《動物的克隆》同步練習(xí)3

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1、 《動物的克隆》同步練習(xí) 知識點一 動物細胞培養(yǎng) 1.下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述,正確的是 ( ) A.培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞 B.克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細胞的基因型會發(fā)生改變 C.二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的 D.惡性細胞系的細胞可進行傳代培養(yǎng) 2.用動、植物成體的體細胞進行離體培養(yǎng),下列敘述正確的是 ( ) A.都需要用 CO2培養(yǎng)箱 B.都需要用液體培養(yǎng)基 C.都要在無菌條件下進行 D.都可體現(xiàn)細胞的全能性 知識點二  動物細胞融合 3.閱讀

2、下列材料: 材料一 由于細胞的密度不同, 在地面上受重力影響, 細胞的融合非常困難, 在太空進 行此實驗比在地面實驗的細胞融合率要高很多?!吧裰邸绷栵w船上進行了 B淋巴細胞和骨 髓瘤細胞的融合、 黃花煙草原生質(zhì)體和“革新”一號煙草原生質(zhì)體的融合兩個科學(xué)實驗, 在 電融合儀內(nèi)經(jīng)過 160 min 后,終于獲得成功。 材料二 如圖為哺乳動物生殖過程及相關(guān)細胞工程的示意圖,其中 b為卵細胞, c、 d為 體細胞。 根據(jù)以上材料回答: (1) 細胞融合技術(shù)與傳統(tǒng)

3、的有性雜交相比,其優(yōu)越性在于  ________________ 。在太空進 行細胞融合與在地面進行細胞融合相比,其優(yōu)越性在于 ________________________________________________________________________ 。 (2) 動物個體甲、乙的產(chǎn)生分別屬于哪種生殖? ________________________________________________________________

4、________ 。 (3) 在“神舟”六號飛船上進行的“太空融合”,與上圖中的方法 ________的原理相同。 (4) 人工誘導(dǎo)動物細胞融合與誘導(dǎo)植物細胞融合的方法相同的是都可用物理法和化學(xué)法,此外動物細胞融合還可用 ________________ 作為誘導(dǎo)劑。 4.下列有關(guān)動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中,不正確的是 ( ) A.誘導(dǎo)融合的方法不完全相同 B.所用的技術(shù)手段基本相同 C.所采用的原理基本相同 D.都能形成雜種細胞 基礎(chǔ)落實 1.在動物細胞培養(yǎng)過程中,使用胰蛋白酶的目的是 ( ) A.使動物

5、組織分散為單個細胞 B.去掉細胞壁,使其成為原生質(zhì)體 C.去掉細胞膜,暴露出原生質(zhì)體便于細胞融合 D.促進蛋白質(zhì)水解為多肽 2.動物細胞融合特有的誘導(dǎo)方法是 ( ) A. PEG B.滅活的病毒 C.電刺激 D.離心 3.在動物細胞培養(yǎng)中有部分細胞可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去,這種傳代細胞 稱為( ) A.原代培養(yǎng) B.傳代培養(yǎng) C.細胞株 D.細胞系 4.根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)劃分,植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)所常用的培養(yǎng)基分別是 ( ) A.固體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基 B.固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基 C.液體

6、培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基 D.液體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基 5.進行動物細胞培養(yǎng)時,最好選用的培養(yǎng)材料是 ( ) A.衰老退化的動物組織細胞 B.成熟動物個體的體細胞 C.動物的受精卵細胞 D.健康動物胚胎或幼齡動物個體的體細胞 6.下列不屬于動物細胞工程應(yīng)用的是 ( ) A.大規(guī)模生產(chǎn)干擾素,用于抵抗細菌產(chǎn)生的外毒素 B.為大面積燒傷的病人提供移植的皮膚細胞 C.大規(guī)模生產(chǎn)單克隆抗體 D.利用胚胎移植技術(shù),加快優(yōu)良種畜的繁殖 能力提升 7.動物細胞融合和植物原生質(zhì)體融合決定于 ( ) A.細胞膜的流動性

7、 B.細胞膜的選擇透過性 C.細胞質(zhì)的流動性 D.細胞質(zhì)中酶的活性 8.下列關(guān)于動物細胞融合的說法,錯誤的是 ( ) A.動物細胞融合也稱細胞雜交,是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程 B.動物細胞融合后形成的具有原本兩個或多個動物細胞遺傳信息的單核細胞稱為雜交 細胞 C.常用的誘導(dǎo)動物細胞融合的因素有:聚乙二醇、滅活的病毒、電激、紫外線照射等 D.細胞融合技術(shù)突破了有性雜交的局限,使遠緣雜交成為可能 9.下列有關(guān)酶的敘述正確的是 ( ) A.酶的基本組成單位是氨基酸和脫氧核糖核苷酸 B.酶通過為反應(yīng)物供能和降低活化

8、能來提高化學(xué)反應(yīng)速率 C.在動物細胞培養(yǎng)中,胰蛋白酶可將組織分散成單個細胞 D. DNA連接酶可連接 DNA雙鏈的氫鍵,使雙鏈延伸 10. 回答下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的問題: (1) 在動物細胞培養(yǎng)過程中,當(dāng)貼壁細胞分裂生長到細胞表面 ______________________ 時,細胞會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細胞的 ______________________ 。此時,瓶壁上形 成的細胞層數(shù)是 ________________ 。要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來, 需要用酶處理, 可 用的酶是 ___________________________

9、___________________________________________ 。 (2) 隨著細胞傳代次數(shù)的增多, 絕大部分細胞分裂停止, 進而出現(xiàn) ____________________ 的細胞,但極少數(shù)細胞可以連續(xù)增殖,其中有些細胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成 __________ 細 胞 ,該 種細 胞 的粘 著 性 __________ , 細 胞膜 表 面蛋 白質(zhì) ( 糖 蛋 白 ) 的 量 ______________。 (3) 現(xiàn)用某種大分子染料, 對細胞進行染色時, 觀察到死細胞被染色, 而活細胞不染色,原因是 ___________

10、_____________________________________________________________ ________________________________________________________________________ 。 (4) 檢查某種毒物是否能改變細胞染色體的數(shù)目,最好選用細胞分裂到 ____________ 期 的細胞用顯微鏡進行觀察。 (5) 給患者移植經(jīng)細胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后,發(fā)生了排斥現(xiàn)象,這是因為機體把移植的皮膚組織當(dāng)作 ____________進行攻擊。 11.為了探究某物質(zhì) (X) 的作用,研

11、究者提出了以下實驗思路: (1) 實驗分組: 甲組:培養(yǎng)液+ Y細胞+ 3H- TdR(3H標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷 ) +生理鹽水 乙組:培養(yǎng)液+ Y細胞+ 3H- TdR+ X(用生理鹽水配制 ) 每組設(shè)置若干個重復(fù)樣品。 (2) 分別測定兩組的 CRD(細胞內(nèi)的放射性強度 ) ,求每組的平均值。 (3) 將各樣品在適宜條件下培養(yǎng)合適時間后, 測定其 CRD,求每組平均值并進行統(tǒng)計分析。 ( 要求與說明:答題時用 X、 CRD、 3 H- TdR表示相關(guān)名詞; Y細胞是能增殖的高等動物體 細胞 ) 請回答: (1)

12、實驗?zāi)康模? ____________________________________________________________ 。 (2) 預(yù)測實驗結(jié)果及結(jié)論: __________________________________________________ 。 (3) 實驗中采用 3H-TdR的原因: _______________________________________________ 。 綜合拓展 12.家蠶細胞具有高效表達外源基因的能力。 將人干擾素基因?qū)爰倚Q細胞并大規(guī)模培 養(yǎng),可提取干擾素用于制藥。 (1) 進行轉(zhuǎn)基因操

13、作前,需用 ________酶短時處理幼蠶組織,以便獲得單個細胞。 (2) 為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達,需要把來自基因文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的 __________和 __________ 之間。 (3) 采用 PCR技術(shù)可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細胞。該 PCR反應(yīng)體系的主要成分 應(yīng)包含:擴增緩沖液 2+ ) 、水、 4種脫氧核糖核苷酸、模板 DNA、 ________________ 和 ( 含 Mg ____________。 (4) 利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細胞時,貼壁生長的細胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的

14、 中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中,這樣可以 ____________________ ,增加培養(yǎng)的細胞數(shù)量,也有利于空氣交換。 參考答案: 知識清單 一、動物的細胞和組織培養(yǎng)  1. 一部分組織  機械消化或胰酶消化  單個細胞  2.(2) 原代培養(yǎng)的細胞  生長  增殖  3.(1)  ①可連續(xù)傳代  ②連續(xù)細胞系  有限細胞系  4.(1) 一個單細胞  細胞群體  細胞克隆  (2

15、) 細胞克隆的遺傳性狀均一,表現(xiàn)的性狀相似  (3) 單個細胞  (4) ①選擇適宜的培養(yǎng)基  ③以滋養(yǎng)細胞支持生長 ④激素刺激 二、細胞  細胞培養(yǎng)  細胞融合  1. 兩個或多個細胞融合成一個細胞的現(xiàn)象  2. 基因型 相同或不同的細胞間 基因型不同的細胞間的融合 對點訓(xùn)練 1. D [ 動物細胞在培養(yǎng)過程中有接觸抑制現(xiàn)象,細胞在培養(yǎng)瓶中會貼壁生長,形成一 層細胞, 相互接觸后停止生長。 克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中, 僅有極少數(shù)細胞的基因型會發(fā)生改 變

16、。二倍體細胞的傳代培養(yǎng)一般傳至 10代后就不易傳下去了。 惡性細胞系的細胞具有不死性, 可以進行傳代培養(yǎng)。 ] 思路導(dǎo)引 準(zhǔn)確理解細胞培養(yǎng)的技術(shù)要求及現(xiàn)象,逐一辨析各選項。 知識鏈接 動物細胞培養(yǎng) (1) 概念:從動物個體中取出相關(guān)的組織,將它們分散成單個細胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細胞生長和增殖。 (2) 過程 (

17、3) 基本概念 ①細胞貼壁: 將細胞懸液置于適宜環(huán)境的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng), 懸液中分散的細胞很快就貼附 在瓶壁上的現(xiàn)象。 ②接觸抑制:當(dāng)貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時,細胞就會停止分裂增殖的現(xiàn)象。 ③原代培養(yǎng):通常將動物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。 ④傳代培養(yǎng): 貼滿瓶壁的細胞需要重新用胰蛋白酶等處理, 然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng), 讓細胞 增殖,即為傳代培養(yǎng)。 ⑤細胞株: 傳代培養(yǎng)的細胞一般傳至 10代左右就不易傳下去, 細胞的生長就會出現(xiàn)停滯, 大部分細胞衰老死亡。 但是有極少數(shù)細胞能度過“危機”而繼續(xù)傳下去, 這些存活的細胞一 般能傳到 40

18、~ 50代,這種傳代的細胞叫做細胞株。 ⑥細胞系: 當(dāng)細胞株傳至 50代以后又會出現(xiàn)“危機”不能再傳下去。 但有部分細胞的遺 傳物質(zhì)發(fā)生了改變, 而且?guī)в邪┳兊奶攸c, 獲得不死性, 可在培養(yǎng)條件下無限制的傳代下去,這種傳代的細胞稱為細胞系。 2. C [ 不管是動物細胞培養(yǎng)還是植物組織培養(yǎng),最基本的一個外界條件就是都要在無 菌環(huán)境條件下進行。  此外,動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基,  其中的碳源是葡萄糖,培 養(yǎng)液中還需要加入一定的動物血清,其氣體環(huán)境是  95%空氣+  5%的二氧化碳,以維持培養(yǎng)液

19、 的pH。而植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基,  其碳源為蔗糖, 在組織培養(yǎng)的脫分化階段必 須在黑暗條件下進行,再分化過程則需要一定的光照條件;動物細胞培養(yǎng)就是細胞的增殖, 不能體現(xiàn)細胞的全能性,而植物組織培養(yǎng)體現(xiàn)了植物細胞的全能性。 ] 歸納提升 動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較 植物組織培養(yǎng) 動物細胞培養(yǎng) 原 細胞的全能性 細胞的增殖 理 目 快速繁殖,培育無病毒植株等 獲得細胞或細胞的代謝產(chǎn)物 的

20、 不 液體, 除營養(yǎng)物質(zhì)外, 一般還有血 培 固體,除營養(yǎng)物質(zhì)外,還有植物 同 清、 養(yǎng)基 激素 點 血漿等 結(jié) 培育成植物個體或組織 培育成細胞株或細胞系 果 過 細胞有分化,無癌變 細胞無分化,有可能癌變 程 相同 ①都需無菌條件,培養(yǎng)基中含有有機物和無機物等營養(yǎng)物質(zhì) 點 ②都是細胞有絲分裂過程 特別提醒 與植物組織培養(yǎng)比較

21、, 動物細胞培養(yǎng)基的獨特之處有: ①液體培養(yǎng)基; ②其 成分中有動物血清。 3. (1) 克服了遠緣雜交不親和的障礙 解決了因兩種細胞密度不同而難以融合的問題 (2) 有性生殖;無性生殖 (3) 三 (4) 滅活的病毒 解析 (1) 細胞融合與精卵結(jié)合相比,通過人工的方法克服了存在于物種之間的遺傳屏 障的困難,從而能夠按照人們的主觀意愿, 把來自不同物種的不同組織類型的細胞融合起來, 克服了遠緣雜交不親和的障礙。 若在太空中進行細胞融合, 可以解決因兩種細胞密度不同而 難以融合的問題。 (2)

22、動物個體甲是通過精卵結(jié)合產(chǎn)生的,屬于有性生殖,而乙是通過體細 胞核移植技術(shù)產(chǎn)生的, 屬于無性生殖。 (3) “太空融合”是細胞融合, 與方法三的原理相同, 都是細胞膜的流動性。 (4) 動物細胞融合,除了可以利用誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的方法外, 還可以采用滅活的病毒。 知識鏈接 動物細胞融合 (1) 概念:是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程,也叫細胞雜交。 (2) 原理:細胞膜的流動性。 (3) 誘導(dǎo)融合的方法①物理、化學(xué)方法:與植物體細胞雜交相同,如聚乙二醇、電激法等。②生物方法:滅 活的病毒。 (4)

23、 過程 (5) 總結(jié):①過程:膜融合→質(zhì)融合→核融合②融合成功的標(biāo)志:雜交細胞進行有絲分裂。③重組細胞的特點:雜交細胞具有兩個細胞的遺傳信息,能表現(xiàn)兩個親本的性狀。 4. B [ 植物細胞與動物細胞相比由于具有細胞壁結(jié)構(gòu)而無法直接進行融合,所以融合 之前必須用纖維素酶和果膠酶去除該結(jié)構(gòu)。 動物細胞融合與植物體細胞雜交所用的技術(shù)手段 有很大差異,誘導(dǎo)融合的手段不完全相同。 ] 歸納提升 動物細胞融合與植物體細胞雜交的對比 植物體細胞雜交 動物細胞融合 細 胞融合 細胞膜的流動性、細胞的全能性

24、 細胞膜的流動性、細胞增殖 原理 細 用纖維素酶、 果膠酶去除細胞壁后, 用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細胞分 胞融合 誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合 散,誘導(dǎo)細胞融合 方法 誘導(dǎo) 離心、電激、振動、聚乙二醇等誘 與植物體細胞雜交相比,還可用滅 手段 導(dǎo) 活的病毒誘導(dǎo) 用途 克服遠緣雜交不親和的障礙,擴展 制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾 雜交親本范圍,培育新品種 素等 特別提醒 動、植物細胞融合的主要不同點: ①滅活的病毒是動物細胞融合常用的誘導(dǎo)劑,植物體細胞雜交不用此誘導(dǎo)劑。 ②植物

25、細胞融合過程中, 首先要除去細胞壁, 制備原生質(zhì)體, 而動物細胞無細胞壁,可 直接誘導(dǎo)融合。 課后作業(yè) 1. A [ 在進行動物細胞培養(yǎng)前,先用胰蛋白酶使組織塊中的細胞相互分散開,以增加 與培養(yǎng)液的接觸面積,便于培養(yǎng)。 ] 2. B [ 物理、化學(xué)方法在動植物細胞融合時都可用,滅活的病毒誘導(dǎo)是動物細胞融合 特有的方法。 ] 3. D [ 細胞系細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,而且?guī)в邪┳兊奶攸c,可在培養(yǎng)條件下無 限制的傳代下去。 ] 4. B [ 在植物組織培養(yǎng)過程中所用的是固體培養(yǎng)基,而在動物細胞培養(yǎng)過程中需制成 單個懸

26、浮細胞,用的是液體培養(yǎng)基。 ] 5. D [ 在進行動物細胞培養(yǎng)時,用的是健康幼齡動物細胞或胚胎,這類細胞有旺盛的 分裂能力。 ] 6. A [ 大規(guī)模生產(chǎn)干擾素,用于抵抗細菌產(chǎn)生的外毒素,應(yīng)該屬于基因工程和發(fā)酵工 程的應(yīng)用。 ] 7. A [ 細胞融合的原理是細胞膜的流動性。 ] 8.C [ 紫外線照射常用作人工誘變, 可誘發(fā)基因突變,而不是誘導(dǎo)細胞融合的因素。 9. C [ 酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)或 RNA,其基本組成單位是氨基酸或核糖核苷酸,  ] A項錯 誤。酶在酶促反應(yīng)前后不發(fā)生變化, 

27、可通過降低化學(xué)反應(yīng)的活化能來提高化學(xué)反應(yīng)速率,  但 不能提供能量,  B項錯誤。胰蛋白酶可分解動物組織細胞間的物質(zhì)從而將組織分散成單個細 胞, C項正確。  DNA連接酶可連接兩個  DNA片段形成磷酸二酯鍵,  D項錯誤。  ] 10. (1)  相互接觸  接觸抑制  單層 ( 或一層  )  胰蛋白酶  (2) 衰老甚至死亡  不死性 ( 無限增殖 ) 降低 減少 (3) 由于活細胞的膜具有選擇透

28、過性,大分子染料不能進入活細胞內(nèi),故活細胞不能著 色( 或由于死細胞的膜喪失了選擇透過性,大分子染料能夠進入死細胞內(nèi)而著色 ) (4) 有絲分裂中 (5) 抗原 解析 (1) 動物細胞培養(yǎng)過程中當(dāng)貼壁細胞分裂生長到細胞表面相互接觸時,細胞會停 止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制。 此時,瓶壁上形成單層細胞。 要使貼壁的細胞 從瓶壁上分離下來,需要用胰蛋白酶處理。 (2) 隨著細胞傳代次數(shù)的增多,絕大部分細胞分 裂停止, 進而出現(xiàn)衰老甚至死亡, 但極少數(shù)細胞可以連續(xù)增殖, 其中有些細胞會因遺傳物質(zhì) 發(fā)生改變而變成無限增殖的細胞, 該種細胞的粘

29、著性降低, 細胞膜表面蛋白質(zhì) ( 糖蛋白 )的量 減少,稱之為細胞系 ( 朝癌變方向發(fā)展 ) 。 (3) 用大分子染料對細胞進行染色時,活細胞不能 染色,原因是活細胞的膜具有選擇透過性,大分子染料不能進入活細胞內(nèi)。 (4) 檢查某種毒 物是否能改變細胞染色體的數(shù)目,最好選用細胞分裂到有絲分裂中期的細胞進行顯微鏡觀 察,因為在有絲分裂中期染色體形態(tài)穩(wěn)定、數(shù)目清晰,便于觀察。 (5) 給患者移植經(jīng)細胞培 養(yǎng)形成的皮膚組織后, 發(fā)生了排斥現(xiàn)象, 這是因為機體把移植的皮膚組織當(dāng)作抗原進行攻擊。 11. (1) 探究 X對Y細胞增殖 (DNA合成 ) 的影響 (2

30、) 如果乙組 CRD明顯高于甲組, 說明 X對Y細胞增殖 (DNA合成 ) 有促進作用; 如果乙組 CRD 與甲組基本相同,說明 X對 Y細胞增殖 (DNA合成 ) 無影響;如果乙組 CRD明顯低于甲組,說明 X 對Y細胞增殖  (DNA合成 ) 有抑制作用  (3) 3H- TdR是 DNA合成的原料之一, 可根據(jù) CRD變化來判 斷細胞增殖  (DNA合成 ) 情況 解析  (1) 該實驗的變量為某物質(zhì)  (X) 的有無,因變量為細胞內(nèi)的放射性強度的大小。  3H -TdR

31、是用來合成  DNA的原料,若細胞分裂旺盛,則細胞內(nèi)的放射性強度的平均值  (CRD)就比 較高。所以該實驗的目的是探究 X對 Y細胞增殖 (DNA合成 ) 的影響。(2)X 對 Y細胞增殖 (DNA合成 ) 的影響可能是促進、 抑制或無任何作用。 如果乙組 CRD明顯高于甲組, 說明 X對 Y細胞增殖 (DNA 合成 ) 有促進作用;如果乙組 CRD與甲組基本相同,說明 X對 Y細胞增殖 (DNA合成 ) 無影響;如 果乙組 CRD明顯低于甲組,說明 X對 Y細胞增殖 (DNA合成 ) 有抑制作用。 (3) 堿基 T為 DNA特有

32、堿 基,若用 3H- TdR來培養(yǎng)細胞,則可知細胞的放射性來自于細胞內(nèi)新合成的 DNA。 CRD越高, 證明細胞增殖速度越快。 12. (1) 胰蛋白 ( 或膠原蛋白 ) (2) 啟動子 終止子 (3) 對干擾素基因特異的 DNA引物對 Taq DNA聚合酶 (4) 擴大細胞貼壁生長的附著面 積 解析 (1) 為了將動物組織分散并得到單個細胞,可以用胰蛋白酶處理動物細胞。 (2) 在基因工程中,構(gòu)建重組 DNA分子時,需要將目的基因插入啟動子和終止子之間,以使目的 基因得到高效表達。 (3)PCR過程模擬的是細胞內(nèi) DNA分子的復(fù)制過程,需要模板、原料、能 量、酶 (DNA聚合酶 ) 、適宜的溫度和酸堿度等,  同時需要加入設(shè)計好的引物。  (4) 為了防止發(fā) 生接觸抑制現(xiàn)象而放入小玻璃珠可以增加細胞貼壁生長的附著面積,  同時珠內(nèi)中空, 有利于 空氣交換。

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