脂3.3.營養(yǎng)組成營養(yǎng)組成: :各種培養(yǎng)基一般都含有各種培養(yǎng)基一般都含有_、_(_(提供碳元素的提供碳元素的物質(zhì)物質(zhì)) )、_(_(提供氮元素的物質(zhì)提供氮元素的物質(zhì)) )和無機鹽和無機鹽, ,此外還需要滿足此外還需要滿足微生物生長對微生物生長對_、特殊營養(yǎng)物質(zhì)、特殊營養(yǎng)物質(zhì)( (如維生素、氨基酸和堿基等如維生素、氨基酸和堿基等) )以

2、及以及_的要求。的要求。水水碳源碳源氮源氮源pHpH氧氣氧氣二、無菌技術二、無菌技術1.1.關鍵關鍵: :防止防止_的入侵。的入侵。 外來雜菌外來雜菌2.2.消毒和滅菌消毒和滅菌: :比較項目比較項目消毒消毒滅菌滅菌理化因素理化因素的作用強的作用強度度較為溫和較為溫和_消滅微生消滅微生物的數(shù)量物的數(shù)量物體物體_的部的部分微生物分微生物物體內(nèi)外所有的微生物物體內(nèi)外所有的微生物芽孢和孢芽孢和孢子能否被子能否被消滅消滅不能不能_表面或內(nèi)部表面或內(nèi)部強烈強烈能能比較項目比較項目消毒消毒滅菌滅菌適用對象適用對象操作空間、液體、雙操作空間、液體、雙手手接種環(huán)、接種針、玻璃接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

3、器皿、培養(yǎng)基等常用方法常用方法煮沸消毒法、煮沸消毒法、_、化學藥劑消毒、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法法、紫外線消毒法_、干熱滅、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌菌、高壓蒸汽滅菌巴氏消巴氏消毒法毒法灼燒滅菌灼燒滅菌三、大腸桿菌的純化培養(yǎng)三、大腸桿菌的純化培養(yǎng)1.1.制備培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基: :(1)(1)最常用的細菌培養(yǎng)基最常用的細菌培養(yǎng)基:_:_。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(2)(2)配制步驟配制步驟: :配方配方黏稠黏稠稱量紙稱量紙迅速迅速瓊脂瓊脂瓊脂糊底瓊脂糊底燒杯破裂燒杯破裂高壓蒸汽高壓蒸汽干熱干熱5050酒精燈火焰酒精燈火焰2.2.純化大腸桿菌純化大腸桿菌: :(1)(1)純化培養(yǎng)方法純

4、化培養(yǎng)方法: :在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上純化大腸桿菌在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上純化大腸桿菌, ,最最常用的方法有常用的方法有_法和法和_法。法。(2)(2)純化培養(yǎng)的原理純化培養(yǎng)的原理: :想方設法在培養(yǎng)基上得到由一個細胞繁殖想方設法在培養(yǎng)基上得到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的而來的肉眼可見的_,_,即獲得較純的菌種。即獲得較純的菌種。平板劃線平板劃線稀釋涂布平板稀釋涂布平板菌落菌落(3)(3)平板劃線法平板劃線法: :通過通過_在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)_的操作的操作, ,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。其具體將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。其具體操作是操作是

5、: :將將_放在火焰上灼燒放在火焰上灼燒, ,直到接種環(huán)燒紅。直到接種環(huán)燒紅。在火焰旁冷卻在火焰旁冷卻_,_,并打開棉塞。并打開棉塞。將試管口通過將試管口通過_。將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中, ,沾取一環(huán)菌液。沾取一環(huán)菌液。將試管口通過火焰將試管口通過火焰, ,并塞上棉塞。并塞上棉塞。接種環(huán)接種環(huán)劃線劃線接種環(huán)接種環(huán)接種環(huán)接種環(huán)火焰火焰左手將皿蓋打開一條縫隙左手將皿蓋打開一條縫隙, ,右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)入平板內(nèi), ,劃三至五條劃三至五條_線線, ,蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)基。基。灼燒灼燒_,_,待

6、其冷卻后待其冷卻后, ,從第一區(qū)域劃線的末端開始往第從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復以上操作二區(qū)域內(nèi)劃線。重復以上操作, ,在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。將平板將平板_,_,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。平行平行接種環(huán)接種環(huán)倒置倒置(4)(4)稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法: :將菌液進行一系列的梯度將菌液進行一系列的梯度_,_,然后將不然后將不同稀釋度的菌液分別同稀釋度的菌液分別_到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面, ,進行培養(yǎng)。進行培養(yǎng)。其操作步驟是其操作步驟是: :系

7、列稀釋系列稀釋( (梯度稀釋梯度稀釋) )操作操作: :稀釋稀釋涂布涂布涂布平板操作涂布平板操作: :a.a.將涂布器浸在盛有將涂布器浸在盛有_的燒杯中。的燒杯中。b.b.取少量菌液取少量菌液( (不超過不超過0.1 mL0.1 mL),),滴加到培養(yǎng)基滴加到培養(yǎng)基_。c.c.將沾有少量將沾有少量_的涂布器在火焰上引燃的涂布器在火焰上引燃, ,待酒精燃盡后待酒精燃盡后, ,冷冷卻卻8 s8 s10 s10 s。d.d.用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布時可轉(zhuǎn)動培用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布時可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿養(yǎng)皿, ,使菌液分布均勻。使菌液分布均勻。 酒精酒精表面表面酒精酒精四

8、、菌種的保藏四、菌種的保藏臨時保藏法臨時保藏法甘油管藏法甘油管藏法適用適用對象對象_使用的菌種使用的菌種_保存的菌種保存的菌種培養(yǎng)基培養(yǎng)基類型類型_培養(yǎng)基培養(yǎng)基_培養(yǎng)基培養(yǎng)基溫度溫度44-20-20頻繁頻繁長期長期固體斜面固體斜面液體液體臨時保藏法臨時保藏法甘油管藏法甘油管藏法方法方法菌落長成后放入冰箱中菌落長成后放入冰箱中保存保存, ,以后每以后每3 36 6個月將個月將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上移到新鮮的培養(yǎng)基上將培養(yǎng)的菌液與等體積將培養(yǎng)的菌液與等體積滅菌后的滅菌后的_混合均混合均勻后放在冷凍箱內(nèi)保存勻后放在冷凍箱內(nèi)保存缺點缺點菌種易被污染或菌種易被污染或_

9、甘油甘油產(chǎn)生變異產(chǎn)生變異【思考辨析【思考辨析】1.1.判斷正誤判斷正誤(1)(1)平板劃線操作中平板劃線操作中, ,接種結束后灼燒接種環(huán)的目的是殺死接接種結束后灼燒接種環(huán)的目的是殺死接種環(huán)上原有的微生物。種環(huán)上原有的微生物。( ( ) )【分析【分析】接種結束后灼燒接種環(huán)的目的是及時殺死接種環(huán)上接種結束后灼燒接種環(huán)的目的是及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種殘留的菌種, ,避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。(2)(2)在稀釋涂布平板法操作中吸管要在酒精燈火焰周圍使用。在稀釋涂布平板法操作中吸管要在酒精燈火焰周圍使用。 ( ( ) )(3)(3)平板劃線時平板劃線時, ,在第一次

10、劃線后在第一次劃線后, ,每次劃線都要從上一次劃每次劃線都要從上一次劃線的末端開始。線的末端開始。( ( ) )(4)(4)消毒和滅菌實質(zhì)上是相同的。消毒和滅菌實質(zhì)上是相同的。( ( ) )【分析【分析】消毒使用較溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內(nèi)消毒使用較溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物部的部分微生物, ,不包括芽孢和孢子不包括芽孢和孢子; ;滅菌使用強烈的理化因素滅菌使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物殺死物體內(nèi)外所有的微生物, ,包括芽孢和孢子。包括芽孢和孢子。2.2.問題思考問題思考(1)(1)在配制培養(yǎng)基時在配制培養(yǎng)基時, ,各組分溶化以后是否立即進行滅菌各

11、組分溶化以后是否立即進行滅菌? ?為什為什么么? ?提示：提示：不是。由于不同的微生物生長對不是。由于不同的微生物生長對pHpH的需求不同的需求不同, ,所以在所以在培養(yǎng)基各組分溶化后需要先用酸或堿將培養(yǎng)基各組分溶化后需要先用酸或堿將pHpH調(diào)至微生物生長的最調(diào)至微生物生長的最適宜條件適宜條件, ,再進行滅菌處理。再進行滅菌處理。(2)(2)倒平板時為何將滅過菌的培養(yǎng)皿放在酒精燈的火焰旁倒平板時為何將滅過菌的培養(yǎng)皿放在酒精燈的火焰旁? ?提示：提示：避免周圍環(huán)境中微生物的污染。避免周圍環(huán)境中微生物的污染。一、制備培養(yǎng)基一、制備培養(yǎng)基1.1.配制原則配制原則: :(1)(1)目的明確目的明確:

12、:不同微生物需求不同不同微生物需求不同, ,根據(jù)培養(yǎng)目的進行配制。根據(jù)培養(yǎng)目的進行配制。(2)(2)營養(yǎng)要協(xié)調(diào)營養(yǎng)要協(xié)調(diào): :營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例要適宜。營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例要適宜。(3)pH(3)pH要適宜要適宜: :為維持為維持pHpH的相對恒定的相對恒定, ,可在培養(yǎng)基中加入緩沖劑可在培養(yǎng)基中加入緩沖劑, ,常用磷酸氫二鉀或磷酸二氫鉀。常用磷酸氫二鉀或磷酸二氫鉀。2.2.培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分及功能培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分及功能: :營養(yǎng)營養(yǎng)成分成分功能功能主要來源主要來源碳源碳源能為微生物的代謝提能為微生物的代謝提供碳元素的物質(zhì)供碳元素的物質(zhì)無機碳源無機碳源:CO:CO2 2、NaHCONaHCO3

13、 3等等; ;有機碳源有機碳源: :糖類、蛋白質(zhì)、糖類、蛋白質(zhì)、脂肪、花生餅、石油等脂肪、花生餅、石油等氮源氮源能為微生物的代謝提能為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì)供氮元素的物質(zhì)無機氮源無機氮源:N:N2 2、NHNH3 3、 、 ; ;有機氮源有機氮源: :蛋白胨、尿素、蛋白胨、尿素、蛋白質(zhì)等蛋白質(zhì)等 3NO4NH營養(yǎng)營養(yǎng)成分成分功能功能主要來源主要來源生長生長因子因子生長必不可少的微生長必不可少的微量有機物量有機物維生素、氨基酸、堿基等維生素、氨基酸、堿基等水水在生物體內(nèi)含量很在生物體內(nèi)含量很高高, ,在低等生物體內(nèi)在低等生物體內(nèi)含量更高含量更高外界攝入外界攝入無機鹽無機鹽為微生物提供碳、為

14、微生物提供碳、氮元素以外的各種氮元素以外的各種重要元素重要元素, ,包括某些包括某些大量元素大量元素無機化合物無機化合物【易錯提醒【易錯提醒】有關培養(yǎng)微生物所需營養(yǎng)的幾點提醒有關培養(yǎng)微生物所需營養(yǎng)的幾點提醒(1)(1)不同微生物對營養(yǎng)的需求不同不同微生物對營養(yǎng)的需求不同, ,所以培養(yǎng)不同的微生物所需所以培養(yǎng)不同的微生物所需要的營養(yǎng)可能不同。要的營養(yǎng)可能不同。(2)(2)對異養(yǎng)微生物來說對異養(yǎng)微生物來說, ,含含C C、H H、O O、N N的化合物既是碳源又是氮的化合物既是碳源又是氮源、能源。源、能源。(3)(3)培養(yǎng)微生物時營養(yǎng)物質(zhì)要協(xié)調(diào)。營養(yǎng)物質(zhì)過少不能滿足微培養(yǎng)微生物時營養(yǎng)物質(zhì)要協(xié)調(diào)。營

15、養(yǎng)物質(zhì)過少不能滿足微生物的營養(yǎng)需要生物的營養(yǎng)需要, ,過多對微生物的生長有抑制作用。過多對微生物的生長有抑制作用。【典例訓練【典例訓練1 1】下表是某微生物培養(yǎng)基成分下表是某微生物培養(yǎng)基成分, ,請據(jù)此回答請據(jù)此回答: :編號編號成分成分含量含量粉狀硫粉狀硫10 g10 g(NH(NH4 4) )2 2SOSO4 40.4 g0.4 gK K2 2HPOHPO4 44.0 g4.0 gMgSOMgSO4 49.25 g9.25 gFeSOFeSO4 40.5 g0.5 gCaClCaCl2 20.5 g0.5 gH H2 2O O100 mL100 mL(1)(1)上表培養(yǎng)基可培養(yǎng)的微生物類型

16、是上表培養(yǎng)基可培養(yǎng)的微生物類型是_。(2)(2)若不慎將過量若不慎將過量NaClNaCl加入培養(yǎng)基中加入培養(yǎng)基中, ,如不想浪費此培養(yǎng)基如不想浪費此培養(yǎng)基, ,可可再加入再加入, ,用于培養(yǎng)用于培養(yǎng)_。(3)(3)若除去成分若除去成分, ,加入加入(CH(CH2 2O),O),該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)。(4)(4)表中營養(yǎng)成分共有表中營養(yǎng)成分共有類。類。(5)(5)不論何種培養(yǎng)基不論何種培養(yǎng)基, ,在各種成分都溶化后分裝前在各種成分都溶化后分裝前, ,要進行的是要進行的是。(6)(6)上表中各成分質(zhì)量確定的原則是上表中各成分質(zhì)量確定的原則是。(7)(7)若上表培養(yǎng)基用于菌種鑒定若上

17、表培養(yǎng)基用于菌種鑒定, ,應該增加的成分是應該增加的成分是?！窘忸}關鍵【解題關鍵】判斷微生物的代謝類型依據(jù)培養(yǎng)基中有無有機碳判斷微生物的代謝類型依據(jù)培養(yǎng)基中有無有機碳源源; ;根據(jù)培養(yǎng)基提供的主要營養(yǎng)成分分析表格中的培養(yǎng)基成分根據(jù)培養(yǎng)基提供的主要營養(yǎng)成分分析表格中的培養(yǎng)基成分, ,培養(yǎng)及配制的原則是目的明確、營養(yǎng)協(xié)調(diào)、培養(yǎng)及配制的原則是目的明確、營養(yǎng)協(xié)調(diào)、pHpH適宜。適宜?！窘馕觥窘馕觥款}表中的營養(yǎng)物質(zhì)有水、無機鹽、氮源三類題表中的營養(yǎng)物質(zhì)有水、無機鹽、氮源三類, ,缺乏碳缺乏碳源和特殊營養(yǎng)物質(zhì)。該培養(yǎng)基中沒有碳源源和特殊營養(yǎng)物質(zhì)。該培養(yǎng)基中沒有碳源, ,說明培養(yǎng)的微生物說明培養(yǎng)的微生物是從

18、空氣中獲得碳源的是從空氣中獲得碳源的, ,即可判斷培養(yǎng)的微生物就是自養(yǎng)型微即可判斷培養(yǎng)的微生物就是自養(yǎng)型微生物。該培養(yǎng)基中加入了過量食鹽生物。該培養(yǎng)基中加入了過量食鹽, ,就可以培養(yǎng)耐鹽的金黃色就可以培養(yǎng)耐鹽的金黃色葡萄球菌葡萄球菌, ,但金黃色葡萄球菌是異養(yǎng)型微生物但金黃色葡萄球菌是異養(yǎng)型微生物, ,這個培養(yǎng)基還需這個培養(yǎng)基還需要加入有機碳源。該培養(yǎng)基若加入要加入有機碳源。該培養(yǎng)基若加入(CH(CH2 2O),O),培養(yǎng)基中就有了碳培養(yǎng)基中就有了碳源源, ,但除去成分但除去成分, ,卻使培養(yǎng)基中沒有了氮源卻使培養(yǎng)基中沒有了氮源, ,這時就只能用于這時就只能用于培養(yǎng)固氮微生物了。微生物生長需要

19、一定的培養(yǎng)固氮微生物了。微生物生長需要一定的pH,pH,所以培養(yǎng)基裝所以培養(yǎng)基裝瓶前需要調(diào)節(jié)瓶前需要調(diào)節(jié)pHpH。表中各成分含量要根據(jù)微生物的生長需要來。表中各成分含量要根據(jù)微生物的生長需要來確定。對于菌種鑒定確定。對于菌種鑒定, ,往往用的是固體培養(yǎng)基往往用的是固體培養(yǎng)基, ,而表中沒有凝固而表中沒有凝固劑劑, ,故需要加入常見的凝固劑故需要加入常見的凝固劑瓊脂。瓊脂。答案：答案：(1)(1)自養(yǎng)型微生物自養(yǎng)型微生物 (2)(2)含碳有機物金黃色葡萄球菌含碳有機物金黃色葡萄球菌(3)(3)固氮微生物固氮微生物 (4)3 (5)(4)3 (5)調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)pHpH(6)(6)依微生物的生長需要確定

20、依微生物的生長需要確定 (7)(7)瓊脂瓊脂( (或凝固劑或凝固劑) )【變式訓練【變式訓練】下列敘述正確的是下列敘述正確的是( () )A.A.培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì)培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì)B.B.培養(yǎng)基只有兩類培養(yǎng)基只有兩類: :液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基C.C.固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基D.D.微生物在固體培養(yǎng)基上生長時微生物在固體培養(yǎng)基上生長時, ,可以形成肉眼可見的單個細可以形成肉眼可見的單個細菌菌【解析【解析】選選A A。培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需。培養(yǎng)基是人們按

21、照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求求, ,配制出的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基的種類根據(jù)劃配制出的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基的種類根據(jù)劃分依據(jù)的不同而不同分依據(jù)的不同而不同, ,如根據(jù)化學成分可分為天然培養(yǎng)基和合如根據(jù)化學成分可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基添加凝固劑而形成的成培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基添加凝固劑而形成的, ,其其他成分均相同。微生物形體微小他成分均相同。微生物形體微小, ,肉眼無法看到肉眼無法看到, ,必須借助儀器必須借助儀器才能看到才能看到, ,在固體培養(yǎng)基上用肉眼觀察到的是一個菌落。在固體培養(yǎng)基上用肉眼觀察到的是一個菌落。二、常見消毒與滅菌方法的比

22、較二、常見消毒與滅菌方法的比較內(nèi)內(nèi)容容種類種類主要方法主要方法應用范圍應用范圍區(qū)別區(qū)別滅滅菌菌灼燒滅灼燒滅菌法菌法酒精燈火焰灼燒酒精燈火焰灼燒微生物接種工具微生物接種工具, ,如如接種環(huán)、接種針或接種環(huán)、接種針或其他金屬用具等其他金屬用具等, ,接接種過程中試管口或種過程中試管口或瓶口等瓶口等強烈的理化因素強烈的理化因素, ,能殺死物體內(nèi)外能殺死物體內(nèi)外包括芽孢和孢子包括芽孢和孢子在內(nèi)的所有微生在內(nèi)的所有微生物物干熱滅干熱滅菌法菌法干熱滅菌箱干熱滅菌箱160160170170加熱加熱1 h1 h2 h2 h玻璃器皿玻璃器皿( (如吸管、如吸管、培養(yǎng)皿等培養(yǎng)皿等) )、金屬用、金屬用具等不適合用

23、其他具等不適合用其他方法滅菌而又能耐方法滅菌而又能耐高溫的物品高溫的物品高壓蒸高壓蒸汽滅菌汽滅菌法法一般壓力為一般壓力為100 kPa100 kPa, ,溫度為溫度為121,121,維持維持15 min15 min30 min30 min培養(yǎng)基等培養(yǎng)基等種類種類主要方法主要方法應用范圍應用范圍區(qū)別區(qū)別消消毒毒巴氏消巴氏消毒法毒法70707575煮煮30 min30 min或或8080煮煮15 min15 min牛奶、啤酒、果酒和醬牛奶、啤酒、果酒和醬油等不宜進行高溫滅菌油等不宜進行高溫滅菌的液體的液體溫和的物溫和的物理、化學理、化學方法方法, ,殺死殺死表面微生表面微生物營養(yǎng)體物營養(yǎng)體或抑制營

24、或抑制營養(yǎng)體繁殖養(yǎng)體繁殖, ,是部分滅是部分滅菌菌煮沸消煮沸消毒法毒法100100煮沸煮沸5 min5 min6 min(15 min6 min(15 min30 min30 min水蒸氣水蒸氣) )日常食品、罐裝食品日常食品、罐裝食品紫外線紫外線消毒法消毒法紫外線照射紫外線照射30 min30 min接種室、接種箱、超凈接種室、接種箱、超凈工作臺工作臺化學藥化學藥劑消毒劑消毒法法用體積分數(shù)為用體積分數(shù)為70%70%75%75%的乙醇、碘酒涂抹的乙醇、碘酒涂抹, ,來來蘇水噴灑等蘇水噴灑等用于皮膚、傷口、動植用于皮膚、傷口、動植物組織表面消毒物組織表面消毒, ,空氣、空氣、手術器械、塑料或玻璃

25、手術器械、塑料或玻璃器皿消毒等器皿消毒等【思維拓展【思維拓展】(1)(1)酒精消毒時酒精消毒時,70%,70%的酒精殺菌效果最好。原因的酒精殺菌效果最好。原因是濃度過高是濃度過高, ,菌體表面蛋白質(zhì)變性過快從而凝固成一層保護膜菌體表面蛋白質(zhì)變性過快從而凝固成一層保護膜, ,乙醇分子不能滲入其中乙醇分子不能滲入其中; ;濃度過低濃度過低, ,殺菌能力減弱。殺菌能力減弱。(2)(2)具體選擇消毒還是滅菌需要考慮具體選擇消毒還是滅菌需要考慮: :一是要考慮效果一是要考慮效果, ,滅菌的滅菌的效果比消毒要好效果比消毒要好; ;二是要考慮操作對象的承受能力二是要考慮操作對象的承受能力, ,活體生物材活體

26、生物材料、操作者的手等只能采用消毒料、操作者的手等只能采用消毒, ,而不能滅菌。而不能滅菌?！镜淅柧殹镜淅柧? 2】細菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、細菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理火焰灼燒等幾種不同的處理, ,這些方法依次用于殺滅哪些部位這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌的雜菌( () )A.A.接種針、手、培養(yǎng)基接種針、手、培養(yǎng)基 B.B.高壓鍋、手、接種針高壓鍋、手、接種針C.C.培養(yǎng)基、手、接種針培養(yǎng)基、手、接種針 D.D.接種針、手、接種環(huán)接種針、手、接種環(huán)【解題關鍵【解題關鍵】解決該題需明確解決該題需明確: :消毒消毒殺死部分微生物殺死部分

27、微生物; ;滅菌滅菌殺死所有微生物。二者采用的方法、程度不同決定了它們的適殺死所有微生物。二者采用的方法、程度不同決定了它們的適用范圍不同。用范圍不同。【解析【解析】選選C C。本題考查學生對無菌技術的掌握。高壓蒸汽滅。本題考查學生對無菌技術的掌握。高壓蒸汽滅菌鍋是滅菌的一個設備菌鍋是滅菌的一個設備, ,通常用于培養(yǎng)基的滅菌。用酒精擦拭通常用于培養(yǎng)基的滅菌。用酒精擦拭雙手是消毒的一種方法。火焰灼燒雙手是消毒的一種方法?；鹧孀茻? ,可以迅速徹底地滅菌可以迅速徹底地滅菌, ,適用適用于微生物的接種工具于微生物的接種工具, ,如接種針、接種環(huán)。如接種針、接種環(huán)。三、純化大腸桿菌操作過程中的注意事項

28、三、純化大腸桿菌操作過程中的注意事項1.1.平板劃線法中幾次灼燒接種環(huán)的目的平板劃線法中幾次灼燒接種環(huán)的目的: :灼燒時期灼燒時期目的目的取菌種前取菌種前殺死接種環(huán)上原有微生物殺死接種環(huán)上原有微生物每次每次劃線前劃線前殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種, ,使下次使下次劃線的菌種直接來自于上次劃線末端劃線的菌種直接來自于上次劃線末端, ,使每次使每次劃線菌種數(shù)目減少劃線菌種數(shù)目減少, ,達到分離菌株的目的達到分離菌株的目的接種接種結束后結束后殺死接種環(huán)上殘存的菌種殺死接種環(huán)上殘存的菌種, ,避免細菌污染環(huán)境避免細菌污染環(huán)境和感染操作者和感染操作者2.2.稀釋涂布平

29、板法操作比較復雜稀釋涂布平板法操作比較復雜, ,且各個細節(jié)均需保證無菌操且各個細節(jié)均需保證無菌操作作, ,應特別注意應特別注意: :(1)(1)酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要適宜。酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要適宜。(2)(2)吸管頭不要接觸其他任何物體。吸管頭不要接觸其他任何物體。(3)(3)吸管要在酒精燈火焰周圍使用。吸管要在酒精燈火焰周圍使用。(4)(4)涂布器末端浸在盛有涂布器末端浸在盛有70%70%酒精的燒杯中酒精的燒杯中, ,取出時取出時, ,要讓多余的要讓多余的酒精在燒杯中滴盡酒精在燒杯中滴盡, ,然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃焰上引燃, ,注意

30、防火。注意防火?！疽族e提醒【易錯提醒】(1)(1)在稀釋涂布平板操作中在稀釋涂布平板操作中, ,每個步驟都要注意無每個步驟都要注意無菌操作菌操作, ,以防培養(yǎng)基被污染以防培養(yǎng)基被污染, ,影響實驗效果。影響實驗效果。(2)(2)每一稀釋倍數(shù)菌液都至少要涂布三個平板每一稀釋倍數(shù)菌液都至少要涂布三個平板, ,作為實驗重復作為實驗重復, ,求平均值求平均值, ,若其中有菌落數(shù)與其他實驗差距懸殊者若其中有菌落數(shù)與其他實驗差距懸殊者, ,應舍棄該實應舍棄該實驗數(shù)據(jù)驗數(shù)據(jù), ,不進行統(tǒng)計、計算。不進行統(tǒng)計、計算。(3)(3)平板冷凝后平板冷凝后, ,皿蓋上會凝結成水珠皿蓋上會凝結成水珠, ,凝固后的培養(yǎng)基

31、表面的凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高濕度也比較高, ,將平板倒置將平板倒置, ,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)揮發(fā), ,又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染?！镜淅柧殹镜淅柧? 3】稀釋涂布平板法是微生物培養(yǎng)中的一種常用的稀釋涂布平板法是微生物培養(yǎng)中的一種常用的接種方法。下列相關敘述錯誤的是接種方法。下列相關敘述錯誤的是( () )A.A.操作中需要將菌液進行一系列的濃度梯度稀釋操作中需要將菌液進行一系列的濃度梯度稀釋B.B.需將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面需將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面C.C.不同濃度的菌液均可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落不同濃度的菌液均可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落D.D.操作過程中對培養(yǎng)基和涂布器等均需進行嚴格滅菌處理操作過程中對培養(yǎng)基和涂布器等均需進行嚴格滅菌處理【解題關鍵【解題關鍵】解答該題需明確菌落的定義中菌落的來源、梯度解答該題需明確菌落的定義中菌落的來源、梯度稀釋的目的以及防止雜菌污染的做法。稀釋的目的以及防止雜菌污染的做法?！窘馕觥窘馕觥窟x選C C。若菌液濃度過大。若菌液濃度過大, ,形成的菌落連在一起形成的菌落連在一起, ,得不到得不到單個的菌落。單個的菌落。